高效液相色谱法测定人血浆中羧甲司坦浓度

目的:建立高效液相色谱法测定人血浆中羧甲司坦浓度.方法:采用邻苯二甲醛为柱前衍生化试剂,反相高效液相色谱法检测羧甲司坦衍生物:Hypersil BDS C18柱(4.6 mm×150 mm,5 μm);流动相:甲醇-0.05 mol·L-1醋酸钠缓冲液(pH 5.9)-四氢呋喃(15:84:1);流速:1. 0 mL·min-1;进样量:5μL,使用荧光检测器检测激发波长:338 nm,发射波长:450 nm.结果:标准曲线线性、范围1.0～40.0 mg·L-1(r=0.999 9,n=6),血浆中羧甲司坦最低检测限为0.5 mg·L-1,日内RSD为0.3%～1.3%,日间RSD为0.4%～4.5%,准确度为97.9%～102.7%,羧甲司坦回收率为99.5%～103.0%.结论:该方法分离效果好,方法学结果满意,适用于人血浆中羧甲司坦的检测.     

LC-MS/MS法测定人血浆中拉米夫定的质量浓度及生物等效性评价

目的建立人血浆中拉米夫定质量浓度的LC-MS/MS测定方法,并应用于拉米夫定片在健康人体内的生物等效性研究及评价。方法前处理方法采用沉淀蛋白法。分离选用Venusil ABS C18色谱柱,以甲醇-水-甲酸(体积比5.0∶95.0∶0.1)为流动相,采用多反应离子监测(multiple reaction monitoring,MRM)模式进行正离子检测。结果拉米夫定的线性范围为0.020 0~5.00 mg·L-1,定量下限为20μg·L-1。方法准确度为95.0%~102.4%,日内和日间精密度均不大于7.6%。结论本方法适用于拉米夫定人体生物等效性试验研究。24名健康受试者口服拉米夫定参比制剂和受试制剂后的药代动力学行为一致。     

羧甲司坦泡腾片的人体相对生物利用度研究

目的比较羧甲司坦泡腾片和普通片在健康人体内的药代动力学过程,并对两制剂的生物等效性做出评价。方法18名健康受试者随机交叉单剂量口服羧甲司坦泡腾片和羧甲司坦普通片剂1000mg后,采用柱前衍生化高效液相色谱荧光检测法测定血浆中羧甲司坦浓度,进行药代动力学和生物利用度研究。结果试验结果表明,羧甲司坦泡腾片和普通片剂的血药浓度时间曲线符合血管外给药一室模型,主要药代动力学参数tmax分别为1.50±0.34h和1.97±0.32h,Cmax分别为11.91±2.63mg     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中尼古丁浓度

目的建立简单、快速且灵敏的液质联用法检测人血浆中尼古丁的浓度。方法 血浆样品经二氯甲烷萃取后,采用Thermo Hypurity CN柱(2.1mm×150mm,5μm)分离,以乙腈-20mmol.L-1甲酸铵(50∶50,v/v)为流动相,流速为0.30mL·min-1。采用电喷雾离子源(ESI源)正离子多反应监测(MRM)扫描分析,尼古丁和d-4-尼古丁的离子选择通道分别为:m/z163→130和m/z 167→133.9。结果尼古丁的线性范围为0.597～76.48ng·mL-1,最低检测浓度为0.597ng·mL-1,平均提取回收率为70.7%～86.8%,日内和日间变异均<15%。结论本方法简单、灵敏、快速、重现性好,适用于尼古丁的人体临床药物代谢动力学及生物等效性研究。     

高效液相色谱法测定羧甲司坦颗粒剂中羧甲司坦的含量

目的 测定羧甲司坦颗粒剂中羧甲司坦的含量。方法 采用高效液相色谱法。色谱柱:Hypersi　C18（4.6×300mm,5μm）;流动相:pH2.0磷酸盐缓冲液;流速:1.0mL·min-1;检测波长:210nm;进样量:10μL;柱温:室温。结果 羧甲司坦进样量在2～20μg·ml-1范围内,线性关系良好（r=1.0000）,平均回收率为99.85％,RSD=0.4％（n=9）。结论 该法简便、快速,结果准确、可靠,重现性好。     

HPLC-MS法测定人血浆中酮康唑浓度及其生物等效性研究

目的:建立人血浆中酮康唑的高效液相色谱-质谱测定方法.研究受试制剂酮康唑片在人体内的药代动力学特征,评价其相对生物利用度和生物等效性.方法:20 名男性健康受试者随机分成2组,进行双交叉试验,受试及参比制剂剂量均为200 mg.采用高效液相色谱-质谱法测定血药浓度.结果:志愿者口服受试和参比制剂后,酮康唑的药动学参数如下:峰浓度分别为(4.77±1.63)μg·mL-1和(5.09±1.64)μg·mL-1,达峰时间分别为(1.37±0.71) h和(1.19±0.61)h,消除半衰期分别为(1.89±0.80) h和(2.13±0.91)h,平均驻留时间分别为(3.02±0.81) h和(3.04±0.81)h,AUC0-24分别为(13.03±5.65)μg·h·mL-1和(13.99±6.54)μg·h·mL-1;相对生物利用度为95.6%±12.5%.结论:建立的分析方法准确、灵敏、可靠、简便,统计结果表明受试制剂和参比制剂生物等效.     

高密度羧甲司坦的制备

高密度羧甲司坦的制备ＰＲＥＰＡＲＡＴＩＯＮＯＦＨＩＧＨＤＥＮＳＩＴＹ（Ｓ）┐ＣＡＲＢＯＸＹＭＥＴＨＹＬ┐Ｌ┐ＣＹＳＴＥＩＮＥ吴义杰＊李云华刘超美（第二军医大学药学院，上海２００４３３）ＷＵＹｉ－Ｊｉｅ＊，ＬＩＹｕｎ－Ｈｕａ，ＬＩＵＣｈａｏ－Ｍｅｉ（Ｃ...     

LC-MS/MS法测定人血浆中拉米夫定浓度及其生物等效性研究

目的建立测定人血浆中拉米夫定浓度的LC-MS/MS方法,并评价拉米夫定片在健康志愿者体内的相对生物利用度及2种制剂间的生物等效性。方法 24名健康男性志愿者随机分组、自身双交叉,分别单剂量口服100 mg拉米夫定试验制剂和参比制剂,LC-MS/MS法测定血浆中拉米夫定浓度,采用WinNonlin 6.1软件计算药动学参数。结果拉米夫定在20.48～5 000μg L-1与峰面积呈良好的线性关系,最低定量限（LLOQ）为20.48μg L-1。口服100 mg拉米夫定参比制剂和试验制剂后的主要药动学参数如下：Cmax分别为（1 152.6±326.4）和（1 032.4±319.7）μg L-1;tmax分别为（0.93±0.30）和（1.07±0.47）h;t1/2分别为（3.4±0.7）和（3.3±0.6）h;AUC0～16 h分别为（3 811.9±870.2）和（3 753.6±1 067.0）μg h L-1;AUC0～∞分别为（3 958.9±871.3）和（3 914.8±1 087.0）μg h L-1。试验制剂的相对生物利用度为（98.2±17.0）%。结论本方法简单、快速、灵敏、准确,可用于人血浆中拉米夫定浓度的测定。试验制剂与参比制剂具有生物等效性。     

HPLC-MS/MS测定人血浆中氟比洛芬的浓度及其生物等效性研究

目的 建立并验证一种简单、快速、灵敏的测定人血浆中氟比洛芬的液相色谱-串联质谱分析方法,研究氟比洛芬凝胶贴膏在中国健康受试者体内的药动学特征并评价生物等效性。方法 液相条件:使用InertSustain C₁₈色谱柱(3.0 mm×100 mm,3 μm);柱温设定为40℃;流动相A为甲醇-乙腈(40:60),B为0.1%甲酸水溶液;流速为0.6 mL·min^-1;梯度洗脱,血浆样品采用蛋白沉淀的前处理方法。质谱条件:离子源为电喷雾离子化源(ESI);负离子模式;氟比洛芬和氟比洛芬-d5的检测离子对分别为m/z 243.1→199.2和m/z 248.0→204.3。结果 本分析方法总运行时间为4.5 min,氟比洛芬和氟比洛芬-d5的保留时间分别为2.43,2.44 min。该方法在0.5~100 ng·mL^-1内线性关系良好。批内精密度在1.3%~12.5%,准确度在97.2%~115.2%。批间精密度在1.9%~11.6%,准确度在99.5%~107.8%。提取回收率范围为103.5%~104.9%,基质效应不显著。在不同的测试条件下,氟比洛芬在溶液和血浆中都是稳定的。验证方法成功应用于一项在中国健康志愿者开展的随机、开放、两周期、四序列、交叉给药的生物等效性研究。结果表明,2种每40 mg氟比洛芬凝胶贴膏在外用给药下,生物等效性符合接受标准,安全和耐受性良好。参比制剂和受试制剂的药动学参数为C_max(19.695±13.159)和(18.135±11.772)ng·mL^-1、T_max(19.375±3.807)和(19.575±4.138)h、AUC_0-∞(534.402±272.792)和(506.529±256.746)h·ng·mL^-1。结论 该方法可应用于氟比洛芬凝胶贴膏的生物等效性研究。     

HPLC-MS／MS法测定人血浆中奎硫平浓度的方法学研究

目的:建立人血浆中奎硫平测定的 HPLC-MS/MS 法。方法:血浆蛋白用乙腈直接沉淀。采用 Thermo Hypurity C_(18)(2.0mm×150 mm,5μm)分析柱,以乙腈(含1%甲酸)-1%甲酸水溶液(80:20)为流动相,流速为0.2 mL·min~(-1);采用 ESI~ MRM进行离子方式监测。质谱检测参数:源电压3.5 kV,源温度100℃,去溶剂化温度200℃,锥孔气流速50 L·h~(-1),去溶剂化气流速350 L·h~(-1)。结果:血浆中奎硫平检测方法的线性范围为1.764～1806 ng·mL~(-1),最低检测限为0.88 ng·mL~(-1)。方法回收率为94.1%～104.8%,提取回收率均值为68.0%～72.3%,日内 RSD 小于10%,日间 RSD 小于15%。结论:本方法灵敏、准确,可用于奎硫平的药代动力学研究。     

HPLC-MS/MS法测定人体色甘酸钠血浆浓度及其药代动力学研究

采用HPLC-MS/MS法测定人血浆中色甘酸钠浓度，进行其滴鼻液和鼻用喷雾剂的药代动力学研究并评价其生物等效性。采用高效液相分离系统，流动相为乙酸铵-甲醇(含50%乙腈)(15∶85)，固定相为AGT Venusil XBP C₁₈(250 mm×4.6 mm ID， 5 μm)色谱柱。采用质谱检测系统， ESI离子源， 正离子模式， 多级反应监测(MRM)方式， m/z 469→263.1(色甘酸钠)， m/z 447.2→327.1(内标，普伐他汀钠)。在0.3～20 ng·mL^-1色甘酸钠血药浓度呈线性关系， 定量限为0.3 ng·mL^-1， 回收率在94.1%以上， 日内日间的RSD均小于14.3%。单剂量给药色甘酸钠鼻用喷雾剂或滴鼻液， 其药代动力学参数T_1/2分别为(1.82±0.54)和(1.59±0.52) h； T_max分别为(0.47±0.12)和(0.44±0.15) h； C_max分别为(9.79±4.66)和(10.88±4.05) ng·mL^-1， AUC_{0-5 h}分别为(11.52±3.46)和(12.63±4.23) ng·mL^-1·h。色甘酸钠鼻用喷雾剂相对生物利用度F_r为(93.6±13.8)%。本法灵敏度高， 适用于色甘酸钠治疗药物监测及其药代动力学和生物利用度研究。     

HPLC-MS测定人血浆中氟哌噻吨及生物等效性研究

目的建立测定人血浆中氟哌噻吨浓度的高效液相色谱-质谱联用法,用于氟哌噻吨美利曲辛片的生物等效性研究。方法采用高效液相色谱-质谱法,血浆样品用乙酸乙酯萃取后,用Thermo C18色谱柱,以50 mmol.L-1乙酸铵溶液(pH=4.0)-甲醇-乙腈(45∶36∶19)为流动相分离,电喷雾电离法,选择离子监测(SI M)。结果氟哌噻吨在0.03~2.0μg.L-1线性关系良好,平均回收率为99.79%,日内RSD≤10.30%,日间RSD≤7.85%。结论该方法准确、灵敏度高,适用于含氟哌噻吨制剂的人体药动学和生物等效性研究。     

HPLC-MS/MS法测定伏立康唑的血药浓度及其在生物等效性研究中的应用

目的建立测定人血浆中伏立康唑的高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）,研究2种伏立康唑片的相对生物利用度。方法血浆样品经酸化后用甲醇沉淀蛋白,经Waters Atlantis C18柱分离,流动相为乙腈-0.2%冰醋酸水溶液（内含20 mmol.L-1醋酸铵）（60∶40,v/v）,流速为0.2 mL.min-1;选择多反应离子检测（MRM）方式进行定量分析,用于监测的离子为质荷比m/z350.9→281.4（伏立康唑）和m/z307.9→220.3（内标氟康唑）。18名健康志愿者以随机交叉方式分别单次口服伏立康唑分散片T或伏立康唑片R 0.2 g后于不同时间点取血,样品以新建立的HPLC-MS/MS法测定,研究比较两制剂的药动学及相对生物利用度。结果伏立康唑与血浆中内源性杂质分离度好,伏立康唑浓度在27.35~3 500 ng.mL-1与峰面积比线性良好,最低定量浓度为27.35ng.mL-1。蛋白沉淀绝对回收率为86.2%~88.8%,相对回收率为97.9%~105.7%,日内精密度（RSD）〈9.8%,日间精密度（RSD）〈9.4%。单剂量口服伏立康唑分散片T和伏立康唑片R 0.2 g后2种制剂的Cmax为（717.9±325.1）、（671.8±243.3）μg.L-1;tmax为（1.1±0.5）、（1.1±0.4）h;AUC0~24为（3 729.1±1 887.7）、（3 811.2±1 836.6）μg.h.L-1;t1/2为（6.7±1.9）、（6.7±1.7）h。与R相比,T制剂相对生物利用度为（97.3±13.0）%。结论该方法简单快速,灵敏度高,可用于伏立康唑的体内过程研究。方差分析表明伏立康唑分散片T与伏立康唑片R中伏立康唑的主要药动学参数之间均无明显差异,双单侧t检验结果表明两制剂为生物等效制剂。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中西洛他唑浓度

目的建立灵敏快速检测人血浆中西洛他唑浓度的HPLC-MS/MS方法。方法采用色谱柱为Thermo Hy-purity C18（150 mm×2.1 mm,5μm,USA）,流动相为乙腈（含0.1%甲酸）-甲醇=25∶75（v/v）;流速为0.2mL.min-1;ESI＋离子源,MRM进行离子方式监测。质谱参数：源电压3 500V,源温度100℃,去溶剂化温度350℃,锥孔气流速50 L.h^-1,去溶剂化气流速350 L.h^-1;血浆处理采用乙腈直接沉淀萃取方法。结果血浆中西洛他唑检测方法的线性范围为4.90-2 510 ng.mL-1,最低检出浓度为4.90 ng.mL-1,血浆中西洛他唑的方法回收率在80%-120%,日内RSD〈10%,日间RSD〈15%。结论本方法用于测定人血浆中西洛他唑的浓度,简单、快速、灵敏。     

HPLC-MS/MS同时测定人血浆中对乙酰氨基酚和咖啡因含量的方法学研究

目的建立同时测定人血浆中对乙酰氨基酚和咖啡因浓度的HPLC-MS/MS法。方法以茶碱为内标,血浆样品用甲醇沉淀蛋白后直接进样。用Waters symmetry C18（150 mm×4.6 mm,5μm）为分析柱,甲醇-0.2%醋酸=35∶65（v/v）为流动相,流速为0.9 mL·min^-1,采用柱后分流,0.2 mL·min^-1进入质谱,柱温35℃。选择监测的离子为m/z152.1→109.9（对乙酰氨基酚）、m/z195.3→138.1（咖啡因）和m/z181.1→123.9（茶碱）。结果血浆中对乙酰氨基酚和咖啡因的线性范围分别为0.02-4.04μg·mL^-1,5.05~1 010 ng·mL^-1;日内日间精密度RSD均〈7.94%。结论本方法专属性强,灵敏度高,操作简便、快速,符合生物样品分析要求,适用于临床药动学研究。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中匹伐他汀钙的浓度及应用

目的建立高效液相色谱-质谱（HPLC-MS/MS）法测定人血浆中匹伐他汀钙的浓度,评价2种匹伐他汀钙片在人体内的生物等效性。方法血浆中加入内标瑞舒伐他汀后,甲基叔丁基醚萃取,选用Venusil MP-C18（150 mm×2.1 mm,5μm,Agela）色谱柱,流动相为30 mmol·L-1乙酸铵（含0.1%甲酸）-甲醇（25：75）,流速0.4 mL·min-1,进样体积为20μL,柱温为40℃。以多重离子反应监测模式进行检测：m/z421.9→m/z290.1（匹伐他汀）,m/z482.2→m/z258.2（瑞舒伐他汀）。结果匹伐他汀钙的线性范围为0.110～56.0μg·L-1,本方法灵敏、稳定、特异性高,可应用于生物等效性研究。结论该方法重复性好,可以准确测量人血浆中匹伐他汀钙的浓度,适用于临床匹伐他汀的生物等效性研究。     

高效液相色谱-串联质谱法同时测定人血浆中瑞格列奈和二甲双胍及其在人体药动学中的应用

目的:建立高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)同时测定人血浆中瑞格列奈和二甲双胍浓度的方法,并进行人体药动学研究。方法:以乙腈沉淀蛋白处理血浆样品,替米沙坦做内标,采用Kromasil 60-5CN色谱柱(2.1 mm×100 mm, 5 μm),流动相为20 mmol·L^-1醋酸铵水溶液(含0.2%甲酸)-乙腈(45:55);质谱采用电喷雾离子化-多反应离子监测(ESI-MRM)。并测定12名健康志愿者单剂量口服瑞格列奈盐酸二甲双胍复方片(2 mg:500 mg)后瑞格列奈和二甲双胍的血浆浓度。结果:瑞格列奈和二甲双胍分别在0.05~50 μg·L^-1、2~2 000 μg·L^-1范围内线性良好,定量下限分别为0.05 μg·L^-1和2 μg·L^-1,日内日间精密度均小于8%,提取回收率分别为77.32%~80.65%和78.98%~82.46%。瑞格列奈和二甲双胍的主要药动学参数C_max分别为(29.50±9.57),(1 167±197.77)μg·L^-1;t_max分别为(0.83±0.39),(1.88±0.64)h;t_1/2分别为(1.11±0.38),(4.31±0.86)h;AUC_0→∞分别为(56.90±20.31),(7 407.32±1 653.25)μg·L^-1·h^-1。结论:建立的分析方法灵敏、准确可靠,样品处理快速、简便,适用于瑞格列奈/盐酸二甲双胍复方片人体药动学和生物等效性研究。