反相高效液相色谱法测定全血环孢霉素A的含量

目的　探讨反相高效液相色谱法 (RP -HPLC)测定全血中环孢霉素A(CyA)的含量。方法　以液 -液提取法萃取、C8(4.6mm× 15 0mm)色谱柱 乙腈 甲醇 水 =6 4 10 2 6作流动相 ,在 6 5℃、2 14nm波长下、CyD为内标分离 ,检测全血中CyA的含量。 结果　在 4 5～ 10 0 3ng·ml-1范围内线性关系良好 ,回归方程及相关系数分别为 :cCyA=0 .5 75ACyA/ACyD+0 .0 12 6 ,r=0 .9998。结果的相对标准偏差 (RSD)均在 10 %以内 ,平均回收率为 99.9% ,最低检测浓度为 2 0ng·ml-1。结论　本方法简便、快速、准确 ,线性范围宽 ,可用于临床和科研工作中CyA浓度的快速检测。     

高效液相法测定加替沙星尿药浓度

目的　建立反相高效液相色谱法以测定大鼠尿液中加替沙星浓度。方法　尿液样品用二氯甲烷提取 ,以环丙沙星为内标 ,色谱柱 :LichrosorbC1 8,流动相 :甲醇 - 0 .0 1mol/L ,磷酸二氢钾缓冲液 - 0 .5mol/L ,四丁基氢氧化铵溶液 (1 5∶75∶1 .4) ,磷酸调 pH至 2 .6 ;流速为 1 .0ml/min ;检测波长 2 98nm。 结果　本法在 3 .1 0～ 1 55 .2 μg/ml范围内线性良好 ,r=0 .9995 ,日内RSD为 5 .1 %～ 9.7% ,日间RSD为 5 .7%～ 1 0 .2 % (n =5) ;尿液最低检测浓度为 50ng/ml。 结论　本法测试快速、准确、重现性好     

反相高效液相色谱法测定微量血浆中卡马西平浓度

目的 :建立微量血浆中卡马西平浓度的测定方法。方法 :采用反相高效液相色谱 (HPLC)法 ,以艾司唑仑为内标 ,测定微量血浆中卡马西平浓度。色谱柱 :ShimadzuShimpackCLC -ODS 6 0mm× 15 0mm ,加保护柱 ,流动相为甲醇和水 (6 0∶40 ) ,流速 0 8ml/min ,检测波长为 2 5 4nm。结果 :卡马西平在 2～ 16mg/L浓度范围内线性良好 ,r=0 9996。最低检测限为 4 92 μg/L。卡马西平高、中、低 3种浓度的平均回收率分别为 97 0 0 % ,96 0 0 % ,93 98% ;RSD分别为 1 1% ,3 0 % ,4 1% (n =9)。日内RSD分别为 1 9% ,1 6 % ,6 3% (n =5 )。日间RSD分别为 1 8% ,2 4% ,2 9% (n =5 )。结论 :该方法准确、快速、简便 ,可作为卡马西平血药浓度常规监测方法     

RP-HPLC法同时测定头孢哌酮舒巴坦钠中二组分的含量

目的 :建立HPLC法同时测定头孢哌酮舒巴坦钠中两组分的含量。方法 :以对乙酰氨基酚为内标 ,以 μBondapakC18为固定相 ,以V[0 .0 2 5mol/L四丁基溴化铵 (pH 4.6± 0 .1) ]∶V (甲醇 ) =6 4∶36为流动相 ,检测波长 2 2 0nm ,流速为 1.0mL/min ,同时测定头孢哌酮和舒巴坦钠的含量。结果 :平均回收率及RSD % (n =9)分别为 ,头孢哌酮 10 0 .5 %、0 .95 % ,舒巴坦 10 0 .9%、0 .2 9%。结论 :本法简便、快速、准确、经济。     

高效液相色谱法检测家兔血浆中酮康唑浓度

目的　建立家兔血浆中酮康唑(ketoconazole)浓度的高效液相色谱检测法。方法　采用HypersilODSC18柱,以甲醇 水 三乙胺(79:2 0 :1)为流动相,紫外检测波长2 4 1nm ,安定为内标,乙醚提取,浓缩后进样。结果　酮康唑与内标分离良好;血浆酮康唑浓度在0 .5～10 0 .0 μg/ml范围内线性良好,r =0 .9996 ;最低检测浓度为0 .2μg/ml;0 .5、5 .0、5 0 .0 μg/ml三种浓度的平均回收率分别为91.2 %、96 .9%和98.7% (n =5 ) ;日内和日间RSD <10 %。结论　该方法操作简便、可靠、取血量少,适用于酮康唑的血药浓度测定和临床生物利用度的研究。     

使用配置荧光探测器的HPLC法分析血液中的异丙酚

使用荧光探测HPLC法 ,测定了临床血样中异丙酚的质量浓度。全血样品用正己烷提取后 ,再用 0 .4mol/LNaOH甲醇溶液反提。使用C1 8ODS柱 (2 5 0mm× 4.6mm) ;乙腈 水 (体积分数分别为 60 %、40 % ,每 1 0 0 0mL加1mL三氟乙酸 )为流动相 ;以百里酚作为内标 ;激发波长 2 76nm ,发射波长 3 1 0nm荧光检测。结果 :方法的最低检测下限 0 .5 μg/L ,平均相对回收率在 93 %～ 1 0 4%之间 ,RSD(相对标准偏差 ) <9.2 %。     

高效毛细管电泳法测定血清中头孢他啶的含量

采用高效毛细管电泳法测定血清中头孢他啶的含量。毛细管 6 0cm× 75 μm ;运行缓冲液 2 5mmol/L四硼酸钠 (pH8 2 ) ,高压进样 5s,分离电压 2 0kV ,温度为 2 5℃ ,检测波长为 2 5 4nm ,地塞米松磷酸钠为内标。头孢他啶在 0 .6 2 5～ 2 0 μg/mL浓度范围内线性关系良好 (r =0 .9997) ,平均回收率为 98.81 % (n =5 ,RSD =1 .88% )。     

高效液相色谱法同时测定血清中硝西泮、氯硝西泮的探讨

目的:建立一种同时测定血清中硝西泮与氯硝西泮的方法.方法:采用高效液相色谱法,色谱条件: ZORBAX 300SB-C8柱,柱温25℃,流动相:甲醇-水-乙腈=12∶68∶20,流速:1ml/min,检测波长:254nm;内标:150mg/L氢化可的松溶液.结果:两药在5～200μg/L的浓度范围内,药物-内标峰面积比(Y)与浓度(X)呈线性关系,最低检出浓度均为1μg/L;日内精密度分别为:硝西泮RSD=2.7%,氯硝西泮RSD=2.5%;硝西泮平均回收率为94.8%～104.0%,RSD为0.9%～3.2%;氯硝西泮平均回收率为96.3%～105.0%,RSD为1.2%～3.7%.结论:本方法快速、准确,适合对血清中两药的定性、定量分析.     

反相高效液相色谱法测定丁卡因和利多卡因含量

目的　采用反相高效液相色谱法同时测定丁卡因和利多卡因的含量。方法　ODS色谱柱 ,检测波长 2 6 3nm ,以乙腈 - 0 .1%硫酸三乙胺缓冲液 (6 0∶4 0 )为流动相 ,流速 0 .5ml/min。结果　丁卡因在 0 .1～0 .5g/L浓度范围内呈线性关系 ,平均回收率 10 1.8% ,RSD为 0 .7% (n =4 ) ;利多卡因在 0 .15～ 0 .75g/L浓度范围内呈线性关系 ,平均回收率 99.53% ,RSD为 0 .9% (n =4 )。结论　该法准确可靠 ,快速简便。     

高效液相色谱法测定人血浆中的烟酸

目的　建立人血浆中烟酸的高效液相色谱 (highperformanceliquidchromatography ,HPLC)测定方法。方法　以替硝唑为内标物 ,用乙腈直接沉淀人血浆中蛋白质 ,上清液在sphersorb色谱柱上 ,以乙腈 水 10 %四丁基氢氧化铵 (5 5∶4 5∶1)为流动相进行分离 ,流速 1ml·mim-1;柱温 30°C ;检测波长为 2 5 4nm。结果　烟酸与内标分离完全且无其他干扰 ,保留时间分别为 5 5 4、4 15min。线性范围 0 18～ 11 0 μg·ml-1,r=0 9999.日内RSD为 1 70～ 3 33% ,日间RSD为 1 75 %～ 4 11% ,回收率为 94 2 %～10 6 6 % ,血浆中烟酸的最低检测浓度为 0 0 9μg·ml-1。结论　所用方法简便、准确、重复性好 ,可用于口服烟酸缓释片后的血药浓度检测。     

反相高效液相色谱法测定脑脊液中头孢三嗪浓度

目的建立脑脊液中头孢三嗪含量的测定方法。方法以C18色谱柱、0.05mol.L-1Na2HPO4(pH=7.20)∶甲醇=85∶15为流动相,在35℃2、40nm波长下分离、检测头孢三嗪,外标法定量。结果线性范围为0.625~20.0mg.L-1,r=0.9989。10.0、5.0、1.0mg.L-1头孢三嗪的平均回收率为98.5%。3浓度的平均日内精密度(RSD)为3.60%,平均日间RSD为4.06%。结论本方法快速、简便、准确,可用于科研和临床工作中头孢三嗪脑脊液浓度的快速检测。     

HPLC同时测定小柴胡颗粒中四种成分的含量

目的:为了建立同时测定小柴胡颗粒中黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素四种有效成分含量的HPLC分析。方法:色谱柱:Dikma Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈–0.05%磷酸溶液,梯度洗脱;波长:278nm。结果:黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的线性范围分别为0.418～4.18μg(r=0.9999),0.2～2μg(r=0.9999),0.233～2.33μg(r=0.9999),0.215～2.15μg(r=0.9998)。小柴胡颗粒中4种成分的平均回收率分别为98.10%(RSD=0.59%),98.85%(RSD=1.33%),98.95%(RSD=1.36%),99.09%(RSD=1.23%)。结论:该方法快速、简便、准确、具有良好的重复性和回收率,可作为小柴胡颗粒中这4种成分的含量测定方法。     

反相高效液相色谱法同时测定血清中多索茶碱和茶碱的浓度

目的：建立同时测定人血清中茶碱和多索茶碱浓度的反相高效液相色谱方法。方法：采用内标法,咖啡因为内标,分析柱为WondaSilCl8,流动相为甲醇-水-三乙胺-冰醋酸（35：65：0.01：0.01）,流速为1.0mL/min,柱温：30℃,检测波长为273nm;血清样品经12%高氯酸直接沉淀蛋白离心后取样进行色谱分析。结果：样品与内标的峰面积比（R）同样品浓度（C）间线性均良好,线性范围均在2.5-40mg/L,回归方程分别为：茶碱C=3.746R＋0.4436,r=0.9997,多索茶碱C=10.24R-4.506,r=0.9999;平均回收率为：茶碱99.89%（RSD=1.07%,n=5）,多索茶碱99.60%（RSD=0.81%,n=5）。结论：该方法简单方便,快速,准确     

HPLC同时测定参附汤中新乌头碱、乌头碱、次乌头碱含量的研究

[目的]建立参附汤中新乌头碱、乌头碱、次乌头碱的含量测定方法。[方法]采用Hypersil BDS C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,柱温25℃,流动相为甲醇、0.1%三乙胺,梯度洗脱,流速:1.0mL.min-1,检测波长237nm。[结果]新乌头碱在0.005~0.5mg.mL-1范围内线性关系良好,r=0.9999,平均回收率98.49%,相对标准偏差(RSD)为2.31%;乌头碱在0.005~0.5mg.mL-1范围内线性关系良好,r=0.9999,平均回收率99.88%,RSD为1.57%;次乌头碱在0.005~0.5mg.mL-1范围内线性关系良好,r=0.9999,平均回收率99.67%,RSD为1.75%。[结论]该方法学考察符合定量要求,结果准确,可用于同时测定参附汤中新乌头碱、乌头碱、次乌头碱的含量,为参附汤的质量控制提供依据。     

高效液相色谱法测定人血清中万古霉素和去甲万古霉素浓度

目的建立人血清中万古霉素和去甲万古霉素浓度的高效液相色谱法（HPLC）测定方法。方法色谱柱为Hypersil BDS C18（250mm×4.6mm,5μm）柱;流动相为磷酸二氢钾缓冲液-甲醇（87∶13）,流速1ml/min;紫外检测波长236nm;以甲硝唑为内标,采用乙腈和硫酸锌沉淀蛋白后直接进样。结果万古霉素、去甲万古霉素血清浓度与峰面积线性关系良好,万古霉素回归方程为Y=0.0873X-0.0061,r=0.9999;去甲万古霉素回归方程为Y=0.1000X-0.0004,r=0.9997;线性范围1.0～50.0mg/L。日内相对标准编差（RSD）小于4.8%,日间RSD小于6.6%;万古霉素低、中、高浓度的平均方法回收率分别为102.41%,100.44%,104.69%,平均提取回收率分别为87.54%,89.86%,88.13%;去甲万古霉素低、中、高浓度的平均方法回收率分别为99.46%,98.88%,99.47%,平均提取回收率分别为78.13%,77.41%,76.45%。结论方法操作简便快速,回收率稳定,适于临床血药浓度测定及相关科研的应用。     

HPLC法测定抗骨增生片中淫羊霍苷的含量

目的:建立一种简便,灵敏,重现性好的抗骨增生片中淫羊霍苷含量的高效液相色谱法测定方法。方法:采用Hypersil C18柱(200×4.6 mm,5μm);乙腈-水(28∶72)为流动相;流速1.0 ml/min,检测波长为270 nm。结果:淫羊霍苷在0.15~0.60μg之间呈良好的线性关系,r=0.9996;平均回收率为98.29%,RSD=0.75%(n=9);日内精密度(RSD=1.10%,n=9)良好。结论:本方法简便、快速,结果准确、可靠、重现性好,可作为抗骨增生片中淫羊霍苷的含量测定方法。     

人血清中7种多不饱和脂肪酸测定方法研究

目的建立人血清中7种游离脂肪酸的测定方法。方法人血清中的硬脂酸、油酸、亚油酸、十八碳三烯酸、二十碳四烯酸、二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸通过加入正十七酸内标,经硫酸/甲醇甲酯化,正己烷萃取浓缩,气相色谱法定性、定量。结果7种脂肪酸甲酯化后可完全分离,重复性好,在5.0～500μg/mL范围内相关系数r>0.999,检出限≤1.1μg/mL,20μg/mL、100μg/mL、300μg/mL 3个浓度的加标试验,平均回收率在91.7%～98.1%之间,RSD 1.9%～4.1%之间。结论该法适用于人血清中游离脂肪酸测定。     

RP-HPLC法同时测定人血清和脑脊液中苯巴比妥、苯妥英钠和卡马西平浓度

目的建立RP-HPLC法同时测定人血清和脑脊液中苯巴比妥（PB）、苯妥英钠（PHT）和卡马西平（CBZ）浓度的方法。方法色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18（250mm×4.6mm,5μm）;流动相：甲醇-乙腈-水（27.5∶27.5∶45）;流速：1.0mL.m in-1;检测波长：210nm;柱温：40℃;进样量：10μL。结果血清中PB、PHT、CBZ的线性范围依次为：2.64～52.75μg.mL-1、1.45～29.00μg.mL-1、1.04～20.80μg.mL-1;脑脊液中PB、PHT、CBZ的线性范围依次为：1.32～42.20μg.mL-1、0.73～23.20μg.mL-1、0.52～16.64μg.mL-1;血清中PB、PHT、CBZ的平均提取回收率分别为：93.17%、96.17%、94.67%,脑脊液中PB、PHT、CBZ提取回收率接近100%;日间、日内RSD均小于4%。结论本方法简单、快速、准确,适用于临床血及脑脊液浓度的检测。     

高效液相色谱法测定血清叶黄素和玉米黄素

目的:建立C30-高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)内标法测定血清叶黄素、玉米黄素和β-胡萝卜素。方法:应用Develosil C30-UG色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相A为乙腈∶甲醇(体积比60∶40),流动相B为甲基叔丁基醚,梯度洗脱。流速1 mL/min,检测波长450 nm,进样量20μL,柱温25℃。内标物为全反式-β-阿扑-8'-胡萝卜醛。结果:血清叶黄素、玉米黄素和β-胡萝卜素的分离效果良好,保留时间分别为9.9min、10.3 min和21.2 min,日内相对标准差分别为3.22%、3.81%和1.60%。血清叶黄素、β-胡萝卜素在0.012 5～12.5 mg/L(r=0.999 5、r=0.999 7),玉米黄素在0.005～5.0 mg/L(r=1)范围内呈良好线性关系。58名正常老年人(年龄50岁)血清叶黄素、玉米黄素和β-胡萝卜素的平均浓度分别为0.410μmol/L、0.054μmol/L和0.128μmol/L。结论:该C30-HPLC内标法是定量分析血清叶黄素、玉米黄素和β-胡萝卜素的可靠方法之一。