基因芯片技术及其在眼科领域中的应用

基因芯片技术是研究基因表达和功能的一项革命性的新技术，具有敏感和高通量的特点。目前已广泛应用于生命科学的各个领域，包括正常发育过程的基因调控及人类疾病的分子机制等研究。然而基因芯片技术本身仍处于完善过程中。现将基因芯片技术学作简要介绍，以帮助读者全面了解该技术的现状和存在的问题，以便正确运用该技术，准确评估应用该技术产生的数据和结果。 （中华眼底病杂志，2003，19：201-268）     

基因芯片技术在眼科领域中应用的研究进展

基因芯片技术是指将大量基因片段或寡核苷酸进行有序的高密度排列于玻璃、硅等固相支持物上,并通过各种检测手段对探针上的信号强弱进行检测并分析,最终获得样品中大量基因序列及其表达信息的一种技术。基因芯片技术因其高亲和力、高精确性、高信息量等优点在临床疾病的研究中起到了重要作用。对基因芯片技术在眼科领域中的应用进行综述。     

基因芯片技术及其在眼科的应用进展

基因芯片(Gene Chip)是随着人类基因组计划(Human Genome Project，HGF)创建并发展起来的，1996年世界上第一块商品化基因芯片问世，由此掀起了基因芯片研究热潮。并相继出现了多种类型的基因芯片技术。并己在生物医学领域广泛应用。     

基因芯片技术及其在视网膜疾病中的应用

21世纪是生命科学的世纪，也是一个信息爆炸的时代。2002年6月26日首张人类基因图和测序计划（HGP）完成后；科学家们开始进入功能基因组即“后基因时代”的研究。随蛋白组学研究与疾病相关基因和功能蛋白不断发现，出现了大量的生物信息和需要解决的医学问题。随之，现代生物技术转入基因组学技术、蛋白组学技术、生物信息学、生物芯片技术、基因克隆、重组、表达技术，动物体细胞克隆技术等方面，其中引人关注的是生物芯片技术。生物芯片技术始于20世纪80年代后期，被评为1998年度世界十大科技进展之一，其概念源于计算机芯片，其成熟标志为全球掀起至今方兴未艾的技术研究和产业化年产的热潮。     

基因芯片技术及其在视网膜疾病中的应用

21世纪是生命科学的世纪,也是一个信息爆炸的时代。2002年6月26日首张人类基因图和测序计划(HGP)完成后;科学家们开始进入功能基因组,即“后基因时代”的研究。随蛋白组学研究与疾病相关基因和功能蛋白不断发现,出现了大量的生物信息和需要解决的医学问题。随之,现代生物技术,转入基因组学技术、蛋白组学技术、生物信息学、生物芯片技术、基因克隆、重组、表达技术,动物体细胞克隆技术等方面,其中引人关注的是生物芯片技术,生物芯片技术始于20世纪80年代后期,被评为1998年度世界十大科技进展之一,其概念源于计算机芯片。其成熟标志为全球…     

基因芯片技术在角膜病研究中的应用现状

基因芯片技术是近几年发展起来的分子生物学高新技术,在角膜病的临床和基础研究中得到了广泛的应用,为揭示角膜病的功能基因组及基因表达本质提供了强有力的工具。     

基因芯片技术在眼底病研究中的应用

将大量基因片段或寡核苷酸有序、高密度排列在玻璃、硅等载体上，称之为基因芯片。基因芯片技术以其检测快速、高效、高通量、高度并行性、微型化和自动化等特点，成为了研究生命本质及疾病发生发展规律的重要手段。现对其基本概念、特点、基本原理及其在眼底病研究中的应用前景作一综述。（中华眼底病杂志，2004，20：265-266）     

钙通道阻滞剂在眼科疾病中的应用

随着对钙通道特性及钙通道阻滞剂药理作用的深入研究，钙通道阻滞剂的适用范围正从心血管疾病向其它领域扩展，它在眼科领域的研究大部分处于临床前期阶段。本总结了钙通道阻滞剂的种类及其作用机制，重点介绍其在眼科多种疾病中应用的研究进展有的作用机理，钙通道阻滞有望成为一类新的眼用药物。     

基因芯片诊断常见角膜致病真菌的临床应用

目的采用基因芯片技术对真菌性角膜病常见致病菌种进行临床快速检测。方法针对我国临床常见的角膜致病真菌，制备寡核苷酸探针芯片，以通用引物对170例临床采集样本进行PCR扩增，将扩增产物与寡核苷酸芯片杂交，观测相应区域的荧光显色情况，与KOH涂片法和真菌培养法鉴定结果进行统计学比较。结果170例临床角膜刮片标本，KOH涂片法检测阳性113例，阳性率为66．5％；真菌培养法阳性153例，阳性率为90．0％；芯片检测阳性147例，阳性率为86．5％，经，检验，芯片检测法与KOH涂片法阳性率差异有统计学意义（x^2=18．896，P=0．000），芯片检测法与真菌培养法阳性率差异无统计学意义（x^2=1．020，P=0．4）；芯片法与培养法检测结果的一致性比较高度符合（Kappa值=0．80）。结论寡核苷酸探针芯片检测系统与传统的实验室检测手段比较，具有较好的特异性和灵敏度，缩短了检测时间，可对真菌性角膜病的病原菌进行快速诊断。     

细胞周期依赖性激酶抑制剂及其在眼科的应用

哺乳动物细胞能否增殖主要取决于细胞内特异性细胞周期依赖性激酶 (cyclindependentkinase,CDK)的活性发挥 ,CDK的活性发挥依赖于其正调控亚基Cyclin的顺序性表达及其负调控亚基CDK抑制剂 (cyclin dependentkinasein hibitor,CKI)的浓度。因此CKI与眼科肿瘤及增殖性疾病有着密切关系。通过抑制或激活CKI活性也有着广阔的临床治疗前景。我们就CKI的结构功能 ,CKI与眼科肿瘤、白内障、角膜病、增生性玻璃体视网膜病变等的关系及治疗作用作一综述     

DNA芯片技术及其在角膜病的研究应用进展

随着基因芯片技术的日渐成熟，其在眼科领域的应用不断深入。我们对该技术概况进行介绍，并对近年来其在角膜生理和病理状态下基因表达状况、分子机制等方面的研究进展作一综述。     

氪激光诱导大鼠脉络膜新生血管基因芯片研究

目的运用基因芯片技术研究氪激光诱导大鼠脉络膜新生血管的差异表达基因．为脉络膜新生血管的治疗提供实验依据。方法氪激光光凝视网膜后7d，分剐提取实验组和对照组脉络膜组织的总RNA，将纯化后的mRNA进行反转录，制备杂交探针，应用含有5705条Oligo DNA的表达谱芯片对实验组和对照组脉络膜组织进行差异表达基因检测。结果氪激光诱导脉络膜新生血管组织的差异表达基因共有427条，其中上调基因为189条，下调基因为238条。上调最高的基因是MMP12基因。在差异表达基因中有代谢、细胞粘附、细胞运动、发育、运输、信号传导、分化等基因。结论氪激光诱导脉络膜新生血管的发生发展涉及多基因改变。[眼科新进展2005；25（5）：408—410]     

应用基因芯片筛查鼻息肉相关差异表达基因

目的应用基因表达谱芯片筛查鼻息肉相关差异表达基因。方法采用含有人类全长基因的寡聚核苷酸芯片检测6例鼻息肉组织、6例正常鼻黏膜组织的相关差异表达基因,选择部分差异表达基因进行RT-PCR验证。结果筛查出鼻息肉组织差异表达基因共1886条,共同差异表达基因18条,上调基因12条,下调基因6条,包括编码横跨膜4超家族蛋白、IFN-γ诱导蛋白IP-30前体、补体因子前体、胰岛素生长因子结合蛋白、IL-8、RGS1、GRRK4、CCL20、子宫球蛋白等基因。RT-PCR测定差异表达基因IL-8、RGS1与基因芯片检测结果一致。结论鼻息肉基因表达谱存在差异,RGS1通过影响细胞信号传导通路发挥作用,IL-8促使炎性细胞释放多种炎性递质参与鼻息肉发病,IFN-γ诱导蛋白和胰岛素生长因子结合蛋白等基因在鼻息肉发病中起重要作用。     

导流杂交基因芯片技术在成人喉乳头瘤病毒感染分型检测中的临床应用

目的探讨核酸分子快速导流杂交基因芯片技术（HybriMax）在人乳头瘤病毒（HPV）喉部感染分型检测中的应用,并探讨HPV感染与成人喉乳头瘤发病的关系。方法选取2010年3月-2012年10月在本科住院的患者,其中喉乳头瘤36例、声带息肉30例。在支撑喉镜下手术切除喉部病变组织,留取部分组织。同时留取本院妇科门诊HC-Ⅱ检测阴/阳性各10份的宫颈细胞标本;采用HybriMax技术行HPV感染分型检测。结果 10例HC-Ⅱ法阳性宫颈细胞标本HybriMax法均检测出HPV,亚型分别为52、59、68型,其中52型50%（5/10）、58型30%（3/10）,59型20%（2/10）;1例HC-Ⅱ法阴性宫颈细胞标本HybriMax法检测出HPV。36例喉乳头瘤患者HPV阳性率50%（18/36）,分别检测出2种亚型,依次为HPV 6型（33.33%、12/36）、11型（16.67%、6/36）;声带息肉患者均未检测出HPV。结论 HybriMax检测HPV有很好的敏感性和特异性,能检测HPV亚型,是临床喉HPV感染分型检测的有效方法。HPV6、HPV11型可能在成人喉乳头瘤的发病中起作用。     

形觉剥夺性近视猴视皮质中基因表达谱的变化

目的:采用基因表达谱芯片技术研究形觉剥夺近视猴视皮质中基因表达的变化。方法:将8只20～40天龄的健康幼恒河猴分为形觉剥夺组和对照组。形觉剥夺组4只猴右眼配戴散射镜片,另1眼配戴0D镜片;对照组4只猴双眼均配戴0D镜片。戴镜12wk后,形觉剥夺组和对照组猴取视皮质,用基因表达谱芯片技术对形觉剥夺猴视皮质基因表达的变化进行分析。结果:与对照组相比,形觉剥夺组中表达下调的基因明显多于表达上调的基因,其中包括Egr-1,NMDA和GABA等基因。结论:形觉剥夺性近视猴视皮质中存在基因表达被抑制的趋势。     

嗅素结构域基因家族在眼科领域的研究进展

嗅素结构域家族是近几年研究比较多的基因家族,因该家族成员蛋白含有嗅素结构域而得名。越来越多的证据表明该家族在神经起源、细胞黏附、细胞周期调节和肿瘤发生发展中发挥有重要作用,而且很可能是许多重要的信号通路(如Wnt信号通路)的调节者,与眼组织正常发育和病理过程有关。本文就近几年来关于该家族成员在眼科的研究进展作一综述。     

以病毒为载体的基因转导技术在眼科研究中的应用

随着分子生物学技术的进步和基因遗传学的发展,病毒载体系统不断地得到改良及优化,并以其特有的优势逐渐成为眼科基因治疗的良好载体之一。目前,多种病毒载体已应用于眼科疾病的基因治疗研究并取得较好成果。腺病毒载体具有瞬时表达的特点,在减轻角膜移植免疫反应等领域发挥重要作用;慢病毒载体具有稳定高效的特点,在体内可长期缓慢表达,为青光眼治疗提供了新的给药方案;腺相关病毒载体具有免疫原性低,精准持久等特点,可感染多种视网膜细胞,其与成簇规律间隔的短回文重复序列及其相关蛋白9联合使用,为眼科遗传疾病的精准治疗提供了新的思路。病毒载体的出现大大提高了基因治疗的应用潜力,具有传统疗法不可比拟的优势。相信随着技术的进步,以病毒为载体的基因转导技术将会很快进入临床应用,解决更多的眼科疑难问题。