犬细小病毒抗原变异株的分离与鉴定

目的从犬粪便病料中分离和鉴定犬细小病毒（canine parvovirus，CPV）抗原变异株CPV-2a和CPV-2b。方法将疑似犬细小病毒感染的病犬粪便接种猫肾细胞，进行病毒分离、常规病毒学鉴定和分子生物学鉴定。结果常规病毒学鉴定和分子生物学鉴定表明，分离得到5株犬细小病毒抗原变异株，其中2株为CPV-2a，3株为CPV-2b。结论本研究分离的5株犬细小病毒为研究CPV变异及制备CPV特异性诊断试剂奠定基础。     

犬副流感弱毒株的分离与鉴定

目的 分离并鉴定犬副流感弱毒株,供疫苗制备。方法 根据犬副流感的血球吸附特性、细胞２特性以及异种病毒抗血清阻断法分离病毒（简称为ＣＰＩＶ－ＸＮ４病毒）,并对其进行形态学,生物学特性等系统鉴定。结果 病毒分离后其毒力可达１０＾０６ＣＩＤ５０,在电镜下可见较典型的犬副注感病毒形态结构特征,免疫电镜下见到及附在病毒颗粒表征,免疫电镜下见到抗体分子已被吸在病毒表面,在几种细胞上盲传结果ＭＤＣＫ和Ｖｅｒｏ细     

以CpG为佐剂的犬细小病毒基因疫苗的初步研究

目的研制犬细小病毒(CPV)基因疫苗。方法以CPV VP2基因为基因免疫的目的基因,以pcDNA3和pcDNAK质粒为基因免疫的载体,以非甲基化的胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸(CpG)为核心的免疫刺激序列为免疫佐剂,构建重组质粒并免疫BALB/c小鼠和毕格犬。结果经pcDNA3-VP2C1(含1个拷贝CpG基序)基因免疫的BALB/c小鼠能产生抗CPV血凝抑制抗体;对于经CPV灭活苗初次免疫的毕格犬,用pcDNAK-VP2C2(含2个拷贝CpG基序)质粒免疫产生的再次免疫应答优于pcDNA3-VP2C1。结论VP2基因、pcDNAK和犬源CpG可用于CPV基因疫苗的进一步研究。     

犬细小病毒单克隆抗体在治疗上的应用研究

用犬细小病毒单克隆抗体对287例患细小病毒性肠炎病上进行治疗，结果治愈279只，(治愈率达97．21%)，显著高于其他治疗方法的治疗效果。治疗机理主要是对体内病毒的中和作用和促进机体的主动免疫反应。此次研究可为动物乃至人类病毒性疾病的临床治疗开辟一条新的途径。     

犬副流感流行毒株的分离与鉴定

目的 分离和鉴定犬副流感病毒。方法 无菌抽取病犬脑脊液,接种到Ｖｅｒｏ细胞,７２ｈ后收集培养液进行回归动物试验,并采用形态８这观察,血凝特性、血球吸附试验以及细胞敏感性、中和试验和交叉中和试验等方法进行系统鉴定。结果 从病犬脑脊液中分离出一株ＣＰＩＶ流行毒株（ＣＰＩＶＸＮ９３１）,接种Ｖｅｒｏ细胞后,出现明显的细胞病变作用,对Ｖｅｒｏ和ＭＤＣＫ敏感,对２．５ｍＬ．Ｌ＾－１豚鼠红细胞具有显的吸附作     

犬瘟热与犬细小病毒免疫血清临床应用探讨

犬瘟热与犬细小病毒免疫血清临床应用探讨黄爱民１陆琴２（１上海医科大学实验动物部，上海２０００３２；２卫生部上海生物制品研究所）在犬类烈性传染病中，以犬瘟热及犬细小病毒病最为常见。在临床上，犬瘟热病毒感染多以呼吸道体征为主，而犬细小病毒感染则以消化道体...     

犬细小病毒核酸诊断方法的建立和应用

目的建立犬细小病毒的核酸诊断方法（PCR方法）并应用于临床诊断。方法根据犬细小病毒VP2基因序列设计引物，以犬细小病毒标准株、犬传染性肝炎病毒和正常增殖细胞DNA为模板，犬细小病毒扩增出221bp的特异带，将PCR产物连接到pMD18-T Vecter，转化大肠杆菌JM109菌株。重组质粒经测序并经blast比较，与GenBank中已登录的犬细小病毒VP2基因序列进行比较。同时将建立的PCR方法应用于30份犬粪便和病犬组织的检测，并测序。结果PCR产物测得的序列与GenBank的基因序列同源性为100％，粪便检测均无犬细小病毒的特异带，从病犬组织中有6份样品扩增出221bp的特异带，经测序比较，同源率为100％。结论建立了犬细小病毒的PCR检测方法，并能应用于临床诊断。     

犬腺病毒1型流行毒株的分离与鉴定

目的 分离、鉴定犬腺病毒１流行毒株,方法 将处理过的 肝细胞悬液,感染原代犬胎肾细胞。用血凝试验、中和试验、回归试验以及电镜观察等方法,分离、鉴定。结果 分离出一株犬腺病毒１型流行毒株,命名为ＣＡＶ１ＸＮ３株。结论 该毒株与标准毒标的生物学特性一致。     

犬三种病毒疫苗对实验犬的保护效价的测定

用ELISA检测试剂盒和检测方法对上海某犬场的100份接种五联疫苗的实验犬血清进行犬传染性肝炎病毒、犬瘟热病毒、犬细小病毒病毒抗体的检测，以了解该病毒抗体是否达到保护效价，分析国内实验犬的疫苗使用情况。结果：接种一周后，97％实验犬的抗体则达到保护效价，一直到1年后仍有99％的实验犬的抗体有保护能力。     

水貂阿留申病毒、肠炎病毒与犬瘟热病毒多重PCR检测方法的建立与应用

目的水貂阿留申病、病毒性肠炎与犬瘟热并称影响水貂健康的三大疫病,拟建立一种可同时检测三种病毒的多重PCR检测方法。方法针对三种病毒基因保守区分别设计了3对特异性引物,对貂阿留申病毒(ADV)和水貂肠炎病毒(MEV)的DNA模板和犬瘟热病毒(CDV)的RNA模板进行了多重PCR扩增和扩增条件优化。结果 PCR可同时扩增出601 bp(ADV)、205 bp(MEV)和451 bp(CDV)的特异性目的条带,敏感性试验表明最低核酸检出量为ADV每微升2.67×10~4拷贝、MEV每微升3.02×10~4拷贝和CDV每微升1.72×10~5拷贝。临床样品检测结果表明多重PCR和单一PCR检测结果一致。结论建立的多重PCR检测方法可快速地检测ADV、MEV和CDV单一或混合感染的临床样品。     

联合应用丙种球蛋白和麻疹减毒活疫苗佐治紫癜性肾炎30例

目的观察联合应用静脉注射丙种球蛋白(IVIG)和肌肉注射麻疹减毒活疫苗佐治紫癜性肾炎(HSPN)的效果。方法对照组给予常规控制感染、脱敏、糖皮质激素、抗凝、饮食调整等治疗;治疗组在对照组治疗的基础上给予IVIG麻疹减毒活疫苗治疗。结果治疗组总有效率明显高于对照组(P<0.05);两组紫癜消失时间、肉眼血尿消失时间、镜下血尿消失时间、尿蛋白转阴时间均有明显差异(P<0.05)。结论联合应用丙种球蛋白和麻疹减毒活疫苗佐治HSPN效果好,能缩短紫癜消失时间、肉眼血尿消失时间、镜下血尿消失时间、尿蛋白转阴时间。     

犬博卡病毒非结构基因NP1多克隆抗体的制备与鉴定

目的: 制备犬博卡病毒(MVC)的非结构基因NP1的兔多克隆抗体,并进行特异性鉴定。方法: 以MVC的感染性克隆pI-MVC为模板,构建NP1基因的原核表达质粒pGEX-4T-3-NP1,转化大肠杆菌BL21 后,在异巯基-1-硫代-β呋喃半乳糖(IPTG) 诱导下,表达谷胱甘肽S-转移酶(GST)-NP1蛋白。用亲和层析纯化的融合蛋白免疫大白兔,制备NP1抗血清并用ELISA法测定抗血清效价。采用Western blotting和免疫荧光法检测NP1抗血清的特性。结果: 成功构建MVC NP1基因的原核表达质粒pGEX-4T-3-NP1,在大肠杆菌中获得高效表达。表达产物经亲和层析纯化后得到高纯度的NP1融合蛋白,以其免疫大白兔获得NP1多抗血清,ELISA法检测效价达到1:400 000。Western blotting法及免疫荧光检测,所得抗血清具有较高的效价及特异性。 结论: 本研究利用原核表达的MVC GST-NP1 融合蛋白制备的NP1抗血清效价高、特异性高,为进一步深入研究NP1在MVC感染及致病分子机制中的作用奠定了基础。     

甲型肝炎减毒活疫苗病毒的水平传播

目的 探讨甲型肝炎（甲肝）减毒活疫功接种后的病毒水平传播。方法 在昆明市安宁县2个观察点筛选出丙氨酸转氨酶（ALT）正常、甲肝（HAV）抗体（抗－HAV）阴性的4－7岁儿童199人,按1：1.4比例分接种组（82人）和接触组（117人）进行H2株甲肝减毒活疫苗病毒的水平传播观察;另外,取接种者和接触者HAV检测阳性的粪便悬液上清,分别静脉接种于8普通狨猴（Callithrix jacchus）体内,观察粪便HAV毒力水平。结果 接种组接种后6周抗体阳转率为97.6％（80／82）,接触组9周时抗体阳转率为13.7％（16／117）,两组儿童肝功能均未见异常 种组和接触组的粪便HAV检出率分别为89.5%(34/38)和70.7%(53/75）;以2株接种者粪便HAV和2株接触者粪便HAV感染的8只狨猴,均未检出血清酶升高和肝脏组织病理学改变,抗－HAV和2株接触者粪便HAV感染的8只狨猴,均未检出血清酶升高和肝脏组织病理学改变,抗－HAV阳转时间延迟且效价低。结论 H2株甲肝减毒活安全性及免疫原笥良好,疫苗病毒在人体内增殖活跃,且保持减毒性能稳定,能在人群中造成水平传播,但不会引发甲肝。     

甲型H1N1流感病毒裂解疫苗与流行性感冒裂解疫苗同期接种不良反应的对比分析

目的通过比较甲型H1N1流感病毒裂解疫苗(甲流疫苗)和流行性感冒裂解疫苗(普流疫苗)同期接种的不良反应,分析甲流疫苗的安全性。方法收集2种疫苗接种记录,对其中记录的不良反应进行流行病学统计分析。结果甲流疫苗接种156 738人次,发生不良反应18人,发生率11.48/10万;普流疫苗接种116994人,发生不良反应7人,发生率5.98/10万。分析发现,甲流疫苗接种的不良反应发生率与全国水平、普流疫苗相当;此外2种疫苗接种的不良反应在职业、年龄及性别分布上相同;2种疫苗的不良反应发生率在16～25岁年龄段、学生中较高,且有随着年龄段的升高,发生率有下降的趋势(rs=-0.999,P<0.001)。此外,2种疫苗接种后发生不良反应的临床症状除肌肉痛外,其余症状的发生无统计学差别。结论综上所述,甲流疫苗临床观察时间短、接种后有发生不良反应的可能,但总体来看,接种甲流疫苗是安全有效的,能有效保护甲流的易感人群。     

Safety and immunogenicity of lyophilized, live attenuated hepatitis A vaccine in non-human primate model

ＨｅｐａｔｉｔｉｓＡｃｏｎｔｉｎｕｅｓｔｏｂｅａｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｐｕｂｌｉｃｈｅａｌｔｈｐｒｏｂｌｅｍｉｎｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇｃｏｕｎｔｒｉｅｓ,ｅｓｐｅｃｉａｌｌｙｉｎＣｈｉｎａ,ｗｈｅｒｅｔｈｅｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙｏｆｔｈｅｄｉｓｅａｓｅｉｓｃｈａｎｇｉｎｇｗｉｔｈｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔｉｎｌｉｖｉｎｇｓｔａｎｄａｒｄｓＤｉｓｅａｓｅｏｎｓｅｔｉｓｎｏｗｄｅｌａｙｅｄｆｒｏｍｃｈｉｌｄｈｏｏｄｕｎｔｉｌａｓｄｏｌｅｓｃｅｎｃｅｏｒａｄｕｌｔｈｏｏｄＴｈｅｅｖｅｒｉｎｃｒｅａｓｉｎｇｎ…     

犬瘟热病毒流行株的驯化与鉴定

目的 驯化并鉴定犬温热病毒苗修选毒株。方法 犬瘟热流行毒株经鸡胚绒毛尿贵膜→ＭＡ１０４→Ｖｅｒｏ→ＭＤＣＫ→ＭＡ１０４上依次连续传１１２代,传代过程中进行蚀斑克隆、扩增以及每代ＴＣＩＤ５０效价测定,驯化获得１株弱毒株（简称ＣＤＶ－ＸＮ１１２）,然后进行电镜观察及抗生、遗传稳定性、神经毒力特试验。结果 分离到地犬瘟热流行毒株,经到９０代时失对犬的致病性,ＴＯＩＤ５０效价达１０＾５．５．ｍｌ＾－１,电     

利什曼原虫减毒活疫苗研究进展

利什曼原虫减毒活疫苗因其保留了大部分免疫原性,能感染巨噬细胞,诱发与自然感染类似的免疫应答而受到众多科学家的青睐。本文综述了近年来减毒活疫苗的研究进展。