Wnt拮抗因子SFRP2在胃癌中的甲基化和异常表达

目的： 检测Wnt拮抗因子分泌型Frizzled相关蛋白2（SFRP2）在胃癌中的甲基化和表达状态,探讨SFRP2在胃癌发病机制中的作用。方法：采用甲基化特异性PCR（MSP）检测SFRP2在胃癌中的甲基化状态,采用即时定量PCR检测SFRP2在胃癌组织标本及其癌旁正常组织中的表达。采用逆转录PCR（RT-PCR）和Western blotting检测SFRP2在胃癌细胞系中的表达。结果：在胃癌组织中,有26例（65%）检出SFRP2甲基化,在其相应的癌旁组织中,有3例（7.5％）检出SFRP2甲基化。SFRP2在胃癌组织中的甲基化频率显著高于癌旁正常组织（χ2＝28.614,P<0.01）。SFRP2 mRNA在胃癌组织中表达显著低于癌旁正常组织（P<0.01）。在胃癌细胞系SGC-7901、AGS 和NCI-N87中,SFRP2在AGS和NCI-N87发生甲基化,表达消失,而在SGC-7901中未发生甲基化,存在表达。使用去甲基化试剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷酸（DAC）处理AGS和NCI-N87后,SFRP2重新出现表达。结论：SFRP2在胃癌中存在表达下调,其主要由SFRP2发生甲基化所致。结果提示,SFRP2甲基化及表达下调参与了部分胃癌的发病过程。     

人表皮生长因子受体显性负性突变体诱导胃癌细胞发生G0/G1期阻滞

 目的：探讨人表皮生长因子受体显性负性突变体（dominant negative epidermal growth factor receptor,DNEGFR）对胃癌细胞细胞周期的影响及其分子机制。方法：选用2株人胃癌细胞,分为如下6组：SGC-7901细胞未转染组（US组）、SGC-7901细胞pEGFP-N1质粒转染组(ES组)、SGC-7901细胞pEGFPN1-DNEGFR质粒转染组(DS组)、NCI-N87细胞未转染组（UN组)、NCI-N87细胞pEGFP-N1质粒转染组(EN组)和NCI-N87细胞pEGFPN1-DNEGFR质粒转染组(DN组)。采用流式细胞术检测细胞周期,Western blotting检测细胞周期素依赖性蛋白激酶2（CDK2）、cyclin D1、Ser9位点磷酸化糖原合成酶激酶3β［p-GSK-3β(Ser9)］、p21和p27蛋白水平。结果：转染pEGFPN1-DNEGFR质粒的人胃癌细胞株出现G0/G1期阻滞,CDK2、cyclin D1和p-GSK-3β（Ser9）蛋白水平降低,p21和p27蛋白水平则升高。结论：DNEGFR通过激活GSK-3β使cyclin D1蛋白水平降低,并降低CDK2蛋白水平,上调p21和p27蛋白水平,最终导致胃癌细胞发生G0/G1期阻滞。这一结果将为胃癌生物治疗研究提供新思路。     

Snai2在人胃癌细胞系中的差异表达及生物学意义

目的 分析Snai2在人胃癌细胞系中的差异表达与胃癌细胞分化的关系，以探讨Snai2在肿瘤发生发展中的作用。方法培养7株胃癌细胞系，TRIzol法抽提总RNA，逆转录后用RT—PCR和实时荧光定量PCR检测Snai2mRNA在胃癌细胞系中的表达，提取蛋白，用Westernblotting测定不同细胞系Snai2蛋白的表达。结果Snai2mRNA在中低分化、致瘤性强的细胞系BGC823、SGC7901、MGC803、PAMC82、MKN45内呈高表达；在高分化，致瘤性弱的细胞系内N87呈低表达，在AGS几乎不表达。结论Snai2mRNA的表达与胃癌细胞的分化与致瘤性强弱有关，可以作为一个判断肿瘤分化程度和预后的分子标志。     

miR-4500靶向STAT3调节免疫抑制基因PD-L1及对胃癌细胞生物学行为的影响

目的：分析微小RNA(miR)-4500靶向STAT3调节程序性死亡受体-配体1(PD-L1)及对胃癌细胞生物学行为的影响。方法：RT-qPCR检测胃黏膜细胞和胃癌NCI-N87细胞中miR-4500水平。双荧光素酶报告实验验证miR-4500和STAT3的靶向关系。将NCI-N87细胞分为NC组、miR-4500组、STAT3组和miR-4500+STAT3组，根据组别转染miR-4500 mimic或STAT3过表达质粒。CCK-8法、划痕愈合和Transwell实验检测细胞增殖活力、迁移和侵袭能力。Western blot检测STAT3和PD-L1蛋白表达量。结果：与胃黏膜细胞相比，胃癌细胞中miR-4500表达显著降低（P<0.05）。双荧光素酶报告证实NCI-N87细胞中miR-4500靶向STAT3。与NC组比较，miR-4500组细胞STAT3 mRNA和蛋白表达水平、OD值、划痕前缘迁移距离百分比（26.79±1.56）%、侵袭细胞数（85.17±2.19）和PD-L1蛋白表达水平显著降低，而STAT3组的上述指标均升高。miR-4500+STAT3组STAT3 ...     

胃癌不同转移能力细胞系的2-DE图谱及差异分析

目的建立胃癌低转移能力细胞系RF1和高转移能力细胞系RF48的2DE图谱,并分离胃癌转移相关蛋白质。方法利用固相pH梯度技术(immobilizedpHgradient,IPG)双向凝胶电泳(twodimensioanlpolyacrylamidegelelectrophoresis,2DE)建立胃癌低转移能力细胞系RF1和高转移能力细胞系RF48二维电泳图谱;采用图像分析软件进行比较分析,识别差异表达的蛋白质,分离胃癌转移相关蛋白质。再利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDITOFMS)及数据库查询,对部分差异表达蛋白质点进行鉴定。结果建立胃癌低转移能力细胞系RF1和胃癌高转移能力细胞系RF48双向凝胶电泳图谱;三块凝胶的平均蛋白质点数分别为960±92和978±83,平均匹配的点数分别为780±69和769±53,匹配率达87%和86.3%;对25个差异蛋白质点进行肽质指纹图分析,鉴定出与瘤基因、细胞周期调控和信号转导有关的蛋白质。结论建立分辨率高且重复性较好的人胃癌低转移能力细胞系RF1和胃癌高转移能力细胞系RF48的双向凝胶电泳图谱,可以识别和鉴定出一些与胃癌转移相关的差异表达蛋白质。     

外源性HER2基因导入未能提高HER2阴性胃癌细胞系对曲妥珠单抗的敏感性

目的探索外源性人表皮生长因子受体2(HER2)基因导入使HER2阴性胃癌细胞系对曲妥珠单抗敏感性的影响。方法构建人HER2真核表达载体,转染人HER2阴性胃癌细胞系(HGC-27和MGC803)及正常胃上皮细胞GES1(作为对照),细胞免疫荧光与蛋白印迹(Western blot,WB)检测HER2表达及下游信号通路变化,CCK-8法检测细胞增殖活性。结果 HER2阴性胃癌细胞及正常细胞导入外源性HER2后,HER2蛋白表达明显上调,但磷酸化HER2(pHER2)表达无变化。外源性HER2基因导入后,HER2阴性细胞对曲妥珠单抗的敏感性无增加,甚至有下降趋势。此外,外源性HER2基因导入后,HER2下游PI3K/AKT、MAPK通路不但未激活,反而受到明显抑制。结论外源性HER2基因导入无法使HER2阴性胃癌从曲妥珠单抗治疗中获益,主要原因可能是外源性HER2基因无法使其下游PI3K/AKT、MAPK通路激活,外源性和内源性HER2发挥的作用可能不同,有待后续深入研究。     

HER2高表达胃癌细胞中miR-4728-3p表达及生物信息学分析

目的 探讨HER2高表达的胃癌细胞中miR-4728-3p表达状况及其调控靶基因所涉及的信号通路,旨在初步分析miR-4728-3p在胃癌中的作用机制及其与HER2的相关性.方法 首先采用Real-time PCR技术检测胃癌细胞株NCI-N87中miR-4728-3p及HER2 mRNA,然后通过miRanda、DIANA-microT、Targetscan和Targetmine软件预测miR-4728可能的靶基因,并通过DAVID数据库进行靶基因功能富集分析及信号转导通路富集分析.结果 miR-4728-3p及HER2 mRNA在胃癌细胞中均高表达,二者呈正相关(r=0.990,P=0.000).miR-4728-3p预测靶基因共有54个,靶基因功能主要富集于转录活性调节(P=0.014)、DNA结合(P=0.019)及蛋白质磷酸化氨基酸结合(P=0.036)等分子功能,RNA聚合酶Ⅱ启动子的转录调控(P=0.001)、转录调控(P=0.003)及细胞内信号级联(P=0.021)等生物学过程以及轴突部分(P=0.008)等细胞组分上;信号转导通路则主要富集于肿瘤通路(P=0.013)和卵母细胞减数分裂通路(P=0.041).结论 miR-4728-3p在HER2高表达的胃癌细胞中表达上调,二者表达呈正相关;生物信息学分析提示miR-4728-3p通过调控其靶基因参与胃癌的发生发展.     

转染胃动蛋白2基因抑制人胃癌细胞系MKN28增殖、迁移和侵袭

目的检测胃癌、癌旁组织和胃癌远端胃黏膜组织中胃动蛋白2(GKN2)的表达;分析GKN2转染人胃癌MKN28细胞系后对增殖、迁移和侵袭的影响。方法免疫组织化学技术检测胃癌、癌旁组织和胃癌远端胃黏膜中GKN2蛋白的表达;将GKN2基因真核表达载体(Xhol_GKN3SP-h GKN2-TEV-SBP_Xhol)转入人胃癌MKN28细胞,经G418筛选后获得稳转细胞株,Western blot确定GKN2在MKN28细胞中表达;MTT法测定MKN28细胞增殖;Transwell迁移实验和侵袭实验检测细胞迁移和侵袭。结果 GKN2在胃癌组织中的表达少于胃癌远端胃黏膜和癌旁胃组织(P<0.05)。GKN2转染人胃癌MKN28细胞后吸光度值(A值)显著低于未转染组和空载体组(P<0.05)。与未转染组及空载体组相比,GKN2过表达致使迁移细胞数(P<0.05)和侵袭细胞数均明显下调(P<0.05)。结论 GKN2表达减低与胃癌的发生有关;GKN2过表达显然可阻抑人胃癌MKN28细胞的增殖、迁移和侵袭。     

人ArgBP2基因真核表达载体的构建及其在胃癌细胞的表达

目的人ArgBP2基因真核表达载体的构建及其在胃癌细胞系中的表达。方法从人胃癌细胞系SCG7901中提取RNA,反转录为cDNA,并以此为模板,扩增ArgBP2的全长编码基因,并构建到真核表达载体pcDNA3.1/HisC中,同时应用Western blot方法检测其表达,然后利用RT-PCR方法检测在各种胃癌细胞系内源性ArgBP2的表达。结果人ArgBP2编码序列已被克隆至pcDNA3.1/HisC表达载体,双酶切鉴定片段大小为1935bp,Western blot验证其表达成功,大小为70kDa,并在RNA水平上检测ArgBP2在胃癌细胞系中的表达。结论成功构建了人ArgBP2基因真核表达载体,在胃癌细胞系表达,为进一步研究ArgBP2的生物学特性及其信号转导通路奠定了基础。     

环状RNA ATP2B1靶向miR-452-5p降低胃癌细胞系的增殖和侵袭

目的 探讨环状RNA circATP2B1对胃癌细胞增殖和侵袭的影响及其可能的分子机制。方法 收集2018年7月至2021年2月福建医科大学附属泉州第一医院胃肠肝胆外科行手术切除并病理学诊断的44例胃癌组织标本及癌旁组织标本。选取4株胃癌细胞系(SGC7901、HS-746T、MGC803、BGC823)和正常胃黏膜上皮细胞系(GES-1)。RT-qPCR检测胃癌组织和细胞系中circATP2B1表达。将circATP2B1表达最低的胃癌细胞分为对照组(转染阴性对照质粒)和实验组(转染circATP2B1过表达质粒)。分别采用MTT法和Transwell小室法检测各组胃癌细胞的增殖活性和侵袭能力。生物信息学和双荧光素酶报告基因实验分析circATP2B1可能的作用机制，RT-qPCR和Western blot检测circATP2B1下游基因的表达。结果 胃癌组织circATP2B1表达量显著低于癌旁组织(0.92±0.08 vs 3.62±0.23,P<0.01)。胃癌细胞系circATP2B1表达量均显著低于GES-1细胞(P<0.01),其中以HS-746T细胞的表达量...     

三七总皂苷抑制胃癌进程的体外研究

目的:探究三七总皂苷对人胃癌细胞系SGC-790、BGC-823及MKN-4的增殖、迁移、侵袭和凋亡等肿瘤生物学行为的影响及可能涉及的机制。方法:通过CCK8方法研究三七皂总苷对胃癌细胞系增殖能力的影响,通过Transwell侵袭实验研究三七总皂苷对胃癌细胞系侵袭能力的影响,通过划痕实验研究三七总皂苷对胃癌细胞系迁移能力的影响,通过流式方法检测三七总皂苷对胃癌细胞系凋亡水平的影响;采用Western blot检测三七总皂苷对胃癌细胞系中Vemintin、SNAIL、MMP2、MMP9、P21、Caspase-3、BAX和β-catenin等蛋白表达水平的影响;采用免疫荧光方法检测三七总皂苷对胃癌细胞系SGC-790中β-catenin的细胞空间分布的影响。结果:CCK8实验结果证实三七总皂苷可以显著抑制胃癌细胞系的增殖能力(P0.05),Transwell侵袭实验证实三七总皂苷可以抑制胃癌细胞系的侵袭能力(P0.05),划痕实验证明三七总皂苷可以抑制胃癌细胞系的迁移能力(P0.05),凋亡实验证实三七总皂苷可以诱导胃癌细胞系凋亡水平增高(P0.05);Western blot方法证实三七总皂苷可以下调Vemintin、SNAIL、MMP2和MMP9的蛋白表达量,并上调P21、Caspase-3和BAX的蛋白水平,可以下调细胞核内β-catenin的蛋白水平(P0.05);免疫荧光结果证实,三七总皂苷可以减少β-catenin的细胞核内荧光强度,改变β-catenin的细胞内空间分布(P0.05)。结论:三七总皂苷可以显著抑制胃癌细胞系的增殖、侵袭、迁移能力,并诱导胃癌细胞系发生凋亡。其机制是三七总皂苷在胃癌细胞内可以抑制WNT/β-catenin通路,其可能是一种治疗胃癌的新药物。     

ATAD2对人胶质瘤细胞系转移及上皮间质转换的影响

目的探讨三磷酸腺苷酶家族蛋白2(ATAD2)对人胶质瘤细胞的影响。方法用real-time PCR及Western blot检测ATAD2在人胶质瘤细胞系U87MG、U251和正常人星形胶质细胞的表达。U87MG和U251分为对照组(control)、脂质体对照组(mock)、ATAD2 siRNA(转染特异性siRNA)和ATAD2 overexpression(过表达ATAD2)4组,MTT法、Transwell实验观察细胞增殖和侵袭迁移。Western blot检测上皮间质转换标志蛋白上皮钙黏素、神经钙黏素和波形蛋白的表达。结果 U87MG和U251细胞ATAD2高表达。与对照相比,ATAD2 siRNA抑制U87MG和U251细胞增殖、侵袭、迁移、神经钙黏素及波形蛋白表达,促进上皮钙黏素表达(P0.05);ATAD2 overexpression促进细胞增殖、侵袭、迁移、神经钙黏素和波形蛋白表达,降低上皮钙黏素表达(P0.05)。结论 ATAD2可能通过调节上皮间充质转换进程参与人胶质瘤细胞转移。     

周脂素和ADRP在糖代谢异常大鼠肝脏组织中的表达

目的:探讨脂滴相关蛋白周脂素(perilipin)和脂肪分化相关蛋白(ADRP)在糖尿病发生发展过程中的变化情况以及在糖代谢异常合并非酒精性脂肪肝中的作用。方法:分别用高脂饲料喂养和高脂饲料喂养加小剂量链脲佐菌素建立糖耐量受损(IGT)和2型糖尿病大鼠模型(T2DM),采用光镜观察各组大鼠肝组织的形态学改变;用ELISA法测定血清周脂素perilipin和ADRP含量;real-time PCR技术检测肝脏组织中perilipin和ADRP mRNA的表达;用Western blotting法检测肝脏组织中ADRP蛋白的表达。结果:HE结果显示,IGT组和T2DM组大鼠均有肝细胞脂肪变性,IGT组变性更严重;各模型组的生化指标与临床相关疾病的表现一致;血清perilipin水平各组之间无差异,但IGT组和T2DM组肝组织perilipin mRNA表达明显升高(P0.01);与IGT组相比,T2DM组perilipin mRNA表达显著增加(P0.05)。T2DM组血清ADRP含量较其对照组明显降低(P0.01);模型组肝组织ADRP mRNA表达明显降低(P0.01);ADRP蛋白表达较其对照组也明显降低(P0.01);与IGT组相比,T2DM组ADRP mRNA表达明显降低(P0.01)。结论:血清ADRP含量在T2DM的形成中起一定的作用,与胰岛素抵抗指数呈明显负相关;高脂喂养后能导致大鼠糖代谢异常,并伴有非酒精性脂肪肝的发生;糖代谢异常合并非酒精性脂肪肝的发生可能与肝组织perilipin表达升高和ADRP表达降低有关。     

胃癌单克隆抗体免疫交联物内化研究

将胃癌单克隆抗体(McAb)MGb2、MG7,MGc1免疫交联物~(125)I-MGb2,MGb2-MTX、MG7-MTX、MGc1-MTX及MGb2-RTA与SGC-7901人胃癌细胞系及临床胃癌实体瘤细胞反应,综合应用胶体金探针、电镜放射自显影等标记方法,对各交联物在上述靶细胞系统中的内化进行了动态示踪定位,重点探讨了交联物中“弹头”内化转运     

高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ在不同分化胃癌细胞和组织中的差异表达及意义

目的: 分析高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ(GMⅡ)在不同分化人胃癌细胞系和胃癌组织中的差异表达,以探讨GMⅡ在胃癌发生发展中的作用。方法: 收集38例胃腺癌及30例癌旁正常胃黏膜组织,体外培养3株不同分化胃癌细胞系(高分化MKN-28、中分化SGC-7901、低分化BGC-823)和永生化正常胃黏膜上皮细胞系(GES-1),分别应用RT-PCR、免疫组化和Western Blotting检测GMⅡmRNA和蛋白的表达。结果: GMⅡ阳性表达定位于胞浆,其在正常胃粘膜组织及高、中、低分化胃癌组织中的阳性表达率分别为53% (16/30)、 63%(5/8)、83%(15/18)和100%(12/12),各组间差异显著(P<0.05)。细胞爬片显示GMⅡ在正常胃黏膜上皮细胞系和高、中、低分化胃癌细胞系中的表达逐渐增强。与正常胃黏膜上皮细胞系GES-1相比,3种胃癌细胞系MKN-28、SGC-7901、BGC-823中GMⅡmRNA及蛋白表达水平显著增加(P<0.05),且GMⅡ在低分化胃癌细胞系BGC-823中表达最高,而在高分化胃癌细胞系MKN-28中表达最低。与正常胃黏膜组织相比,高、中、低分化胃癌组织中GMⅡmRNA及蛋白表达水平亦显著增加(P<0.05),且GMⅡ表达水平在高分化胃癌组织中最低,而在低分化胃癌组织中最高。结论: GMⅡ参与了胃癌的发生和发展, 其表达水平与胃癌低分化程度更密切相关。     

EZH2对胃癌细胞核因子κB靶基因的调节作用

 目的: 探讨zeste同源物增强子2 (EZH2) 蛋白的表达对胃癌细胞的影响以及可能的作用机制。方法: 用real-time PCR 和Western blot实验检测正常胃黏膜上皮细胞和不同胃癌细胞系中EZH2的mRNA和蛋白表达;采用细胞生长、细胞迁移以及软琼脂增殖实验测定EZH2对胃癌细胞系致癌能力的影响;利用萤光素酶报告基因和real-time PCR检测EZH2对核因子κB靶基因的调节作用;用免疫共沉淀法检测EZH2和p65的相互作用。结果: 与正常胃上皮细胞相比,胃癌细胞系中的EZH2过量表达(P<0.05)。EZH2特异性抑制剂腺苷类似物DZNep处理或shEZH2抑制了AGS和SNU-16细胞系的细胞活力。此外,DZNep和shEZH2 抑制了AGS细胞迁移及软琼脂细胞形成的克隆数目(P<0.05)。shEZH2 下调了核因子κB报告基因或白细胞介素8报告基因的活性以及核因子κB靶基因白细胞介素8、趋化因子配体5及趋化因子配体20的表达(P<0.05)。此外,EZH2可以特异性与p65蛋白相互作用。结论: EZH2 通过调节核因子κB靶基因介导胃癌细胞的生长。     

LncRNA SBF2-AS1靶向miR-375对胃癌细胞免疫逃逸及mTOR1信号通路的影响

目的 探究LncRNA SBF2-AS1靶向miR-375对胃癌细胞免疫逃逸及m TOR1信号通路的影响。方法 Real-time PCR法检测正常胃上皮细胞及4种胃癌细胞系中LncRNA SBF2-AS1、miR-375表达水平,取胃癌细胞将其分为胃癌细胞（GC）组、胃癌细胞+LncRNA SBF2-AS1-NC(SN)组、胃癌细胞+LncRNA SBF2-AS1激动剂（SM）组、胃癌细胞+LncRNA SBF2-AS1抑制剂（SI）组、胃癌细胞+miR-375-NC(MN)组、胃癌细胞+miR-375抑制剂（MI）组、胃癌细胞+miR-375激动剂（MM）组、胃癌细胞+LncRNA SBF2-AS1抑制剂+miR-375激动剂（IM）组,免疫印迹法检测免疫逃逸相关因子及mTOR1信号通路蛋白表达,双荧光素酶报告实验证实LncRNA SBF2-AS1和miR-375的相互作用。结果 胃癌细胞系中的LncRNA SBF2-AS1 mRNA表达量显著高于正常胃上皮细胞系NGEC(P<0.05),miR-375 mRNA表达量显著低于正常胃上皮细胞系NGEC(P<0.05)其中...     

NDRG2和Bcl-2在胃癌组织中的表达及意义

目的分析N-myc下游调节基因2(NDRG2)、B细胞淋巴瘤分子2(Bcl-2)在人胃癌组织中的表达情况并初步探讨二者间的关系及临床意义。方法采用免疫组织化学检测NDRG2和Bcl-2在胃癌组织、癌旁组织及胃正常组织中的表达,并分析胃癌组织中二者的表达相关性及与临床病理资料间的关系。结果在组织芯片中,胃癌组织NDRG2的阳性表达率低于正常组织,Bcl-2的阳性表达率高于正常组织,二者且呈负相关。在206例胃癌组织及癌旁组织中NDRG2和Bcl-2表达与组织芯片结果相似,并发现NDRG2和Bcl-2在胃癌组织中的表达阳性率与年龄、性别无关,而与肿瘤分化程度、临床分期、淋巴结有无转移相关。结论在胃癌组织中NDRG2表达缺失而Bcl-2表达增加、二者呈显著负相关,提示二者可能协同参与胃癌的发生发展。     

亚硒酸钠通过线粒体途径诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡的机制

目的通过检测亚硒酸钠诱导人胃癌SGC-7901细胞系凋亡过程中Bax/Bcl-2、线粒体膜电位和细胞色素C(Cyt C)表达的变化,探讨亚硒酸钠诱导胃癌细胞凋亡的作用机制。方法将人胃癌细胞系SGC-7901细胞加入不同浓度亚硒酸钠(2.5、5.0、10.0mol/L)的培养液中培养24h、48h,免疫细胞化学法和免疫印迹法(Western blotting)检测Bax/Bcl-2蛋白的表达;以罗丹明123(rhodamine123)为细胞染色剂,采用流式细胞技术检测细胞的线粒体膜电位的变化;Western blotting检测细胞质Cyt C和线粒体Cyt C蛋白含量的变化。结果免疫细胞化学法和Western blotting检测结果显示,亚硒酸钠能够能够提高Bax蛋白的表达(P0.05)、降低Bcl-2蛋白的表达(P0.05),且呈剂量依懒性;流式细胞术结果显示,亚硒酸钠能够降低细胞线粒体膜电位;提示:亚硒酸钠可以通过改变Bax、Bcl-2蛋白的含量,降低线粒体的膜电位来诱导细胞凋亡。Western blotting检测结果显示,亚硒酸钠能够提高细胞质Cyt C蛋白的表达(P0.05)并降低线粒体内Cyt C蛋白的表达(P0.05),促使线粒体内的Cyt C向细胞质内释放。结论亚硒酸钠通过上调Bax并下调Bcl-2蛋白表达,降低线粒体膜电位,促进Cyt C从线粒体释放到细胞质,通过线粒体途径诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡。     

乙酰辅酶A羧化酶1对胶质瘤细胞系U87细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的 探讨乙酰辅酶A羧化酶1（ACC1）对人胶质瘤细胞系U87细胞增殖、迁移及侵袭的作用。 方法 Western blotting检测人胶质瘤细胞系U87、U251及U373中ACC1的表达;构建ACC1过表达质粒载体,将过表达ACC1质粒载体瞬时转染至U87细胞中;Western blotting检测转染后U87细胞中ACC1表达情况;MTT实验检测过表达ACC1对U87细胞增殖的影响;Transwell迁移和侵袭实验分别检测过表达ACC1对U87细胞迁移和侵袭的影响;划痕实验检测过表达ACC1对U87细胞划痕愈合能力的影响;Western blotting检测相关蛋白表达变化。 结果 与人胶质瘤细胞系U251和U373相比,U87细胞中ACC1表达较低;ACC1过表达抑制U87细胞增殖（P<0.01）;ACC1过表达抑制U87细胞迁移、侵袭和划痕愈合能力（P<0.01）;ACC1过表达迁移和侵袭相关蛋白波形蛋白(vimentin)、纤维连接蛋白(fibronectin)和尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)表达下调（P<0.01）,凋亡抑制蛋白Bcl-2和细胞周期蛋白(cyclin) B、cyclin D表达下调（P<0.01）,p-STAT3蛋白表达下调（P<0.01）,细胞周期蛋白P21表达上调（P<0.01）。 结论 过表达ACC1可能通过抑制STAT3活性,抑制人胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。