6-[N-(4-氨基丁基)-N-乙基]氨基-2,3-二氢-1,4-酞嗪二酮的合成

目的：建立一种合成化学发光标记试剂6－[N－（4－氨基丁基）－N－乙基]氨基－2，3－二氢－1，4－酞嗪二酮（ABEI）的简便，经济的新方法。方法：室温下用KOH将邻苯二甲酰亚胺转化为邻苯二甲酰亚胺钾盐，并进一步进行甲基化，硝化和还原反应，得到N－甲基－4－氨基邻苯二甲酰亚胺，N－（4－溴丁基）邻苯二甲酰亚胺与N－甲基－4－氨基邻苯二甲酰亚胺缩合之后，通过乙基化和肼解的反应得到目的的产物ABEI。结果：按起始原料计算，ABEI的总收率为4．4％，经熔点、核磁、质谱、红外，元素分析等方法鉴定，各中间体及目的产物均与其分子结构相符。结论：起始原料价廉易得，反应步骤操作简便，有利于降低反应成本。     

6-生物素氨基己酸-七叶亭合成及其生物活性评价

[目的]优化6-生物素氨基己酸-七叶亭（6-biotinamidohexanoic acid-esculetin,Bio-AHA-ESC）制备工艺,并初步评价其生物学活性。[方法]以1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐[1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide hydrochloride,EDCI]和N,N’-二环己基碳化二亚胺（N,N’-dicyclohexyl carbodiimide,DCC）为偶联催化剂,通过考察反应温度、时间、EDCI用量、4-二甲氨基吡啶（4-dimethylaminopyridine,DMAP）用量和七叶亭（esculetin,ESC）与6-生物素氨基己酸（6-biotinamidohexanoic acid,Bio-AHA）投料比,优化合成制备工艺;采用半制备液相色谱法对产物进行分离、纯化,并通过紫外光谱、高分辨质谱和核磁氢谱进行结构鉴定。最后对其氧化应激损伤保护作用和抗炎活性进行初步评价。[结果] EDCI是较为理想的催化剂,优化反应条件为：ESC与Bio-AHA摩尔比为2:1,DMAP添加...     

量子点的制备及其与葡萄球菌蛋白A偶联条件的优化

目的:制备量子点与葡萄球菌蛋白A(Staphylococcal protein A,SPA)的偶联物,探究偶联反应的最佳条件.方法:采用"经典注入法"制备碲化镉量子点,使用1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)和N-羟基丁二酰亚胺(NHS)作为偶联剂用于偶联量子点和SPA,采用单因素考察法,分别探究...     

肝癌单克隆抗体F(ab′)_2段与葡萄球菌肠毒素A结合物的制备及其活性

目的：制备超抗原（SAg）葡萄球菌肠毒素A（SEA）与抗人肝细胞癌单克隆抗体（McAb）HAb18F（ab′）2段的结合物，并对其活性进行鉴定．方法：提取MCAbHAb18并用木瓜蛋白酶切取其F（ab′）2段，用SPDP制备HAb18F（ab′）2－SEA结合物，凝胶色谱柱纯化后用SDS－PAGE鉴定各收集峰，免疫组化ABC法鉴定结合物中的HAb18F（ab′）2的抗体活性，MMT法鉴定结合物中的SEA活化T细胞的活性．结果：成功地制备了HAb18F（ab′）2－SEA结合物，并且制备的结合物具有肝癌抗体活性和活化外周血单个核细胞的功能．结论：SPDP是一种很好的蛋白质交联剂，本实验制备的HAb18F（ab′）2－SEA结合物可用于McAb与SAg结合物导向治疗肝癌的实验研究．     

两种不同制备酶标记结合物方法的比较

①目的 对过碘酸盐经典法（经典法）和过碘酸盐改良法（改良法）制备的酶标结合物进行比较。②方法 两种方法均用过碘酸盐氧化辣根过氧化物酶（HRP）使醛基暴露以提高酶与抗体（或抗原）的结合率。但在用NaIO4氧化前应将酶蛋白分子上的氨基进行处理，以防酶经氧化后形成醛基造成自身交联，为此，经典法是用二硝基氟苯将氨基封闭，而改良法是在低PH条件下用NaIO4直接氧化HRP。用二硝基氟苯封闭仍有35%的HRP发生自身交联，而且酶的活性受影响。而改良法在低PH条件下直接氧化HRP，仅5%HRP有自身交联而且活性不受影响。我们用上述方法分别制备了两种酶结合物，并对两种酶结合物作了质量对比试验，包括对流电泳、酶活性测定。③结果 改良法酶结合物活性及产率明显比经典法高。④结论 过碘酸盐改良法制备的酶结合物活性及产率均较过碘酸盐经典法好。     

香豆素衍生物合成的研究（Ⅲ.7—羟基香豆素衍生物的合成）

探讨３－取代氨基乙基－４－甲基－７－羟基香豆素衍生物合成的简便方法。方法 间苯二酚和２－（β－二乙氨基惭基乙酰乙酸乙酯经Ｐｅｃｈｍａｎｎ反应得３－（β－二乙氨基）乙基－４－甲基－７－羟基香豆素，再经Ｗｉｌｌｉａｍｓｏｎ反应，生成７－羟基香豆素的衍生物。     

TMB应用于固相酶染色法测定抗核抗体

用３３＇５５＇－四甲基联苯胺（ＴＭＢ）作为辣根过氧化酶（ＨＲＰ）的底物，用鼠肝片作为抗原基质片，建立了固相酶染色法检测抗核抗体（ＡＮＡ）。结果显示该方法稳定性好、敏感度高，酶结合物和Ｈ２Ｏ２用量少且ＴＭＢ又无致癌性，比间接免疫荧光法（ＩＦＡ）有更高的检出率；比３３－二氨基联苯胺（ＤＡＢ）酶免疫染色法有更易辨别核型等优点。     

溪黄草中黄酮甙甙元的质谱分析

从冬凌草的同科属植物溪黄草中提取分离到一个黄酮忒化合物，其结构为5一羟基4’一甲氧基黄酮一7一葡萄糖忒［‘1。在对上述黄酮成的EI．MS测定中，得到了巩元的质谱图。通过图谱解析，认定该成元为5，7一二羟基“一甲氧基黄酮。1材料与方法1．1材料JMS－DI00质谱仪；数据处理系统；；IMA2000；黄酮成（自制）。1．2实验方法EI．MS测定条件：电离电压75V，电离电流300叩；样温：200－Zed℃；质谱由河南省化学所测试中心测定。2结果与分析在对该化合物5．羟基4’．甲氧基黄酮一7．葡萄萄式进行EI．MS测定时，得到的成元质谱图（图1…     

具有pH和还原双重敏感性壳聚糖纳米微凝胶的制备及其控释性能

以含双硫键的N,N-二（3-羧基丙烯酰）胱胺(BCCy)为交联剂,在1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐/N-羟基琥珀酰亚胺（EDC/NHS）的催化下将壳聚糖（CS）交联,在水溶液中制备了纳米微凝胶。通过红外、元素分析、纳米粒度仪和扫描电镜等对其结构和形貌进行了表征,考察了pH和还原性环境对粒径的影响。对抗癌药物喜树碱（CPT）进行了负载,考察了载药粒子在还原性环境中对药物的控释性能。结果表明：随交联剂用量的增加,纳米微凝胶的粒径减小。该纳米微凝胶具有较好的生物相容性、较显著的pH和还原敏感性。     

无溶剂法荧光碳点的制备及卵巢癌细胞荧光成像研究

目的：构建基于碳点（carbon dots,CDs）的荧光纳米探针CDs@Tf,探讨其材料制备及应用于卵巢癌细胞荧光成像的潜能。方法：以二水合柠檬酸钠和尿素为原料,在高温下经无溶剂法制备一种高效荧光碳点,用新型四唑化合物（MTS）法检测其对人卵巢癌细胞HO?8910及人脐静脉血管内皮细胞EA.hy926的细胞毒性。昆明小鼠经尾静脉注射CDs 7 d和21 d后采集主要器官（心、肺、肾、肝、脾）进行组织学分析,评价CDs的活体毒性。利用1?（3?二甲基氨基丙基）?3?乙基碳化二亚胺盐酸（EDC·HCl）及 N?羟基琥珀酰亚胺（NHS）作为化学耦合剂,将制备的CDs与转铁蛋白（Tf）共价结合成荧光分子探针CDs@Tf。对其表征分析并应用于细胞成像。结果：制得一种平均粒径为3.85 nm的球形荧光CDs,最佳激发波长为400 nm,最大发射波长为520 nm,量子产率高达93%。所制备的CDs具有较高的荧光强度和低细胞毒性等性质。建立的CDs@Tf分子探针能靶向识别H0?8910卵巢癌细胞。结论：成功构建一种光学性能优良、毒性低的靶向性新型荧光纳米探针CDs@Tf,有助于应用于卵巢癌的早期筛查。     

10-O-己二酸-[2′-甲氧基-4′-（3″-酮-1″-丁烯基）-苯酯]-双氢青蒿素酯的制备

目的合成10-O-己二酸-[2′-甲氧基-4′-（3″-酮-1″-丁烯基）-苯酯]-双氢青蒿素酯。方法以香草醛为起始原料,在碱性条件下,与丙酮缩合生成脱氢姜酮,再与己二酸在N,N′-二环己基-碳二亚胺（DCC）、对二甲氨基吡啶（DMAP）作用下,进行酯化反应,再与双氢青蒿素通过DCC法缩合制得最终产物。结果与结论合成产物总产率为26．9％,熔点为57℃,其结构经1^H-NMR、MS确证。     

查耳酮的制备Ⅱ

目的：本文研究了六种查耳酮的制备方法，查耳酮是合成黄酮类化合物的中间体。方法：在氢氧化钠催化下，苯乙酮与苯甲醛反应。结果：制备１－苯－３－（４－二甲氨基苯基）－２－丙烯酮（５），１－苯－３－（３－硝基苯基）－２－丙烯酮（６），１－苯－３－（２－羟基苯基）－２－丙烯酮（７），１－苯基－３－（４－甲氧基苯基）－２－丙烯酮（８），１－（２，４－二甲氧基苯基）－３－（４－甲氧基苯基）－２－丙烯酮（９）和１     

肝舒宁口服液质量标准研究

１　实验材料和仪器　　岛津ＵＶ－２４０型紫外分光光度计；１．８－二羟基蒽醌（上海第一制药厂）；硅胶Ｇ（青岛海洋化工厂）；所用试剂、试药均为分析纯。２　实验方法和结果２．１　总蒽醌的含量测定２．１．１　标准品溶液的制备　精密称取１，８－二羟基蒽醌９．９ｍｇ，加入甲醇制成每毫升含０．０９９ｍｇ的溶液，作为对照品溶液。２．１．２　供试品溶液的制备　精密吸取肝舒宁口服液２ｍｌ，置烧瓶内，用混合酸（冰醋酸：２５％盐酸＝５：１）２４ｍｌ，水浴回流３０ｍｉｎ．取出迅速冷却，酸水解液加氯仿萃取３次，每次１０ｍｌ…     

胃癌单克隆抗体-丝裂霉素C结合物的制备及其细胞毒特征

作者报道胃癌单克隆抗体MG11-丝裂霉素C(MMC)结合物的制备及其对肿瘤细胞的杀伤作用。首先用戊二酐处理MMC,于MMC上引入羧基,MMC衍生物与N羟基琥珀酰亚胺及2,2′-二环已基碳二亚胺反应,得到MMC活性酯,后者与抗体反应将MMC引入抗体中。经测定,每克分子抗体中引入约6～7克分子药物,结合物对人胃癌细胞KATⅢ具有较强的选择性杀伤作用,在0.56μg/ml水平(药物浓度)对肿瘤细胞杀伤牢达60％,优于游离药物(51％)及无关抗体结合物(9.3％),提示选用的胃癌单抗对MMC具有较好的导向作用。     

CELISA法的建立及其在免疫导向药物制备过程中的应用

用细胞ＥＬＩＳＡ（ＣＥＬＩＳＡ）法测定了导向药物Ｂ１５９－表阿霉素结合物和Ｂ１５９－阿霉素结合物制备过程中含单抗Ｂ１５９腹水、Ｂ１５９纯化物和结合物的抗体活性。结果表明，ＣＥＬＩＳＡ法较活细胞免疫荧光法有更高的敏感性，是导向药物制备过程中鉴定免疫活性的一种稳定、实用、经济而简单的方法。     

O-乙酰氨基半乳糖基化氨基酸的化学合成

目的 为获得精确定位糖基化糖肽，合成Ｏ－乙酰氨基半乳糖基化氨基酸，作为糖肽固相合成的原料。方法 利用环状糖结构的半缩醛羟基可与含侧链羟基氨基酸的羟基形成糖苷键，用化学方法，使过乙酰化ＣａＩＮＡｃ与氨基被９－Ｆｌｕｏｒｅｙｌｍｅｔｈｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ（Ｎ－α－Ｆｍｏｃ）保护的丝氨酸或苏氨酸连接。结果 反应产物通过反相制备ＨＰＬＣ纯化后，可作为Ｏ－连接糖肽合成构建单位（Ｂｕｉｌｄｉｎｇ ｂｌｏｃｋ     

5-氯-2，4-二羟基吡啶的合成

目的：合成二氯嘧啶脱氢酶抑制剂5-氯-2，4-二羟基吡啶。方法：以丙二腈、原乙酸三甲酯、1，1-二甲氧基三甲胺为起始原料制备1，1-二氰基-4-（N，N-二甲基氨基）-2-甲氧基-1，3-丁二烯，经冰醋酸环合得2-羟基-4-甲氧基-3-氰基吡啶，再经硫酰氯氯化形成5-氯-4-甲氧基-3-氰基-2-（1H）-吡啶酮，经47％HBr水解得5-氯-2，4-二羟基吡啶。结果：合成了5-氯-2，4-二羟基吡啶，总收率为56％。结论：该工艺路线成本较低，反应条件温和，操作简便，容易实现工业化生产。     

麻黄碱衍生物的合成

本文报道N－（1－苯基－3－羟基－5－吡唑酮－4－亚甲基）－麻黄碱及其伪麻黄碱、去甲基伪麻黄碱衍生物和1－苯基－3－羟基－4－取代氨基亚甲基－5－吡唑酮等10种新化合物的合成，并经过元素分析和红外光谱确定了其结构。     

N—取代—琥珀酸二酰亚胺衍生物的合成

本文报道N－取代－琥珀酸二酰亚胺衍生物的合成。化合物的制备是以琥珀酸二酰亚胺为载体与芳香伯胺和伸胺在38％甲醛和95％乙醇中回流，制得了8种新N－Mannich碱。     

应用RT—PCR技术克隆人白细胞介素6的cDNA

0引言人白细胞介素6（11。－6）是一种由212个氨基酸组成的多功能细胞因子「‘’，我们应用反转录一聚合酶链反应（RT－P（二）的方法，成功地从人Hel。a细胞中克隆了11。－6的CDNA，为后续的表达奠定了基础．l材料和方法1．l材料人Hel。a细胞系购自中科院细胞生物所；pUC19及JM103为本实验室保存；Taq聚合酶、AMV反转录酶、T4ljNA连接酶及MagicPCR纯化试剂盒为Promega产品；重组a干扰素和DMEM培养基为GIBCO产品；内切酶为华美公司产品；PCRdl物PI：5’CGGAATTCATGC－CAGlxACCCCCAGGAG3’pZ：5’（7G（iGATCC…