双黄连胶囊双波长毛细管电泳指纹图谱研究

目的 建立双黄连胶囊( Shuanghuanglian Jiaonang,SHLJN)双波长高效毛细管电泳指纹图谱(DW CEFP).方法 用三角形和四面体优化法优化出以50 mmol·L-1硼砂(含20 mmol·L-1β-环湖精和5％乙腈,磷酸调pH 7.55)为背景电解质(BGE),采用未涂层石英毛细管(75 cm×75 μm,有效分离长度57 cm),以色谱指纹图分离量指数(RF)为目标函数优化试验条件,运行电压12 kV,检测波长203 nm和256 nm.用均值法整合双波长谱的宏定性宏定量信息,用一级系统指纹定量法评价SHLJN质量.结果 以连翘苷(FST)为参照物峰,在203 nm和256 nm下检测,分别确定16和11个共有指纹峰,建立了DW-CEFP.用均值法整合后进行评价出S9样品质量极好,S2、S3、S4和S6样品质量很好,S1、S7、S10和S11样品质量好,S5、S8和S12样品质量良好.结论 基于双波长谱的一级系统指纹定量法对SHLJN整体定性定量分析具有信息全面、准确可靠的特点,为其质量控制提供一种新参考.     

朱砂安神丸毛细管电泳指纹图谱研究

目的建立朱砂安神丸(ZSASW)毛细管电泳指纹图谱(capillary electrophoresis fingerprint,CEFP),以系统指纹定量法鉴定其质量,并针对ZSASW-HPCE对照指纹图谱进行不确定度和可靠度评价。方法采用未涂层毛细管(75 cm×75μm,有效长度62 cm),以50 mmol.L-1硼砂-150 mmol.L-1磷酸二氢钠-50 mmol.L-1磷酸氢二钠(体积比为4∶1∶1,pH9.0)为背景电解质(BGE),运行电压12 kV,紫外检测波长203 nm,重力进样20 s。通过对12批样品聚类分析确定用其中9批生成对照CEFP(RCEFP),计算其不确定度和可靠度。以此RCEFP为标准鉴别12批样品质量。结果以小檗碱(BBR)为参照物峰,确定21个共有峰,用系统指纹定量法鉴别出S1、S2、S6、S10和S11质量很好,S5和S9质量好,S12质量良好,S3质量中等,S4、S7和S8质量劣。RCEFP的宏定性宏定量可靠度均>0.96。结论所建立的CEFP稳定可靠,可为ZSASW质量控制提供新参考。     

比率指纹图谱定量评价柏子养心丸质量

目的以样品指纹峰面积xi和对照指纹峰面积yi之比ri=xi/yi对保留时间作图得到比率指纹图谱(ROFP),以样品指纹向量XR=(x1/y1,x2/y2,···,xn/yn)=(r1,r2,···,rn)→和对照指纹图谱(标准制剂指纹)向量YR=(1,1,···,1)=(100%,100%,···,100%)→为基础建立中药比率指纹定量法(QRFM)以定性定量控制中药质量。方法用高效液相色谱二极管阵列检测器同时测定12批柏子养心丸228、286和326 nm指纹谱,以均值法整合三波长下指纹图谱和ROFP的评价结果,并与正常指纹图谱(NFP)评价结果进行比较。结果以绿原酸(CGA)为参照物峰,确定56(228 nm)、53(286 nm)和45(326 nm)个共有指纹峰,建立了三波长BZYXP-HPLC指纹图谱和ROFP。首先将三波长下得到的NFP和ROFP进行均值整合,之后再对NFP和ROFP进行二次均值整合鉴定出S11(1级)质量极好,S2、S3、S4、S6和S10质量很好(2级);S1、S5、S8和S9质量好(3级);S7质量次(7级);S12质量劣(8级)。结论 ROFP各指纹量值一致使其评价结果更准确和更客观,但奇异峰比值易引起误差。QRFM对中药复杂轮廓化学成分的整体定量更客观和更准确。基于中药标准制剂控制模式,以定量指纹图谱为基础和使用QRFM是中药质量一致性和均一性控制的重要方法。     

基于柱效指数监测的双波长定量比率指纹图谱评价朱砂安神丸

目的建立色谱指纹图谱柱效指数模型,用以检测定量指纹图谱的变化。方法用高效液相色谱二极管阵列检测器同时测定12批朱砂安神丸(ZSASP)在203 nm和286 nm指纹谱(NFP)和比率指纹图谱(ROFP),分别以均值法整合同波长下指纹图谱,最后进行双波长指纹图谱的二次均值整合,计算双波长指纹图谱柱效指数并进行比较。结果以小檗碱(BBR)为参照物峰,确定57(203 nm)和50(286 nm)个共有指纹峰,建立了双波长ZSASP-HPLC指纹图谱和比率指纹图谱。首先将同波长下的NFP和ROFP进行均值整合,之后进行双波长二次均值整合鉴定出S1、S4、S5、S6、S9和S10质量极好(1级),S2、S3、S11和S12质量很好(2级),S7和S8质量次(7级)。在203 nm,S4、S5、S6、S9柱效指数较高,而在286 nm下四者柱效指数较低造成两者差值很大,S8呈现上述反变化过程造成较大差异值。结论色谱指纹图谱柱效指数能监测中药定量指纹图谱的柱效关联分离度后的变化情况,因此柱效指数标志着信号均化性和分离度均化性以及峰宽变动情况。     

平行五波长高效液相色谱指纹图谱全息整合法定量鉴定补中益气丸整体质量

目的建立补中益气丸（Buzhong Yiqi Wan,BZYQW）平行五波长HPLC指纹图谱,用全息整合法鉴定补中益气丸整体质量。方法采用RP-HPLC法,以橙皮苷（HI）为参照物峰,在203、228、265、280、326 nm下检测,分别确定了82、87、61、68、48个共有指纹峰,建立BZYQW平行五波长HPLC指纹图谱。分别以权重法、均值法和投影参数法整合五波长下各样品的定性定量全信息,并用系统指纹定量法（SFQM）鉴定了10批BZYQW的质量等级。结果 10批BZYQW,用平均值法评价S3和S5的质量等级是Ⅶ级（次）;用权重法评价S3的质量级别是Ⅷ级（劣）;用投影参数法评价S3、S5和S6的质量级别是Ⅶ级（次）。其余质量级别均≤Ⅵ（一般）。结论平行多波长指纹图谱全信息整合法是基于从多维全信息角度整体定性和整体定量鉴定中药质量的有效可信方法 ,可作为补中益气丸质量控制的依据。     

甘草饮片HPCE指纹图谱研究

目的建立甘草饮片HPCE-DAD指纹图谱分析方法,并对甘草及其炮制品的指纹图谱进行比较。方法采用高效毛细管电泳法进行色谱分离,以40 mmol.L 1硼砂-10 mmol.L 1磷酸二氢钠-10%甲醇(pH=8.6)为运行缓冲液,分离电压为20 kV,波长为254 nm,以甘草酸为参照物(IS),测定其指纹图谱,并作模糊聚类法分析和相似度评价。结果初步建立了以10个共有峰为特征指纹信息的甘草饮片HPCE-DAD指纹图谱,发现少数甘草饮片的指纹图谱有一定差异,生品与其炮制品的指纹谱中共有峰相对峰面积差异显著。结论本方法准确可靠,重现性好,可作为甘草饮片内在质量评价的依据。     

双色谱系统定量指纹图谱评价石斛夜光丸质量

目的研究在双色谱系统条件下用系统指纹定量法(SQFM)对石斛夜光丸(SHYGP)进行评价所产生的变动情况,同时考察SHYGP同一75%乙醇提取液经5℃放置70 d后指纹图谱变化。方法 SQFM的3个指标宏定性相似度(Sm)、宏定量相似度(Pm)和变动系数(α)间存在密切相关特性,在洗脱程序EP1条件下用高效液相色谱测定12批SHYGPs在203、286和326 nm波长处的指纹图谱,分别以均值法整合三波长下定量指纹图谱的鉴定结果;经70 d后重新提取样品在显著变动的洗脱程序EP2条件下同法试验和评价指纹图谱,对2次获得指纹图谱群的评价结果进行误差对比,并讨论质量鉴定等级和宏定量相似度变化。同时对75%乙醇提取液5℃存放70 d后采用EP2方法试验,同法考察变化。结果以柚皮苷(NG)为参照物峰,EP1确定38(203 nm),34(286 nm)和30(326 nm)个共有指纹峰,EP2确定32(203 nm)、37(286 nm)和26(326 nm)个共有指纹峰。经SQFM评价后的三波长指纹图谱结果按照均值法整合,对S2、S3、S4和S12等4批样品鉴定结果一致,除S6、S11外,余下6批样品鉴定结果波动仅1级,不考虑S1、S6和S11,Sm平均波动<0.04,Pm误差基本<10%(S9、S10除外)。对EP1和EP2三波长HPLC-FPs鉴定数据取平均,最终鉴定S1、S2、S3、S5和S7质量极好(1级),S4、S8和S9质量很好(2级),S10和S12质量好(3级),S11质量较好(4级),S6质量中等(5级)。结论在有效期内SQFM对同一总体样品以定量指纹图谱进行评价时,系统梯度洗脱条件的显著变化基本不影响鉴定结果。     

用乘方指纹图谱评价双黄连胶囊质量的方法探讨

目的建立双黄连胶囊（Shuanghuanglian capsule,SHLC）280 nm HPLC指纹图谱,提出基于系统指纹定量法（SQFP）的4种乘方指纹图谱评价模型。方法采用RP-HPLC法,以黄芩苷（baicalin,BCL）为参照物峰,确定44个共有指纹峰,建立了280 nm SHLC-HPLC定量指纹图谱（N-FP）、开立方指纹图谱（CT-FP）、开平方指纹图谱（ST-FP）、1.5次方指纹图谱（1.5 PFP）和平方指纹图谱（S-FP）,均采用SQFP评价12批双黄连胶囊质量。结果依据N-FP,用SQFP鉴别出12批次SHLCs的S1、S2、S4和S12质量很好（2级）;S3、S6、S9、S10和S11质量好（3级）;S8质量较好（4级）,S7质量一般（6级）,S5质量劣（8级）,除S7外定性相似度都〉0.9,只有S5的Pm相差很大,造成评级很大,结果表明11个不同批次的SHLC质量均一性很接近。N-FP能较好地反映SHLCs含量特征、指纹物质均一性及内在总质量变化状况,但忽视小指纹峰对评价的作用。CT-FPs和ST-FPs能拉平大小指纹峰信号而提高宏定性相似度,使宏定量相似度趋向100%,前者更能有效降低大峰掩蔽小峰来突出小指纹峰作用;对〉1的乘方指纹图谱能突出大峰权重而增加大峰掩蔽小峰,当指纹峰信号比较接近时可采用高方次指纹图谱评价模式来实现突出大峰差异化。结论所建立SHLC-HPLC定量指纹图谱可清晰反映SHLC质量差异,开方指纹图谱和〉1的乘方指纹图谱能分别增加小峰和差异化突出大峰对相似度贡献,但扭曲定量相似度。本文多维乘方指纹图谱评价模式为色谱指纹图谱评价方法提供了新思路。     

血府逐瘀丸高效液相色谱数字化定量指纹图谱研究

目的 建立血府逐瘀丸( Xuefuzhuyu Pill,XFZYP) HPLC数字化定量指纹图谱,对其进行数字化整体质量控制.方法 采用RP-HPLC法,以阿魏酸对照品(ferulic acid,FA)为参照物峰,确定42个共有指纹峰,建立了XFZYP-HPLC数字化定量指纹图谱.以47个数字化参数评价指纹图谱,并用6级系统指纹定量法(6-SFQM)鉴定1 5批XFZYPs质量.结果 用16个数字化指数鉴别出2批样品不合格,用6-SFQM鉴别出11批质量极好(1级),1批质量很好(2级),3批质量良好(4级).结论 所建立XFZYP-HPLC数字化定量指纹谱可准确反映XFZYP质量特征.     

三波长定量指纹谱结合4种化合物定量测定银翘解毒丸对照指纹图谱标准

目的建立双标定量指纹法精确恢复银翘解毒丸对照指纹图谱（RFP）标准,以实现动态指纹图谱标准的校正和复原。方法用RP-HPLC法对银翘解毒丸（YQJDP）中绿原酸、咖啡酸、连翘苷和牛蒡苷4组分进行定量分析。建立228、265和280 nm下YQJDP-HPLC指纹图谱,采用均值法整合三波长下定性定量全信息,应用六级系统指纹定量法对其进行评价。选择绿原酸和牛蒡苷为双参照物峰（双标）,采用双标定量指纹法恢复YQJDP-RFP。结果三波长整合指纹图谱评价结果如下：S3、S4、S6和S8质量为极好（1级）,S2、S5、S7和S9质量为很好（2级）,DS1质量中（5级）,S1、DS3、DS4、WS1和WS2质量次（7级）,DS2质量劣（8级）。含量测定结果与指纹图谱评价结果很一致。在此基础上建立YQJDP双标定量指纹法技术标准。结论基于多指标定量分析和多波长HPLC指纹谱的双标定量指纹法能够找到产生RFP的标准制剂和实现实时随行定量检测YQJDP指纹图谱。     

毛细管区带电泳法测定麻黄中麻黄碱和伪麻黄碱的含量

目的建立测定麻黄中麻黄碱和伪麻黄碱含量的毛细管区带电泳（CZE）法。方法以200 mmol.L-1硼砂-500 mmol.L-1硼酸溶液（1∶1,v/v）含2 mg.mL-1庚烷磺酸钠和0.4%（v/v）乙腈为背景电解质（BGE）,石英毛细管（75 cm×75μm）,有效分离长度60 cm,运行电压15 kV,紫外检测波长210 nm,重力进样20 s（高度10 cm）,以苯甲醇作内标,对麻黄中的麻黄碱和伪麻黄碱进行定量分析,以两者含量为参量对10批麻黄进行系统聚类分析并进行质量评价。结果麻黄碱和伪麻黄碱的相对峰面积（Ai/Ar）与各自的质量浓度C（mg.mL-1）呈良好的线性关系,两者的平均回收率分别为100.4%和100.9%。结论该法准确可靠,操作便捷,可用于麻黄中麻黄碱和伪麻黄碱的含量测定。     

盐酸肾上腺素注射液中S-对映体的测定及稳定性考察

目的:建立肾上腺素对映异构体中S-对映体的高效毛细管电泳检测方法。方法:采用未涂层熔融石英毛细管(50μm×42 cm,有效长度32 cm),以含13 mmol·L-1DM-β-CD pH 2.5的缓冲体系(含0.10 mol·L-1磷酸和0.07 mol·L-1三乙胺)为背景电解质溶液,在20 kV分离电压下,于214 nm波长处测定S-对映体。结果:肾上腺素R-对映体和S-对映体浓度分别在0.0026～0.1036 mg·mL-1范围内线性关系良好,相关系数分别为0.9995和0.9999(n=6);定量限分别为0.3和0.4μg·mL-1(S/N≥10),检测限分别为0.1μg·mL-1(S/N≥3)。结论:本方法灵敏度高,重复性好,可用于盐酸肾上腺素注射液中S-对映体的测定及稳定性研究。     

高效毛细管电泳法测定绞股蓝中芦丁和槲皮素的含量

目的采用高效毛细管电泳法对绞股蓝中的有效成分芦丁和槲皮素同时进行含量测定。方法采用未涂层熔融石英毛细管柱（57 cm×75μm,有效长度50 cm）为分离通道,以12 mmol.L-1硼砂-甲醇（80∶20）为电泳介质,分离电压30 kV,毛细管温度30℃,检测波长360 nm。结果芦丁和槲皮素在20 min内得到很好的分离,分别在0.054~1.070、0.009~0.180 mg.mL-1与峰面积线性关系良好,平均回收率分别为99.0%、98.8%。结论方法简便快速、结果准确、重现性好,可用于绞股蓝及其制剂的质量控制。     

延胡索饮片非水毛细管电泳指纹图谱的研究

目的:建立延胡索饮片非水毛细管电泳(NACE)指纹图谱分析方法,评价不同批次延胡索饮片的质量。方法:选择非水毛细管电泳分离模式,以40 mmol.L-1乙酸钠-60 mmol.L-1乙酸铵-无水甲醇缓冲液(pH 6.0)为运行缓冲液,分离电压为25 kV,检测波长270 nm,以延胡索乙素为参照物(IS),测定其指纹图谱,并作模糊聚类法分析和相似度评价。结果:初步建立了以7个共有峰为特征指纹信息的NACE指纹图谱;发现少数批次延胡索饮片的指纹图谱有一定差异,生品与其炮制品的指纹谱中共有峰相对峰面积差异显著。结论:方法准确可靠,重现性好,可作为延胡索饮片质量评价的依据。     

非共价涂层毛细管电泳法测定黄连及其炮制品中3种生物碱的含量

目的建立同时测定黄连药材中小檗碱、巴马汀和药根碱含量的毛细管电泳方法。方法采用聚凝胺-聚丙乙烯磺酸钠涂层毛细管柱(33 cm×50μm I.D.,有效长度为24.7 cm),运行缓冲液为500 mmol.L-1Tris-甲醇(体积比为70∶30)缓冲溶液(8 mol.L-1,磷酸调节pH 7.5),分离电压为22 kV,检测波长为230 nm,温度为20℃,压力自动进样(5 000 Pa×6 s),阴极检测。结果在所选电泳条件下,黄连中的生物碱组分在4.5 m in内得到良好分离,盐酸小檗碱、盐酸巴马汀和盐酸药根碱的线性范围分别为199.8~1 998、48.45~484.5和47.3~473 mg.L-1,线性关系良好,加样回收率分别为102.8%、100.2%和97.7%。结论该方法可应用于黄连药材中生物碱的分析测定。     

毛细管电泳法同时测定元胡止痛片中欧前胡素和异欧前胡素的含量

目的:建立以毛细管电泳法同时测定元胡止痛片中欧前胡素和异欧前胡素含量的方法。方法:以盐酸小檗碱为内标,采用未涂层弹性融硅石英毛细管柱(55cm×75μmID,有效长度47cm),以20mmol·L-1磷酸二氢钠+100mmol·L-1十二烷基磺酸钠+80%甲酰胺溶液(pH7.12)为运行缓冲液,分离电压为15kV,重力进样5s(高度15cm),检测波长为254nm。结果:欧前胡素、异欧前胡素检测浓度分别在8.0～40.0μg·mL-(1r=0.9987)、4.0～20.0μg·mL-(1r=0.9990)范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系;二者平均回收率分别为101.3%和100.2%,RSD分别为3.24%和1.44%(n=6)。结论:本法简便、快速、准确,可用于元胡止痛片的质量控制。     

胶束毛细管电泳法测定牛磺酸滴眼液中的羟苯乙酯

目的建立一种简便快速的胶束毛细管电泳法测定滴眼液中的抑菌剂羟苯乙酯的方法。方法采用未涂层石英毛细管柱(50μm×50 cm,有效分离长度41 cm)为分离通道,采用紫外检测器,检测波长254 nm,以20 mmol.L-1硼酸盐(pH7)-10mmol.L-1 SDS为运行缓冲液,运行电压20 kV,重力进样5 s(高度15 cm)。结果 25～400μg.mL-1羟苯乙酯线性关系良好,平均回收率97.9%,RSD=1.3%。结论所用方法准确、可靠且简便、易行。     

HPLC法研究还原型谷胱甘肽降解产物

目的研究还原型谷胱甘肽(GSH)在不同破坏条件下的降解产物;在此研究基础上,建立了氧化型谷胱甘肽(GSSG)杂质测定方法。方法采用CenturySIL AQ C18色谱柱(4.6 mm×200 mm,5μm),50 mmol.L-1磷酸二氢钾溶液(含10 mmol.L-1庚烷磺酸钠,用磷酸调节pH值至3.0)-甲醇(体积比97∶3)为流动相;检测波长为210 nm。结果通过对比HPLC保留时间,确定破坏样品中主要降解产物为GSSG、二肽半胱氨酰甘氨酸、谷氨酸、半胱氨酸、甘氨酸和胱氨酸。按外标法计算GSH原料中GSSG的含量为0.32%。结论建立的GSSG测定方法结果准确,重现性好,可用于GSH原料中GSSG的控制。