二氢杨梅素的体外护肝作用：基于脂噬介导的LO2细胞脂质蓄积及HepG2细胞增殖

目的 基于脂噬途径研究二氢杨梅素（DMY）对LO2细胞脂质蓄积的防治效果及其机制,并探索其对HepG2细胞的增殖抑制。方法 FBS诱导LO2细胞建立脂肪变性模型,研究分别设置对照组：10%FBS-DMEM正常培养;模型组：50%FBS-DMEM;阳性对照组：100 μg/mL DMY+10%FBS-DMEM;处理组（L-DMY组：50 μg/mL DMY+50%FBS-DMEM;M-DMY组：100 μg/mLDMY+50%FBS-DMEM;H-DMY组：200 μg/mL DMY+50%FBS-DMEM）及恢复对照组：先50% FBS-DMEM培养,后10%FBS-DMEM培养。油红O染色测定脂滴累积。试剂盒测定TC、TG、LDL水平和AST、ALT和LDH酶活性。AO染色观察自噬溶酶体数量,透射电镜观察自噬体数量。Western blot检测自噬蛋白LC3表达量。MDC染色观察自噬体形成情况,q-PCR测定LC3、ATG7、AMPK、mTOR、p62和Beclin1的mRNA表达水平。细胞周期阻滞实验分析HepG2细胞周期比例,流式细胞术检测HepG2细胞凋亡情况,细胞DNA断裂实验检测HepG2细胞DNA的完整情况。结果 DMY干预和预处理可抑制LO2细胞的脂质蓄积,并且降低TC、TG、LDL水平和AST、ALT和LDH酶活性,差异具有统计学意义（P<0.05）;DMY可促进LO2细胞的自噬体和自噬溶酶体的形成,并促进自噬蛋白LC3的表达;DMY可减轻高FBS诱导的LO2细胞自噬体形成抑制,并上调LC3（P< 0.01）、ATG7（P<0.01）、Beclin1（P<0.05）和AMPK（P<0.001）的mRNA水平,下调p62（P<0.001）和mTOR（P<0.001）的mRNA水 平。DMY可阻滞HepG2细胞的有丝分裂和细胞增殖（53.90% vs 14.62%; 32.31% vs 70.17%）,诱导HepG2细胞的晚期凋亡（4.74% vs 57.86%）和DNA断裂。结论 DMY通过调节AMPK/mTOR介导的脂噬途径减少LO2细胞的脂质累积,通过阻滞细胞周期和促进凋亡抑制HepG2增殖,发挥体外护肝作用。     

辣椒素对体外肝细胞脂质代谢的影响研究

目的 探讨辣椒素对脂肪变肝细胞内脂质沉积的影响及自噬表达情况,为脂肪性肝病防治的研究提供新的思路和靶点.方法 用油酸(40 μg/mL)诱导肝原代细胞LO2细胞株建立非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)细胞模型.实验分为空白对照组、油酸组、辣椒素组[油酸+辣椒素(100 μmol/L)].油红O染色和三酰甘油试剂盒检测肝细胞内脂肪变程度;Western blot检测自噬体标记分子p62和LC3的表达水平并计算LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ比值.结果 40 μg/mL油酸处理LO2细胞24h后,油红O染色观察,油酸组肝细胞中可见大小不等的橘红色脂滴.而空白对照组无明显橘红色脂滴形成,油酸在体外成功建立NAFLD模型.与油酸组相比,辣椒素组肝细胞内三酰甘油水平显著降低(P＜0.05),脂滴明显减少,p62蛋白水平明显降低(P＜0.05),而LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值明显上调(P＜0.05).结论 在体外利用油酸诱导LO2细胞株建立NAFLD模型,辣椒素刺激NAFLD细胞,上调NAFLD细胞自噬水平,减少细胞内脂质沉积,但具体机制还需进一步研究.     

二苯乙烯苷对HepG2 细胞胆固醇含量的 影响及其作用机制研究

目的 探索二苯乙烯苷对HepG2 细胞胆固醇含量的影响及其作用机制。方法 将细胞随机分为 正常组、模型组（ox-LDL 50 mg/L）、A 组（ox-LDL 50 mg/L+ 二苯乙烯苷250μmol/L）、B 组（ox-LDL 50 mg/L+ 二苯乙烯苷188μmol/L）、C 组（ox-LDL 50 mg/L+ 二苯乙烯苷125μmol/L）及D 组（ox-LDL 50 mg/L+ 二苯乙烯苷62.5μmol/L）。细胞处理48 h 后，采用油红O 脂肪染色法观察、胆固醇测定试剂盒测 定各组胆固醇的含量并用逆转录聚合酶链反应检测肝癌HepG2 细胞ABCG1、ABCA1 及SR-BI 的表达水平。 结果 正常组、A、B、C 和D 组细胞内总胆固醇（TC）、细胞内游离胆固醇（FC）含量均低于模型组（P <0.05）， 同时A、B、C 和D 组上清TC 和FC 含量较正常组升高（P <0.05）。二苯乙烯苷能够降低HepG2 细胞内 胆固醇含量，增加胆固醇外流率（P <0.05），其中二苯乙烯苷浓度为125μmol/L 时达最高值。模型组细胞 ABCA1 mRNA 表达水平较正常组下降（P <0.05）。A、B、C 和D 组ABCA1、ABCG1 和SR-BI mRNA 表 达水平较模型组上升（P <0.05）。结论 二苯乙烯苷能够降低HepG2 细胞胆固醇的含量，其机制可能是通过 上调ABCA1、ABCG1 和SR-BI 的表达水平而增加胆固醇外流。     

Exendin-4通过促进自噬减少非酒精性脂肪性肝病细胞模型的脂质沉积

目的 探究Exendin-4改善肝细胞脂质沉积的作用机制,讨论Exendin-4治疗非酒精性脂肪肝病的可能机制。方法 对照组（人正常肝细胞LO2和肝癌细胞HepG2,不做任何处理）;棕榈酸钠（PA）组（LO2与HepG2分别进行PA处理,以构建肝细胞脂肪变性模型）;PA+Exendin-4组（LO2与HepG2分别进行PA与Exendin-4共处理）;PA+Exendin-4+3BDO组（LO2与HepG2分别进行Exendin-4与3BDO共处理）。通过油红O染色实验、CCK8实验,检测对照组、PA组、PA+Exendin-4组的脂质沉积程度与细胞增殖能力,并通过Western blot检测信号通路关键分子p-mTOR、m-TOR、p-AKT、AKT,以及自噬相关蛋白LC3-I/II和p62的表达;通过 Western blot 与免疫荧光实验,检测 LO2 与 HepG2 细胞中 GLP-1R 表达情况;通过 Western blot,检测对照组、PA+Exendin-4组、PA+Exendin-4+3BDO组中LC3-I/II和p62的表达。结果 油红O染色实验表明,PA诱导后细胞中脂质明显增加,PA+Exendin-4组脂质沉积程度较PA组降低;细胞增殖实验表明,PA组细胞增殖水平较对照组明显受抑制（P<0.01）;PA+Exendin-4组细胞增殖水平较PA组升高（P<0.05）;免疫荧光实验表明,人正常肝细胞LO2和肝癌细胞HepG2细胞株中均有GLP-1R表达;Western blot表明,PA+Exendin-4组p-mTOR的表达较PA组下调,p-AKT的表达较PA组上调。Exendin-4可下调自噬相关蛋白p62,而上调LC3-II的表达,而这一结果可被3BDO逆转。结论 Exendin-4可能通过直接作用于细胞上GLP-1R,激活AKT-mTOR信号通路,进而促进自噬;同时,Exendin-4有助于缓解PA作用下肝细胞的脂质沉积过程,并促进细胞增殖。提示Exendin-4在PA作用下肝细胞的脂质沉积过程中具有重要作用。     

ABCA1-565C/T基因多态性对心梗患者来源的巨噬细胞胆固醇外流功能影响及其机制研究

目的 比较三磷酸腺苷结合盒转运子A1(ABCA1)启动子区-565C/T不同基因型的心肌梗死患者巨噬细胞胆固醇外流功能及ABCA1蛋白表达.方法 应用人外周血单核细胞原代细胞培养及乙酰化低密度脂蛋白(Ac-LDL)诱导获得巨噬细胞,3H标记的胆固醇测量巨噬泡沫细胞胆固醇外流功能;采用western blot技术测量ABCA1蛋白表达.结果 (1)单核细胞原代培养分化成巨噬细胞,经Ac-LDL诱导成泡沫细胞 ;(2)ABCA1-565C/T TT型巨噬泡沫细胞胆固醇流出率低于CT型和CC型;(3)TT型巨噬细胞中ABCA1蛋白表达显著低于CT型和CC型,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 ABCA1-565 C/T位点 TT基因型ABCA1的蛋白表达及胆固醇外流功能较CC、CT型减低,推测TT基因型通过影响ABCA1蛋白表达而影响巨噬细胞胆固醇外流功能而促进冠心病的发生和发展.     

NF-κB途径介导Chemerin抑制THP-1源性巨噬泡沫细胞ABCAl表达和降低胆固醇外流

目的观察脂肪因子Chemerin是否调节胆固醇流出和巨噬泡沫细胞脂滴蓄积,以及对巨噬泡沫细胞ATP结合盒转运子A1(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)和酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1(Acyl-CoA:choles-terol acyltransferase-1,ACAT1)表达和NF-κB活化的影响。方法佛波酯(phorbol myristate acetate,PMA)诱导THP-1单核细胞分化为巨噬细胞,随后加入胆固醇和ox-LDL培养促进巨噬细胞转化为巨噬泡沫细胞,免疫荧光染色检测巨噬细胞表面抗原CD68的表达,油红O染色后观察泡沫细胞形态,脂肪因子Chemerin干预巨噬泡沫细胞,应用液体闪烁计数仪检测胆固醇流出变化,油红O染色观察细胞内脂滴变化,实时PCR和Western blot检测ABCA1及ACAT1mR-NA和蛋白表达水平。Sandwich ELISA法检测巨噬泡沫细胞NF-κB活化情况。实时PCR检测NF-κB抑制剂四氢化吡咯二硫代氨基甲酸酯(PDTC)预处理后,Chemerin再干预时ABCA1表达的变化。结果 Chemerin抑制巨噬细胞内胆固醇流出,促进脂滴蓄积,下调ABCA1mRNA和蛋白的表达,增加NF-κB活化,差异有统计学意义(均P<0.05),且ABCA1mRNA表达与Chemerin浓度呈负相关,r=-0.936(P<0.05),NF-κB活化程度与ABCA1mRNA表达呈负相关,r=-0.917(P<0.05),但Chemerin对ACAT1mRNA和蛋白的表达无明显影响,PDTC预处理能够逆转ABCA1mRNA表达抑制。结论 Chemerin下调ABCA1mRNA和蛋白的表达,抑制THP-1巨噬泡沫细胞内胆固醇外流,增加细胞内脂滴蓄积,NF-κB活化可能是Chemerin抑制ABCA1mRNA表达的信号通路之一。     

晚期自噬在非酒精性脂肪肝中的促凋亡作用

目的 在非酒精性脂肪肝体外模型中研究油酸长期刺激对自噬的影响及其作用.方法 用含浓度为400 μmol/L油酸的DMEM高糖培养基培养肝癌HepG2细胞,制作体外非酒精性脂肪肝细胞模型.向肝癌HepG2细胞转染GFP-LC3质粒,通过观察LC3Ⅱ绿色荧光斑点确定自噬的发生.采用PI3k抑制剂LY294002抑制自噬.用...     

棕榈酸对肝细胞自噬和凋亡的影响

目的:探究棕榈酸对肝细胞内自噬和凋亡途径的影响。方法:不同浓度棕榈酸处理肝细胞并检测自噬相关蛋白的改变; CCK-8法检测不同浓度棕榈酸对肝细胞活性的影响;棕榈酸培养细胞不同时间,观察细胞数量和形态的改变;棕榈酸培养细胞8 h后用DAPI染色观察细胞核形态。结果:棕榈酸使自噬相关蛋白表达增加,但并不表现为剂量依赖性;随着棕榈酸浓度的增加,细胞活力下降;随着棕榈酸作用时间的增加,细胞数量减少;和对照组相比,棕榈酸处理组细胞核致密浓染。结论:棕榈酸能够引起肝细胞凋亡,细胞活力下降,同时通过Erk1/2通路引起肝细胞自噬增强。     

熊果酸通过AMPK介导的信号通路激活自噬改善油酸诱导的肝细胞脂肪沉积

[目的]揭示熊果酸改善油酸诱导的肝细胞脂质沉积的作用及其潜在分子机制。[方法] 采用油酸诱导HepG2肝细胞建立脂质沉积模型,给予不同浓度熊果酸(10、20、40μmol·L-1)进行干预,采用酶法检测细胞内甘油三酯含量,Bodipy染色法观察胞内的脂滴,Western blot检测抗微管相关蛋白1轻链3B(microtubule-associated protein 1 light chain 3B,LC3B)蛋白表达及腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)磷酸化水平。[结果] 0.5mmol·L-1油酸干预肝细胞16h可建立肝脂质沉积体外模型;不同浓度熊果酸干预16h可以显著减轻油酸导致的肝细胞脂质沉积(P＜0.05,P＜0.01),且保护作用呈剂量依赖关系。自噬激动剂雷帕霉素可显著降低油酸诱导后肝细胞甘油三酯含量,并抑制胞内脂滴的形成(P＜0.05);而自噬抑制剂氯喹显著加重油酸诱导的肝脂质沉积(P＜0.05)。熊果酸干预可显著上调肝细胞内LC3B的表达(P＜0.05,P＜0.01),从而激活自噬,而抑制自噬可显著阻断熊果酸对肝脂质沉积的减轻作用。熊果酸还可显著激活自噬调控开关AMPK的磷酸化水平(P＜0.05)。[结论] 熊果酸通过激活自噬改善油酸诱导的肝细胞脂质沉积,AMPK可能是熊果酸激活自噬的潜在分子靶点。     

原代肝细胞脂肪变性细胞模型的构建

目的 为非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)发病机制和防治研究提供可靠的原代肝细胞脂肪变性细胞模型。方法 采用Seglen两步灌流法及其改良方法分离获取小鼠原代肝细胞,体外培养48 h后,给予不同浓度的游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)混合物(油酸∶棕榈酸=2∶1)诱导24 h,采用油红O染色,观察肝细胞内脂滴沉积情况,全自动生化分析仪测定细胞内三酰甘油(TG)含量。结果 与对照组相比,模型组肝细胞内出现红色脂滴沉积,且与加入的FFA混合物浓度呈剂量依赖性;模型组肝细胞内TG含量明显高于对照组(P<0.05),且随着加入的FFA浓度升高而增加,提示肝细胞内脂质沉积随着加入的FFA浓度升高而增加。结论 成功构建了原代肝细胞脂肪变性细胞模型,为NAFLD的研究提供了可靠的细胞模型。     

FGF21通过SOCS3/JAK/STAT通路调控肝细胞脂质代谢研究

目的 通过敲减细胞内成纤维细胞生长因子21(fibroblast growth factors 21,FGF21)的表达,观察其对肝细胞脂质代谢的影响,并探讨FGF21调控肝细胞脂质代谢的分子机制。方法 通过FGF21干扰慢病毒转染HepG2细胞,降低FGF21的表达,以空载体转染HepG2细胞作为对照,分为干扰组和对照组。两组均以棕榈酸油酸刺激构建非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)细胞模型。采用油红O染色法观察肝细胞内脂质沉积情况,测定分光光度值,计算脂质含量;利用蛋白质印迹(Western blot)法检测肝细胞中SOCS3、JAK2、STAT3蛋白的变化。结果 油红O染色及吸光度值显示,与对照组相比,干扰组肝细胞内脂滴含量显著减少;Western blot结果表明,干扰组肝细胞内细胞因子信号转导抑制因子3(suppressor of cytokine signaling 3,SOCS3)、Janus激酶2(Janus kinase 2,JAK2)、信号转导和转录活化因子3(signal transducer and...     

过表达apoA-Ⅰ对BEL-7402细胞内脂质堆积的影响

目的通过建立过表达载脂蛋白A-Ⅰ(apolipoprotein A-Ⅰ,apoA-Ⅰ)的细胞模型,用不同浓度及不同类型的脂肪酸作用于细胞,检测过表达apoA-Ⅰ与正常细胞内脂质水平,来研究利用过表达apoA-Ⅰ促进ATP结合盒转运子A1(ATP-bindingcassette transporter A1,ABCA1)介导的脂质转运途径,降低脂质合成,进而影响非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)细胞的脂质堆积的分子机制,探索一种新方法,通过apoA-Ⅰ/ABCA1这一途径改变细胞内脂质代谢来预防NASH。方法①通过不同浓度和类型的脂肪酸处理人肝癌细胞系BEL-7402细胞,作用6、12、24 h后,经油红O染色,检测不同时间脂质在细胞内的定位,从而确定出适合的脂肪酸浓度及作用时间;②通过MTT法检测不同浓度及类型的脂肪酸作用细胞6、12、24 h后,细胞活性的变化情况;③分别转染空载体质粒pcDNA 3.0与质粒pcDNA3.0/apoA-Ⅰ,通过Western blotting的实验方法,检测细胞内、外apoA-Ⅰ的表达情况;④对正常或过表达apoA-Ⅰ的BEL-7402细胞模型,以最适的实验条件作用于正常(对照组)和过表达apoA-Ⅰ(实验组)的BEL-7402细胞,检测细胞内胆固醇、游离脂肪酸以及三酰甘油的含量。结果①200μmol/L或400μmol/L浓度脂肪酸作用6、12及24 h均可使脂质在BEL-7402细胞胞质中堆积,脂质的产生对脂肪酸呈剂量和时间依赖性;②饱和脂肪酸棕榈酸使细胞活性降低,且对细胞生长的抑制作用随棕榈酸的浓度及作用时间的增加而加强;③apoA-Ⅰ过表达于BEL-7402细胞内,且apoA-Ⅰ可以释放到细胞外,协助ABCA1转运胆固醇;④与正常的BEL-7402细胞相比,过表达apoA-Ⅰ组细胞内的三酰甘油、游离脂肪酸以及胆固醇均有显著减少。结论与正常组相比,过表达apoA-Ⅰ可以减少胆固醇、游离脂肪酸及三酰甘油在人肝细胞内的聚积,从而对于NASH的防治具有治疗作用。     

胡柚皮黄酮诱导自噬抑制肝细胞脂肪变性的作用研究

目的 观察胡柚皮黄酮对棕榈酸诱导的肝细胞脂肪变性的影响。方法 棕榈酸诱导HepG2细胞脂肪变性，不同浓度胡柚皮黄酮干预后，采用油红O染色法观察肝细胞脂肪变性；荧光探针法观测细胞内活性氧水平及线粒体膜电位变化；免疫印迹法检测Beclin-1、LC3及P62蛋白表达。结果 棕榈酸诱导后，HepG2细胞内脂滴和活性氧含量明显增高；胡柚皮黄酮处理后，细胞内脂滴和活性氧均明显降低，线粒体膜电位恢复，LC3和Beclin-1蛋白表达上调，P62蛋白表达下调。结论 胡柚皮黄酮能改善肝细胞脂肪变性和氧化应激反应，机制可能与其调控线粒体自噬，维持线粒体功能稳定有关。     

不同膳食脂肪酸对肝细胞SREBP-1c表达及脂代谢的影响

目的探讨不同膳食脂肪酸构成对肝细胞脂代谢及固醇调节元件结合蛋白-1c(sterol-regulatory elementarybinding protein-1c,SREBP-1c)表达的影响。方法以HepG2肝细胞为研究对象,分为空白对照组、二十碳五烯酸(EPA)组、棕榈酸(PA)组、EPA和亚油酸(LA)1∶1混合组、PA和油酸(OA)1∶1混合组,EPA、PA单独处理组终浓度为150μmol/L,混合处理组各组分浓度为75μmol/L,总浓度为150μmol/L,处理细胞24 h。采用油红O染色观察细胞内脂滴的变化,测定甘油三酯(TG)含量来评价细胞内脂质含量;采用RT-PCR、Western blot法检测SREBP-1c mRNA及蛋白的表达。结果 PA组、PA和OA 1∶1混合组SREBP-1c mRNA及蛋白的表达上调,EPA和LA 1∶1混合组、EPA组SREBP-1c mRNA及蛋白的表达下调,与对照组相比差异显著(P<0.05)。与对照组相比,EPA和LA 1∶1混合组、EPA组肝细胞内TG含量显著减少(P<0.05);PA和OA 1∶1混合组、PA组肝细胞内TG含量显著增加(P<0.05)。结论 PA、OA上调肝细胞SREBP-1c的表达并促进细胞内TG的合成,可能促进肝细胞脂肪变性;而EPA、LA下调肝细胞SREBP-1c的表达并显著降低肝细胞内TG含量,减轻肝细胞脂肪变性。     

二甲双胍对非酒精性脂肪性肝病细胞模型内质网应激与自噬的影响

目的观察二甲双胍对游离脂肪酸(FFA)诱导的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)HepG2细胞模型内质网应激(ERS)及自噬的影响。方法 2020年7—11月于武汉大学人民医院消化系统疾病湖北省重点实验室进行实验。分别用0(空白对照)、10、20、40、80 mmol/L的二甲双胍处理HepG2细胞24 h,评估二甲双胍对细胞活力的影响。取对数生长期HepG细胞分为对照组(BSA组)、模型组(FFA组)、二甲双胍低浓度组(Met L组)、二甲双胍高浓度组(Met H组)4组,FFA、Met L、Met H组利用FFA处理HepG2细胞24 h建造NAFLD细胞模型,Met L、Met H组分别加入1 mmol/L和10 mmol/L二甲双胍干预其过程。Western-blot法分别检测HepG2细胞ERS相关蛋白磷酸化PERK(p-PERK)、ATF4及自噬相关蛋白p62、LC3表达水平的变化,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测ATF4 mRNA表达。结果二甲双胍可剂量依赖性地降低HepG2细胞活力(F/P=1 759.000/0.000)。与BSA组比较,FFA组内p-PERK、p62、ATF4蛋白和mRNA表达水平增高(t/P=3.273/0.029、16.190/0.000、47.290/0.000、13.730/0.000),LC3Ⅱ/Ⅰ比值下降(t/P=17.980/0.000);与FFA组比较,Met L组和Met H组p-PERK、p62、ATF4蛋白和mRNA表达水平降低(F/P=70.310/0.000、106.700/0.000、995.600/0.000、66.960/0.000),LC3Ⅱ/Ⅰ比值升高(F/P=166.400/0.000),且与Met L组比较,Met H组上述指标变化更明显(P<0.05),但p62水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论二甲双胍可降低FFA诱导的NAFLD细胞模型ERS水平并提高细胞自噬水平。     

TSPAN8参与小鼠非酒精性脂肪性肝病的脂质代谢

目的 探讨四跨膜蛋白8（TSPAN8）在非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）发生发展中的变化及其在脂质代谢中的作用。方法 将30只C57BL/6J 雄性小鼠随机分为普通饲料组（ND,n=15）和高脂饲料组（HFD,n=15）。Western blot检测1、3、6月末各组小鼠肝脏组织中TSPAN8的表达水平。HepG2细胞分成6组：完全培养基培养,无其他处理的命名为对照组（CON）;游离脂肪酸（FFA）处理以构建NAFLD细胞模型的命名为FFA组;TSPAN8过表达细胞命名为PCDNA-TSPAN8组,其对照为PCDNA3.1 组;FFA处理后的PCDNA-TSPAN8命名为PCDNA-TSPAN8+FFA组,其对照为PCDNA3.1+FFA组;qRT-PCR及Western blot检测CON组和FFA组细胞中TSPAN8表达水平;油红O染色法和全自动生化仪检测PCDNA-TSPAN8+FFA和PCDNA3.1+FFA组细胞内脂质蓄积情况。qRT-PCR检测与脂质代谢相关基因mRNA的表达情况。结果 Western blot显示,与同喂养时间ND组相比,HFD喂养3、6月的小鼠肝组织中TSPAN8的表达下降（P<0.05）。qRT-PCR与Western blot显示,与CON组比较,TSPAN8在FFA组中的表达下降（P<0.01）。与PCDNA3.1+FFA组相比,PCDNA-TSPAN8+FFA组中细胞内甘油三酯（TG）水平下降（P<0.001）。qRT-PCR示,与PCDNA3.1组比较,脂肪酸转运蛋白 5（FATP5）在PCDNA-TSPAN8组中表达降低（P<0.01）,与CON组相比,FATP5在FFA组表达上调（P<0.001）。结论 TSPAN8参与NAFLD的脂质代谢,细胞过表达TSPAN8可能通过降低FATP5的表达来抑制细胞内脂质的沉积,可能具有潜在的临床价值。     

Caprylic Acid Improves Lipid Metabolism,Suppresses the Inflammatory Response and Activates the ABCA1/p-JAK2/p-STAT3 Signaling Pathway in C57BL/6J Mice and RAW264.7 Cells

Objective This study aimed to investigate the effects of caprylic acid(C8:0) on lipid metabolism and inflammation, and examine the mechanisms underlying these effects in mice and cells.Methods Fifty-six 6-week-old male C57 BL/6 J mice were randomly allocated to four groups fed a highfat diet(HFD) without or with 2% C8:0, palmitic acid(C16:0) or eicosapentaenoic acid(EPA). RAW246.7 cells were randomly divided into five groups: normal, lipopolysaccharide(LPS), LPS+C8:0, LPS+EPA and LPS+cAMP. The s...     

短链脂肪酸对HepG2细胞脂质堆积模型脂质代谢的影响

目的:揭示肠道菌群产物短链脂肪酸(Short-chain fatty acids, SCFAs)对HepG2细胞脂质堆积模型脂质代谢的影响。方法:通过油红O染色法观察油酸钠建立的HepG2细胞脂质堆积模型,使用不同浓度的SCFAs(乙酸、丙酸、正丁酸)干预HepG2细胞脂质堆积模型,MTT法检测HepG2细胞存活率;TC、TG试剂盒检测HepG2细胞脂质堆积模型中TC、TG含量;Western blot检测HepG2细胞AMPK、p-AMPK、ACC和p-ACC等蛋白的表达量。结果:随着三种SCFAs浓度的升高,HepG2细胞活性逐渐降低(P<0.05);SCFAs干预HepG2细胞脂质堆积模型后TC、TG含量降低(P<0.05),并抑制脂质堆积模型组细胞内AMPK、ACC的磷酸化表达。结论:SCFAs对HepG2细胞活性、HepG2细胞脂质堆积模型脂质代谢以及蛋白表达均有影响,不同浓度不同种类的SCFAs干预结果有差异。