胸苷磷酸化酶多态性对结直肠癌患者接受卡培他滨的辅助化疗疗效的影响

  目的  本研究旨在探讨胸苷磷酸化酶（thymidine phosphorylase,TYMP）基因多态性对R0术后结直肠癌（colorectal cancer,CRC）患者接受卡培他滨为基础的辅助化疗疗效的影响。  方法  本研究纳入2010年1月至2016年12月在郑州人民医院行R0切除术后接受辅助化疗的CRC患者235例。收集患者外周血及术后癌组织标本分别进行TYMP多态性位点基因分型及TYMP基因表达测定,并对纳入研究患者的疗效进行关联性分析。  结果  TYMP基因5633C > T位点在CRC患者中的分布频率为:CC型149例（63.40%）,CT型73例（31.06%）,TT型13例（5.54%）,最小等位基因频率为0.21。单变量的生存分析结果显示:携带T等位基因的CT/TT型患者和野生型CC型患者的中位总生存期（overall survival,OS）分别为5.9和4.5年,差异具有统计学意义（P=0.009）。经过多变量的Cox模型校正之后发现CT/TT基因型患者对OS有独立的影响（HR=0.67,P=0.015）。另外,进一步在87例癌组织标本的mRNA表达分析中发现,突变的CT/TT型患者癌组织中TYMP的mRNA表达显著高于CC型患者（P=0.019）。  结论  TYMP基因5633C > T位点可能通过影响该基因mRNA的表达进而使CRC患者从卡培他滨的治疗中获益。      

胸苷磷酸化酶表达与结直肠癌关系研究进展

胸苷磷酸化酶(thymidine phosphorylase, TP)是嘧啶核苷合成与分解过程中的一个关键酶。目前认为TP与血小板源性内皮细胞生长因子(platelet-derived endothelial cell growth factor, PD-ECGF)具有同源性, 其诱导血管形成和抗凋亡的作用与结直肠癌的生长、转移密切相关。同时TP也是使5'-脱氧氟尿苷(5'-deoxy-5-fluorouridine, 5'-DFUR)等(5-fluorouracil, 5-FU)前体药物转化为5-FU的关键酶, 其活性与结直肠癌细胞对氟尿嘧啶类药物的敏感性及靶向治疗密切相关。因TP在肿瘤的生长、转移、治疗和预后方面均有重要作用, 阐明其表达机制具有重要意义。本文将对近年TP在结直肠癌中的表达与肿瘤血管新生及与激活5'-DFUR发挥细胞毒作用、治疗结直肠癌的研究进展进行综述。      

结直肠癌组织中胸苷酸磷酸化酶的表达及其临床意义

背景与目的：血管生成已被公认是与肿瘤的生长和侵袭有关,近年研究表明胸苷酸磷酸化酶(thymidine phosphorylase,TP)不仅参与肿瘤新生血管形成,而且可增强5-氟尿嘧啶前药的化疗敏感性,但其在结直肠癌中的作用以及对预后的影响尚未得出一致的结论。本研究检测TP在人结直肠癌组织中的表达水平,并探讨其临床意义。方法：以西安交通大学第一医院行根治术且随访满5年的70例结直肠癌患者的库存组织标本为材料,采用免疫组织化学方法检测其TP表达水平。结果：TP表达主要见于肿瘤细胞胞浆之中,TP阳性表达患者40例,占57．14%。TP在不同Dukes’分期和不同病理组织学分级组织中的表达水平具有显著性差异(P=0．007和P=0．002)。Kaplan-Meier生存率分析提示,TP阳性表达者5年生存率为33．33％,而TP阴性表达者则为73．33％(P=0．000),结果提示TP阳性表达患者的预后较阴性表达者差。结论：TP表达可作为判断结直肠癌患者预后的参考指标之一。     

胸苷酸合成酶表达对进展期胃癌术前新辅助化疗疗效的预测价值

目的 探讨胸苷酸合成酶(TS)表达对进展期胃癌术前新辅助化疗疗效的预测价值。方法 选择2017年1月至2019年1月在河南科技大学第一附属医院就诊的58例胃癌患者作为研究对象,采用逆转录聚合酶链反应检测患者TS mRNA表达,采用Western blot法检测TS蛋白表达。结果 58例患者中,有效38例,无效20例,有效率为65.52%(38/58),疾病控制率为86.21%(50/58)。治疗有效者新辅助化疗前TS mRNA和蛋白分别为0.82±0.11、0.57±0.09,低于治疗无效者的1.43±0.43、1.23±0.33,差异均有统计学意义(t=2.123,P=0.037;t=2.235,P=0.030)。结论 TS低表达的进展期胃癌患者对L-OHP/5-FU/CF方案新辅助化疗的敏感性较高,疗效更好,TS表达水平可作为L-OHP/5-FU/CF方案新辅助化疗前的疗效预测因子。     

肿瘤标志物与结直肠癌术后XELOX辅助化疗疗效的相关性分析

目的探讨肿瘤标志物(CEA、VEGF、IGFBP-3、TGF-β1、TIMP-1、miR-21、miR-126、miR-143、miR-148a、miR-192)在结直肠癌XELOX辅助化疗前后的表达变化及与化疗疗效的相关性。方法收集50例健康志愿者,54例结直肠癌患者不同时期(术前、术后化疗前及化疗后)血清样本,运用酶联免疫吸附实验及实时荧光定量PCR法检测样本中上述肿瘤标志物的表达,并分析其与化疗疗效的相关性。结果 XELOX辅助化疗后患者血清中CEA、VEGF、IGFBP-3、TGF-β1、TIMP-1蛋白整体水平显著低于手术前(P0.05),Ⅱ及Ⅲ期患者化疗后CEA、VEGF、IGFBP-3、TGF-β1、TIMP-1蛋白水平显著低于化疗前(P0.05),Ⅳ期患者化疗后仅CEA、TGF-β1、TIMP-1水平显著下降(P0.05);实时荧光定量PCR结果表明:CEA、IGFBP-3、miR-21及miR-126化疗后水平显著低于术前(P0.05),而与化疗前相比,Ⅱ期患者化疗后CEA、IGFBP-3、miR-21及miR-126显著降低(P0.05),miR-143显著性增高(P0.05),Ⅲ期患者化疗后仅CEA、miR-21及miR-126水平显著性降低(P0.05),其余分子无显著性变化,Ⅳ期患者化疗后与化疗前相比,上述肿瘤标志物分子皆无变化。CEA无论在蛋白水平还是mRNA水平的表达变化与疗效都具有正相关性(mRNA水平Ⅳ期患者除外),IGFBP-3与TGF-β1在蛋白水平的变化与Ⅱ期患者化疗疗效呈正相关,TGF-β1与Ⅲ期患者化疗疗效呈正相关;在mRNA水平,miR-21和miR-126的变化与Ⅱ及Ⅲ期患者化疗疗效呈正相关,其余分子表达变化与疗效无相关性。结论肿瘤标志物的表达变化与结直肠癌不同分期XELOX辅助化疗疗效具有相关性。     

胸苷酸合成酶、胸苷酸磷酸化酶的表达与培美曲塞时辰化疗的疗效分析

目的构建肺腺癌A549细胞的裸鼠皮下移植瘤模型,研究按昼夜不同时辰给予培美曲塞是否能提高疗效和降低不良反应,分析胸苷酸合成酶（TS）mRNA和胸苷酸磷酸化酶（TP）mRNA表达高低与培美曲塞疗效以及不良反应的关系。方法 常规方法体外培养肺腺癌A549细胞。待肿瘤体积生长至0.5~1.5 cm³,随机将荷瘤鼠分为四组,每组5只,其中三组严格按照每昼夜24 h的三个时间点给药即:早晨7点（光照后0 h）、中午15点（光照后8 h）、晚间23点（光照后16 h）进行腹腔给药,第四组为对照组,腹腔给予同体积的0.9%氯化钠溶液。培美曲塞按照150 mg/kg应用,每天一次,连续4天。以后每周测量瘤体积,裸鼠体重,观察裸鼠的行为状态、精神以及食欲变化。实验结束时称量剥离的裸瘤重量。应用实时荧光定量PCR（Real-Time PCR）检测肿瘤组织中TS mRNA和TPmRNA的表达水平。结果7 h给药组裸鼠体重增长较快（P=0.041）,化疗不良反应较小,瘤体积生长最慢（P=0.032）,抑瘤率最大（P=0.000）。7 h给药组的肿瘤组织中TS mRNA相对表达量最低,TP mRNA的相对表达量对高,差异有统计学意义（P<0.01）。结论培美曲塞对肺腺癌裸鼠移植瘤有明显的抑制作用,疗效及不良反应与时辰给药有关,7 h给药组疗效最佳,化疗不良反应最小;TS和TP可以作为培美曲塞的疗效预测因子,为培美曲塞的个体化临床用药提供参考。     

TYMP基因多态性对结直肠癌患者R0切除术后辅助化疗疗效的影响

目的 探讨胸苷磷酸化酶（thymidine phosphorylase, TYMP）基因变异是否对R0术后结直肠癌患者接受辅助化疗疗效有影响。方法 纳入198例术后接受辅助化疗的结直肠癌患者。收集患者外周血及术后癌组织标本分别用来进行TYMP基因5633C>T位点基因分型及TYMP基因表达测定。通过不同的分析方法分析该位点和其他变量的关系。Real-time PCR分析该位点不同基因型患者的TYMP mRNA表达水平。结果 TYMP基因5633C>T位点在CRC患者中的基因型分布频率为CC型126例（63.64%）,CT型61例（30.81%）,TT型11例（5.55%）,最小等位基因频率为0.21,三种基因型分布频率符合哈迪温伯格平衡（P=0.323）。不同基因型患者基线资料均衡,预后分析上将CT/TT基因型合并。单变量生存分析结果显示：野生型的CC型患者OS较差,显著低于携带突变基因的CT型和TT型患者,差异有统计学意义（P=0.009）。多变量Cox模型校正之后发现CC基因型对OS有独立的影响（P=0.015）。另外,进一步在87例癌组织标本的mRNA表达分析中发现,突变的CT或TT型患者相对于野生型的CC型患者,癌组织中TYMP mRNA表达明显较高,差异有统计学意义（P=0.019）。结论 TYMP基因5633C>T位点可能通过影响TYMPmRNA的表达从而影响接受含卡培他滨辅助化疗方案的CRC患者的预后。     

结直肠癌新辅助化疗患者术后预后的相关影响因素分析

目的 探讨结直肠癌新辅助化疗患者术后预后的相关影响因素。方法 选取接受新辅助化疗与根治术治疗的85例结直肠癌患者作为研究对象,术后随访2年,记录患者随访期间复发情况与患者基线资料,分析结直肠癌新辅助化疗患者预后的影响因素。结果 85例结直肠癌患者术后2年内复发16例(18.82%),未复发69例(81.18%)。复发患者与未复发患者在年龄、吸烟史、肿瘤分化程度、术前癌胚抗原(CEA)方面比较,差异有统计学意义(P<0.05);经Logistic回归分析结果显示,年龄大、有吸烟史、肿瘤分化程度低、术前CEA高表达是导致结直肠癌新辅助化疗患者预后不佳的因素(OR>1,P<0.05)。结论 结直肠癌新辅助化疗患者术后预后情况受患者年龄、吸烟史、肿瘤分化程度、术前CEA水平的影响。     

结直肠癌患者手术前后胸苷酸磷酸化酶(TP)的表达及临床意义

目的:研究结直肠癌组织和血清中胸苷磷酸化酶(thymidine phosphorylase TP)表达与病理及生物特性之间的关系。方法:对50例结直肠癌标本、20例正常结直肠黏膜标本及18例结直肠良性病变组织进行免疫组化S-P法检测,测定TP表达情况;ELISA法测定结直肠癌患者术前、术后血清TP水平及20例健康志愿者血清TP水平。结果:结直肠癌组织中胸苷磷酸化酶表达的阳性率显著高于正常结直肠黏膜、结直肠良性病变(P<0.05);有淋巴结转移的结直肠癌组TP表达阳性率高于无淋巴结转移组(P<0.05);结直肠癌组血清TP水平较健康组为高,差别具有统计学意义(P<0.05);DukesA-B期和DukesC-D期患者之间血清TP水平比较差别具有统计学意义(P<0.05)。术前和术后结直肠癌患者血清TP水平差别具有统计学意义(P<0.05)。结论:结直肠癌Dukes分期较晚及有淋巴结转移者,其瘤组织中TP表达的阳性率高;血清胸苷磷酸化酶的水平与患者的肿瘤病理分期有关,分期越晚表达水平越高;胸苷磷酸化酶在组织中的表达与其血清的水平呈正相关性,血清胸苷磷酸化酶的水平可以反应其组织中的表达水平。     

Platelet-derived endothelial cell growth factor/thymidine phosphorylase inhibitor augments radiotherapeutic efficacy in experimental colorectal cancer

Purposes

A lot of radiosensitizers have been developed. However, there are few to be available in the clinical setting. Thymidine phosphorylase inhibitor (TPI) regulates the phosphorolysis of thymidine to thymine and 2-deoxy-d-ribose-1-phosphate which is essential for tumor angiogenesis. The aim of this study is to evaluate whether TPI augments the radiotherapy for colorectal cancer in vitro and in vivo studies.

Materials and methods

The cytotoxicity of TPI with irradiation on HT29 and HCT116 cells was examined using MTT- and colony formation assay. At 10 days post-inoculation, HT29 bearing orthotopic model mice (n = 28) were divided into four groups and orally treated with TPI- (50 mg/kg/day for 2 weeks), radiation (RT, 2 Gy × 4: Total 8 Gy), their combination or the vehicle. The mechanisms underlying the efficacy were assessed genomically and immunohistochemically.

Results

Compared to each single treatment, the combination of TPI and RT synergistically inhibited the cell viability in a time- and dose-dependent manner. In the HT-29 bearing mice, the combination of TPI and RT reduced the tumor growth compared with RT alone. Notably, the mRNA levels of VEGF, TGF-β and, Rad51 and the protein expressions of VEGF and CD34 were significantly lower in the combination than the others. Furthermore, the combination markedly increased the TUNEL-positive cells, suggesting that TPI augments the cancer cell death through inhibition of angiogenesis and DNA repair system in the radiotherapy.

Conclusions

Our study first demonstrated that the combination of TPI and irradiation was effective in colon cancer. TPI would provide a promising therapeutic strategy as a radiosensitizer.     

DC-CIK细胞过继免疫治疗联合XELOX方案化疗对进展期结直肠癌患者的疗效分析

目的探讨树突状细胞-细胞因子诱导杀伤细胞(DC-CIK)细胞过继免疫治疗联合奥沙利铂+卡培他滨(XELOX)方案化疗对进展期结直肠癌(CRC)患者的疗效。方法将104例进展期CRC患者按随机数字表法分为观察组和对照组各52例,观察组行DC-CIK联合化疗,对照组行化疗。检测患者治疗前后血清糖类抗原242(CA242)、糖类抗原19-9(CA19-9)、癌胚抗原(CEA)、T淋巴细胞亚群[自然杀伤性T(NKT)细胞、自然杀伤(NK)细胞、CD4^+、CD3^+、CD8^+]及白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,评价患者近期疗效。结果观察组患者的缓解率(RR)为61.54%(32/52),疾病控制率(DCR)为75.00%(39/52),分别高于对照组的40.38%(21/52)和55.77%(29/52),差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患者血清CEA水平均低于治疗前,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗后,观察组患者血清IL-2、IFN-γ、TNF-α、CD4^+、CD3^+、CD8^+及NKT细胞水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 CRC患者行DC-CIK细胞过继免疫治疗联合XELOX方案化疗可改善机体免疫功能,弥补单纯化疗所造成的免疫抑制,为安全有效的疗法。     

结直肠癌组织胸苷磷酸化酶表达临床意义研究的现状

目的:总结近年来关于胸苷磷酸化酶(TP)在结直肠癌组织中表达临床意义的研究现状.方法:应用PubMed、Elsevier Sciencedirect、CNKI及万方全文数据库检索系统,以胸苷磷酸化酶和结直肠癌为关键词,检索2005-01-2011-06发表的相关文献.纳入标准:1)TP在结直肠癌及转移组织中的表达及其促血管新生、抗细胞凋亡等生物学作用.2)TP与5-氟尿嘧啶(5-FU)前体类药物靶向治疗的关系.根据纳入标准分析文献29篇.结果:TP对于结直肠癌的影响是双重性的,其在肿瘤血管新生、转移、复发以及抗细胞凋亡等过程中均发挥重要作用,高表达TP的患者往往预后不良.另外,TP又在5-FU前体药物的化疗过程中起着关键作用,增加TP的表达很可能可以增强5-FU前体药物的化疗效果.结论:TP在结直肠癌组织中的表达对结直肠癌靶向治疗和预后有着非常重要的临床意义.     

大肠癌端粒酶活性与c-myc基因表达的关系

目的　探讨端粒酶活性和c myc表达的相关性及其与大肠癌发生发展的关系。方法　运用端粒重复扩增 (TRAP)及免疫组织化学方法对 30例大肠癌、癌旁组织及正常粘膜和 2 0例大肠腺瘤性息肉组织中端粒酶活性和c myc蛋白进行检测。结果　大肠癌端粒酶活性和c myc蛋白表达率分别为 83 33% (2 5 / 30 )和 80 0 0 % (2 4 / 30 ) ,显著高于癌旁、正常大肠粘膜及大肠腺瘤性息肉组织 (P <0 0 5 ) ;端粒酶活性及c myc蛋白阳性表达率在伴淋巴结转移的大肠癌组织中明显高于无淋巴结转移者 (P <0 0 5 ) ;在 2 5例端粒酶活性阳性的大肠癌组织中有 2 3例 (92 0 0 % )表达c myc蛋白 ,端粒酶活性与c myc蛋白表达密切相关 (P <0 0 5 )。结论　端粒酶激活及c myc的异常表达与大肠癌的发生发展密切相关 ,联合检测有助于大肠癌的诊断和预后判断 ;在大肠癌的形成和发展过程中 ,c myc过度表达对端粒酶的激活可能起重要作用。     

结直肠癌与自然杀伤细胞的相关性探讨北大核心

目的:研究结直肠癌及其配对的癌旁组织的自然杀伤(nature killer,NK)细胞数量及分布情况。方法:结直肠癌及其配对的癌旁组织各40例,以SP免疫组化法检测NK细胞。结果:结直肠癌及其配对的癌旁组织中均未检测到NK细胞的浸润。结论:结直肠癌及其配对的癌旁组织中缺乏NK细胞浸润可能与肿瘤微环境、生理微环境、未知的NK细胞亚型相关,结直肠癌患者可能不适用NK细胞进行免疫治疗。     

卡培他滨联合沙利度胺化疗对结直肠癌组织胸苷磷酸化酶表达的影响

目的:探讨卡培他滨联合沙利度胺治疗晚期结直肠癌的近期疗效及癌组织胸苷磷酸化酶的表达。方法:比较卡培他滨联合沙利度胺和5-氟尿嘧啶 亚叶酸 奥沙利铂(FOLFOX4)方案治疗晚期结直肠癌的疗效、不良反应,并采用ELISA方法测定两组患者癌组织中TP含量。结果:卡培他滨联合沙利度胺组疗效优于FOLFOX4组,总有效率分别为50.0%和36.3%(P<0.05);卡培他滨联合沙利度胺组TP浓度均数(211.2±30.5μg/L)显著低于FOLFOX4组(323.4±28.3μg/L)(P<0.005)。结论:卡培他滨联合沙利度胺治疗晚期结直肠癌疗效肯定,安全性较好。     

肥胖与结直肠癌的相关性研究

现今生活和饮食结构的改变,导致肥胖在正常人群中的患病比重不断增加,同时结直肠癌（colorectal cancer,CRC）在肥胖患者中又具有高发病率,虽然现已明确肥胖是结直肠癌发生的重要因素,但其具体的作用机制尚不明了。对于肥胖患者患结直肠癌的预后尚无定论,而肥胖悖论的提出引发了我们新的探索,对于患有结直肠癌的肥胖患者其中是否存在一定特异性相似以及其行新辅助治疗的必要性仍需要进一步研究。本文就肥胖与结直肠癌的临床关系以及一些特异性联系作一综述。     

Correlation between malignancy grade and p53 gene in relation to thymidine phosphorylase activity in colorectal cancer patients

We studied 89 colorectal cancer patients conducting immunohistological staining of thymidine phosphorylase (TP) and investigated correlation between the enzyme activity levels, clinicopathologic factors and patient prognosis. Based on TP expression level, we also assessed p53, an anti-oncogene related to hematogenesis and nucleic acid metabolism. TP staining results were classified into: i) strongly stained group (8 patients) in which 20% or more tumor cell nuclei were stained and ii) weakly stained group (39 patients) in which less than 20% of the nuclei were stained. These 2 groups were defined as TP positive group and those without TP staining (42 patients) were defined as TP negative group. TP positive group showed: a significantly higher incidence of vascular infiltration (p=0.0065) than TP negative group, and slightly higher incidence of lymphatic permeation and tumor progress. Strongly stained group showed significantly higher incidences of vascular infiltration and lymphatic permeation (p=0.0001, p=0.0271). As for 5-year survival rate, TP positive group showed a significantly lower rate (29%) than TP negative group (52%) (p=0.05) indicating that TP expression level was an important prognostic factor in colorectal cancer patients. No differences were found in pathologic factors and patient prognosis between groups with or without point mutation. As for relationship between TP staining and p53, there were significantly more patients with strongly positive TP staining in the p53 negative group. These findings suggest that TP is an important prognostic factor for colorectal cancer patients, and p53, in conjunction with other factors, is also a prognostic indicator.