受体介导的基因转移

受体介导的基因转移技术以其转移基因的相对高效性和特异性日益受到重视．本对该技术的原理、转移基因载体的构建、提高基因转染率和表达水平的方法，以及临床应用潜力等问题进行了综述．     

受体介导的基因转移

受体介导的基因转移技术以其转移基因的相对高效性和特异性日益受到重视。本文对该技术的原理、转移基因载体的构建、提高基因转染率和表达水平的方法,以及临床应用潜力等问题进行了综述。     

转铁蛋白受体介导的自杀基因转移系统的建立及其体外抗瘤效应

目的 构建转铁蛋白受体介导的自杀基因系统并观察其对肝癌细胞的体外杀伤效应。方法 SPDP法制备抗转铁蛋白受体与多聚赖氯酸(PLL)的复合物并用分子筛层析纯化。根据DNA阻断试验结果，pEBAF／tk重组质粒与Ab-PLL按1：6混合使二者结合形成PEBAF／tk—Ab PLL复合物。将此复合物转入人肝癌细胞株SMMC7721、HepG2和肺癌细胞株A549，并以脂质体转移为对照。加入不同浓度的更昔洛韦(GCV)以观察细胞的自杀效应。结果 加入GCV后HepG2／tk的增殖受抑制最明显。100mg／L和1mg／L时抑制率分别为60．5％和24．3％。SMMC7721／tk受抑制较低，而A549的增殖不受抑制。结论 本基因治疗体系具仃很好的靶向性和杀肿瘤效果。     

心血管外科中基因转移技术的研究

如何半目的基因导入心脏和血管是基因治疗和基因预防在心血管外科中应用的特殊问题,本文概述目前采用的几种方法。     

恶性疟原虫FCC1/HN株3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的序列测定

3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)是疟原虫糖酵解过程中重要的酶,其基因最近被发现[1].本文报告恶性疟原虫FCCI/HN株GAPDH基因序列测定结果.     

脐带血造血干细胞基因转移的研究现状

八十年以来，脐血细胞组成和生物学特性的深入研究以及脐血在临床上的应用使脐血造血干细胞成为骨髓造血干细胞的良好替代品，脐血造血干细胞的体外扩增技术稳定并且成熟，为进一步的研究提供了保证，近年来，用脐血细胞作为基因转移的靶细胞，采用基因重组技术把目的基因导入其中，可以研究目的的基因在体外培养的脐血细胞中的表达特性，或者将带有目的的基因的脐血细胞直接输入患者体内，治疗遗传性疾病及恶性肿瘤等。     

腺病毒介导的心肌蛋白激酶Cε基因转移导致心功能损害

目的本文旨在研究腺病毒介导的成年小鼠心肌直接PKCε基因转移对左室收缩功能的影响。方法使用标准方法建立表达PKCt基因的重组腺病毒载体。直接注射重组腺病毒到FVB／N和ICR小鼠心肌，对照鼠给予相同剂量空载腺病毒。Western免疫印迹测定PKCε蛋白质表达水平。用非开胸经颈总动脉插管的显微外科技术评价小鼠左室收缩功能。结果与对照鼠相比基因转移鼠心肌转基因PKCε蛋白质表达水平增加近4倍，基线左室最大收缩压、最大收缩速率（dP／dt）、-dP／dt明显降低，左室舒张末压、舒张压明显升高（P〈0．01），异丙肾上腺素激发后左室dP／dt剂量依赖的升高明显减弱（P〈0．01），PKCε基因转移鼠心脏／体重比也较对照鼠明显增加（P〈0．01）。结论腺病毒介导的、心肌直接的PKCε基因转移诱发了左室收缩功能的损害，导致了心肌肥厚和心衰。     

腺病毒介导的心肌蛋白激酶Cε基因转移的心肌保护作用

目的　蛋白激酶Cε (ProteinKinaseCε,PKCε)转基因小鼠表现了保护心肌缺血 /再灌注损伤的遗传特性 (心肌保护表型 )。本文旨在研究腺病毒介导的成年小鼠心肌直接的PKCε基因转移对心肌缺血 -再灌注损伤的影响。方法　通过克隆PKCεcDNA到人类 5型腺病毒基因组DNA的E1区建立表达PKCε基因的重组腺病毒。直接注射重组腺病毒 3 3× 10 10 菌落形成单位 (pfu) /体重 (kg)到小鼠 (10～ 13周 ) ,对照鼠被直接注射相同剂量的空载腺病毒。Western免疫印迹被用于测定PKCε蛋白质表达水平。通过冠状动脉阻断 /再灌注、染色、照像和微机计算进行心肌梗死分析。结果　PKCε重组腺病毒直接心肌注射优于静脉注射 ;直接心肌注射后 4 8h ,基因转移鼠心肌PKCε蛋白质表达水平比对照鼠增加近 4倍。心脏重、左室重、危险区重和危险区重 /左室重百分数在PKCε基因转移和对照小鼠之间无显著差异 ,而PKCε基因转移小鼠的梗死重 [(35 4± 3 1)mgvs(10 3±1 3)mg]、梗死 /危险区域百分数 (5 1 1%± 0 3%vs 17 0 %± 2 6 % )、梗死 /左室百分数 (30 0 %±3 0 %vs 9 2 %± 0 5 % )明显低于对照鼠 (均P <0 0 1)。结论　腺病毒介导的、心肌直接的PKCε基因转移小鼠表现了对心肌梗死的保护作用。     

上皮性卵巢癌转移相关基因的研究进展

局部浸润和远处转移是恶性肿瘤治疗失败及患者死亡的主要原因。卵巢癌尤其是上皮性卵巢癌早期即可发生转移，60％～70％的病例确诊时已发生转移，致使其5年存活率始终徘徊在30％左右。研究表明，肿瘤转移受多种基因的调控和影响，肿瘤转移基因的过度表达或转移抑制基因表达减少、缺失以及二者相互关系的异常均可导致肿瘤的转移。对肿瘤转移相关基因的研究已成为临床研究的热点。现将近年来与上皮性卵巢癌转移相关基因的研究进展情况简述如下。     

类风湿关节炎的基因转移治疗

类风湿关节炎（RA）是一种慢性的、全身性的疾病,主要表现为侵袭性对称性的关节破坏并有不同程度的关节外组织器官的累及,现在全球平均发病率为1%,多40～60岁发病,其中1/3的患者为60岁以后发病,RA的第一个5年致残率达30%,平均缩短寿命5～7年,已经成为一种严重威胁人类特别是老年人健康的疾病.RA的传统治疗药物多起效慢,长期使用副作用大,近年来兴起的生物治疗,如细胞因子抗体等广泛应用于临床,但生物制剂昂贵、副作用多、需要反复注射并且无靶器官特异性,而基因治疗则避免了这些缺点,选择性高,可以从分子水平针对发病机制进行治疗,为RA的生物治疗开辟了一个新的领域.目前主要运用基因转移技术将目的基因转移到体内。     

逆转录病毒载体介导的端粒酶抑制基因促进肝癌细胞凋亡

目的:探讨逆转录病毒载体介导的反义端粒酶抑制基因对肝癌细胞系BEL-7402的凋亡诱导作用.方法:用电穿孔的方法把正、反义端粒酶抑制基因导入包装细胞,包装出完整的病毒,用此病毒感染肝癌细胞系BEL-7402,绘制细胞生长曲线来研究其抗肿瘤疗效.应用MTT、流式细胞术研究细胞凋亡情况.结果:肿瘤细胞感染逆转录病毒后,肿瘤生长受到明显抑制,转染反义hTR病毒组BEL-7402细胞凋亡率显著高于转染正义hTR病毒和生理盐水组(61.32%±2.24%vs23.02%±2.13%,4.11%±1.00%,P<0.01),转染反义hTR与5-FU联用细胞凋亡率更高,为71.71%±2.53%.结论:反义端粒酶抑制基因能明显抑制肿瘤细胞的体外生长,与抗肿瘤药物5-FU有协同作用,联合用药可以增强疗效,具有明显抗肿瘤作用.     

转基因和基因转移技术在动脉粥样硬化研究中的应用

转基因和基因转移技术在动脉粥样硬化研究中的应用范乐明（南京医科大学动脉粥样硬化研究中心，南京２１００２９）将基因构件（包括编码和调节序列）导入生殖／胚胎细胞或体细胞；以改变其遗传特性、表达新表型性状并传递至后代的技术被分别称为＂转基因作用＂（ｔｒａｎ...     

KAI1基因与胰腺癌转移的关系

癌症转移是一种复杂的分子生物学病理改变过程。研究表明 ,当转移及非转移的癌细胞被融合成新的细胞杂交株时 ,虽仍具有肿瘤源性 ,但不出现转移[1] ;提示抑癌基因、尤其肿瘤转移抑制基因活性的丧失 ,是导致肿瘤扩散和转移的分子基础。为此 ,我们比较了ＫＡＩ1基因在胰腺癌及其转移癌中的作用。一、材料和方法1.病例资料 :正常胰腺组织 13例 ,其中男 10例 ,女 3例 ,年龄为 18～ 47岁 ;胰腺癌组织 37例 ,其中男 2 3例 ,女 14例 ,年龄为 32～ 80岁。按肿瘤ＴＮＭ分类[2 ] :3例Ⅰ期 ,10例Ⅱ期 ,2 2例Ⅲ期 ,2例Ⅳ期。此外 ,尚有来自胰腺癌转移的…     

老年大鼠在体心肌缝线法基因转移

目的探讨老年大鼠在体心肌缝线转基因法的可行性。方法分别应用浸泡过ｐＮ２质粒及ｐＮ２－ＬａｃＺ质粒溶液的缝线给３０月龄的Ｗｉｓｔａｒ大鼠心肌进行缝合，术后２、７、１４、９０天取出缝合的心肌，检测β－半乳糖苷酶活性和组织化学染色、对照观察。结果对照组术后心肌组织未检测到β－半乳糖苷酶活性，治疗组术后２、７、１４、９０天分别为（４．３±０．２）×１０－４、（７．４±０．６）×１０－４、（５．７±０．４）×１０－４及（１．８±０．２）×１０－４Ｕ／ｇ组织。治疗组术后２、７、９０天组织化学染色见有蓝染者分别为１００％、１００％、８０％。结论缝线法为一种新的在体心肌直接转基因方法，它可使外源性基因在老年大鼠心肌中表达出具有生物活性的蛋白质。     

不同球囊扩张时间转移基因效率的对比研究

为了对不同球囊扩张时间的转移基因效率进行比较。方法：用左旋多聚赖氨酸包被导管球囊，然后吸附携带报告基因Ｌａｃｚ的腺病毒载体，向兔腹主动脉下段定位转移基因。球囊扩张时间分为５分钟，１５分钟和３０分钟用定性和定量方法检测基因转移效率。     

肺癌转移相关基因的研究进展

<正>转移是肺癌的恶性标志和特征,约90%的肺癌患者死于转移并发症[1],因此,了解肺癌转移相关机制十分重要。肺癌转移是一个多因素参与、极其复杂的过程,它涉及到肿瘤细胞间黏附作用的丧失、     

舌癌转移复发相关基因分子的研究进展

舌癌的发病率位居口腔癌的首位,恶性程度较高,浸润性强,转移复发是患者死亡的主要原因。舌癌复发和转移一直是口腔颌面外科医师关注的问题,其复发转移的相关基因分子也成为最近研究的热点和难点。该文就近期文献研究的舌癌转移复发相关的基因分子作一综述。