血管紧张素Ⅱ通过抑制原癌基因c-SKI表达促进小鼠高血压性心肌纤维化

目的：探讨原癌基因c-SKI (cellular Sloan-Kettering Institute)表达变化对血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ, Ang Ⅱ)诱导的小鼠高血压性心肌纤维化的影响。方法：将12只雄性C57BL/6小鼠随机分成PBS组（n=6）和Ang Ⅱ组（n=6），利用渗透压微泵皮下植入小鼠慢性持续给予等体积的PBS和Ang Ⅱ，给药4周，测定小鼠血压。取小鼠心脏组织进行HE和Masson染色检测病理学变化；免疫组织化学染色和Western blot检测c-SKI、CD31、平滑肌蛋白22(smooth muscle protein 22, SM22)、Ⅰ型胶原（collagen type Ⅰ, Col Ⅰ）和α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）水平。用不同浓度的AngⅡ处理人冠状动脉内皮细胞（humancoronaryarteryendothelialcells,HCAECs），显微镜观察细胞形态，CCK-8法检测细胞活力；用最低有效剂量的Ang Ⅱ处理HCAECs，免疫荧光染色和Western blot检测c-SKI...     

靶向调控c-SKI的microRNA的筛选及验证

目的筛选和验证靶向调控c-SKI并与纤维化相关的microRNA(miRNA)。方法生物信息学方法预测并结合文献报道,筛选出靶向c-SKI的候选miRNAs,RT-qPCR检测人心肌成纤维细胞(HCFBs)中候选miRNAs和c-SKI的表达,筛选出抑制作用最显著的miRNA;构建c-SKI-3′-UTR野生型(c-SKI-wt)和突变型(c-SKI-mut)载体,分别与miR-155a-5p/miR-17a-5p的模拟物、抑制剂及对照在人胚肾上皮细胞(HEK293T)中共转染,双萤光素酶报告系统检测各组荧光素酶活性;接着,分别将miR-155a/miR-17a-5p mimics和inhibitor转染至人心肌成纤维细胞(HCFBs),Western blot检测各组细胞c-SKI的表达。结果 1)经筛选miR-155a-5p和miR-17a-5p对c-SKI的抑制作用最明显(P<0.01);2)与NC组相比,miR-155a-5p/miR-17a-5p mimics组萤光素酶活性均显著下降(P<0.05),miR-155a-5p/miR-17a-5p inhibitor组萤光素酶活性均明显增强(P<0.05);3)与NC组相比,miR-155a-5p/miR-17a-5p mimics组中c-SKI蛋白表达显著下调,miR-155a-5p/miR-17a-5p inhibitor组中c-SKI的表达显著上调(P<0.01)。结论 miR-155a-5p和miR-17a-5p可分别靶向结合c-SKI的3′-UTR,在HCFBs中负性调控c-SKI的表达。     

Sirt1参与异丙肾上腺素诱导的小鼠心肌肥大

目的:观察Ⅲ类组蛋白去乙酰基酶1(Sirt1)在异丙肾上腺素(ISO)诱导的小鼠心肌肥大中的表达及作用。方法:昆明小鼠随机分为正常对照组、ISO模型组和ISO+NAM(烟酰胺,Sirt1抑制剂)组。皮下注射ISO诱导小鼠心肌肥大。以心脏重量指数(心脏重量/体重)、HE染色、透射电镜以及脑钠肽(BNP)mRNA表达水平观察心肌肥大的变化。同时采用RT-PCR、Western blotting检测各组心肌Sirt1 mRNA、蛋白质的表达。结果:与对照组相比,心脏重量指数,HE染色,透射电镜以及BNP mRNA表达水平均显示皮下注射ISO可明显诱导小鼠心肌肥大;Sirt1在心肌肥大模型组表达显著增多(P0.01),其抑制剂NAM可明显减轻ISO诱导的心肌肥大(P0.05),并降低Sirt1的表达(P0.01)。结论:Sirt1的激活可能参与ISO诱导的小鼠心肌肥大。     

c-SKI对冠脉内皮细胞增殖及内皮-间充质转化的影响

目的:探讨核蛋白c-SKI对冠状动脉内皮细胞增殖能力及内皮-间充质转化的影响。方法:使用不同浓度的转化生长因子β1(TGF-β1)作用人冠脉内皮细胞不同时点,Western blot法检测各组细胞中c-SKI、间充质细胞标志物波形蛋白和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及内皮细胞标志物E-钙黏蛋白的表达。使用携带c-ski基因的慢病毒转染冠脉内皮细胞后采用RT-qPCR验证转染效率。将细胞分为4组:对照组、TGF-β1(5μg/L)组、c-ski基因感染+TGF-β1组及对照病毒感染+TGF-β1组。过表达c-SKI后,MTT实验和集落形成实验检测冠脉内皮细胞的增殖能力,Western blot检测波形蛋白、α-SMA、E-钙黏蛋白、Smad2、Smad3、p-Smad2和p-Smad3蛋白的水平。结果:TGF-β1处理冠脉内皮细胞后,c-SKI在冠脉内皮细胞中的表达呈剂量和时间依赖性下降(P0.01)。MTT及集落形成实验结果显示,过表达c-SKI可显著抑制冠脉内皮细胞增殖(P0.01)。Western blot检测结果显示,与病毒对照组相比,过表达c-SKI可显著下调冠脉内皮细胞中α-SMA和波形蛋白的表达量(P0.01),上调E-钙黏蛋白的表达量(P0.01),同时抑制Smad2和Smad3蛋白的磷酸化(P0.01),逆转TGF-β1诱导的内皮-间充质转化。结论:内皮-间充质转化过程中c-SKI表达下调,而过表达c-SKI能够抑制冠脉内皮细胞增殖及内皮-间充质转化,其机制可能与调控TGF-β1/Smad信号通路活性有关。     

运动训练能够抑制异丙基肾上腺素诱导的心脏炎症反应

<正>目的:明确运动训练能否抑制β-肾上腺素受体激动剂异丙基肾上腺素(isoprenaline,ISO)诱导的小鼠心脏炎症反应。方法:将成年C57雄性小鼠分为10组(n=6),分别为安静对照组、安静给ISO 1 h组、24 h组、3 d组和7 d组、跑步训练对照组、跑步训练给ISO 1 h组、24 h组、3 d组和7 d组。ISO组均为给予ISO 5 mg/kg皮下注射,跑步训练组为应用小鼠跑步机训练6     

地塞米松对异丙肾上腺素所致小鼠急性心肌损伤及脾脏T细胞亚群的影响

目的:观察地塞米松(DEX)对异丙肾上腺素(ISO)致小鼠急性心肌缺血损伤的影响,并探讨其作用机制。方法:16只昆明种小鼠随机分成正常对照组(CON组)、ISO组、DEX预处理组(DEX+ISO组)、DEX后处理组(ISO+DEX组),每组各4例。ISO组腹腔注射ISO(5mg/kg),1次/天,连续3天;DEX+ISO组于ISO注射前30min腹腔注射DEX(1.25mg/kg),连续3天;ISO+DEX组于实验第2天和第3天腹腔注射ISO后30min,再腹腔注射DEX(1.25mg/kg);CON组腹腔注射等量生理盐水,连续3天。实验第4天,各组小鼠心脏采血检测血清谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同功酶(CK-MB);摘取心脏进行HE染色,观察各组心肌组织形态学改变;摘取脾脏,流式细胞术检测脾组织匀浆T细胞亚群分布。结果:(1)与CON组比较,ISO组AST、LDH、CK均显著升高(P0.01);心肌组织损害明显加重(P0.01);脾组织CD8~+、CD4~+CD69~+T细胞表达上升(P0.05,P0.01)。(2)与ISO组比较,DEX+ISO组AST、CK、LDH、CK-MB均下降(P0.05或P0.01);心肌组织损害明显改善(P0.01);脾组织CD4~+、CD8~+T细胞表达显著下降(P0.01),CD4~+CD69~+T细胞表达显著上升(P0.01)。(3)与ISO组比较,ISO+DEX组CD8~+T细胞表达下降(P0.05),其余均无明显变化(P0.05)。结论:DEX预处理可以明显改善ISO致小鼠急性心肌缺血损伤,其作用机制可能与DEX介导的T细胞亚群免疫应答功能改变有关。     

超声心动图斑点追踪方法检测异丙基肾上腺素引起的早期心脏功能异常

<正>目的:观察超声心动图斑点追踪能否早期发现和诊断异丙基肾上腺素(ISO)引起的心脏功能异常。方法:将成年C57雄性小鼠分为对照、ISO给药后3 d和ISO给药后7 d组。ISO组为一次性给予ISO 5 mg/kg皮下注射,分别于给药后3 d和7 d应用传统超声心动图及斑点追踪评价小鼠心脏功能。结果:(1)应用传统超声心动图方法测得ISO给药后3 d组FS和E/Em     

G1254023X对白细胞介素6受体、趋化因子CX3CL1的抑制作用及其对冠心病的影响

目的 通过检测G1254023X干预的冠心病(CHD)小鼠主动脉血管直径及白细胞介素6受体(IL-6R)、趋化因子Chemokine(C-X3-C motif) ligand 1(CX3CL1)的表达,初步探究去整合素和金属蛋白酶10(ADAM10)影响CHD的机制.方法 用高脂高糖饲料饲养ApoE基因敲除小鼠制备CHD小鼠模型;采用B超法测量G1254023X组、模型组及空白对照组小鼠的主动脉血管直径;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)分别检测三组小鼠外周血IL-6R、CX3CL1的浓度;采用苏木素-伊红染色法(HE)检测小鼠主动脉组织的病理变化;分别用蛋白免疫印记法(WB),免疫组织化学法(IHC)检测三组小鼠主动脉组织中IL-6R、CX3CL1的表达差异.测量G1254023X组、模型组及空白对照组小鼠的主动脉血管直径.结果 模型组小鼠主动脉血管直径显著大于G1254023X组;模型组小鼠主动脉组织病理学变化大于G1254023X组;外周血样本和主动脉组织中IL-6R、CX3CL1浓度G1254023X组显著低于模型组;各项指标G1254023X组与空白对照组无显著差异.结论 特异性ADAM10抑制剂G1254023X可以有效缓解CHD小鼠主动脉血管直径狭窄,抑制IL-6R、CX3CL1的表达,延缓冠心病发展.     

OPN-siRNA对胶原诱导性关节炎小鼠的治疗作用

目的:观察骨桥蛋白(OPN)的小干扰RNA(siRNA)对胶原诱导性关节炎(CIA)小鼠的治疗作用。方法:采用牛Ⅱ型胶原建立CIA小鼠,未做任何处理的DBA1小鼠为空白组,将CIA小鼠随机分为模型组、空载体组、OPN-siRNA1组及OPN-siRNA2组,每组3只,将成功构建的OPN-siRNA表达载体尾静脉注射CIA小鼠,模型组和空载体组小鼠分别注射等剂量、等比例的磷酸盐缓冲液(PBS)和p GFP-V-RS空载体。每周注射一次,每次注射100μl,共注射8次。注射后28 d处死小鼠。RT-PCR法检测小鼠肺脏组织中OPN mRNA的表达水平;免疫组化法检测小鼠肺脏组织和踝关节中OPN蛋白的表达水平;病理切片苏木精-伊红(HE)染色法观察小鼠肺脏及踝关节的病理变化; ELISA检测小鼠血清中IL-17、IL-10及IFN-γ水平;流式细胞检测小鼠脾细胞Th17及Treg水平。结果:(1)OPN-siRNA1组和OPN-siRNA2组小鼠肺组织中OPN mRNA的表达明显低于模型组和空载体组,差异有统计学意义(P0. 05)。(2)OPN-siRNA1组和OPN-siRNA2组小鼠肺脏和踝关节中OPN蛋白的表达明显低于模型组和空载体组(P0. 05)。(3)光镜下观察踝关节的HE染色病理切片,与模型组和空载体组比较:OPNsiRNA1组和OPN-siRNA2组小鼠踝关节炎性细胞浸润减少,关节肿胀程度减轻;肺组织炎细胞浸润减轻,间质性肺病明显改善。(4)小鼠血清IL-10水平OPN-siRNA1组和OPN-siRNA2组明显高于模型组和空载体组,差异有统计学意义(P0. 05);血清IFN-γ水平OPN-siRNA1组和OPN-siRNA2组低于模型组和空载体组,差异有统计学意义(P0. 05)。(5)OPN-siRNA1组和OPN-siRNA2组的Th17细胞下降,Treg细胞升高,差异有统计学意义(P0. 05)。结论:OPN-siRNA抑制RA模型鼠体内OPN基因和蛋白表达和炎症介质的水平,同时改善CIA小鼠肺脏和踝关节的病理变化,因此,OPN可能成为RA治疗的潜在靶点。     

脂肪因子Omentin-1对代谢综合征小鼠的影响及可能机制

探讨脂肪因子Omentin-1对代谢综合征((metabolic syndrome,MS)小鼠的影响及可能机制。选择6～8周龄SPF级雄性BALB/c小鼠,通过高脂高糖饮食建立MS模型,将小鼠随机分为模型组及治疗组。治疗组给予腹腔注射Omentin-1 [8μg/(kg·d)],模型组给予腹腔注射等量生理盐水。干预4周后,采用免疫组化、ELISA及Western blotting等方法评估Omentin-1治疗对MS小鼠糖、脂质代谢及系统性炎症的影响,并进一步分析Omentin-1对小鼠内脏脂肪组织炎症及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferators-activated receptor-γ, PPAR-γ)信号的影响。研究发现治疗组小鼠空腹血糖(fasting blood-glucose,FBG)、甘油三酯(triglyceride,TG)及低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)水平均显著低于模型组(P0.05),而高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)水平显著高于模型组(P0.05)。治疗组小鼠外周血IL-8及TNF-α水平均显著低于模型组(P0.05)。治疗组小鼠脂肪组织巨噬细胞浸润及IL-6水平均显著低于模型组(P0.05),但IL-10水平显著高于模型组(P0.05)。治疗组小鼠脂肪组织PPAR-γ及脂联素水平显著高于模型组(P0.05)。这提示Omentin-1可有效改善MS小鼠系统性炎症及糖、脂质代谢,可能与激活脂肪组织PPAR-γ信号通路有关。     

旋毛虫对三硝基苯磺酸和噁唑酮诱导肠炎小鼠结肠中Th1/Th2类细胞因子表达的影响

目的 研究旋毛虫(T. spiralis)对三硝基苯磺酸(TNBS)和噁唑酮(OXZ)诱导的实验性肠炎小鼠结肠中Th1/Th2类细胞因子表达的影响.方法 雌性BALB/c小鼠,随机分为50%乙醇对照组、T. spiralis应用组、TNBS(OXZ)诱导肠炎模型组、预先感染T. spiralis后诱导TNBS(OXZ)模型组(每组小鼠取材时保证6只以上).对各组小鼠肠黏膜固有层单个核细胞(LPMC)进行分离培养,采用ELISA方法观察感染T.spiralis和未感染T.spiralis小鼠于TNBS或OXZ诱导肠炎后3 d和7 d结肠中Th1/Th2类细胞因子蛋白的表达变化,包括IFN-γ、IL-12、IL-4、IL-10的表达量分析.结果 预先感染T. spiralis后诱导TNBS模型组小鼠在造模后3 d及7 d肠黏膜LPMC产生IFN-γ的水平均低于模型组(P＜0.05),而IL-4、IL-10的表达高于模型组(P＜0.05).预先感染T. spiralis后诱导TNBS模型组小鼠在造模后3 d肠黏膜LPMC产生IL-12的水平低于模型组(P＜0.05),第7天与模型组相比未见明显差异(P＞0.05).预先感染T. spiralis后诱导OXZ模型组小鼠在造模后3 d及7 d肠黏膜LPMC产生IFN-γ、IL-4及IL-10的水平均高于单纯造模组(P＜0.05).结论 T. spiralis对TNBS诱导的肠炎模型小鼠肠道局部免疫作用机制可能是通过诱导Th2型免疫反应及Tr1型细胞因子而抑制结肠炎小鼠Th1型过度免疫应答而实现的.在T.spiralis对OXZ模型小鼠的干预性研究中,没有按理论所设想的感染T.spiralis所产生的Th2型免疫反应会对OXZ诱导的Th2型炎症反应起叠加作用而加重病情.这提示我们,需要进一步探讨T.spiralis对拥有Th2型免疫应答的OXZ模型的具体作用机制.     

菊苣酸改善小鼠心肌缺血再灌注损伤研究

目的 探讨菊苣酸对心肌缺血再灌注(ischemia reperfusion,I/R)小鼠心肌损伤、 氧化应激及炎性反应的影响.方法 构建心肌I/R的BALB/c小鼠模型.40只小鼠随机分为5组:对照组,I/R模型组,菊苣酸低、 中、 高剂量组.HE染色观察小鼠心肌组织损伤情况.ELISA检测心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)、...     

HMGB1通过TLR4促进心肌缺血损伤并调节脾脏CD4~+、CD8~+T细胞和Th17细胞比例

目的探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)通过Toll样受体4 (TLR4)调控心肌缺血损伤及对脾脏组织CD4~+T细胞、CD8~+T细胞及Th17细胞亚群的影响。方法 C57BL/6野生型小鼠(WT)和TLR4基因敲除(TLR4-/-)小鼠各30只,随机分为对照组、异丙肾上腺素诱导心肌缺血(ISO)组和ISO联合重组HMGB1(r HMGB1)组。采用心脏超声检查小鼠心功能,应用HE染色和天狼星红染色观察心肌组织病理学变化;原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测心肌细胞凋亡指数,流式细胞术检测脾脏组织中CD4~+T细胞、CD8~+T细胞和Th17细胞亚群的比例。结果与对照组相比,ISO组小鼠诱发心脏功能损害、心肌组织坏死和纤维化、心肌细胞凋亡,脾脏组织中CD4~+T淋巴细胞比例、CD4~+/CD8~+T细胞比值和Th17细胞比例升高;与ISO组小鼠相比,ISO联合r HMGB1组心脏功能损害、心肌组织坏死和纤维化、心肌细胞凋亡状况均加重,脾脏组织中CD4~+T淋巴细胞比例、CD4~+/CD8~+T细胞比值和Th17细胞比例更高;与ISO联合r HMGB1组野生型小鼠相比,ISO联合r HMGB1组TLR4-/-小鼠心脏功能损害、心肌组织坏死和纤维化和心肌细胞凋亡减轻,脾脏组织CD4~+T淋巴细胞比例、CD4~+/CD8~+T细胞比值和Th17细胞比例显著降低。结论 HMGB1通过TLR4诱发心肌缺血时心肌组织损伤,并上调脾脏组织CD4~+T细胞比例、CD4~+/CD8~+T细胞比值和Th17细胞比例,从而可能促进心肌组织炎症损伤。     

猪血纤维连接蛋白促进小鼠Ⅲ度烧伤愈合

目的 研究相同浓度下不同纯度纤维连接蛋白对小鼠Ⅲ度烧伤创面愈合的效果及差异.方法 制备小鼠背部Ⅲ度烧伤模型,模型小鼠随机分5组:纤维连接蛋白高纯度组(85％)、中纯度组(75％)、低纯度组(65％)、贝复济阳性对照组以及空白对照组,观察各组创面愈合时间,脱痂时间及病理学变化.结果 不同纯度的纤维连接蛋白与空白对照组比较均能缩短小鼠皮肤创面愈合的时间及脱痂时间,并能显著改善创面皮肤的病理形态.结论 纤维连接蛋白对小鼠Ⅲ度烧伤愈合有显著促进作用,中纯度组可能具有潜在应用价值.     

脱氢表雄酮对血管性痴呆小鼠学习和记忆能力的改善作用

目的:研究脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone,DHEA)对血管性痴呆小鼠学习和记忆能力的改善作用及可能机制。方法:将小鼠随机分为假手术组、模型组及DHEA(20、40和60 mg/kg)组。采用夹闭小鼠双侧颈总动脉15 min再放开的方法,建立全脑缺血再灌注所致的血管性痴呆小鼠模型。通过Y迷宫和新物体辨别实验测试小鼠的学习和记忆能力;采用Western blot法检测小鼠海马组织神经元核抗原(NeuN)、突触小泡蛋白(SYP)和突触后致密蛋白95(PSD-95)的含量。结果:与假手术组相比,在Y迷宫和新物体辨别实验中,模型组小鼠出现显著的学习和记忆障碍,DHEA治疗能显著增加Y迷宫实验中小鼠自发交替反应率,同时还可显著提高小鼠新物体辨别实验的优先指数和辨别系数(P 0. 05),其中DHEA中剂量组效果最为显著(P 0. 01)。Western blot实验结果显示,模型组小鼠海马组织NeuN、SYP和PSD-95的表达水平与假手术组比显著降低(P 0. 05); DHEA组小鼠海马组织NeuN、SYP和PSD-95蛋白的表达较模型组显著增多(P 0. 05)。结论:DHEA具有提高血管性痴呆小鼠学习和记忆能力的作用,其机制可能与减少神经元的丢失和改善突触的可塑性有关。     

泽明红山颗粒激活Nrf2/HO-1通路抑制非酒精性脂肪性肝炎小鼠肝损伤

目的 探讨泽明红山颗粒对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)小鼠肝功能影响及可能机制.方法 SPF级C57BL/6小鼠30只,随机分为对照组(control组)、非酒精性脂肪性肝炎模型组(NASH组)与非酒精性脂肪性肝炎模型+泽明红山颗粒组(ZMHS组).NASH和ZMHS组小鼠采用高脂纯化饲养(MD45％添加0.5％胆固醇...     

谷胱甘肽改善线粒体功能障碍减轻小鼠酒精性肝损伤

目的制备小鼠酒精性肝病动物模型,给予还原型谷胱甘肽,观察模型小鼠肝线粒体功能及肝损伤恢复情况。方法C57BL/6J雄性小鼠30只随机分为对照组(Control)、模型组(ALD)、干预组(Glutathione),每组10只。实验结束后处死小鼠进行取材,对小鼠及肝脏进行称重,对肝脏进行病理分析,TUNEL染色检测模型组和干预组肝细胞凋亡情况。检测血液生化指标ALT、AST、TG,比较各组肝组织谷胱甘肽(GSH)与氧化型谷胱甘肽(GSSG)的比值(GSH/GSSG)。结果与对照组相比,模型组小鼠肝重比升高,与模型组相比,干预组小鼠肝重比降低(P<0.05)。模型组小鼠肝脏有气球样变性和脂质沉积,细胞凋亡数量明显多于对照组,干预组小鼠肝脏空泡样病变和脂质沉积减轻,细胞凋亡数量少于模型组(P<0.05)。血清ALT、AST和TG水平模型组比对照组升高(P<0.05),干预组比模型组下降(P<0.05)。肝组织GSH/GSSG水平模型组比对照组显著下降,干预组比模型组显著上升(P<0.05)。结论谷胱甘肽减轻小鼠酒精性肝病模型肝损伤,与改善线粒体功能障碍相关。     

罗格列酮通过抑制肠系膜脂肪组织炎症改善三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的小鼠结肠炎

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂罗格列酮(rosiglitazone)对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS诱导的结肠炎小鼠的治疗作用及可能机制。方法选取雄性BALB/c小鼠20只建立TNBS结肠炎模型,造模成功后随机分为罗格列酮处理组及模型组,每组10只。罗格列酮处理组给予罗格列酮灌胃(0. 2 m L,[20 mg/(kg·d)]),模型组给予生理盐水(0. 2 m L/d)灌胃。处理6周后,处死所有小鼠。采用炎症性肠病疾病活动度指数(DAI)及HE染色结合Spencer结肠炎组织学评分评估两组小鼠肠道炎症程度及组织学改变,ELISA检测肠黏膜白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-10水平及肠系膜脂肪组织IL-6、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)水平;脂肪组织HE染色后200倍光镜下拍照依据比例尺计算脂肪细胞直径;免疫组织化学染色法检测小鼠肠系膜脂肪组织F4/80阳性巨噬细胞浸润数量、脂肪细胞成熟标志物外周蛋白(peripherin)、脂连蛋白(adiponectin)及瘦素(leptin)水平。Western blot法检测小鼠肠系膜脂肪组织核因子κB(NF-κB)和信号通路中的NF-κBp65、磷酸化的NF-κBp65(p-NF-κBp65)、磷酸化的NF-κB抑制蛋白(p-IκB)及磷酸化的IκB激酶(p-IKK)的蛋白水平。结果罗格列酮处理后第5及6周,小鼠DAI评分显著低于模型组。同时,处理组小鼠肠黏膜IL-1β及TNF-α水平显著低于模型组,而IL-10水平显著高于模型组。与模型组小鼠相比,罗格列酮处理组小鼠肠系膜脂肪细胞直径及脂肪细胞成熟标志物perilipin水平均显著高于模型组。同时,罗格列酮处理组小鼠肠系膜脂肪组织巨噬细胞浸润数量及炎症介质IL-6、MCP-1水平均显著低于模型组。罗格列酮治疗显著促进处理组小鼠肠系膜脂肪细胞adiponectin的表达,而抑制leptin的水平。罗格列酮处理组小鼠肠系膜脂肪组织NF-κBp65、p-NF-κBp65、p-IKK及p-IκB蛋白水平均显著低于模型组。结论罗格列酮可显著抑制TNBS模型小鼠肠道炎症,可能与抑制肠系膜脂肪组织NF-κBp65通路有关。     

过表达endophilin A2减轻异丙肾上腺素诱导的心肌肥大

目的:研究过表达吞蛋白A2(endophilin A2,Endo A2)对异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO)诱导的心肌肥大的影响。方法:取健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、Ad-EndoA2组、ISO模型组及ISO+Ad-EndoA2组,其中Ad-EndoA2组和ISO+Ad-EndoA2组于给药前1 d左心室壁注射Ad-EndoA2腺病毒,假手术组和ISO组注射磷酸缓冲盐溶液,然后分别连续7 d皮下注射生理盐水或ISO。7 d后用小动物超声测定心功能指标,然后处死大鼠,收集心脏,以心脏重量指数、HE染色及胚胎基因表达水平评价心肌肥大情况,Western blot法检测自噬相关蛋白LC3和P62的表达。结果:小动物超声结果显示,与假手术组相比,ISO组大鼠处于心肌肥大代偿期(左室收缩期前壁厚度、左室收缩期后壁厚度、射血分数和短轴缩短率升高,左室收缩内径及心输出量下降,均P 0. 05),心脏重量指数、HE染色及RT-qPCR结果也均显示心脏发生了明显肥大(P 0. 05),过表达Endo A2可明显减轻ISO诱导的心肌肥大,改善心功能(P 0. 05)。Western blot结果显示,过表达Endo A2明显逆转ISO引起的自噬水平降低(P 0. 05)。结论:过表达Endo A2可减轻ISO诱导的大鼠心肌肥大,可能与加强自噬有关。     

肌苷对精神分裂症小鼠认知能力及海马超微结构的影响

目的:探究口服肌苷对精神分裂症(SP)小鼠模型学习记忆能力及海马神经元和髓鞘超微结构的作用.方法:30只ICR雄性小鼠按照随机性分为对照组(control)、模型组(MK-801)以及肌苷治疗组(Inosine+MK-801),每组10只.连续14 d腹腔注射MK-801制备SP模型,Inosine+ MK-801组小...