肾小管上皮细胞转分化与糖尿病肾病

目的：探讨肾小管上皮细胞转分化与糖尿病肾病之间的关系、发病机制、发展规律。方法：通过查阅文献,对肾小管上皮细胞转分化的特征及影响因素几个方面对肾小管上皮细胞转分化与糖尿病肾病的关系进行综述。结论：糖尿病肾病（DN）对糖尿病患者的生存质量有着严重的影响,甚至会危机患者的生命。以肾小管转分化为切入点的诊疗方案必将对糖尿病肾病产生有益的影响。     

小檗胺对糖尿病肾小管上皮细胞损伤的影响

目的 研究小檗胺对体外糖尿病肾小管上皮细胞(RTEC)损伤的影响。方法 将RTEC分成对照组、模型组(高糖)、低剂量实验组(2 mg·L^-1小檗胺和高糖)、中剂量实验组(4 mg·L^-1小檗胺和高糖)、高剂量实验组(8 mg·L^-1小檗胺和高糖)、BBM-H+miR-NC组(转染mimics control, 8 mg·L^-1小檗胺和高糖)、BBM-H+miR-135b组(转染miR-135b mimics, 8 mg·L^-1小檗胺和高糖)。以噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性,以流式细胞术检测细胞凋亡率,以蛋白质印迹法检测细胞B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X(Bax)蛋白表达,以化学荧光法检测活性氧(ROS)水平,以硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)水平,以黄嘌呤氧化法检测超氧化物歧化酶(SOD)水平,以酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)和白细胞介素-1β(IL-1β)水平。结果 对照组、模型组和低、...     

苦杏仁苷对骨质疏松大鼠骨折愈合的影响

目的 研究苦杏仁苷(AD)对骨质疏松(OP)大鼠骨折愈合的影响及其可能的作用机制。方法 将SD大鼠随机分为假手术组、模型组和低、中、高剂量实验组及抑制药组,每组12只。用双侧卵巢切除手术构建OP大鼠模型,造模成功后,低、中、高剂量实验组大鼠腹腔注射0.1、0.5、1.0 mg·kg^-1 AD,抑制药组腹腔注射5.0 mg·kg^-1H-89[环腺苷酸/蛋白激酶A/环腺苷酸反应元件结合蛋白(cAMP/PKA/CREB)通路抑制药]+1.0 mg·kg^-1AD,假手术组和模型组腹腔注射等量的0.9%NaCl,每天1次,连续90 d。用显微计算机断层扫描技术观察大鼠股骨微结构;通过骨科生物力学测试评估大鼠股骨生物力学状况;用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠血清骨钙素(OC)和Ⅰ型胶原交联C-末端肽(CTX-Ⅰ)、骨形态发生蛋白2(BMP-2)、cAMP的含量;用试剂盒检测大鼠血清中氧化应激产物的水平;用蛋白质印迹法检测大鼠骨组织中碱性磷酸酶(ALP)及cAMP/PKA/CREB信号通路蛋白(p-PKA/PKA、p-CRE...     

Foxo1在糖尿病大鼠肾小管上皮细胞的表达研究

目的探究Foxo1在糖尿病大鼠肾脏的表达和脂质代谢的关系。方法构建1型糖尿病大鼠模型,喂养2个月后处死,取肾脏组织,免疫组织化学和Western blot检测Foxo1、Akt和SREBP-1在肾脏的表达;油红O染色及组织脂质定量检测肾组织中脂质含量。结果糖尿病大鼠出现明显的多饮、多食、多尿症状,体重较正常组明显下降,血糖、血甘油三酯及血尿素氮升高。免疫组织化学检测显示,磷酸化Foxo1和Foxo1表达定位于肾小管上皮细胞。Western blot检测可见与正常组大鼠相比,磷酸化Foxo1在糖尿病大鼠表达升高;而总Foxo1在两组间表达未见差异。相似地,磷酸化Akt和SREBP-1在糖尿病组大鼠表达也均明显升高。油红O染色表明脂滴沉积于糖尿病大鼠肾小管上皮细胞,定量甘油三酯测定显示糖尿病组肾脏脂质含量高于正常对照大鼠。结论磷酸化Foxo1在糖尿病大鼠肾小管上皮细胞表达升高,可能和SREBP-1上调及细胞内脂质沉积相关。     

罗格列酮对2型糖尿病大鼠肾小管上皮细胞中α-SMA表达的影响

目的探讨罗格列酮(rosiglitazone,RSG)对α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在2型糖尿病大鼠肾小管上皮细胞中表达的影响,揭示RSG对糖尿病肾病的保护作用。方法应用免疫组化技术及流式细胞学技术检测对照组、2型糖尿病组及RSG干预组肾小管上皮细胞中α-SMA的表达。结果免疫组化及流式定量结果显示:RSG干预组较2型糖尿病组大鼠肾小管上皮细胞胞浆中α-SMA表达减弱。结论RSG可以减弱2型糖尿病大鼠肾小管上皮细胞中α-SMA的表达,从而起到保护肾脏的作用。     

罗格列酮对2型糖尿病大鼠肾小管上皮细胞中α-SMA表达的影响

目的探讨罗格列酮(rosiglitazone,RSG)对α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在2型糖尿病大鼠肾小管上皮细胞中表达的影响,揭示RSG对糖尿病肾病的保护作用。方法应用免疫组化技术及流式细胞学技术检测对照组、2型糖尿病组及RSG干预组肾小管上皮细胞中α-SMA的表达。结果免疫组化及流式定量结果显示:RSG干预组较2型糖尿病组大鼠肾小管上皮细胞胞浆中α-SMA表达减弱。结论RSG可以减弱2型糖尿病大鼠肾小管上皮细胞中α-SMA的表达,从而起到保护肾脏的作用。     

糖尿病肾病肾小管间质损伤及治疗研究进展

糖尿病肾病（DN）是终末期肾病（ESRD）的一个重要原因,既往一直认为在DN中只存在肾小球的损伤,但事实上很多糖尿病肾病患者往往存在肾小管酸中毒（ RTA）的临床表现,故很多研究者认为,肾小管间质损伤是糖尿病肾脏病变的一个重要方面,在高血糖诱导状态下,其过程包括肾小管上皮细胞形态及功能学改变,肾小管间质纤维化等,在其发生发展过程中,多种细胞因子、代谢产物及蛋白调控分子等参与上述病理变化,本文概括了近年来DN小管及间质病变的最新研究进展,并简要阐述针对各种发病机制的治疗措施,拟为临床治疗糖尿病肾病提供一定参考依据。     

白芍总苷对糖尿病大鼠肾小管-间质损伤的保护作用及机制

目的探讨白芍总苷(TGP)对糖尿病大鼠肾小管-间质损伤的保护作用及机制。方法采用链脲佐菌素(STZ)诱导大鼠糖尿病模型。SD大鼠随机分对照组、模型组、白芍总苷给药组(50、100、200mg·kg-1·d-1口服),8wk后观察肾小管-间质损伤指数(TII)的变化。应用免疫组化方法检测肾小管-间质骨桥蛋白(OPN);α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,Western blot方法检测肾组织硝基酪氨酸(NT)表达。结果模型组大鼠TII明显高于对照组(P<0·01),TGP100、200mg·kg-1给药组TII明显低于模型组(P<0·05,P<0·01)。模型组肾小管-间质OPN与α-SMA蛋白表达明显高于对照组(P<0·01),TGP100、200mg·kg-1给药组肾小管-间质OPN表达明显低于模型组(P<0·01),TGP各剂量给药组肾小管-间质α-SMA蛋白均明显低于模型组(P<0·01)。模型组肾组织NT蛋白表达较对照组增加3·4倍,TGP50、100、200mg·kg-1给药8wk可使肾组织NT蛋白表达分别下降41·2%、43·8%与57·5%。结论白芍总苷对糖尿病大鼠肾小管-间质损伤有明显保护作用,其机制可能与抑制糖尿病肾小管-间质过高OPN与α-SMA表达有关。     

虎杖苷对脓毒血症肾损伤大鼠的肾小球血管内皮的保护作用

目的研究虎杖苷对脓毒血症肾损伤大鼠肾小球血管内皮保护作用及磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)和西罗莫司靶点(mTOR)在其过程中的活性。方法在大鼠尾静脉注射脂多糖建立脓毒血症模型。按照体重将大鼠随机分为4组:假手术组(实施麻醉、置管),模型组(实施麻醉、置管及脓毒血症),对照组(实施麻醉、置管、脓毒血症及应用0.9%NaCl复苏),实验组(实施麻醉、置管、脓毒血症及应用0.9%NaCl+虎杖苷10 kU·kg^-1)。测定心率和肾功能的指标,用酶联免疫吸附法检测每组AMPK和mTOR蛋白活化情况。结果给药后6 h,实验组、对照组、模型组的心率(次/分)分别为88.21±17,102.36±12.83,118.04±16.51;这3组的尿素氮分别为(49.77±9.67),(77.92±12.01),(122.19±12.87)mg·dL^-1,与对照组和模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。实验组与模型组的AMPK分别为3.06±1.34,0.77±0.21;这2组的mTOR蛋白活性分别为2.48±1.12,3.95±1.02,与模型组比较,实验组差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论虎杖苷能够对脓毒血症肾损伤肾小球血管内皮起保护作用,这可能通过AMPK途径抑制mTOR的活性,发挥其保护肾的作用。     

膜性肾病患者蛋白尿对肾小管上皮细胞转分化的影响

目的探讨膜性肾病患者蛋白尿对肾小管上皮细胞转分化的影响。方法提取膜性肾病患者尿蛋白进行蛋白成分分析、细菌内毒素试验、蛋白溶液的肌酐水平等质量鉴定后,尿蛋白组分别按1.0、2.0、4.0、8.0 mg/mL蛋白质量浓度刺激人肾小管上皮细胞(hRTEC)48 h;空白对照组无尿蛋白,采用蛋白质印迹法(Western blot)检测hRTEC胞浆内平滑肌肌动蛋白-α(α-SMA)的表达,观察hRTEC转分化情况。结果膜性肾病患者尿蛋白组分构成:清蛋白为56.4%、转铁蛋白为34.6%、免疫球蛋白G(IgG)为6.9%。膜性肾病患者尿蛋白诱导hRTEC胞浆中α-SMA水平随蛋白质量浓度的增加而增加(P<0.05)。结论膜性肾病患者的蛋白尿是导致肾间质纤维化的原因之一,并具有质量浓度依赖关系。     

法舒地尔对高糖培养的肾小管上皮细胞转分化的抑制作用

目的探讨法舒地尔对高糖培养人肾小管上皮细胞(HK-2)转分化的影响及可能作用机制。方法人肾小管上皮细胞同时加入葡萄糖60 mmol·L-1和法舒地尔20μmol·L-1。配体结合沉淀法检测葡萄糖60mmol·L-1作用0～24 h后细胞Rho A活性,免疫细胞化学技术检测上皮钙黏素表达,Western印迹法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,ELISA法检测细胞培养上清液转化生长因子β1(TGF-β1)的含量。结果在一定时间范围内,高糖能刺激细胞Rho A分子活化;与正常对照组比较,葡萄糖60 mmol·L-1培养HK-2细胞72 h后上皮钙黏素表达明显减少(P<0.01),α-SMA表达明显增多(P<0.01),TGF-β1分泌增多(P<0.01),而葡萄糖5.5 mmol·L-1+甘露醇54.5 mmol·L-1高张组无明显差异。法舒地尔20μmol·L-1同步干预后,与高糖组比较,细胞上皮钙黏素表达明显增多〔(0.03±0.01)vs(0.08±0.02),P<0.05〕,α-SMA表达下降(P<0.05),48 h时TGF-β1分泌明显减少〔(128±11)vs(49±5)μg.g-1(P<0.05)〕。结论法舒地尔能抑制高糖培养的肾小管上皮细胞转分化,可能部分通过减少TGF-β1的分泌发挥作用。     

罗哌卡因对白细胞介素-1β诱导的软骨细胞损伤的保护作用探究

目的 基于腺苷一磷酸活化蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物西罗莫司靶蛋白(mTOR)通路探究罗哌卡因对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的软骨细胞损伤的保护作用。方法 对软骨细胞进行培养,将软骨细胞随机分为对照组、模型组和低、中、高剂量实验组。对照组常规培养,模型组用含10 ng·mL^-1IL-1β的培养基刺激细胞24 h,低、中、高剂量实验组在模型组的基础上,用25,50,100 mg·L^-1的罗哌卡因进行处理。用细胞计数法-8(CCK-8)检测各组细胞的增殖情况;用流式细胞术检测细胞凋亡情况;用蛋白质印迹(Western blot)法检测细胞凋亡相关蛋白、细胞外基质降解相关蛋白及细胞中磷酸化AMPK(p-AMPK)和磷酸化mTOR(p-mTOR)蛋白表达的影响。结果 与对照组比较,模型组24,48,72 h OD值降低;与模型组相比,中、高剂量实验组24,48,72 h OD值均明显升高(均P<0.05)。对照组、模型组和低、中、高剂量实验组细胞凋亡率分别为(4.24±0.64)%,(18.13±1.53)%,(14.93±0.52)%...     

红景天苷对转化生长因子-β1诱导人肾小管上皮细胞逆向分化的影响

目的：阐释红景天苷对转化生长因子-β1（TGF-β1）诱导人肾小管上皮细胞（HKC）表型转分化的效应,探讨其对I型（colⅠ）和Ⅲ型（ColⅢ）胶原蛋白表达的影响。方法：体外培养HKC,应用不同浓度红景天苷处理经TGF-β1诱导活化的HKC细胞,显微镜观察细胞形态改变,免疫组化法检测角化蛋白-18和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达：应用酶联免疫吸附法（ELISA）检测ColⅠ型和ColⅢ型胶原蛋白表达。结果：HKC细胞经过TGF-β1诱导,细胞角化蛋白．18表达明显下调,α-SMA、ColⅠ、ColⅢ型胶原表达明显上调,与空白对照组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。经红景天苷干预后,其表达有所下降,与TGF-β1诱导组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：红景天苷可抑制TGF-β1诱导的HKC表型转分化,同时可以抑制肾小管上皮细胞外基质成分ColⅠ、ColⅢ型胶原的合成,在一定程度上具有阻止肾小管间质纤维化的作用。     

糖尿病大鼠肾小管Bcl-2蛋白家族的动态变化

目的动态观察糖尿病(DM)病程中肾小管p38MAPK和Bcl-2蛋白家族表达的变化及相互关系。方法 SD大鼠随机分为对照组和糖尿病组,注射链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病,分别于DM2、4、8、16和24周处死动物。生化方法测血糖和尿蛋白;免疫组织化学检测Bcl-2和Bax蛋白;Western blot检测p38MAPK和p-p38MAPK蛋白水平。结果与对照组相比,DM大鼠出现明显高血糖并且持续于高水平;DM2周24h尿蛋白量开始增多并随病情进展而加重。免疫组织化学结果显示,DM2周大鼠肾小管Bcl-2和Bax蛋白均明显高于对照组,然而DM8周Bcl-2蛋白表达开始减少,Bax蛋白则随DM进展而增多,Bax/Bcl-2比值增高。Western Blot结果显示,对照组和DM2周肾皮质有少量p38MAPK蛋白表达,DM4周开始p38MAPK和p-p38MAPK蛋白明显增加。p-p38MAPK水平与Bax/Bcl-2比值呈显著正相关。结论糖尿病病程中,p38MAPK蛋白活性增高可能介导了肾小管Bax/Bcl-2比值上调。     

益气解毒活络方对早期糖尿病肾病肾小管损伤的影响

目的:探讨益气解毒活络方对早期糖尿病肾病肾小管损伤、外周血单个核细胞磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)、免疫球蛋白G4(IgG4)和β2微球蛋白(β2-MG)的影响.方法:以2018年10月至2020年1月金昌市人民医院就诊的早期糖尿病肾病患者为研究对象,将106例患者(门诊患者41例,住院患者65例)按照随机...     

二苯乙烯苷对糖尿病大鼠心肌损伤的保护作用

目的探讨二苯乙烯苷(TSG)对糖尿病大鼠心肌损伤的作用及对沉默信息调节因子2的哺乳动物同源体1(SIRT1)和磷酸腺苷活化的蛋白激酶(AMPK)蛋白影响。方法建立2型糖尿病大鼠模型,分组给药,16周时处死大鼠,生化法测定血糖、血脂、肝功能及肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)和心肌组织游离脂肪酸(NEFA);酶联免疫吸附法测定心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)、心肌组织脂代谢相关酶脂肪酸跨膜转运载体蛋白(FATPs)和脂肪酸β氧化酶(FA-β-oxidase)的含量;放射免疫法测定血浆炎症因子肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)的含量,Western blot检测心肌组织中TNF-α、IL-6、IL-1β、SIRT1和AMPK蛋白的表达;并测定左心室胶原含量。结果TSG干预后能减低血脂水平,对血糖和胰岛素水平无明显影响。TSG能减低糖尿病大鼠心肌组织中胶原含量,减少心脏游离脂肪酸含量,增加心肌组织脂代谢相关酶(FATPs和FA-β-oxidase)含量,抑制外周血和心肌组织中炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-1β)的分泌。TSG能明显增加糖尿病大鼠心脏SIRT1和p AMPK蛋白表达。结论 TSG对糖尿病大鼠心肌具有保护作用,其机制可能与抑制心肌炎症因子和改善能量代谢有关。     

利拉鲁肽保护链脲霉素致糖尿病大鼠心肌损伤的机制

目的研究利拉鲁肽对链脲霉素(STZ)致糖尿病大鼠心肌损伤的保护作用机制。方法大鼠腹腔注射STZ构建糖尿病大鼠模型,腹腔注射利拉鲁肽50和200μg·kg~(-1)干预,检测大鼠空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)和血脂指标情况,应用光、电镜及免疫组化观察心肌组织,并取心肌组织作mRNA及蛋白检测。结果与正常组比较,模型组大鼠的心肌肥厚指数(HWI)、FPG、FINS、总胆固醇(TC)和三酰甘油(TG)水平显著升高,而利拉鲁肽干预后上述指标均显著降低(P<0.05);模型组大鼠心肌细胞及间质胶原纤维排列松散,自噬小体数量显著减少,利拉鲁肽干预后心肌纤维化程度显著降低,自噬小体数量显著升高(P<0.05);模型组大鼠心肌组织中自噬标志因子(LC3B)和腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)磷酸化水平均降低,转化生长因子-β_1(TGF-β_1)和Ⅰ型胶原蛋白(Col-1)的mRNA表达水平以及选择性自噬接头蛋白(p62)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)磷酸化水平均显著升高,利拉鲁肽干预后LC3B和AMPK磷酸化水平均升高,TGF-β_1、Col-1的mRNA表达水平以及p62、mTOR磷酸化水平均显著降低(P<0.05)。结论利拉鲁肽能通过抑制促纤维化因子表达从而抑制心肌组织纤维化,同时促进AMPK/mTOR介导的自噬来改善糖尿病引起的心肌损伤。     

糖尿病大鼠肾小管上皮细胞整合素连接激酶的表达及氯沙坦钾的干预作用

糖尿病肾病（DN）是糖尿病的常见并发症和终末期肾病（ESRD）的首要原因。大约有1/3的糖尿病患者发展为DN。DN是肾小球和。肾小管发生病理改变的一种复杂疾病。整合素连接激酶（ILK）是一种丝氨酸,苏氨酸蛋白激酶,在基质沉积、细胞黏附、细胞凋亡、细胞迁移、细胞增生以及肿瘤形成发挥重要作用,     

牛蒡子苷对糖尿病肾病大鼠肾小球滤过屏障损伤的保护作用

目的 探讨牛蒡子苷对糖尿病肾病(DN)大鼠肾小球滤过屏障中nephrin、podocin和乙酰肝素酶(HPSE)表达的影响.方法 将SD大鼠制备成DN实验模型,随机分为模型组、牛蒡子苷小、大剂量组(ig 40、60 mg·kg-1 ·d-1)正常对照组.8周后观察各组血糖、24h尿蛋白定量及肾脏指数,光镜下观察肾组织的...     

血管紧张素受体拮抗剂对糖尿病肾病患者肾小管功能的作用

目的探讨肾小管间质损伤作为糖尿病患者肾损害早期的一项重要特征，评价血管紧张素受体拮抗剂对该指标的作用。方法予对照组患者口服双嘧达莫100mg，一日3次，治疗组患者在此基础上加用口服缬沙坦80mg，一日1次，观察两组患者的肾小管功能。结果治疗组患者经治疗后尿系列蛋白均明显降低。结论缬沙坦具有肾小管保护功能。