血根碱、白屈菜红碱衍生物的合成与体外抗HBV活性研究

目的合成季铵类苯并菲啶生物碱血根碱(1)和白屈菜红碱(2)的衍生物,评价其体外抗HBV活性,初步探讨抗HBV活性。方法以血根碱和白屈菜红碱为原料,通过结构修饰获得衍生物,采用Hep G2.2.15细胞模型评价衍生物对HBsAg和HBeAg分泌抑制活性和HBV DNA复制的抑制活性。结果血根碱和白屈菜红碱对HBsAg、HBeAg和HBV DNA复制具有较高的抑制活性,但细胞毒性较高。氧化白屈菜红碱(6)对HBV DNA的复制具有一定的抑制作用(IC50=0.75 mmol·L-1),细胞毒性较白屈菜红碱明显降低(CC50>3.0 mmol·L-1)。6-乙氧基二氢血根碱(7)和6-乙氧基二氢白屈菜红碱(8)对HBsAg和HBeAg和HBV DNA复制具有一定的抑制活性。结论季铵类苯并菲啶生物碱具有显著的体外抗HBV活性,烯胺正离子结构单元对化合物的抗HBV活性产生重要的影响。     

5-取代嘧啶开环核苷膦酸酯类化合物的合成及其抗病毒活性研究

目的：设计合成5-取代嘧啶开环核苷膦酸酯类新化合物并进行体外抗病毒活性实验。方法：氯甲基氯乙基醚与三氟乙醇磷酸酯缩合后,经碘-氯交换得碘代乙氧基甲基三氟乙醇膦酸酯侧链,和5-取代嘧啶在DBU作用下缩合,氯甲酸酯酰胺化,设计合成得到8个新化合物1a～1h。对合成的目标化合物进行了初步的体外抗乙肝病毒药理活性实验。,结果：设计合成的8个化舍物对HBsAg和HBeAg都有一定的抑制作用,其中化合物1d的抑制活性优于拉米夫定。结论：5-取代嘧啶开环核苷膦酸酯类化合物保持抗病毒活性,N6位长链脂肪氯甲酸酯取代的化合物抗HBV病毒活性较好。     

取代腺嘌呤类化合物的合成及其抗病毒活性研究

目的：修饰阿德福韦（ADV）结构,设计合成新化合物,研究其对乙肝病毒HBsAg、HBeAg的抑制活性。方法：以（ADV）为原料,经磷酰氯化、三氟乙醇酯化和氯甲酸酯缩合等反应,设计合成了未见文献报道的8个嘌呤类目标化合物1a-1h,所有化合物经^1HNMR谱等确证;体外药理实验采用酶联免疫法（ELISA）,阳性药物采用临床常用同类药物ADV。结果：设计合成的8个化合物,对HBsAg和HBeAg都有一定的抑制作用,其中化合物1d,1e,1g,1h对HBsAg抑制活性与ADV相当,化合物1g对HBeAg抑制活性与ADV相当。所有目标化合物对HBsAg抑制活性好于对HBeAg抑制活性。结论：在嘌呤环N6位引入较长碳链的1g活性最佳。     

含丙二酰胺结构片段的硫醇类HDAC抑制剂的设计、合成及抗肿瘤活性研究

目的设计并合成含丙二酰胺结构片段的硫醇类HDAC抑制剂,评价其体外抗肿瘤细胞增殖活性及组蛋白去乙酰化酶抑制活性。方法以丙二酸二乙酯和1,5(6)-二溴戊(己)烷为原料,经C-烷基化、水解、缩合、亲核取代、水解共5步反应合成目标化合物;以伏立诺他为阳性对照药,分别采用MTT法和台盼蓝染色法考察了目标化合物对人乳腺癌细胞MCF-7和人急性早幼粒白血病细胞HL-60细胞株的抗增殖活性;并测试了部分化合物在10μmol·L-1浓度下的抑酶活性。结果与结论共合成21个未见文献报道的新化合物,结构经1H-NMR、MS和IR确证;化合物Ⅲa-8、Ⅲa-11、Ⅲa-12、Ⅲa-13和Ⅲa-14的体外抗乳腺癌活性好于伏立诺他,其中Ⅲa-12的活性最强,IC50值为4.28μmol·L-1,化合物Ⅲa-8的体外抗白血病细胞活性最强,GI50值为6.85μmol·L-1;Ⅲa系列化合物在10μmol·L-1时的酶抑制率为59%~77%,而其相应的硫酯化合物没有表现出明显的酶抑制活性(抑制率<5%),说明硫酯类化合物不能直接与酶发生相互作用,而其水解产物具有一定的酶抑制活性。     

新型氨基二硫代甲酸酯类抗肿瘤化合物HGWJ—11c的发现

为发现新结构类型的抗肿瘤化合物,基于我们发现的氨基二硫代甲酸酯类化合物的合成新方法,利用液相组合化学技术,通过两轮共构建了74个化合物库,对从中筛选出的6个可能具有活性的化合物进行了合成及活性验证,发现结构新颖的化合物13（HGWJ-11C）具有明显抗肿瘤作用,其中的氨基二硫代甲酸骨架是产生活性的必需结构。化合物13值得作为一个苗头化合物进行深入研究。     

转阴灵抗乙型肝炎病毒的体外实验研究

目的通过体外实验,探讨转阴灵抗乙肝病毒(HBV)的作用。方法将转阴灵作用于体外培养的2.2.15细胞,以MTT比色法观察转阴灵的细胞毒性,以ELISA法检测细胞培养液中HBsAg和HBeAg的变化,观察药物对2.2.15细胞分泌HBsAg和HBeAg的影响。结果转阴灵作用于2.2.15细胞8d后,对细胞的半数毒性质量浓度(TC50)为4.5g·L-1,对HBsAg和HBeAg抑制的半数有效质量浓度IC50分别为0.42和0.15g·L-1,转阴灵对HBsAg和HBeAg的治疗指数(TI)分别为10.71和30.00。结论转阴灵在体外细胞培养中对HBsAg和HBeAg的分泌有较好的抑制作用,有显著的抗HBV作用。     

2-(8-氮杂-6-取代苯硫基-9H-嘌呤-9-基)乙氧基甲基磷酸类化合物的设计、合成及抗病毒活性

目的设计、合成新型抗乙型肝炎病毒的开环核苷膦酸类似物。方法根据阿德福韦（PMEA）的结构特点,采用生物电子等排体理论,引入8．氮杂-6-取代苯硫基嘌呤,设计、合成系列目标化合物。化合物结构经IR,1H-NMR谱进行确证。对1a-1e化合物进行了体外抗HBsAg、HBeAg和抗HBV—DNA活性筛选试验。结果设计合成了10个目标化合物;所测化合物抗HBsAg、HBeAg活性均好于PMEA,化合物1e抗HBV—DNA活性与PMEA相当,值得继续研究。结论PMEA引入8-氮杂-6-取代苯硫基嘌呤抗HBV—DNA活性保持,抗HBsAg、HBeAg活性提高。     

化合物209对人结直肠癌细胞HT-29的体内和体外作用(英文)

化合物209是一个新合成的氨基二硫代甲酸酯类化合物,它在体外水平可以抑制肿瘤细胞的增殖,但是化合物209的体内抗肿瘤作用及其抗肿瘤机制并不明确。本文探究了化合物209对人结直肠癌细胞HT-29的作用并初步探讨了相关机制。体外研究表明,化合物209可以显著抑制HT-29细胞的增殖;体内研究结果表明,化合物209可以显著抑制裸鼠HT-29移植瘤的生长,但是对裸鼠体重和白细胞无影响。流式细胞分析实验结果表明,化合物209可将HT-29细胞阻滞于细胞周期的G1期。同时,化合物209能上调体外培养HT-29细胞中p27,cyclin E,CDK2,cyclin D1和CDK4的表达。在体内瘤组织中上述蛋白表达情况与体外实验结果一致。这些结果说明,化合物209具有较好的抗肿瘤活性,其抗肿瘤作用与细胞周期阻滞及其相关蛋白的表达变化有关。     

三种中草药及其复方体外对HBsAg HBeAg分泌的抑制

国外有资料显示,赤芍、蚤休、何首乌体外有抑制乙型肝炎患者血清中HBsAg的作用[1],国内有人报道上述3种单方水煎液有抑制血清中HBV DNA复制作用[2].HBV的装配需HBsAg、HBeAg、HBcAg和HBV DNA,它们的减少将影响HBV的复制[3].本文从以下两个方面研究中草药赤芍、蚤休、何首乌及它们的复方体外抑制HBV的复制作用:①上述3种中草药及其复方的大鼠血清液对HBV的HBsAg、HBeAg表达抑制.②比较上述3种中草药单方与复方抗HBV的HBsAg、HBeAg的     

1H-1,2,3-三氮唑乙酸酯衍生物的合成与体外抗乙肝病毒活性研究

目的 设计合成1H-1,2,3-三氮唑环衍生物，并测定其体外抗乙肝病毒活性。方法 以取代吲哚为原料，经取代、环加成反应得到14个目标化合物，通过¹H-NMR、¹³C-NMR和MS方法对化合物的结构进行表征，以HepG2.2.15为细胞模型进行抗乙肝病毒体外活性实验，测试化合物在体外对乙肝病毒e抗原(HBeAg)和乙肝病毒表面抗原(HBsAg)分泌的影响。结果与结论其中4个目标化合物能较好地抑制HBeAg和HBsAg的分泌，化合物2-(4-((5-氯-1H-吲哚-1-基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基)乙酸乙酯(IC₅₀=75.41μmol·L^-1,SI=9.23)能较好抑制HBV DNA。吲哚5号位含有吸电子基团卤素原子的化合物对抑制乙肝病毒的分泌效果较好。     

核酸类似物PNA在HepG2．2．15细胞中对乙型肝炎病毒复制的抑制作用

目的评价核酸类似物PNA在HepG2．2．15细胞中对乙型肝炎病毒复制的抑制作用。方法以HepG2．2．15细胞作为细胞模型,拉米夫定作为阳性对照药物。HepG2．2．15细胞于药物处理14d后,收集上清液及细胞。采用ELISA检测上清液中HBsAg和HBeAg含量,HBV荧光定量检测上清液和细胞内HBV DNA水平,CCK-8试剂盒检测药物对细胞的毒性作用。结果核酸类似物PNA与拉米夫定在浓度1．6-1000μmol·L^-1内对HepG2．2．15细胞的毒性均较小。与药物未处理组比较,PNA和拉米夫定均可有效抑制细胞上清HBV DNA,半数抑制浓度（IC50）分别为0．05-0．10μmol·L^-1和0．09-0．18μmol·L^-1,两者之间差异无统计学意义。结论在体外细胞实验中,PNA对细胞的毒性小,与拉米夫定的安全指数相当;PNA对乙型肝炎病毒复制有较强的抑制作用,且具有一定时效量效关系,与拉米夫定的抑制强度相当。     

A flavonoid from medicinal plants blocks hepatitis B virus-e antigen secretion in HBV-infected hepatocytes

A flavonoid molecule that showed a unique anti-HBV function was isolated from Phyllanthus urinaria. The molecular formula was determined as C14H6O8 based on FAM-MS analysis and the structure was determined by NMR. The identified flavonoid molecule, ellagic acid, showed unique anti-HBV functions. Ellagic acid did not inhibit either HBV polymerase activity, HBV replication or block HBsAg secretion. Rather, ellagic acid blocks effectively HBeAg secretion in HepG2 2.2.15 cells (IC50=0.07 microg/ml). Since HBeAg is involved in immune tolerance during HBV infection, ellagic acid, a newly identified functional anti-HBV compound, may be a new candidate therapeutic against immune tolerance in HBV-infected individuals.     

亚硒酸钠对乙型肝炎病毒的体外抑制作用

目的探讨亚硒酸钠在体外对乙型肝炎病毒(HBV)蛋白合成、DNA复制的影响及机制。方法将不同浓度的亚硒酸钠作用于HepG2.2.15细胞系,通过检测细胞培养上清液中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)水平、乙型肝炎核心抗原(HBcAg)和HBV DNA水平来评价HBV复制情况;免疫组织化学检测HepG2.2.15细胞p53蛋白的表达情况。结果亚硒酸钠对HBV复制具有抑制作用,随着亚硒酸钠浓度的升高,对HBsAg和HBeAg的抑制率逐渐上升,但对HBsAg的抑制作用要小于HBeAg。细胞内HBV DNA复制水平也逐渐下降(P<0.01)。p53蛋白的分布也发生了改变。结论亚硒酸钠对HepG2.2.15细胞HBsAg、HBeAg和HBcAg表达、HBV DNA复制均有抑制作用,作用机制与其干扰p53蛋白的表达有关。     

Synthesis and biological evaluation of phenylpropanoid derivatives

In this work, a series of oxime ether phenylpropanoid derivatives were synthesized. Their anti-hepatitis B virus (HBV) activity in HepG 2.2.15 cells was determined, and anti-cancer potential against three human cancer cell lines was evaluated. All the synthesized derivatives showed great efficiency against HBV. Compound 4d demonstrated the most effective anti-HBV activity, performing strong potent inhibitory not only on the secretion of HBsAg (IC₅₀ = 50.45 μM, SI = 9.18) and HBeAg (IC₅₀ = 50.11 μM, SI = 9.24), but also on the HBV DNA replication (IC₅₀ = 51.80 μM, SI = 8.94). Besides, the synthetic compounds also displayed obvious anti-cancer activity. Moreover, the docking study of all synthesized compounds inside the related protein active site was conducted to explore the molecular interactions and a molecular target for activity using a MOE-docking technique. This study identified a new class of potent anti-HBV and anti-cancer agents.     

马蹄金素衍生物的合成及其抗HBV活性研究

目的对马蹄金素[N-(N-苯甲酰基-L-苯丙氨酰基)-O-乙酰基-L-苯丙氨醇,MTS]进行结构修饰,以期寻找到抗乙肝病毒(HBV)活性更强、毒性更低的马蹄金素衍生物。方法以马蹄金素为先导化合物进行结构优化,合成一系列不同取代基团的马蹄金素衍生物并对其进行抗HBV活性测试。结果合成了马蹄金素衍生物共计9个,经体外活性筛选结果显示有4个衍生物具有抗HBV活性,4a(IC50:24.20μmol·L-1,SI:3.69)、5f(IC50:252.60μmol·L-1,SI:>3.96)、5g(IC50:0.82μmol·L-1,SI:52.57)、5h(IC50:1.44μmol·L-1,SI:59.97)。结论化合物5g和5h显示较强的抗HBV活性,选择指数较高,具有进一步研究开发的价值。     

Anti-hepatitis B virus activity of wogonin in vitro and in vivo

The traditional Chinese medicine Scutellaria radix has been used for thousands of years, mainly for the treatment of inflammatory conditions including hepatitis. The major active constituent, wogonin (WG), isolated from S. radix has attracted increasing scientific attention in recent years due to its potent biological activities. However, pharmacologic studies have primarily been focused on wogonin's anti-inflammatory and anti-cancer activities. In this study, we have investigated wogonin's anti-hepatitis B virus (HBV) activity both in vitro and in vivo. In the human HBV-transfected liver cell line HepG2.2.15, wogonin effectively suppressed the secretion of the HBV antigens with an IC(50) of 4 microg/ml at day 9 for both HBsAg and HBeAg. Consistent with the HBV antigen reduction, wogonin also reduced HBV DNA level in a dose-dependent manner. Duck hepatitis B virus (DHBV) DNA polymerase was dramatically inhibited by wogonin with an IC(50) of 0.57 microg/ml. In DHBV-infected ducks wogonin dosed i.v. once a day for 10 days reduced plasma DHBV DNA level with an ED(50) of 5mg/kg. The in vivo anti-HBV effect of wogonin in ducks was confirmed by Southern blotting of DHBV DNA in the liver. Histopathological evaluation of the liver revealed significant improvement by wogonin. In addition, in human HBV-transgenic mice, wogonin dosed i.v. once a day for 10 days significantly reduced plasma HBsAg level. Immunohistological staining of the liver confirmed the HBsAg reduction by wogonin. In conclusion, our results demonstrate that wogonin possesses potent anti-HBV activity both in vitro and in vivo. Currently, wogonin is under early development as an anti-HBV drug candidate.     

Synthesis and anti-HBV activities evaluation of new ethyl 8-imidazolylmethyl-7-hydroxyquinoline-3-carboxylate derivatives in vitro

Some new ethyl 8-imidazolylmethyl-7-hydroxyquinoline-3-carboxylate derivatives have been synthesized and evaluated for their anti-hepatitis B virus (HBV) activities and cytotoxicities in HepG2.2.15 cells stable transfection with HBV. Compounds 13a, 11b, 11c, 12c, 13c, 11g, and 12g inhibited the expression of the viral antigens HBsAg or HBeAg in a low concentration, of which 11c (IC(50 )= 12.6 microM, SI = 12.4), 12c (IC(50 )= 3.5 microM, SI = 37.9), and 12g (IC(50) = 2.6 microM, SI = 61.6) showed more active abilities to inhibit the replication of HBV DNA than the positive control lamivudine (3TC, IC(50) = 343.2 microM, SI = 7.0).     

Seven new secoiridoids with anti-hepatitis B virus activity from Swertia angustifolia

Seven new secoiridoids, swertianglide (1) and swertianosides A-F (2-7), together with fifteen known compounds, were isolated from the whole plants of Swertia angustifolia. Their structures were elucidated on the basis of extensive spectroscopic analyses ([α](D), UV, IR, MS, 1D- and 2D-NMR). Fourteen compounds were evaluated for their anti-hepatitis B virus (HBV) activities on the Hep G 2.2.15 cell line in vitro. Compound 2, an unusual secoiridoid glycoside dimer, showed significant activities inhibiting the secretion of HBsAg (IC?? 0.18 mM, SI 3.11) and HBeAg (IC?? 0.12 mM, SI 4.67).     

脱氧野尻霉素衍生物抗乙型肝炎病毒的体外试验研究

目的:观察脱氧野尻霉素(DNJ)衍生物N—苄基—1—脱氧野尻霉素(P-DNJ)与N—壬基—1—脱氧野尻霉素(NN-DNJ)的体外抗乙型肝炎病毒(HBV)作用。方法:以HBVDNA转染的人肝癌细胞株HepG22,2,15细胞为靶细胞,以不同浓度的试验药物培养细胞,在第6天、第10天时应用时间分辨免疫荧光分析法和荧光实时定量聚合酶链反应法检测培养基上清液中HBsAg、HBeAg和HBVDNA,同时应用MTT法检测药物对细胞的毒性。结果:P-DNJ、NN-DNJ在试验浓度(5~125μg.mL-1)内未见细胞毒性作用,在浓度为125μg.mL-1时能显著减少细胞培养基上清液中HBsAg、HBeAg、HBVDNA的分泌。结论:P-DNJ、NN-DNJ在体外细胞培养试验中发现有抗HBV作用。