丙戊酸联合顺铂对人肝癌细胞的增殖抑制作用研究

目的探讨丙戊酸(VPA)联合顺铂(DDP)对人肝癌细胞HepG2、BEC7404、SMMC7721的增殖抑制作用。方法三组浓度的VPA与DDP单药及联合作用于人肝癌细胞HepG2、BEC7404、SMMC7721,24、48、72 h后,观察细胞数量和形态的变化。用MTT法分析药物对细胞增殖的抑制率(IR),计算联合用药对细胞增殖抑制率q值,考察联合使用是否为协同作用。结果 72 h后,各用药组细胞数目减少十分明显,其中VPA+DDP组较单独用药组减少更为显著,其细胞形态发生较大改变。采用MTT比色法显示,对照组细胞生长率明显高于各实验组,联合用药组对细胞增殖IR更为显著,且随着药物浓度增加及作用时间延长,各组对细胞增殖IR明显增加。根据q值结果,在VPA较高浓度(≥100μg/mL)时,联合用药组具有明显的协同作用。结论 VPA能增强DDP对人肝癌细胞的增殖抑制作用,并且在VPA较高浓度时,两药具有协同优势。     

顺铂联合HSV-tk自杀基因对肝癌细胞HepG2的生长抑制作用

目的研究HSV-tk自杀基因联合顺铂对人Hep G2细胞株的杀伤作用。方法使用脂质体携带p AFP-TK-IRES2-EGFP质粒转染Hep G2细胞;Hep G2细胞在转染HSV-TK基因后,继续添加顺铂,用CCK-8试剂检测HSV-tk基因联合顺铂对Hep G2细胞杀伤效果。结果重组质粒p AFP-tk-IRES2-EGFP成功转染Hep G2肝癌细胞;HSV-tk自杀基因联合顺铂对Hep G2细胞的杀伤作用大于单独使用顺铂或HSV-tk自杀基因(P<0.05)。结论实验成功评价了顺铂联合HSV-tk自杀基因对Hep G2肝癌细胞株的杀伤效果,为肝癌的临床治疗方法提供了实验依据。     

顺铂和卡铂致小鼠肝损害的实验研究

目的探讨顺铂、卡铂致小鼠肝损害的时间及损伤机制。方法将90只小鼠分别尾静脉注射顺铂17mg／kg、卡铂67mg／kg及0．9％氯化钠注射液,分别于给药第3、7、11、14天测定各组小鼠血清生化指标、肝组织氧化及抗氧化指标,检查肝组织病理学改变。结果两实验组在给药第3天的病理切片即出现肝细胞脂肪变性,顺铂组尚有肝细胞点状坏死,周围有炎性细胞;两实验组天冬氨酸氨基转氨酶和碱性磷酸酶明显高于对照组（均P〈0．01）,顺铂组丙氨酸氨基转氨酶明显高于对照组和卡铂组;两实验组氧化指标丙二醛明显高于对照组（均P〈0．01）,抗氧化成分还原型谷胱甘肽明显低于对照组（均P〈0．01）。结论顺铂、卡铂在给药第3天即可引起肝组织损伤,顺铂致肝损伤的程度明显重于卡铂。     

颐康冲剂对顺铂,喜树碱,环磷酰胺的增效作用及其对毒性影响的实验研究

颐康冲剂是用香菇、当归、红参须等１６味药材制成的纯中药肿瘤化疗增效剂。本文研究了颐康冲剂对顺铂、喜树碱、环磷酰胺的增效作用及其对毒性的影响，结果表明，颐康冲剂对顺铂、喜树碱有显著增效作用，ｐ＜０．０５～０．００１；但对环磷酰胺有极显著减效作用，ｐ＜０．００１。对３种化疗药物所致小鼠免疫器官萎缩、巨噬细胞吞噬功能降低、ＮＫ细胞活性下降、染色体畸变及白细胞减少等毒副反应，有显著拮抗作用，并能明显提高机体免疫功能。     

顺铂化疗联合用药的增效减毒作用研究进展

摘 要 顺铂在临床上应用于多种肿瘤的治疗,也会引起广泛的不良反应如肾毒性、肝毒性、耳毒性等,限制了其临床应用,因此临床上主张联合用药以达到增效减毒的作用。本文概述了近些年来关于化学药及中药（中药成分、单味中药及中药复方）对顺铂的增效解毒作用方面的研究进展,为化疗药联合用药研究和临床给药方案的制定提供参考依据。     

国产顺铂水针剂与进口顺铂水针剂体外抗肿瘤作用比较研究

目的 :比较昆明三戍贵金属药业有限公司国产顺铂水针剂 (Ⅰ )与进口科鼎 (Faulding)公司顺铂水针剂(Ⅱ )的抗肿瘤效果。方法 :MTT法分别对 (Ⅰ )与 (Ⅱ )进行体外抗肿瘤作用活性测定 ,比较其半数抑制生长浓度(IC50 ) ,评价其抗肿瘤效果。结果 :(Ⅰ )与 (Ⅱ )对鼻咽癌细胞株CNE2 的IC50 分别为 2 7± 0 8及 4 2± 1 7μg/ml,差别具有显著性 (P <0 0 5) ;(Ⅰ )与 (Ⅱ )对乳腺癌细胞株MCF -7的IC50 分别为 2 5± 0 6及 4 9± 1 8μg/ml,差别具有显著性 (P <0 0 5)。结论 :(Ⅰ )体外抗肿瘤效果比 (Ⅱ )强     

肝康灵胶囊对化疗药物的增效减毒作用研究

目的:研究肝康灵胶囊(GKL)对化疗药物的增效减毒作用。方法:以体内抑瘤实验测定GKL单独使用及与顺铂(DDP)伍用时对小鼠移植性肿瘤(S180肉瘤、H22肝癌和Lewis肺癌肿瘤)的抑癌率,并考察GKL分别与DDP和丝裂霉素(MMC)伍用时对荷瘤小鼠白细胞数、免疫器官质量、巨噬细胞吞噬功能和自然杀伤(NK)细胞活性的影响。结果:GKL对小鼠移植性肿瘤(S180肉瘤、H22肝癌和Lewis肺癌肿瘤)均有抑制作用;当其分别与MMC和DDP伍用时,能显著提高2种化疗药物的抑癌率(P<0.01);GKL还可显著减少MMC和DDP所致小鼠白细胞下降、免疫器官萎缩、巨噬细胞吞噬功能下降和NK细胞活性降低等副作用。结论:GKL具有显著的抗肿瘤和增效减毒作用。     

低频超声逆转人肝癌细胞多药耐药的实验研究

多药耐药(multidurg resistance,MDR)是导致肿瘤化疗失败的重要原因,超声波具有方向性好,可聚焦的特点,能非特异性地提高细胞膜的通透性,促进一系列物质进入细胞内,是一种理想的耐药逆转工具。为此,我们以人肝癌耐阿霉素(ADM)的多药耐药细胞亚系HepG2／ADM为研究对象,观察低频超声对其耐药特性的逆转,并探讨其可能的作用机制。     

丹参防治顺铂肝毒性的实验研究

<正>顺铂广泛用于治疗各种实体瘤,但由于其在肝脏蓄积,且肝脏对顺铂敏感性高~[1],高剂量给药或低剂量重复给药,患者肝毒性频发。氧化应激与顺铂所致肝脏病理损伤有密切关联~[2]。而丹参具有抗氧化,清除脂质过氧化物的功效~[3]。因此,本课题旨在研究丹参对顺铂给药小鼠肝功能的影响,并探讨其作用机制。1材料1.1实验动物SPF级♂ICR小鼠,体质量20 g~23 g,购     

miR-218抑制卵巢癌细胞A2780对顺铂耐药性的实验研究

目的研究miR-218抑制卵巢癌细胞A2780对顺铂耐药性的影响及可能机制。方法实时定量PCR检测A2780及顺铂耐药细胞株A2780/DDP中miR-218的表达,转染miR-218 inhibitors和mimics改变A2780及A2780/DDP细胞中miR-218的表达,MTT法检测转染前后细胞对顺铂的敏感性,并分析Wnt2B蛋白表达的改变。结果与A2780细胞相比,miR-218在A2780/DDP中的表达明显降低。A2780细胞转染miR-218 inhibitors后,细胞对顺铂的敏感性降低,Wnt2B蛋白表达明显增强;而A2780/DDP细胞转染miR-218mimics后,细胞对顺铂的敏感性增强,Wnt2B蛋白表达明显减少。结论 miR-218可能通过靶向Wnt2B抑制卵巢癌细胞A2780对顺铂的耐药性。     

低频超声辐射对化学治疗药物致人肺癌A549细胞凋亡作用的影响

目的探讨低频超声辐射是否增加化学治疗（化疗）药物对人肺癌细胞的凋亡作用。方法将人肺癌A549的细胞分成4组：空白对照组常规培养;单纯使用顺氯氨铂组（单纯化疗组,药物终浓度5 mg/L）;单纯低频超声辐射处理组（单纯超声组,频率30 kHz,发射强度2.8 W/cm2,作用时间5 min）以及低频超声辐射联合顺氯氨铂化疗组（超声联合化疗组,超声治疗和化疗方法同单纯超声组和单纯化疗组）。经过各个条件处理的细胞培养36 h后应用流式细胞仪检测A549细胞凋亡率。结果超声联合化疗组A549细胞凋亡率［（7.84±2.74）%］明显高于单纯化疗组［（5.06±0.88）%］、单纯超声组［（2.71±0.99）%］和空白对照组［（2.64±0.99）%］,差异均有统计学意义（P= 0.012,P= 0.004,P=0.010）,同时超声联合化疗组及单纯化疗组A549细胞凋亡率也明显高于空白对照组,差异有统计学意义（P=0.004）,单纯超声组与空白对照组间A549细胞凋亡率差异无统计学意义（P=0.055）。结论体外低频超声辐射可以增加化疗药物对人肺癌细胞的凋亡作用。     

内皮素对人肝癌细胞增殖作用的探讨

目的　探讨内皮素 2对人肝癌细胞增殖作用的影响。方法　该实验分为实验组及对照组 ,采用体外细胞培养法 ,以MTT法记录并反映人肝癌细胞的增殖效果。结果　实验组加入不同浓度的内皮素 2 ,培养 2 4小时及 48小时后 ,在浓度为 10 -9M时显示明显促进人肝癌细胞的增殖 (P<0 0 5 ,P <0 0 1)。结论　内皮素是一种促肿瘤生长因子 ,与人肝癌的发生发展有一定关系     

不同株人肝癌细胞对化疗药物杀伤作用的敏感性分析

目的研究化疗药物对不同株人肝癌细胞杀伤作用的敏感性。方法采用MTT比色分析法测定多柔比星(DXRB)或米托蒽醌(DHAQ)对体外培养的4株人肝癌细胞的细胞毒作用。结果DXRB对SMMC-7721细胞的杀伤作用最强,QJY次之,HEPG-2和Alexander不敏感;DHAQ对QJY细胞的杀伤作用最强,Alexander和SMMC-7721次之,同样HEPG-2不敏感。结论不同株人肝癌细胞对同一化疗药物可具有不同的敏感性。     

蟾蜍灵对肝癌细胞SMMC 7721的细胞毒作用及生长相关基因表达的影响

为探讨蟾蜍灵的抗癌作用机理 ,以肝癌SMMC772 1细胞为靶细胞 ,应用噻唑蓝还原法检测细胞毒作用 ,双荧光染色法和DNA电泳技术检测细胞凋亡与坏死 ;免疫组织化学方法检测细胞生长相关基因p2 1waf1/cip1和增殖细胞核抗原 (PCNA)蛋白表达 .结果表明 ,0 .0 1μmol·L- 1及以上浓度蟾蜍灵对SMMC772 1细胞具有显著细胞毒作用 ,形态学和DNA片段化检测证实蟾蜍灵诱导的细胞死亡以凋亡为主 ;p2 1waf1/cip1在蟾蜍灵诱导下表达上调 ,同时PCNA的表达下降 ,两者呈负相关 (P <0 .0 1) .提示蟾蜍灵通过上调p2 1waf1/cip1表达 ,下调PCNA表达 ,从而抑制肝癌细胞生长     

广西瑶药鸡爪风提取物抑制4种人肝癌细胞株体外增殖作用的研究

目的探讨广西瑶药鸡爪风(Desmos chinensis Lour.)体积分数85%乙醇提取物在体外对HCC-LM3、BEL-7404、SMMC-7721、HepG2等4种人肝癌细胞株增殖的影响。方法用体积分数85%乙醇渗漉法提取鸡爪风中组分,采用MTT法评价鸡爪风体积分数85%乙醇提取物对体外培养4种人肝癌细胞株生长的影响情况。结果给予不同质量浓度(0.8,0.4,0.2,0.1和0.05mg·mL-1)体积分数85%乙醇提取物培养HCC-LM3、BEL-7404细胞24和48h,不同质量浓度(0.5,0.25,0.125,0.075和0.037 5mg·mL-1)体积分数85%乙醇提取物培养SMMC-7721、HepG2细胞24和48h,均表现出一定的抑制细胞增殖作用,且作用随药物质量浓度增加而增大、随作用时间的延长而升高,最高抑制率达90%以上。结论鸡爪风体积分数85%乙醇提取物对体外培养的4种不同人肝癌细胞株的增殖均有抑制作用,呈剂量与时间依赖性。     

General gambogic acids inhibited growth of human hepatoma SMMC-7721 cells in vitro and in nude mice

AIM: To study the inhibitory effect of general gambogic acids (GGA) on transplantation tumor SMMC-7721 in experimental animal model and SMMC-7721 cells in vitro. METHODS: Anti-tumor activity of GGA in the experimental transplantation tumor SMMC-7721 was evaluated by relative tumor growth ratio. Cell morphology was observed with inverted microscope and electron microscope. Cell proliferation was measured by MTT assay and the telomerase activity was determined by PCR. RESULTS: In vivo study indicated that GGA (2, 4, and 8 mg/kg, iv, 3 times per week for 3 weeks) displayed an inhibitory effect on the growth of transplantation tumor SMMC-7721 in nude mice compared with the normal saline group (P<0.01). At the concentrations of 0.625-5.0 mg/L, GGA remarkably inhibited the proliferation of SMMC-7721 cells in vitro. GGA 2 mg/L dramatically changed morphology of SMMC-7721 cells and inhibited the telomerase activity in SMMC-7721 cells. CONCLUSION: GGA had inhibitory effect on the growth of SMMC-7721, which might be related to its inhibition of telomerase activity.     

低频超声波透皮给药的强度对皮肤组织的影响

目的　探讨不同强度下低频超声波介导透皮给药对人体皮肤组织的影响。方法　以 2 4例健康青年志愿者的双上臂作为试验区域 ,每个试验者两上臂同时涂抹 1geutecticmixtureoflocalanesthetics,10min后分别采用 0 .5、1W·cm-2 的能量进行低频超声 (2 0kHz )介导 ,介导时间 10min。每 5min测量两组镇痛起始时间 ,试验结束后观察皮肤组织的变化。结果　能量为 1W·cm-2 的低频超声组平均镇痛起始时间为 32 .75± 3.73min ,0 .5W·cm-2 组为 37.6 5± 3.2 4min。低频超声可使角质层间质增宽和疏松 ,0 .5W·cm-2 组未见组织学病理损害 ,1W·cm-2 组可见点状红疹 ,类似二度烫伤。结论　能量高可更快促进药物透过皮肤 ,但高能量可引起皮肤组织病理性损害 ,0 .5W·cm-2 组能量是比较安全的低频给药方式。     

尿多酸肽对人肝癌细胞Smmu7721体内体外抑制作用

目的 :研究由人尿提取的尿多酸肽 (uroacitide)对人肝癌细胞的体内体外抑制作用。方法 :体外实验 ,以四唑盐(MTT)比色法测定培养板中加入尿多酸肽后 ,人肝癌细胞Smmu772 137℃ 5 %CO2 培养箱培养 72h的生物活性 ;体内抑瘤实验为裸鼠皮下接种人肝癌细胞Smmu 772 1,待肿瘤生长后 ,连续每天ip尿多酸肽 10天 ,观察其抑制作用。结果 :体外实验 ,尿多酸肽剂量为 0 0 3～ 2 0 0mg·mL- 1 ,对人肝癌细胞Smmu 772 1的IC5 0 为 0 35～ 0 49mg·mL- 1 ;体内实验 ,尿多酸肽剂量 5 0 0～ 2 0 0 0mg·kg- 1 ,对裸鼠接种人肝癌细胞Smmu 772 1的抑瘤率在 38 9%～ 6 7 9%。结论 :尿多酸肽对人肝癌细胞Smmu772 1体内体外均有显著的抑制作用。     

靶向hTERT的特异性siRNA抑制SMMC-7721肝癌细胞增殖机制研究

目的筛选有效抑制肝癌细胞hTERT表达的小干扰RNA(siRNA)序列,并检测其对hTERT蛋白表达、细胞凋亡的影响。方法设计并合成针对hTERT的6条siRNA双链及一条阴性对照siRNA,以LipofectaminTM2000转染至肝癌SMMC-7721细胞。用磺基罗丹明B法(sulforhodamine B法,SRB法)测定干扰后细胞增殖的变化,RT-PCR测定hTERTmRNA的表达,筛选出有效序列。有效序列转染后,进一步采用Western blot法检测hTERT蛋白水平的变化,AnnexinV-FITC/PI双染、流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果以SRB和RT-PCR法筛选出的两条有效siRNA:siRNA-2和siRNA-6,能明显抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖,对细胞的抑制率分别为45.3%、38.2%,能高度沉默hTERT mRNA的基因,沉默率分别为80%、75%。二者还能明显下调hTERT蛋白表达(P<0.05),明显增加凋亡,凋亡率分别为20.23%、17.94%。结论 siRNA-2和siRNA-6能特异性沉默肝癌SMMC-7721细胞hTERT基因表达,抑制增殖,降低hTERT蛋白水平,诱导凋亡,为肝癌基因治疗提供了有力的实验依据。     

Pomegranate peel extract polyphenols induced apoptosis in human hepatoma cells by mitochondrial pathway

This study was aimed to investigate the influence of pomegranate peel polyphenols (PPPs) on the proliferation and apoptosis of HepG2 cells (a kind of human hepatoma cells) and the related mechanism. The inverted fluorescence microscope and the flow cytometer (FCM) were used to test the changes of the cellular morphology, cell cycle, apoptosis, reactive oxygen species (ROS) and mitochondrial transmembrane potential (Δψm). The kit was used to measure the activities of caspase-3/9, and Western Blot was used to detect the expressions of apoptosis-associated proteins including p53, Bcl-2/Bax, Cyt-c and PARP. The results showed that the cells cycle of HepG2 arrested at the S-phase by PPPs and the amount of the early apoptotic cells and ROS level were increased obviously, the level of Cyt-c and the activity of Caspase-3/9 markedly were also increased by PPPs, as well as the ratio of Bax/Bcl-2 and the protein expressions of P53. It was concluded that PPPs could inhibit the growth of HepG2 cells by blocking the cell cycle and inducing the mitochondrial apoptotic pathway in a dose-dependent manner.