徐长卿水提物抗乙型肝炎病毒的体外实验研究

目的初步探讨徐长卿水提物的抗乙型肝炎病毒(HBV)作用.方法通过徐长卿水提物作用于体外培养的2.2.15细胞株,观察其对2.2.15细胞株分泌HBsAg和HBeAg的影响,以初步评价其抗HBV作用. 结果徐长卿水提物作用于2.2.15细胞株12d后,对2.2.15细胞株的半数毒性浓度为62.65g/L,对HBsAg的半数抑制浓度小于0.78 g/L、对HBeAg的半数抑制浓度为10.13 g/L;对HBsAg治疗指数大于80.32,对HBeAg治疗指数为6.18.结论徐长卿水提物在体外细胞培养中对两抗原的分泌有较好的抑制作用.     

重楼水提物对肝癌细胞HepG2增殖及凋亡的影响

目的 探讨重楼水提物对人肝癌HepG2细胞株增殖和凋亡的影响.方法 以体外培养的肝癌HepG2细胞为研究对象,MTT法检测重楼对肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪Annexin V/PI 双染法检测重楼对其凋亡的影响,ELISA法检测Bcl-2、Bax 蛋白表达的情况.结果 不同浓度重楼水提物能有效抑制HepG2细胞的增殖,且呈时间及浓度依赖性,作用效果在12 μg/ml时抑制效果最好（P〈0.01）.12 μg/ml重楼水提物作用HepG2细胞24 h、48 h后,结果表明HepG2随着重楼水提物作用时间的延长,细胞凋亡率增加,与阴性对照组相比,差异有统计学意义（P〈0.01）.12 μg/ml重楼水提物作用HepG2 细胞24 h后,Bcl-2蛋白表达降低,Bax蛋白表达增加,与阴性对照组相比,差异有统计学意义（P〈0.05）.结论 重楼水提物能抑制HepG2细胞的体外增殖,抑制作用表现出时效关系,其机制可能与促进细胞凋亡、降低Bcl-2蛋白表达、增加Bax蛋白表达有关.     

七叶皂苷对人肝癌HepG-2细胞增殖与凋亡的实验研究

目的：观察研究七叶皂苷对人肝癌HepG-2细胞的增殖周期及凋亡的影响,探讨七叶皂苷抗肿瘤作用的机制。方法：噻唑蓝（MTT）法检测七叶皂苷对人肝癌HepG-2细胞生长的抑制作用,流式细胞仪分析七叶皂苷对人肝癌HepG-2细胞周期及凋亡的影响。结果：七叶皂苷对人肝癌HepG-2细胞的增殖有明显的抑制作用,并随着作用浓度的增大,抑制作用逐渐增强。流式细胞仪检测可见亚二倍体峰,提示七叶皂苷有诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡作用。七叶皂苷可通过诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡并将细胞阻滞在G0~G1期,使细胞不能进入S期进行DNA合成,最终使瘤细胞的体外增殖受到抑制。结论：七叶皂苷抑制人肝癌HepG-2细胞的增殖,使细胞周期阻滞和诱导细胞凋亡,七叶皂苷可能在其抗肝癌作用中具有重要意义。     

云芝氯仿萃取物对肝癌HepG-2细胞的凋亡作用

[目的]探讨云芝氯仿萃取物对肝癌HepG-2细胞的凋亡作用．[方法]采用MTT方法检测不同浓度云芝氯仿萃取物对肝癌HepG．2细胞生存抑制率的影响;应用HE染色方法观察不同质量浓度云芝氯仿萃取物对肝癌HepG-2细胞形态学变化的影响．[结果]MTT方法观察结果显示,云芝氯仿萃取物可抑制肝癌HepG-2细胞的增殖,随着时间的延长和药物浓度的增加,抑制作用越明显,当药物浓度为200mg／L、作用时间为48h时对HepG-2细胞的抑制率为52．3％,接近半数抑制浓度．HE染色结果显示,云芝氯仿萃取物处理的肝癌HepG．2细胞,与对照组相比细胞间距增大、细胞变小、失去原有形态、细胞核皱缩、染色变深、细胞碎裂、可见凋亡小体,并且随着时间的延长和剂量的增加,凋亡程度越严重．[结论]云芝氯仿萃取物可促进肝癌HepG2细胞的凋亡．     

异叶天南星氯仿萃取物对肝癌HepG-2细胞的凋亡作用

[目的]探讨异叶天南星氯仿萃取物对肝癌HepG-2细胞的凋亡作用.[方法]采用MTT法测定不同质量浓度的异叶天南星氯仿萃取物对肝癌HepG-2细胞生存抑制率的影响,并利用HE染色法观察各组肝癌HepG-2细胞形态学的变化.[结果]MTT检测结果显示,异叶天南星氯仿萃取物可明显抑制肝癌HepG-2细胞的增殖(P<0.05,P<0.01),且抑制作用随给药时间的延长及药物质量浓度的增加而明显增强;当异叶天南星氯仿萃取物质量浓度为100mg/L,作用时间为48h时,对肝癌HepG-2细胞的抑制率为54.33%,接近IC50.HE染色结果显示,经异叶天南星氯仿萃取物处理的HepG-2细胞表现出细胞间距增大,细胞核固缩、深染,细胞浓缩、碎裂、形成凋亡小体等一系列凋亡形态,且凋亡程度随药物质量浓度的增加及给药时间的延长而增强.[结论]异叶天南星氯仿萃取物可诱导肝癌HepG-2细胞凋亡.     

红景天苷对人肝癌细胞HepG-2的作用及机制研究

目的研究红景天苷对人肝癌细胞系HepG-2生长抑制作用及可能机制。方法以不同浓度的红景天苷作用体外培养的人肝癌细胞株HepG-2,应用MTT法检测对细胞生长的抑制情况,应用酶联免疫吸附测定检测乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果红景天苷可以使HepG-2细胞发生形态学改变;0.5、1.0、2.0 mg/mL三种浓度红景天苷在24 h、48 h、72 h对细胞生长的抑制率分别为12.77%、20.76%、25.11%和20.50%、25.04%、33.24%、和27.66%、37.06%、46.07%,可抑制细胞生长,具有时间剂量依赖性(P<0.05);用红景天苷2.0 mg/mL组处理HepG-2细胞24 h、48 h、72 h后,LDH活性分别为105.37 U/L、139.4 U/L和174.4 U/L,红景天苷组LDH活性明显高于对照组(P<0.05)。结论红景天苷对体外培养肝癌HepG-2细胞具有直接杀伤作用。     

鞣花酸抗肝癌作用的相关分子

目的 探索五倍子提取物鞣花酸抗肝癌生物学活性的相关分子.方法 鞣花酸体外孵育肝癌HepG-2细胞,采用细胞形态学、四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法和Hoechst33258染色分析细胞的增殖与凋亡;Westera-blotting分析基因表达.结果 鞣花酸剂量依赖性抑制HepG-2细胞增殖,诱导其凋亡;鞣花酸抑制肿瘤相关基因CtBP、Stathmin和COX-2的表达,随鞣花酸浓度升高,抑制作用增强.结论 鞣花酸通过抑制CtBP、Stathmin和COX-2的表达发挥抗肝癌的生物学作用.     

斑蝥水提液体外细胞毒性研究

目的通过体外细胞培养技术,探讨斑蝥水提液对肿瘤细胞和人正常细胞的增殖抑制作用。方法将斑蝥水提液作用于人肝癌细胞Hep G-2、人肝癌细胞BEL-7402、人肺癌细胞A549、人正常肝细胞LO-2、人胚肾细胞293A,采用CCK-8法测定斑蝥水提液对上述细胞生长的抑制作用。结果斑蝥水提液对上述细胞均有明显毒性作用,能抑制细胞的生长增殖,呈量效关系。斑蝥水提液对Hep G-2、BEL-7402、A549、LO-2、293A细胞的IC50依次为331、287、523、397、443μg/m L。结论斑蝥水提液具有抗肿瘤效果,体外抗肿瘤的同时对正常肝肾细胞也有毒性抑制作用。     

槲皮素对人肝癌SMMC-7721细胞生长的抑制及细胞凋亡的诱导作用

目的探讨槲皮素体外对人肝癌SMMC-7721细胞的生长抑制作用及诱导细胞凋亡的作用机制。方法以10、30、60、100#mol／L槲皮素作用于体外培养的SMMC-7721细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,Annexi—V／PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡情况,免疫组化染色法检测bcl-2、bax蛋白表达的变化。结果30、60、100umol／L槲皮素可显著地抑制SMMC-7721细胞的生长（P〈0．01）,诱导细胞发生凋亡（P〈0．01）,并呈现量墩和时-效关系;槲皮素作用48h后,免疫组化染色法检测显示bcl-2蛋白表达降低和bax蛋白表达上调。结论槲皮素体外通过引起人肝癌SMMC-7721细胞bcl-2蛋白表达下调和bax蛋白表达上调诱导细胞发生凋亡,抑制细胞生长,槲皮素可能成为一种潜在的抗肝癌药物。     

白毛夏枯草提取液抗肝癌体内外实验研究

目的：观察白毛夏枯草提取物对肝癌细胞株HepG2的体外增殖抑制作用及对小鼠移植性肝癌H22实体瘤的体内抑制作用的影响。方法：（1）肝癌细胞增殖抑制观察：采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测药物,观察不同浓度的白毛夏枯草水提液对肝癌细胞株HepG2的增殖抑制作用;（2）小鼠腹水瘤抑制作用观察：小鼠接种H22腹水瘤后,造成移植性小鼠肝癌模型。随机分为阴性对照组（NS组）、阳性对照组（5-FU组）、白毛夏枯草水提物大剂量组、白毛夏枯草水提物小剂量组,分别观察荷瘤小鼠的抑瘤率。结果：（1）白毛夏枯草水提物对HepG2细胞有较强的抑制增殖作用,并呈一定的浓度依赖性。（2）白毛夏枯草水提物大剂量组、小剂量组对小鼠腹水瘤抑制率分别为37.84%、34.82%。结论：白毛夏枯草对肝癌细胞和小鼠腹水瘤有较好的抑制作用。     

石榴皮提取物对Caco-2细胞生长抑制作用实验

目的探讨石榴皮提取物对人源性结肠癌细胞Caco-2的体外抑制作用。方法培养人源性结肠癌细胞Caco-2,制作石榴皮提取物并配置成不同浓度的提取液,将这些不同浓度的石榴皮提取液加入到培养至对数生长期的Caco-2细胞中,一段时间后,用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)对给予不同浓度石榴皮提取物的肿瘤细胞进行染色,观察不同浓度石榴皮提取物对Caco-2细胞生长抑制程度,并计算抑制率。结果石榴皮提取物在8 g/L时对Caco-2细胞有较强的抑制作用,24、48、72 h的细胞生长抑制率分别为(50.65±5.18)%、(57.21±2.07)%、(69.88±2.14)%;在72 h时对Caco-2细胞的IC50是2.89 g/L。结论石榴皮粗提物在高浓度时具有良好的抑制Caco-2细胞增殖的作用。     

白芨水提物对黑素瘤与角质形成细胞共培养模型黑素合成的影响

目的：利用人表皮黑素瘤细胞（A375细胞）与人永生化角质形成细胞（HaCat细胞）共培养模型,观察白芨水提物对该模型中黑素合成的影响.方法：构建A375细胞与HaCat细胞共培养模型,采用氢氧化钠裂解法、MTT法和多巴氧化法分别检测白芨水提物对黑素含量、细胞增殖和酪氨酸酶（TYR）活性的影响.结果：与阴性对照组比较,2 g/L、1 g/L、0.5 g/L、0.25 g/L白芨水提物对黑素合成有显著抑制作用（P＜0.01）,2g/L、1 g/L组对黑素合成的抑制作用与阳性对照药物熊果苷组相当;白芨水提物对TYR活性有显著抑制作用（P＜0.01）,其中0.5 g/L、0.25 g/L和0.125 g/L组与阳性对照药物熊果苷组的作用相当.结论：白芨水提取物可以通过抑制TYR活性抑制A375细胞与Hacat细胞共培养体系的黑素合成,为临床使用白芨治疗黄褐斑提供了实验依据.     

海洋放线菌发酵物对肝癌细胞株生长和凋亡的影响

目的 研究一株南海海洋放线菌的发酵产物对肝癌细胞生长和凋亡的影响。 方法 采用MTT法评定其对肝癌细胞HepG-2增殖抑制作用及对正常细胞Vero细胞的细胞毒性,经Hoechst 33258 (8g/L)染色进行形态学观察,应用流式细胞术检测细胞周期、凋亡和凋亡基因Fas的表达情况。 结果 发酵物对HepG-2细胞的生长抑制效果明显,荧光显微镜下观察发现培养细胞中出现核固缩、凋亡小体;发酵物在诱导HepG-2细胞凋亡同时,下调Bcl-2表达水平,且均呈剂量效应关系。 结论 发酵物通过阻滞肿瘤细胞的生长及通过抑制Bcl-2诱导细胞凋亡等机制,对肝癌细胞的增殖有一定的抑制作用。     

皮寒药不同提取液体外抗菌作用研究

目的:研究皮寒药全草水提液、乙醇提取液的体外抗菌作用.方法:采用纸片扩展法和2倍递增稀释浓度法检测皮寒药提取液的最低抑菌浓度( MIC)及测定其对5种菌种的抑菌率.结果:皮寒药水提液、乙醇提取液对表皮葡萄球菌的生长有明显的抑制作用,MIC均为25μg/mL;皮寒药乙醇提取液( 100μg/mL)对金色葡萄球菌有一定的抑制作用,其抑制率88.57％;皮寒药水提液(12.5μg/mL)和乙醇提取液(12.5μg/mL)对表皮葡萄球菌的抑菌率分别为80.39％、32.68％.结论:皮寒药水提液和乙醇提取液对表皮葡萄球菌有明显抑菌作用,且水提液比乙醇提取液的抑制作用强;乙醇提取液对金色葡萄球菌表现出抑菌作用,但药物浓度较大.皮寒药水提液和乙醇提取液在实验药物浓度下对绿脓杆菌、大肠杆菌及沙门氏菌无明显抑制作用.     

徐长卿提取物对损伤内皮细胞中乳酸脱氢酶、肿瘤坏死因子及白细胞介素-8活性的影响

目的 研究徐长卿提取物对损伤内皮细胞中炎症介质乳酸脱氢酶（LDH）、肿瘤坏死因子（TNF-α）及白细胞介素-8（IL-8）活性的调节作用,探究徐长卿治疗动脉粥样硬化的作用机制.方法 应用补体蛋白纯品于体外在人脐静脉内皮细胞表面组装亚溶破剂量的C5b-9,建立内皮损伤模型,分别建立提取物高、中、低剂量组及空白、模型及标准品对照组,分别用不同浓度的徐长卿提取物及丹皮酚标准品处理细胞,应用紫外分光光度法及ELISA试剂盒测定细胞培养上清液中LDH、TNF-α及IL-8浓度.结果 提取物高剂量组LDH[（119.85±4.12）U/L]及IL-8[（33.65±2.48）ng/L]与模型对照组[（200.49±3.31） U/L,（40.98±0.60）ng/L]比较,差异有高度统计学意义（P＜0.01）;高剂量[（94.75±3.19）ng/L]及中剂量组[（92.81±1.78）ng/L]与模型对照组[（108.00±2.30）ng/L]比较,均可降低TNF-α水平（P＜ 0.01）.结论 徐长卿可能通过降低炎症介质LDH、TNF-α及IL-8活性,从而修复内皮细胞损伤来达到治疗动脉粥样硬化的目的.     

党参皂苷D对HepG-2细胞增殖时间效应和细胞周期的影响

目的：观察党参皂苷D对HepG-2细胞增殖时间效应和细胞周期的影响,探讨轮叶党参抗癌活性成分及作用机制。方法：不同浓度（5、10、15、20和25 mg/L）党参皂苷D作用于体外培养的人肝癌HepG-2细胞,同时设空白对照组;采用 MTT法检测党参皂苷D对HepG-2细胞增殖抑制情况,流式细胞术检测细胞周期变化。结果：25 mg/L党参皂苷D作用12、24、48
和72 h后,HepG-2细胞增殖抑制率均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。党参皂苷D作用48、72、96及120 h后,各组细胞总数明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);党参皂苷D 5、15、20及25 mg/L组间比较,差异有统计学意义(P<0.05),且随着党参皂苷D浓度增加,HepG-2细胞增殖速度缓慢。细胞周期检测结果表明,党参皂苷D浓度为10、15、20和25 mg/L时,G0/G1期细胞所占百分比分别为55.97%±0.42%、57.16%±0.13%、57.48%±0.15%及60.39%±0.32%,与空白对照组（53.22%±0.28%）比较,差异均有统计学意义（P<0.05）;此浓度范围内S期细胞所占百分比分别为27.47%±1.42%、26.15%±2.71%、26.34%±0.67%及24.81%±0.46%,与空白对照组（33.47%±0.25%）比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。党参皂苷D组的细胞周期发生了G0/G1期阻滞。结论：党参皂苷D在体外明显抑制HepG-2细胞生长,并能引起癌细胞DNA合成代谢紊乱。     

17-AAG对不同肿瘤细胞系增殖影响作用

目的：观察17-烯丙胺-17-脱甲氧格尔德霉素（17-allylamino-17-desmethoxy—geldana．mycin,17-AAG）对胃癌MKN-45细胞株、乳腺癌MCF-7细胞株、肝癌HepG-2细胞株和肺癌A549细胞株增殖能力的影响。方法：体外培养四种肿瘤细胞株,分别给予10．0、5．00、2．50、1．25、0．62、0．31、0．160μg／mL的不同剂量的17-AAG进行作用,并分别在24h、48h之后用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTT法）检测细胞增殖能力的变化。结果：10．0、5．00、2．50、1．25、0．62、0．3l、0．160μg／mL作用24h、48h后发现17-AAG在体外细胞试验中浓度1一lOng／mL时对人癌细胞有显著的抑制作用。且有明显的时间,剂量依赖性。结论：17-AAG能够抑制多种肿瘤细胞增殖的能力。     

4种源于虎皮楠的生物碱对人肝癌细胞株HepG-2增殖的影响

目的研究源于虎皮楠的生物碱对HepG-2增殖的影响。方法采用MTT法测定源于虎皮楠的生物碱对HepG-2细胞的抑制率及IC50。结果有4种生物碱可显著抑制HepG-2细胞增殖,作用72h后,IC50分别为3.874、1.671、0.745、2.954μg/mL,并有明显的时效和量效关系。结论虎皮楠中提取的生物碱在体外具有明显的抑制HepG-2细胞增殖的作用。     

不同提取方法的紫地榆提取物对常驻口腔细菌的研究

摘要：目的  研究不同方法提取紫地榆正丁醇部分和乙酸乙酯部分对变形链球菌、黏性放线菌和血链球菌生长及产酸的影响。方法  首先分别测定不同方法提取的紫地榆正丁醇部分和乙酸乙酯部分对变形链球菌、黏性放线菌及血链球菌的最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）,再以低于MIC的4个浓度配制含药的胰酶解酪蛋白-植物蛋白胨-酵母提取物液体培养基,测定紫地榆正丁醇部分和乙酸乙酯部分对3种常驻口腔细菌产酸的影响。结果  热提的紫地榆正丁醇部分对变形链球菌、黏性放线菌及血链球菌的MIC分别为3.0、3.0和6.0 g/L,MBC分别为6.0、6.0和12.0 g/L。热提的紫地榆乙酸乙酯部分对变形链球菌、黏性放线菌及血链球菌的MIC均为6.0 g/L,MBC均为12.0 g/L。冷提的紫地榆正丁醇部分对变形链球菌、黏性放线菌及血链球菌的MIC均为6.0 g/L,MBC均为12.0 g/L。冷提的紫地榆乙酸乙酯部分对变形链球菌、黏性放线菌及血链球菌的MIC均为6.0 g/L,MBC均为12.0 g/L。一定浓度的紫地榆正丁醇部分和乙酸乙酯部分对3种常驻口腔细菌的产酸有一定的抑制作用,但提取方法的不同对其抑制产酸的能力差异无统计学意义。结论  紫地榆正丁醇部分和乙酸乙酯部分能有效抑制口腔致龋菌的生长和产酸,可能是一种潜在的天然防龋药物。