Procaspase-3小分子激活剂的研究进展

Caspase-3作为细胞凋亡通路的下游关键执行蛋白,在细胞凋亡信号传导中扮演着重要的角色。开发直接通过激活高表达状态的procaspase-3成为caspase-3,进而重启肿瘤细胞凋亡的小分子药物,已成为克服中/上游凋亡蛋白突变的有效策略。目前,以procaspase-3为靶点已经报道了一些特异性小分子激活剂,至今还没有上市药物,开发直接激活procaspase-3的新型药物仍然是一项重要和艰难的挑战。本文介绍了procaspase-3与肿瘤之间的关系及小分子procaspase-3激活剂的研究进展。     

青蒿素及其衍生物抗肿瘤分子机制的研究进展

目的:为青蒿素类抗肿瘤药物的开发提供参考。方法:通过Pub Med、中国知网检索2002-2014年国内外有关青蒿素及其衍生物抗肿瘤研究文献,进行系统归纳、总结和综述。结果与结论:青蒿素及其衍生物通过对细胞周期的阻滞抑制肿瘤细胞的增殖;通过作用于Bcl-2家族和Caspase家族诱导细胞的凋亡;通过调控基质金属蛋白酶和整合蛋白的表达抑制肿瘤细胞的侵袭及转移;通过调控与血管形成相关的基因如血管内皮生长因子等抑制肿瘤血管形成。深入研究青蒿素及其衍生物的分子机制,对于寻找抗肿瘤药物新的作用靶点和开发相关新药具有重要意义。     

辐射增敏剂Wortmannin促进组蛋白去乙酰化酶抑制剂诱导的MOLT-4细胞凋亡

目的 探讨选择性磷脂酰肌醇激酶相关蛋白激酶家族（PIKKs）的小分子抑制剂Wortmannnin对组蛋白去乙酰化酶抑制剂（HDIs）诱导的细胞凋亡的影响,并探讨DNA损伤功能信号级联在HDIs类药物抗肿瘤效应中的功能机制。方法 流式细胞术分析加药后不同时间点的细胞周期分布和细胞凋亡情况;荧光显微镜下观察用药后的细胞核形态;免疫印迹法检测加药前后Caspase-2,Caspase-3,Caspase-7和Survivin蛋白表达情况。结果 低剂量Wortmannin单独作用对肿瘤细胞生存率未见显著影响,但能够激活G1/S细胞周期阻滞、抑制TSA引发的G2/M阻滞、并显著促进肿瘤细胞凋亡。在此过程中,Wortmannin促进凋亡效应分子Caspase-2,Caspase-3和 Caspase-7的激活并抑制Survivn的表达。结论 PIKKs家族的小分子抑制剂Wortmannnin 通过下调Survivin并促进Caspase信号级联而促进TSA诱导的肿瘤细胞凋亡。     

Survivin拮抗肽对体内血管生成的影响

<正>肿瘤的侵袭、转移过程是多因素、多步骤的过程,一般涉及肿瘤细胞黏附、运动,细胞外基质降解,肿瘤新生血管生成等多个环节[1]。抗肿瘤血管生成是目前抗肿瘤转移药物研究的重要靶环节之一[2]。Survivin是近年来分离的一种哺乳动物凋亡抑制蛋白[3],被认为在bcl-2的下游阻断了半胱氨酸蛋白酶caspase-3和caspase-7凋亡调节通路[4,5],与其他家族成员     

MAPK信号转导通路与肿瘤细胞凋亡

丝裂原活化的蛋白激酶（mitogen—activated protein kinase,MAPK）是一组可被多种信号激活的丝／苏氨酸激酶。经双重磷酸化激活后可参与细胞的多种生物活性,如调节基因转录,诱导细胞凋亡、调节细胞周期等。而MAPK对细胞凋亡的诱导作用,是近年来研究的重点,尤其是对肿瘤细胞凋亡的诱导作用,更是人们关注的焦点。现已发现p38,ERK5,ERK以及JNK4个亚族。其中ERK,JNK,p38MAPK三条通路与肿瘤细胞凋亡关系密切。细胞凋亡是在特定时空发生的、受机体严密调控的细胞“自杀”现象。在肿瘤细胞中,活化的p38可增强c—myc表达、磷酸化p53、参与Fas／Fasl介导的凋亡;可增强TNF-α表达;作用于Caspase家族的上游而诱导肿瘤细胞凋亡。某些作用丁p38通路的化疗药物,也是通过诱导凋亡,产生抗肿瘤作用。JNK信号转导通路参与多种凋亡反应,现阶段研究表明,JNK通路介导肿瘤细胞凋亡的机制是通过磷酸化Bcl-2和Bcl-xL,促进线粒体释放细胞色素C,进而激活Caspase级联反应,最终作用于Caspase-3,导致细胞凋亡。     

RNAi沉默XIAP基因抑制MG-63细胞增殖及其分子机制

目的 探讨RNA干扰(RNAi)抑制NC-63骨肉瘤细胞X-连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)基因的表达及其抗肿瘤的机制.方法 构建XIAP基因的短发夹RNA(shRNA)表达载体.将NC-63细胞分为空白组(A组),用空白质粒psiRNA-Con转染(B组),用psiRNA-XIAP转染(C gt).Westernblot检测XIAP蛋白的表达;MTT检测细胞的增殖;流式细胞术检测细胞周期、凋亡及半胱天冬氨酸蛋白酶9(Caspase-9)的表达;ELISA法检测细胞内血管内皮生长因子(VEGF)含量.结果 与A、B组比较,C组细胞XIAP蛋白水平、MTT值及VEGF含量均显著降低,细胞凋亡率、Caspase-9蛋白表达及G2/M期细胞所占比例增高(P＜0.05).结论 RNAi能有效抑制XIAP基因表达,抑制骨肉瘤细胞增殖活性,诱导其凋亡.其机制可能涉及Caspase家族凋亡信号转导通路的活化、DNA合成及肿瘤血管生成的抑制.     

Livin和Caspase-3在上皮性卵巢癌中的表达及相关性研究

<正>Livin又称ML-凋亡蛋白抑制蛋白(IAP)或KIAP是与肿瘤发生发展密切相关的凋亡抑制蛋白家族中的新成员,能够与内源性IAP抑制剂SMAC和Caspase-3,Caspase-7,Cas-pase-9结合发挥抗细胞凋亡的作用[1]。Caspase家族蛋白酶是     

天花粉蛋白对黑色素瘤细胞血管生成拟态及PI3K信号通路的影响

血管生成拟态 (vasculogenic mimicry,VM)是对经典的内皮性血管生成之外肿瘤血管生成方式的重要补充,临床上针对VM抑制将可能成为肿瘤治疗的新靶点[1-2].天花粉蛋白(trichosanthin,TCS)是从中药栝楼中提取的一种碱性蛋白质,近年来发现对胎盘滋养层的肿瘤及其它多种肿瘤均具有抗肿瘤作用[3-4].本研究观察天花粉蛋白对体外三维培养的恶性黑色素瘤细胞血管生成拟态及磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol-3 kinase, PI3K)信号通路的影响,探讨天花粉蛋白的抗肿瘤作用及机制.     

以细胞凋亡通路为靶点的抗肿瘤分子治疗研究进展

细胞凋亡异常与肿瘤的发生存在密切的关系。通过靶向细胞凋亡通路中的关键分子,诱导肿瘤细胞凋亡,成为肿瘤分子治疗的一个热点和方向。本文就细胞凋亡的分子机制及针对凋亡通路中的关键调控分子为靶点的抗肿瘤研究进展进行综述。     

Survivin在肿瘤早期诊断及治疗中的作用

Survivin是新近被克隆出的一种凋亡抑制蛋白，是凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis protein．IAP）家族中的一员。但其与IAP家族其它成员不同，Survivin分子几乎在正常组织中不表达，而特异性表达于人和鼠的胚胎发育组织以及多数人类肿瘤细胞。在正常成人组织的表达仅见于胸腺、睾丸和分泌期子宫内膜。这为肿瘤治疗提供了一个新靶点。Caspase-3是一种促凋亡因子，是Caspase系统引起细胞凋亡的最下游成分。Survivin通过抑制Caspase-3的活性而阻断凋亡的发生过程。现就Survivin的分子生物学特征和功能、机制及其在肿瘤的早期诊断和治疗预后方面的价值作一综述。     

内质网应激凋亡通路中的耐药节点

内质网应激 (endoplasmic reticulum stress,ERS)介导的细胞凋亡是一种新的凋亡途径,ERS过长过强,可多途径诱导细胞凋亡.肿瘤化疗药物的作用机制是诱导肿瘤细胞发生凋亡,因此凋亡信号传导通路在肿瘤治疗中尤为关键.凋亡通路中任意环节缺陷都能导致肿瘤细胞对凋亡的耐受.该文就内质网中影响凋亡信号传导通路中发挥关键作用的一些重点耐药分子作一综述,包括P-gp分子、IAP家族、Bcl-2耐药家族中的关键蛋白以及内质网钙泵IP3R.     

Smac与肿瘤

Smac Smacl Second mitochondrical activator of caspase是一种新发现的线粒体蛋白,在细胞凋亡过程中起着重要作用;当细胞发生凋亡时,其与细胞色素C-起被释放进入细胞浆,在细胞色素C/Apaf-1/Caspase-9凋亡途径中促进Casepase(含半胱氨酸的天冬氨酸特异性蛋白酶)的激活.Smac通过解除凋亡抑制蛋白对Caspase-3、Caspase-7、Casepase-9的抑制作用而诱导细胞凋亡.Smac的高表达可以增加细胞对凋亡刺激信号的敏感性,这对于肿瘤的发生、发展,以及肿瘤的治疗具有重要意义.     

紫草素衍生物Z7对Burkitts淋巴瘤CA-46细胞的作用

目的 本研究探讨紫草素衍生物Z7对Burkitts淋巴瘤细胞株CA-46增殖及凋亡的作用.方法 运用MTT比色法检测紫草素衍生物Z7对细胞增殖的抑制作用,DNA片段化、Caspase-3酶活性检测细胞凋亡,Western blot检测Caspase家族蛋白表达变化.结果 紫草素衍生物Z7能明显抑制CA-46细胞株的增殖,作用48 h后的IC50为(0.835±0.086 3)μmol/L;高浓度组可见到典型的DNA凋亡梯带;药物组的Caspase-3活性显著升高;Western blot可见Caspase-9、Caspase-3蛋白表达下调,PARP蛋白上调.结论 紫草素衍生物Z7对CA-46具有抑制增殖及诱导凋亡的作用,其作用机制可能与激活线粒体通路有关.     

基于网络药理学研究半夏治疗功能性消化不良的作用机制

目的 探讨半夏治疗功能性消化不良的作用机制.方法 本研究起止2020年1—2月.通过TCMSP数据库检索得到半夏的活性成分和作用靶点,同时借助UniProt、HCBI和PubMed等数据库,得到药物活性成分靶点对应的基因名.利用Gene Cards和OMIM数据库得到功能性消化不良的相关治疗靶点,将其与半夏活性成分靶点取交集后得到药效靶点.将交集靶点通过STRING 11.0数据库进行蛋白质-蛋白质的相互作用网络分析得到潜在的治疗核心蛋白.最后采用KOBAS 3.0平台和DAVID 6.8数据库进行GO功能富集分析和KEGG信号通路富集分析,研究半夏治疗功能性消化不良靶点的作用机制.结果 筛选得出半夏的13个活性成分和74个活性成分靶点基因以及35个交集基因.通过蛋白质-蛋白质相互作用网络分析,半夏治疗功能性消化不良可能与B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、RACα丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT1)、半胱氨酸蛋白酶-3(CASP3)、半胱氨酸蛋白酶-9(CASP9)等靶点蛋白相关.GO功能富集分析得到66个GO条目(P<0.05),通过分析我们可以知道半夏治疗功能性消化不良主要与儿茶酚胺结合、内肽酶活性、核受体活性、转录因子活性、凋亡过程中的半胱氨酸型内肽酶活性等功能相关.KEGG信号通路分析得到97条信号通路(P<0.05),通过筛选主要与凋亡-多物种、凋亡-乙型肝炎、大肠癌、肿瘤坏死因子等信号通路相关,我们发现这些通路中均含有B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、半胱氨酸蛋白酶(Caspase)、凋亡基因(Bax)等凋亡因子.结论 半夏可以通过多成分、多靶点、多途径共同发挥对功能性消化不良的治疗作用,其中在对凋亡通路上的其因子表达抑制或者增强,最终达到抑制组织细胞的凋亡将可能是半夏治疗功能性消化不良的重要机制之一.     

基于组蛋白去乙酰化酶设计的多靶点抗肿瘤药物研究进展

肿瘤的发生是一个多因子、多步骤的复杂过程.多靶点抗肿瘤药物能同时作用于肿瘤发生的多个疾病通路,比单靶点抗肿瘤药物有更好的治疗效果.研究显示,组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDACs)在多种肿瘤细胞中过度表达,是肿瘤发生的关键靶点,因此以抑制HDACs为基础设计兼顾作用于其他靶点的多靶点抗肿瘤...     

抗肿瘤靶向治疗药物应用的护理管理实践与体会

抗肿瘤靶向治疗(molecular targeted therapy)是以肿瘤细胞过度表达的某些标志性分子为靶点,选择针对性的阻断剂,有效干预受该标志性分子调控、并与肿瘤发生密切相关的信号转导通路,从而达到抑制肿瘤生长、进展及转移的效果[1].靶向治疗是近年来肿瘤综合治疗技术研究的热点,其特点是专门针对在肿瘤发生中起关键作用的靶分子及其调控的信号转导通路,增强了抗肿瘤治疗的特异性和选择性,避免了一般化疗药物的无选择性不良反应和耐药性,是肿瘤治疗中新的里程碑[2-3].靶向药物研究和应用的快速发展对肿瘤护理提出新的挑战,本文对近年来护理管理经验总结如下.     

白花蛇舌草的有效成分2-羟基-3-甲基蒽醌通过Fas/FasL信号通路诱导卵巢癌细胞凋亡

目的研究中药白花蛇舌草的有效成分2-羟基-3-甲基蒽醌对人卵巢癌细胞HO-8910生长的抑制作用和凋亡的影响。方法不同浓度的2-羟基-3-甲基蒽醌与人卵巢癌细胞HO-8910分别培养0、24、48、72 h,用台盼蓝染色法测定HO-8910细胞存活率;以Annexin V FITC/PI双染流式细胞仪检测HO-8910细胞的凋亡率;Western blot法检测Fas和Fas L蛋白的表达;采用荧光比色法测定Caspase-3和Caspase-8蛋白酶的活性。结果随着2-羟基-3-甲基蒽醌浓度的增加及作用时间的延长,药物对HO-8910细胞的生长有明显的抑制作用;HO-8910细胞的凋亡率亦随之增高,且呈药物浓度及时间依赖关系;2-羟基-3-甲基蒽醌作用HO-8910细胞后Fas和Fas L的蛋白表达水平逐渐上升;Caspase-3和Caspase-8蛋白酶的表达亦逐渐增强;Caspase-3和Caspase-8抑制剂能够抑制2-羟基-3-甲基蒽醌诱导的HO-8910细胞凋亡。结论 2-羟基-3-甲基蒽醌可以诱导HO-8910细胞凋亡,Fas/Fas L通路在2-羟基-3-甲基蒽醌诱导的HO-8910细胞凋亡过程中起重要作用。     

力达霉素经线粒体依赖通路介导细胞凋亡

力达霉素(lidamycin，LDM)是具有我国自主知识产权的烯二炔类抗生素，具有较强的抗肿瘤活性，其抗肿瘤机制有待深入阐明。本研究主要利用人肝癌BEL-7402和乳腺癌MCF-7细胞研究了力达霉素对线粒体凋亡通路相关因子的影响。通过MTT法检测不同剂量力达霉素对肿瘤细胞增殖毒性；蛋白印迹技术检测线粒体和细胞质细胞色素c、总Bax，Bcl-2及p53表达；RT-PCR检测p53和bax mRNA表达等。结果发现，LDM能迅速激活肿瘤细胞线粒体凋亡通路，在2 h内就引起线粒体中细胞色素c释放至细胞质中。同时Bcl-2家族成员中促凋亡成员Bax持续增加，而抗凋亡成员Bcl-2先增加后减少。p53蛋白在6 h显著增加。Bax蛋白表达升高与其mRNA转录水平升高有关，p53蛋白表达升高与转录后水平有关。 Caspase抑制剂可以部分抑制LDM的增殖毒性。因此LDM可以通过激活细胞色素c启动的线粒体凋亡通路发挥抗肿瘤作用。     

一种基于流式细胞仪平台荧光共振能量转移技术的Caspase-8活性检测荧光探针

荧光共振能量转移技术(fluorescence resonance energy transfer,FRET)作为一种经典的荧光检测技术,已经广泛运用于生物科学研究中,开发了一系列基于FRET技术的荧光检测探针。半胱氨酸蛋白酶家族(cysteine aspartic acid specific protease,Caspase)在细胞凋亡通路中发挥着十分重要的作用,尤其是位于死亡受体介导的凋亡通路起始位置的Caspase-8,它的激活能引发后续的一系列Caspase酶原的激活并引起细胞的凋亡。因此,Caspase-8活性的检测在细胞凋亡检测中具有非常重要的意义。本文基于蛋白酶类FRET荧光探针原理设计了一个能检测活细胞内Caspase-8活性变化的荧光探针,并且在流式细胞仪上利用FRET技术检测了细胞凋亡诱导剂特异性激活的Caspase-8活性,从而证明了所构建的探针检测Caspase-8活性的有效性和特异性。结果表明,所设计的探针能够特异性地响应细胞凋亡诱导中引起细胞内Caspase-8酶活性的变化,并且能够利用流式细胞技术得以快速定量检测。本研究为在活细胞中检测Caspase-8活性提供了一种更加方便快捷的检测方法。     

细胞凋亡相关基因与肿瘤多药耐药的关系

肿瘤多药耐药(Multi-drug resistance, MDR)系一种药物作用于肿瘤使之产生耐药性后,该肿瘤对未曾接触过、与结构无关、机制各异的多种抗肿瘤药也具有交叉耐药性的现象.细胞凋亡(Apoptosis)是化疗药物杀伤肿瘤细胞的共同通路,其受细胞凋亡相关基因调控.越来越多的研究表明,药物诱导肿瘤细胞发生凋亡依赖于完整且正常的凋亡途径,如肿瘤细胞的凋亡途径出现缺陷或抗凋亡机制增强,则可表现为对药物的耐药性.为此,本文就细胞凋亡相关基因及其蛋白与细胞凋亡及 MDR的关系作一简要综述.