脂肪组织炎性反应的研究进展

本文探讨了与脂肪组织炎性反应相关的脂质介质,促炎介质:环氧合酶衍生的二十烷类化合物(如前列腺素);促炎性反应消退介质:由ω-6-多不饱和脂肪酸产生的脂氧素,以及由ω-3-多不饱和脂肪酸产生的消退素等。炎性反应的治疗不应局限于急性级联拮抗剂或抑制剂的使用,而应扩大到考虑炎性反应消退阶段诱导剂或激动剂的巨大治疗潜力。     

谷氨酰胺对高脂饮食诱导C57BL/6J小鼠肥胖和胰岛素抵抗的影响

目的:探讨谷氨酰胺(L-glutamine,Gln)对高脂饮食(high-fat diet,HFD)诱导小鼠肥胖和胰岛素抵抗的影响。方法:60只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常对照(normal control,NC)组、HFD组、HFD+丙氨酸(Lalanine,Ala)组和HFD+Gln组,每组15只。每周记录小鼠体重,给药16周后禁食不禁水12 h测定空腹血糖(fasting blood glucose,FBG),处死后剖腹取附睾脂肪垫并称重。采用酶联免疫法检测小鼠胰岛素(insulin,INS)、瘦素(leptin,LEP)、脂联素(adiponectin,APN)和胰高血糖素样肽1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)的水平,并计算胰岛素抵抗指数(insulin resistance index,IRI)和胰岛素敏感指数(insulin sensitivity index,ISI)。结果:与NC组比较,HFD组小鼠体重和附睾脂肪垫重量明显升高,FBG、INS、IRI和LEP水平均明显升高,ISI和APN水平明显降低(P0.05);与HFD组比较,HFD+Gln组小鼠体重明显下降,FBG和LEP水平明显降低,IRI明显减小(P0.05)。4组小鼠血清的GLP-1水平差异无统计学显著性。结论:谷氨酰胺减轻高脂饮食诱导的肥胖小鼠体重和胰岛素抵抗。     

奥贝胆酸对高脂喂养的C57BL/6J小鼠糖脂稳态的影响

目的 研究奥贝胆酸(OCA)对高脂喂养C57BL/6J小鼠糖脂代谢的影响。方法 给C57BL/6J小鼠喂高脂饮食(HFD)12周后,将其随机分为模型组(model)和OCA干预组(10 mg/kg,连续灌胃6周),每组10只。喂12周正常饲料的C57BL/6J小鼠作为对照组(control),模型组和对照组灌胃给予0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)。实验期间开展口服葡萄糖耐量和胰岛素耐量实验。实验结束后,测定血清中肝功能相关指标,记录肝脏质量,测定肝脏中脂质相关指标,并对肝脏进行苏木精-伊红(HE)染色;RT-qPCR检测肝脏中脂质代谢相关基因表达。结果 糖负荷和注射胰岛素后,模型组各个时间点血糖和曲线下面积(AUC)明显高于对照组(P<0.01),OCA干预组能缓解模型组小鼠糖耐量异常(P<0.05),提高胰岛素敏感性(P<0.05);模型组血清中三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)、低密度脂蛋白总胆固醇(LDL-C)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平明显高于对照组(P<0.01),高密度脂蛋白总胆固醇(HD...     

podocin和nephrin在高脂饮食C57BL/6J幼鼠肾小球中的表达及意义

目的探讨高脂饮食对幼鼠肾小球裂孔膜蛋白podocin和nephrin表达的影响及意义。方法 36只3周龄雄性C57BL/6J幼鼠随机分为正常饮食组和高脂饮食组,分别给予标准饲料与高脂饲料喂养12周。通过HE和PAS染色观察小鼠肾小球结构的变化;通过免疫组化和免疫印迹技术检测podocin和nephrin蛋白在小鼠肾小球中的表达变化。结果高脂饮食组小鼠出现了肾小囊狭窄以及系膜基质轻度增生等病理改变,且高脂饮食组小鼠肾小球中podocin和nephrin蛋白的表达水平较正常饮食组均显著下调。结论高脂饮食导致裂孔膜蛋白podocin和nephrin低表达,可能是诱发肾小球损伤的原因之一。     

FAT/CD36在高脂喂养小鼠脂肪组织炎症中的作用

目的:探讨脂肪酸转运酶/白细胞分化抗原36(fattyacidtranslocase/CD36,FAT/CD36)在高脂饮食诱导的小鼠脂肪组织炎症中的作用。方法:将6周龄雄性C57BL/6J小鼠分别随机分为普通饮食组和高脂饮食组,喂养14周后,ELISA测定血清游离脂肪酸(FFA)含量,应用荧光实时定量PCR和Westernblotting检测脂肪组织中FAT/CD36及炎症/趋化因子(IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1、MIP-1)mRNA和蛋白的表达,免疫组织化学染色检测脂肪组织巨噬细胞浸润,比较高脂喂养14周的野生型小鼠和CD36基因敲除小鼠的脂肪组织炎症反应情况。结果:与普通饮食组相比,高脂饮食能增强C57BL/6J小鼠脂肪组织的FAT/CD36及炎症/趋化因子的表达,促进巨噬细胞在脂肪组织的浸润。与高脂饮食喂养的野生型小鼠相比,CD36基因敲除小鼠的脂肪组织炎症因子、趋化因子表达明显降低,脂肪组织巨噬细胞浸润减少。结论:高脂饮食通过上调脂肪组织FAT/CD36的表达激活了脂肪组织炎症。     

肺炎衣原体对C57BL/6J小鼠腹膜巨噬细胞泡沫化的影响

目的:探讨肺炎衣原体在C57BL/6J小鼠腹膜巨噬细胞泡沫化过程中的作用。方法:将肺炎衣原体与C57BL/6J小鼠腹膜巨噬细胞培养72h后用油红O方法染色观察细胞的形态变化并测定细胞内胆固醇的含量。结果:肺炎衣原体能使C57BL/6J小鼠腹膜巨噬细胞胞浆内脂质颗粒增多,胆固醇酯占总胆固醇的比例增加。结论:肺炎衣原体能促进C57BL/6J小鼠腹膜巨噬细胞泡沫化。     

高脂饮食小鼠脂肪组织来源DC的形态鉴定及表型分析

有报道高脂饮食(high-fat diet, HFD)小鼠脂肪组织中存在促炎症DC,本研究应用FCM、电镜及实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)等对其进行形态鉴定及表型分析。具体为用FCM检测正常饮食(normal diet, ND)及HFD小鼠脂肪组织中CD11c+DC的百分比;利用电镜观察脂肪组织来源的CD11c+DC的形态;应用FCM检测HFD小鼠脂肪组织中的CD11c+DC表面分子如CD40、CD80、CD86、MHCⅠ及MHCⅡ的表达情况,进而对小鼠脂肪组织中CD11c+DC进行表型分析,同时设立脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)组作为对照。结果显示HFD小鼠脂肪组织来源的CD11c+DC形态典型、具有很长的突触、富含线粒体并且胞质中极少看到溶酶体,其百分比明显高于ND组。经LPS刺激4h后,HFD小鼠脂肪组织来源树突状细胞(adipose tissue dendritic cell, ATDC)的表面分子CD40、CD80、CD86、MHCⅠ及MHCⅡ等表达稳定,说明HFD小鼠ATDC是一群表型稳定的DC。以上结果说明与ND小鼠相比,HFD小鼠脂肪组织中存在着一群百分比相对增高、形态典型且表型稳定的DC。     

4,4'-二甲氧基查耳酮改善高脂饲养小鼠的胰岛素敏感性

目的 观察黄酮类药物4,4'-二甲氧基查耳酮(DMC)在高脂饲养的小鼠中胰岛素敏感性的变化,并探讨其作用机制.方法 将高脂喂养的野生型C57/BL 6小鼠分为对照组和实验组每隔1 d按3μg/kg腹腔分别注射药物DMC和溶剂DMSO.每周检测记录两组小鼠进食和体质量,在第6周检测小鼠糖耐量(GTT)、胰岛素耐量(ITT...     

高脂饮食诱导肥胖小鼠白色脂肪组织中IL-33的表达及意义

目的:探讨细胞因子IL-33在高脂饮食诱导的肥胖小鼠体内不同类型白色脂肪组织的表达情况.方法:3T3-L1前脂肪细胞诱导分化10 d,ELISA检测细胞培养上清中IL-33的含量;Western blot和RT-PCR检测细胞中IL-33的表达.6～8周的C57BL/6雄性小鼠随机分为两组,高脂组给予60％高脂饲料饲养...     

脂肪组织巨噬细胞与胰岛素抵抗关系的研究进展

脂肪组织除了能够储存能量,还能过度分泌各种细胞因子,促使巨噬细胞大量募集,而募集的巨噬细胞进一步分泌各种炎性因子作用于脂肪细胞,二者互相作用导致慢性炎症发生.肥胖相关的脂肪细胞肥大、慢性炎性状态以及脂肪组织异常分化是导致胰岛素抵抗的重要原因.巨噬细胞大量浸润脂肪组织是脂肪组织慢性炎性反应的重要标志.     

近交系C57BL/6J小鼠的脱毛特征

目的了解近交系C57BL/6J小鼠脱毛的性质和脱毛的特征。方法在各代鼠详细观察记录脱毛出现的时间、状况和缓解情况;利用对照组2对来自不同父母鼠的F1雌雄鼠进行交配实验和回盒饲养实验,观察脱毛和脱毛缓解的特征,在F2小鼠观察脱毛特征的遗传性,对脱毛区域皮肤进行病理分析。结果脱毛(头、颈或背部)多出现在3～6只同养的雌性鼠中(对照组32.4%,实验组16.3%),脱毛-新毛生长的过程交替进行,交配有缓解脱毛的作用并能维持新毛的生长状态,脱毛的特征可以遗传。皮肤病理显示皮肤各层结构、毛囊和毛囊球上皮无明显病理性改变。结论脱毛可能是本品系在特定饲养条件下适应环境压力失败及缺乏生理活动的一种表现,具有经过良性、可缓解、特征可遗传等特点。     

应用环磷酰胺构建C57BL/6J小鼠免疫抑制模型

背景：在免疫增强剂的研究中,常用到免疫抑制模型,如何建立免疫抑制模型成为免疫增强剂作用评价的关键。 目的：应用环磷酰胺构建C57BL/6J小鼠免疫抑制模型。 方法：将小鼠随机分为正常对照组、环磷酰胺50 mg/kg 5 d组,环磷酰胺80 mg/kg 3 d组,环磷酰胺80 mg/kg 5 d组,环磷酰胺100 mg/kg 5 d组和环磷酰胺100 mg/kg隔天给药组。正常对照组小鼠腹腔注射生理盐水0.1 mL,连续5 d。环磷酰胺50 mg/kg 5 d组,环磷酰胺80 mg/kg 3 d组,环磷酰胺80 mg/kg 5 d组和环磷酰胺100 mg/kg 5 d组小鼠分别以环磷酰胺50,80,80,100 mg/kg腹腔注射连续5,3,5,5 d。环磷酰胺100 mg/kg隔天给药组小鼠腹腔注射100 mg/kg环磷酰胺,隔天1次,共注射3次。 结果与结论：与正常对照组比较,腹腔注射环磷酰胺可导致小鼠外周血中CD3⁺T,CD3⁺CD4⁺T及CD3⁺CD8⁺T细胞明显下降(P < 0. 05);谷丙转氨酶(除环磷酰胺50 mg/kg 5 d、80 mg/kg 3 d组)、谷草转氨酶、尿素显著升高(P < 0.05),其中环磷酰胺80 mg/kg 5 d组、环磷酰胺100 mg/kg 5 d组和环磷酰胺100 mg/kg隔天给药组对肝肾功能的影响更为明显。提示腹腔注射环磷酰胺可建立CD3⁺T,CD3⁺CD4⁺T及CD3⁺CD8⁺T细胞明显下降的免疫抑制模型,其中以环磷酰胺50 mg/kg 5 d和80 mg/kg 3 d方式对肝肾功能的损伤较小。     

miR-34a对高糖状态下小鼠巨噬细胞系RAW264.7极化及炎性因子分泌的影响

目的 探讨微小RNA-34a(miR-34a)对高糖条件下小鼠巨噬细胞系极化和炎性因子表达的影响。方法 将小鼠巨噬细胞在高糖条件下(25 mmol/L)下培养3至28 d, RT-qPCR检测高糖培养时巨噬细胞中miR-34a表达及M1巨噬细胞标志物(iNOS和MCP-1)和M2巨噬细胞标志物(Arg-1)的基因表达。转染miR-34a模拟物或抑制剂后,ELISA检测炎性相关因子(IL-6、IL-1β和TNF-α)的分泌。Western blot检测miR-34a靶蛋白1型跨膜糖蛋白Notch1的表达。结果 在高糖条件下,巨噬细胞中miR-34a以及M1型巨噬细胞标志物(iNOS和MCP-1)基因表达量逐渐增长。过表达miR-34a后,促炎因子IL-6、IL-1β和TNF-α分泌增加,iNOS和MCP-1基因表达量也明显增加,而沉默miR-34a的表达后,炎性因子(IL-6、IL-1β和TNF-α)分泌及M1型巨噬细胞标记物(iNOS和MCP-1)的表达量降低(P<0.05)。沉默Notch1表达后,miR-34a及IL-6、IL-1β和TNF-α分泌及iNOS和MCP-1表达量...     

C57BL/6J小鼠主要器官的组织学数据库的建立

目的建立C57BL/6J小鼠主要器官的组织学数据库。方法选取C57BL/6J小鼠雌性10只,雄性10只,将其麻醉致死,解剖切取心、肝、脾、肺、肾、胃等45个器官和组织,用10%的中性缓冲福尔马林固定,石蜡切片,常规HE染色,用显微镜观察,图像采集,用计算机对图像进行标注。采用SQLSEVER2000数据库管理系统,C#编程语言,B/S（浏览器/服务器）为系统构架。结果解剖20只C57BL/6J小鼠主要器官和组织,制做了1 589张切片,观察采集了13 578张图片,对1 563张图片进行了标注,建立了容量达7.85 GB的C57BL/6J小鼠主要器官的组织学数据库。结论构建可查询的C57BL/6J小鼠主要器官的形态学数据库,是研究疾病模型小鼠方便快捷的对照图库。     

肺炎衣原体感染致C57BL/6J小鼠内皮功能异常

目的：研究肺炎衣原体感染对C57BL/6J小鼠主动脉内皮依赖舒张反应及动脉粥样硬化形成的影响。方法：32只C57BL/6J小鼠分为肺炎衣原体感染并胆固醇饲料喂养组、胆固醇饲料喂养组、肺炎衣原体感染组和对照组，喂养24周，取主动脉弓标本分析动脉粥样硬化斑块面积，远端胸主动脉作血管舒张功能测定，血样品作血脂、一氧化氮水平及内皮素浓度测定。结果：肺炎衣原体感染并胆固醇饲料喂养组、胆固醇饲料喂养组和肺炎衣原体感染组乙酰胆碱引起的动脉平均最大舒张百分数明显低于对照组(P＜0.01)，且一氧化氮水平也较低，单纯肺炎衣原体感染小鼠无明显动脉粥样硬化形成。结论：肺炎衣原体感染可损害C57BL/6J小鼠动脉内皮功能，一氧化氮途径可能参与其发展。     

二甲双胍对脂多糖致炎性反应小鼠的抗炎作用

目的探究二甲双胍(Met)对脂多糖(LPS)致炎性小鼠的抗炎效应。方法 ICR小鼠分为对照组、LPS组、二甲双胍高、中和低剂量组(400, 200和100 mg/kg)。对照组和LPS组腹腔注射0.9%氯化钠溶液,其余3组注射不同剂量的二甲双胍;0.5 h后,除对照组外,其余4组腹腔注射等体积的LPS致小鼠炎性反应,6 h后测量小鼠的脾指数;ELISA检测小鼠血清中炎性因子IL-6、TNF-α和IL-10的表达;RT-PCR检测小鼠肝脏组织IL-6、TNF-α和IL-10 mRNA表达的变化;HE染色检测小鼠肝脏组织炎性反应变化。结果相对于LPS组,二甲双胍用药组小鼠的脾指数降低(P0.05);外周血IL-6和TNF-α及肝脏组织中IL-6和TNF-αmRNA的表达明显下降(P0.05);而外周血IL-10及肝脏组织中IL-10 mRNA显示上升(P0.05);二甲双胍高剂量组可明显减轻由LPS所致小鼠肝脏的炎性反应。结论二甲双胍对于LPS致炎性小鼠具有一定的抗炎活性。     

C57BL/6J小鼠耳蜗内毛细胞传入神经突触的超微结构观察

目的利用投射电镜观察C57Bl/6J小鼠耳蜗内毛细胞传入神经突触的形态和结构。方法选择发育成熟的C57Bl/6J小鼠,ABR检测听力正常后获取耳蜗标本,分别经过半薄定位和超薄连续切片观察的方法寻找观察耳蜗内毛细胞传入神经突触的形态和结构,探讨发育成熟状态下小鼠耳蜗内毛细胞突触的形态和结构特点,并进一步分析它们可能出现的区域以及与周围解剖结构的关系。结果在听力正常的C57Bl/6J小鼠的不同耳蜗内毛细胞核下区域可以观察到带状突触结构,包括ribbon、突触囊泡、突触间隙和突触后致密带等典型结构;然而有时即使是在听力正常的小鼠耳蜗内,也不能同时观察到这些结构的全部,即内毛细胞带状突触的超微结构和形态可能表现出彼此之间存在明显区别的形式。结论在听力正常的生理状态下,成熟小鼠(c57BL/6J)耳蜗内毛细胞突触的形态和结构处于动态变化之中,突触的个体形态和结构可以表现出不同的特点,而这种结构上的动态变化可能和突触功能的变化有关。     

非酒精性脂肪肝高脂饲养大鼠模型的标准化及评价

随着人民生活水平的提高、生活方式的改变,非酒精性肪性肝病(nonalcoholicfat yliverdisease,NAFLD)在我国发病率正呈现逐年增高趋势,但迄今为止非酒精性脂肪肝的发病机制仍不明确。目前非酒精性脂肪肝大鼠模型运用广泛,尤其是最常用的高脂饲养(highfat ydiet,HFD)大鼠模型。为了对该模型有更进一步地了解以及更深层次把握其运用。本文主要通过查阅近10年运用此模型造模的文献,从中收集相关造模数据等资料,得出该模型合理、常用的造模方法。     

高脂饲养致小鼠胰岛素抵抗对脂肪肝形成的影响

目的：探讨高脂饲养致小鼠脂肪肝形成的机制。方法：随机将8周雄性C57BL/6J小鼠分成高脂饲养组（给予含60%卡路里的高饱和脂肪酸饲养）和正常对照组,饲养12周。监测体重、肝重、血甘油三酯、血总胆固醇、血糖和血胰岛素水平,通过高胰岛素正葡萄糖钳夹实验反映胰岛素敏感性,HE染色、苏丹IV染色及肝脂含量反映肝组织脂质沉积情况,确定高脂饲养致小鼠脂肪肝的形成。通过Westernblot法检测磷酸化胰岛素受体底物1（IRS1）和蛋白激酶B（Akt）水平反映胰岛素信号通路激活情况,检测固醇调节元件结合蛋白1（SREBP-1）和脂肪酸合成酶（FAS）蛋白水平反映肝内脂质合成的情况。结果：高脂饲养组小鼠体重及肝重较正常对照组小鼠明显增加。与正常对照组相比,高脂组血和肝组织内甘油三酯和总胆固醇含量显著升高,血清胰岛素水平升高,葡萄糖输注率减少,磷酸化IRS1和Akt水平降低。肝组织HE染色可见高脂组肝细胞胞浆内充满大量脂肪空泡,苏丹IV染色可见肝细胞内存在大量大小不一的红色脂滴;SREBP-1和FAS蛋白水平明显升高。给予外源性油酸干预原代正常肝细胞48h,磷酸化IRS1和Akt水平呈浓度依赖性减低,而SREBP-1和FAS蛋白表达明显升高。结论：高脂饲养导致小鼠肝脏发生胰岛素抵抗,并通过激活SREBP-FAS脂肪合成途径,促进肝脏脂质沉积,从而诱发脂肪肝。     

可乐定通过激活胆碱能抗炎通路抑制肺损伤小鼠炎性反应

目的:探讨可乐定对肺损伤小鼠炎性反应的影响及其作用机制。方法:以脂多糖(lipopolysac charide,LPS)诱导的肺损伤小鼠为模型,静脉注射可乐定,取左肺上叶组织,检测肺湿干重比(W/D)和总肺含水量(TLW),ELISA试剂盒检测炎性因子IL-1β、IL-6和TNF-α的含量,RT-PCR和Western blot检测α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达的变化;鼻内吸入法将α7nAChR基因RNA干扰慢病毒载体导入肺损伤模型小鼠肺内,或者静脉注射HMGB1外源性蛋白,检测炎性因子和HMGB1的变化。结果:可乐定可减轻LPS诱导的小鼠肺损伤,并通过降低细胞因子IL-6、IL-10和TNF-α水平从而抑制LPS诱导的炎性反应;可乐定促进α7nAChR表达从而激活胆碱能抗炎通路,并抑制HMGB1的表达。结论:可乐定对肺损伤小鼠具有抗炎作用,这可能与激活胆碱能抗炎通路,抑制HMGB1的表达有关。