妇科白带涂片多功能染色液的应用

由于女性阴道感染情况复杂,阴道分泌物检查需要不断改进方法,以全面、综合判断结果,给临床提供正确的诊断依据,有利于女性阴道炎的的预防和治疗.妇科白带涂片多功能染色液(即BTR)为一种液态双试剂,是利用化学反应分子之间的相互吸附原理:病原体、细胞等含有多种氨基酸,其极性基带有不同的电荷,与带不同电荷的染料亲合,而染成不同的颜色,达到对细胞、病原形态的鉴别作用.本文用BTR染色法检测7698例阴道分泌物,在一定条件下与盐水法作对比,现将检测、对比情况报告如下.     

三种不同方法检测妇女白带效果观察

目的比较白带涂片多功能染色技术（BTR）、多项检测快速染色技术（CTB）及生理盐水法在女性生殖道感染检查中的敏感性。方法选取本院妇科生殖道感染症状明显患者300例作为研究对象,对同一份标本同时做BTR、CTB以及生理盐水法检查,比较3种方法滴虫、真菌以及线索细胞检出率。结果 BTR滴虫、真菌及线索细胞检出率分别为48.7%、24.7%和17.3%;CTB分别为26.0%、19.3%和14.7%;生理盐水法分别为24.7%、21.3%和15.3%。BTR滴虫、真菌及线索细胞检出率均高于另外2组,3者滴虫检出率相比差异有统计学意义（P〈0.05）,3组真菌及线索细胞检出率之间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 BTR滴虫、真菌及线索细胞检出率较高,比生理盐水涂片法和CTB更适用于妇科普查。     

未染色大细胞比率检测对白血病诊断价值研究

目的探讨未染色大细胞比率(LUC%)检测对白血病诊断价值。方法收集47例不同类型的白血病患者外周血标本,同时对其在ADVIA120血液分析仪上进行未染色大细胞比率(LUC%)检测、外周血片行POX染色、流式细胞仪进行CD34+测定。统计数据分析与各种类型白血病关系,分析未染色大细胞比率与POX阴性率及CD34+细胞的关系。结果未染色大细胞比率与POX阴性率有良好的相关性,但是未发现未染色大细胞与CD34+细胞有相关性。结论未染色大细胞比率检测是临床白血病诊疗中临床价值较大的临床指标,但尚不能替代流式技术分型。     

家兔脂肪基质干细胞的分离培养及多向分化诱导

背景:脂肪基质干细胞在人体皮下脂肪中储备充足,体外能快速增殖,具有多向分化潜能,是目前组织工程种子细胞的研究热点.目的:体外分离培养家兔脂肪血管基质部分细胞,并验证其具有多分化潜能.方法:体外分离家兔脂肪血管基质部分细胞,在标准条件下培养,流式细胞仪检测第3代血管基质部分细胞表面标记物CD44,CD29,CD45,取第3代血管基质部分细胞进行成脂、成骨、成软骨诱导,油红O染色鉴定成脂诱导,碱性磷酸酶染色、茜索红染色,Von kossa染色鉴定成骨诱导,Ⅱ型胶原免疫组织化学染色和Ⅱ型胶原mRNA RT-PCR检测鉴定成软骨诱导.结果与结论:原代血管基质部分细胞为短梭形和多角形,第3代血管基质部分细胞为长梭形,流式细胞仪检测提示CD44+,CD29+,CD45,成脂诱导组,染色油红O阳性,成骨诱导组,碱性磷酸酶染色、Vonkossa染色、茜素红染色阳性,成软骨诱导组,诱导14 d Ⅱ型胶原免疫组织化学染色阿利新蓝染色阳性,RT-PCR检测Ⅱ型胶原mRNA显示产物条带较未诱导前信号明显增强.提示体外分离培养的家兔血管基质部分细胞具有干细胞表型,具有向成骨、软骨、脂肪细胞分化的能力,初步鉴定为脂肪基质干细胞.     

供体特异性体内免疫状态的定量检测

背景:由于免疫反应的复杂性,目前的免疫学检测方法均有其局限性,虽然各种检测技术精确程度不断提高,但是单一指标不足以判断机体复杂的免疫状态.建立一种在多指标基础上的联合评估模式来监测移植后受体免疫状态是当前需要解决的难题.目的:建立具有供体抗原特异性的体内免疫状态定量检测方法,探索该方法的流式检测技术参数、荧光染色条件、输注细胞数及确定最佳测试时间点.方法:取C57及BALB/c小鼠脾脏制各脾细胞单细胞悬液,分别用不同浓度活细胞染料羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFSE)染色后制备1:1混合细胞悬液,按混合细胞输注C57→BALB/c小鼠皮肤移植排斥模型,分别于输注后1,2,4,10 h,1,2,3,6 d应用流式细胞仪检测外周血两种荧光细胞的比例变化,同时设未移植BALB/c小鼠为对照,探索CFSE荧光染色条件、输注细胞数及确定最佳测试时间点,按公式计算供体特异性细胞杀伤率.结果与结论:供体特异性体内免疫状态定量检测方法流式检测设定在淋巴细胞门,两种细胞CFSE的染色浓度差控制在20倍左右,输注细胞总数在一定范围内对结果没有影响,输注细胞后2-4 h为最佳检测时间点.提示体内细胞毒性试验是一种简单、准确、稳定的免疫状态体内定量监测方法,可以全面反映小鼠皮肤移植后受体的免疫状态.     

NGF及其受体TrkA和p75在发情周期内Wistar大鼠卵巢内的表达

目的 检测NGF及其受体TrkA和p75在发情周期内Wistar大鼠卵巢内的表达.方法 利用免疫组织化学染色技术检测NGF及其受体TrkA和p75在卵巢内的细胞定位及蛋白表达情况;利用原位杂交方法检测在发情周期内大鼠卵巢NGF及其受体TrkA和p75的mRNA表达情况;利用Western blot技术检测发情周期内大鼠卵巢NGF及其受体TrkA和p75的蛋白表达情况.结果 免疫组织化学染色结果显示发情周期内大鼠卵巢内NGF及其受体的表达,在各级卵泡的卵泡细胞、卵母细胞以及黄体内均有不同水平的表达;同时间点的原位杂交检测结果与免疫组织化学染色结果相一致;Western blot检测结果显示整个发情周期内卵巢内的NGF及其受体TrkA和p75的蛋白表达没有明显的波动.结论 NGF及其受体TrkA和p75可促进发情周期内Wistar大鼠卵巢卵泡的卵泡细胞及卵母细胞的发育.     

肺低分化鳞癌骨髓浸润合并缺铁性贫血1例报道

目的 提高疑难血液病的检出率,协助临床诊断与治疗.方法 首先对疑难病患者作血常规检测,并将外周血片作瑞氏染色和网织红计数,再将骨髓片分别作瑞氏染色、铁染色和苏木素-伊红染色.结果 检测证实该患者重度贫血,呈小细胞低色素性,网织红细胞轻度增高,并有低分化鳞癌细胞骨髓浸润;铁染色,细胞外铁(-),细胞内铁2%;苏木素-伊红染色,找到低分化鳞癌细胞.结论 恶性肿瘤性贫血表现为小细胞低色素性时应与缺铁性贫血相鉴别,综合、全面分析是提高骨髓检出率的必要手段.     

脐血单个核细胞体外诱导分化为肝样细胞的可行性

目的:细胞移植为重度肝损伤治疗提供了一条新的途径,但肝细胞来源仍是一个未解决的问题.实验采用体外培养体系,观察人脐血单个核细胞是否可以诱导分化为肝样细胞,以期为治疗肝脏疾病提供了新的细胞来源. 方法:实验于2006-10/2007-08在解放军第一二三医院南京军区肝病中心实验室完成.①实验材料:脐血由蚌埠解放军123医院妇产科提供,产妇及家属对实验知情同意,并经医院伦理委员会批准.②实验方法:分离获得脐血单个核细胞后,将其分组培养:对照组不加细胞因子,实验组加入重组人肝细胞生长因子、重组人成纤维生长因子4和重组人制瘤素.③实验评估:于诱导前及诱导后第7,14,21,28天采用免疫细胞化学染色检测甲胎蛋白、细胞角蛋白18、白蛋白和肝细胞抗体的表达,应用流式细胞仪检测细胞中白蛋白表达,放射免疫法检测细胞培养液中甲胎蛋白的分泌水平. 结果:①免疫细胞化学染色显示,实验组第7天可见甲胎蛋白染色阳性细胞,第21天后染色基本为阴性,第7天未检测到细胞角蛋白18和白蛋白阳性表达,随着诱导时间的延长,呈阳性表达,阳性率逐渐增高.对照组染色均呈阴性.②实验组培养第21天时检测到糖原染色阳性细胞,28 d时呈强阳性表达.对照组糖原染色呈阴性.③流式细胞仪检测实验组白蛋白阳性细胞比例逐渐增高,第28天达80%.放射免疫法检测7 d的甲胎蛋白水平达到最高,与诱导前和对照组差异显著(P < 0.05).结论:在特定细胞生长因子诱导下,脐血单个核细胞能够分化为肝样细胞.     

跨膜谷氨酰胺通量的竞争性拮抗剂V-9302对急性髓系白血病细胞系HL-60、KG-1凋亡的影响

目的:研究跨膜谷氨酰胺通量的拮抗剂V-9302对急性髓系白血病细胞增殖、凋亡的影响.方法:取对数生长期的HL-60、KG-1细胞,给予不同浓度V-9302处理,CCK-8检测细胞增殖情况,采用Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞术检测细胞的凋亡率,采用RT-qPCR、Western blot检测凋亡相关基因...     

叔丁基过氧化氢体外诱导鼠系膜细胞衰老及普罗布考对其影响的研究

目的 探讨叔丁基过氧化氢体外诱导鼠肾小球系膜细胞衰老及普罗布考延缓衰老的作用.方法 应用不同浓度叔丁基过氧化氢刺激鼠系膜细胞,每天刺激1 h,连续作用4 d.刺激结束后48 h检测细胞存活率、β-半乳糖苷酶染色阳性细胞率、细胞周期情况鉴定衰老细胞,并透射电镜观察衰老细胞超微结构,并观察普罗布考对上述指标的影响.结果 30μmol/L叔丁基过氧化氢诱导组细胞存活率为对照组的(80.12±3.25)%(P<0.05),约81%的细胞呈现β-半乳糖苷酶染色阳性,流式细胞仪检测86%细胞阻滞于G0、G1期,透射电镜可见叔丁基过氧化氢诱导组细胞核膜内陷,染色质凝聚.应用普罗布考后细胞存活率为对照组的(92.68±5.03)%,β-半乳糖苷酶染色阳性率降至45.2%,细胞周期各期比例接近正常,细胞形态及超微结构改变减轻.结论 叔丁基过氧化氢可诱导体外培养的鼠肾小球系膜细胞发生衰老,应用普罗布考可以延缓衰老.     

人去表皮真皮细胞活性及组织结构特征(英文)

背景:研究证实,去表皮的真皮可以作为真皮替代物,在其上接种角质形成细胞后形成表皮结构.但有关真皮替代物细胞生物活性、组织结构特点及基底膜成分分析的研究报道较少.目的:观察人去表皮真皮细胞活性及组织结构特征.方法:将健康成人皮瓣用56℃PBS溶液处理以去除表皮,用液氮连续冻融处理去除真皮中细胞成分,获得去表皮真皮.以组织块培养法观察去表皮真皮细胞活性.以苏木精染色检测去表皮真皮细胞核,以波形蛋白免疫组化检测去表皮真皮成纤维细胞成分.以PAS染色及Ⅳ型胶原免疫组化检测基底膜及其成分.以VG染色检测去表皮真皮胶原纤维,Weigert染色检测弹力纤维,VG与Weigert双染色检测胶原纤维及弹力纤维,透射及扫描电镜观察去表皮真皮超微结构.结果与结论;用组织块培养方法培养的去表皮真皮2周无细胞生长.苏木精-伊红染色显示去表皮真皮中无细胞核、波形蛋白免疫组化显示去表皮真皮中无波形蛋白表达.VG染色显示去表皮真皮胶原纤维染成玫瑰红色,Weigert染色显示去表皮真皮弹力纤维染成紫黑色,双染色进一步显示胶原纤维与弹力纤维均匀排列.去表皮真皮表面及附属器残留部位PAS反应强阳性,Ⅳ型胶原表达明显.透射及扫描电镜下观察到去表皮真皮中胶原,弹力纤维交错排列,间有孔隙,相互交织成网.去表皮真皮无活细胞成分,真皮基质表面及附属器管腔壁仍保留糖原、Ⅳ型胶原等基底膜成分,真皮基质中富含胶原及弹力纤维,是一种类似在体真皮的三维胶原基质.     

和厚朴酚对结肠癌细胞生长影响及Caspase凋亡途径相关蛋白的表达研究

目的:探讨和厚朴酚对人结肠癌(SW480)细胞增殖抑制作用及诱导Caspase凋亡途径的研究.方法:利用MTT检测和厚朴酚在不同浓度和时问下对SW480细胞体外增殖的影响;用流式细胞术、Hoechst33258荧光染色检测及Caspase-3,-8,-9 酶活性检测方法和厚朴酚诱导下结肠癌SW480细胞凋亡指标及路径.结果:MTT结果显示和厚朴酚具明显抑制SW480细胞的体外增殖,其抑制率存在剂量和时间依赖性;药物处理24,48,72 h的IC50值分别是54.36、44.72、36.20 μmol/L.和厚朴酚作用细胞后,G0/G1期的细胞比例随药物浓度增加而逐渐增多(P<0.05),表明和厚朴酚能阻滞细胞于G0/G1期.荧光染料 Hoechst33258染色结果显示.细胞核出现典型的凋亡小体.Caspase家族蛋白酶活性检测结果,胞内Caspase-3,-8,-9酶家族分别被激活.其活性随不同时间点升高(P<0.05).结论:和厚朴酚能明显抑制人结肠癌SW480细胞体外增殖,并诱导大肠癌细胞SW480通过激活Caspase途径发生凋亡.     

来源于大鼠腹股沟皮下脂肪垫与附睾周围脂肪的间充质干细胞生物学特性的对比研究

目的:分离培养大鼠腹股沟皮下和附睾周围脂肪的间充质干细胞(ADMSC),研究两种不同来源的间充质千细胞的生物学特征.方法:分离提取Wistar大鼠腹股沟皮下和附睾周围脂肪中的ADMSC,进行体外培养.观察细胞形态,计算细胞的收获情况,MTT法检测细胞的生长增殖状态,应用流式细胞仪检测细胞表面标志CD44以及细胞周期.地塞米松、胰岛素定向诱导后,油红O染色检测细胞内的中性脂肪.结果:单位质量腹股沟皮下和附睾周围脂肪组织中获得的间充质干细胞数量存在差异,两处细胞形态均为条索样.不同的时间点两处细胞的贴壁率相似,并且有同向变化的趋势.两处细胞的增殖能力相当.两处细胞绝大多数处于G0/G1,无明显差异.两处细胞表面标记CD44均为阳性.两处细胞经成脂诱导后,胞浆中有脂滴形成,经油红O染色,脂滴呈鲜红色.结论:从不同部位提取的ADMSC仅在单位质量组织所获得干细胞数量上存在差异,即单位质量的附睾周围脂肪中获取的干细胞数多于腹股沟皮下脂肪垫中获取的干细胞数.两处细胞的其他生物学特性以及成脂分化能力没有明显差异.     

急性白血病患者细胞质髓过氧化物酶检测结果分析

目的 探讨并比较急性白血病(AL)患者细胞过氧化物酶(POX)染色与细胞质髓过氧化物酶(cM-PO)流式细胞术检测的阳性率及阳性积分,评价cMPO流式细胞术的检测能力.方法 选取该院60例AL住院患者作为研究对象,分别进行POX染色与cMPO流式细胞术检测,并比较AL患者细胞POX染色与cMPO流式细胞术的阳性率及阳性积分.结果 在急性非淋巴细胞白血病(ANLL)中cMPO的阳性率较高,与POX染色的阳性率对比差异无统计学意义(P>0.05);急性淋巴细胞白血病(ALL)的POX染色存在一定的假阳性率.ALL与ANLL的POX染色与cMPO流式细胞术的阳性积分对比,差异无统计学意义(P>0.05).结论 POX染色的准确度低于cMPO流式细胞术,但成本低、仪器依赖性小,建议两种方法联合应用,继而为血液系统疾病的诊断提供客观依据.     

急性白血病患者细胞质髓过氧化物酶检测结果分析

目的 探讨并比较急性白血病(AL)患者细胞过氧化物酶(POX)染色与细胞质髓过氧化物酶(cM-PO)流式细胞术检测的阳性率及阳性积分,评价cMPO流式细胞术的检测能力.方法 选取该院60例AL住院患者作为研究对象,分别进行POX染色与cMPO流式细胞术检测,并比较AL患者细胞POX染色与cMPO流式细胞术的阳性率及阳性积分.结果 在急性非淋巴细胞白血病(ANLL)中cMPO的阳性率较高,与POX染色的阳性率对比差异无统计学意义(P>0.05);急性淋巴细胞白血病(ALL)的POX染色存在一定的假阳性率.ALL与ANLL的POX染色与cMPO流式细胞术的阳性积分对比,差异无统计学意义(P>0.05).结论 POX染色的准确度低于cMPO流式细胞术,但成本低、仪器依赖性小,建议两种方法联合应用,继而为血液系统疾病的诊断提供客观依据.     

缺氧对视网膜Müller细胞水通道蛋白4表达的影响

目的 观察体外培养兔视网膜Müller细胞在缺氧条件下水通道蛋白4(AQP4)表达的变化.方法 本实验以体外培养的兔视网膜Müller细胞为研究对象,选定不同缺氧时间体外培养Müller,并采用AO/EB染色检测Müller细胞的凋亡情况,根据细胞凋亡情况选定最适缺氧时间进行检测,利用免疫细胞化学染色、流式细胞术及RT-PCR的方法 对实验组细胞AQP4的表达进行定性及定量测定.结果 Müller细胞缺氧24 h为缺氧最大耐受时间.缺氧组Müller细胞AQP4表达明显低于正常对照组;流式细胞仪检测中波峰位置明显提前,AQP4表达减少;RT-PCR半定量分析显示:AQP4 mRNA的表达比对照组明显降低(P<0.01).结论 缺氧使体外培养兔视网膜Müller细胞AQP4表达下调,缺氧可能影响细胞代谢变化,引起K+外流.     

急性髓细胞白血病微分化型诊断分析

目的 探讨急性髓细胞性白血病微分化型(AML-Mo)诊断.方法 骨髓形态学、细胞化学染色、免疫学分型、染色体、融合基因检查.结果 急性髓细胞白血病微分化型形态学类似急性淋巴白血病,涂抹细胞较少见.过氧化酶为阴性或＜3％,糖原染色1例阴性,2例弱阳性与急性淋巴细胞白血病糖原染色有较大差异.非特异性酯酶染色阴性:免疫分型CD7、CD34、CD33、CD38出现不同程度阳性,染色体、融合基因无特殊改变.结论 形态学与急性淋巴细胞白血病相似,糖原染色有所不同,涂抹细胞较少见者均要引起重视,需要抽取骨髓或血液标本进行免疫分型检查,确诊是否为AML-Mo.     

淋球菌感染实验诊断方法的对比分析

目的 用不同方法对不同类型的淋球菌感染者进行实验诊断评价.方法 采用涂片革兰染色(涂片染色)、分离培养和血清抗体检测3种方法,分别对286例临床上疑似淋病患者进行实验检测和对比分析.结果 淋球菌急性感染者阳性率从高到低依次为涂片染色78.5%、分离培养76.3%、抗体检测2.3%;慢性感染者抗体检测64.2%、分离培养26.9%、涂片染色7.5%;泌尿生殖道感染者分离培养69.6%、涂片染色47.4%、抗体检测30.4%;口腔、肛门直肠感染者分离培养62.1%、涂片染色34.5%、抗体检测10.3%;男性感染者分离培养66.9%、涂片染色55.1%、抗体检测17.4%;女性感染者分离培养73.1%、涂片染色27.8%、抗体检测8.3%.结论 应根据不同类型的淋球菌感染选择恰当的检测方法,以提高实验诊断的准确性.     

腹水常规检测协助诊断淋巴瘤1例

笔者在临床工作中对1例多浆膜腔积液患者腹水进行了检测,细胞涂片瑞氏染色镜检发现大量各阶段幼稚淋巴细胞[1],外周血涂片亦检出幼稚淋巴细胞,与病理检测结果一致.血液细胞学免疫组化染色分析证实为B细胞淋巴瘤.现将患者资料报道如下.     

黄曲霉毒素B1对非洲绿猴肾细胞的毒性效应及作用机制研究

目的探讨黄曲霉毒素B1(AFB1)对非洲绿猴肾细胞(Vero E6)的毒性效应及其作用机制。方法体外培养Vero E6细胞,不同浓度AFB1处理细胞后,采用CCK-8法检测细胞存活率;检测乳酸盐脱氢酶(LDH)释放率;利用Annexin V/PI双染、DAPI染色研究细胞死亡机制。结果 AFB1对Vero E6细胞有显著毒性损伤效应,200μmol/L AFB1处理Vero E6细胞48h后,细胞存活率不到10%。细胞LDH释放率随着AFB1浓度增加而显著升高。Annexin V/PI染色检测到细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻。DAPI染色检测到细胞核碎裂。结论 AFB1对Vero E6细胞具有明显的毒性损伤作用,其可能通过凋亡的机制引起细胞死亡。