两种常见葡萄糖—6—磷酸脱氢酶基因突变检测及临床分析

通过扩增葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ６ＰＤ）基因第１０，１１，１２，１３外湿子６３９ｂｐＤＮＡ片段结合寡核苷酸探针斑点杂交技术，在４０例广西籍Ｇ６ＰＤ缺陷中检测中国人常见Ｇ６ＰＤ突变ｃＤＮＡ１３７６（Ｇ→Ｔ）和ｃＤＮＡ１３８８（Ｇ→Ａ）。结合检出ｃＤＮＡ１３７６（Ｇ→Ｔ）男性半合子１２例，ｃＤＮＡ１３８８（Ｇ→Ａ）男性半合子１０例，ｃＤＮＡ１３８８（Ｇ→Ａ）女性纯合子１例，ｃＤＮＡ１３７６（Ｇ→Ｔ     

葡萄糖—6—磷酸脱氢酶定量比值法的临床应用

目的 了解葡萄糖—6—磷酸脱氢酶定量比值法临床应用的意义。方法 采用四氮唑蓝定量显色。检测红细胞G6PD、6PGD活性。求其比值，取代高铁血红蛋白还原试验。检测G6PD缺乏患儿的酶活性。结果 3年来、检出G6PD缺乏者80例。其中，蚕豆病17例、新生儿G6PD缺乏11例、药物性溶血3例、地贫复合G6PD缺乏7例、慢性溶贫42例。并对其中18例患者做了家系调查，13例男性患者中检出母亲杂合子9例，父亲半合子2例(包括父母G—6—PD活性均下降)。5例女性患者中检出母亲杂合子2例，父亲半合子1例、父母酶活性正常6例。结论 G6PD／6PCD定量比值法。检测酶活性的准确率高、快速、简便，有利于临界上对G6PD缺乏的明确诊断。     

葡萄糖－6－磷酸脱氢酶缺乏红细胞脂质过氧化的研究

按硫代巴比妥酸法测定了葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ６ＰＤ）缺乏和正常红细胞的丙二醛（ＭＤＡ）含量，按改良Ｎｉｓｓｅｌｂａｕｍ法测定还原型辅酶ＩＩ（ＮＡＤＰＨ）的含量。Ｇ６ＰＤ缺乏红细胞的ＭＤＡ和ＮＡＤＰＨ分别为３８．７４ｎｍｏｌ／ｇＨｂ和１８０３．６μｍｏｌ／ｇＨｂ；正常红细胞中含量则分别为２５．６０ｎｍｏｌ／ｇＨｂ和２２４２．８ｔＬｍｏｌ／ｇＨｂ。在受到过氧化刺激后，Ｇ６ＰＤ缺乏红细胞的ＭＤＡ生成明显大于正常红细胞，ＮＡＤＰＨ明显减少，而正常红细胞的ＮＡＤＰＨ则增加。维生素Ｅ能保护Ｇ６ＰＤ缺乏红细胞，使其在过氧化刺激下ＭＤＡ生成不增加。研究提示，Ｇ６ＰＤ缺乏红细胞的脂质过氧化损伤比正常严重，其机制是ＮＡＤＰＨ生成不足。     

应用ARMS法检测广东省常见的三种葡萄糖—6—磷酸脱氢酶基因？…

目的 应用突变特异性扩增系统法筛查广东省常见的葡萄糖－６－磷酸脱氢酶基因的Ｇ１３８８Ａ,Ｇ１３７６Ｔ和Ａ９５Ｇ,并初步估计其频率。方法 应用已建立的Ｇ１３８８Ａ和Ｇ１３７６Ｔ ＡＲＭＳ法和新建立的Ａ９５Ｇ ＡＲＭＳ法,对９０例广东地区男性,经Ｇ６ＰＤ定性和定量证明为Ｇ６ＰＤ缺乏进行检测。     

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶cDNA C1311T的多态性

目的 将突变特异性扩增系统法引入葡萄糖－６－磷酸脱氢酶Ｃ１３１１Ｔ突变型的检测,并利用它调查Ｃ１３１１Ｔ在正常人群中的发生频率,探讨此突变伴发的ＩＶＳ－１１ Ｃ９３５是否与酶活性降低有关。方法 测序检测Ｇ６ＰＤ缺乏症患者中的Ｃ１３１１Ｔ突变,利用已证实为Ｃ１３１１Ｔ标本探索Ｃ１３１１Ｔ的ＡＲＭＳ检测法最佳条件,用此法来确定中国人中Ｃ１３１１Ｔ的发生频率。     

漫谈“蚕豆病”和“葡萄糖—6—磷酸脱氢酶缺乏症”

１引言人们常说,某人患了或曾患过“蚕豆病”,将“蚕豆病”当成“葡萄糖－６－磷酸脱氢酶缺乏症（G６PD）”的代名词。这反映了人们对这两个概念还没有完全理解,同时也反映此病的中文全称太长、英文名不好读的缺点。因而通称为“蚕豆病”也情有可原。其实,两者正确的相互关系是G６PD缺乏症是“蚕豆病”发生的遗传基础（或遗传背景）;有这种遗传背景的人,不仅可以患上“蚕豆病”,而且还可以患其他溶血疾病,如多种药物引起的溶血、新生儿黄疸、某些感染性疾病引起的溶血（如肝炎、肺炎、伤寒、流感、腮腺炎）等。其中,新生儿黄疸…     

葡萄糖6磷酸脱氢酶缺陷的研究现状

红细胞葡萄糖6磷酸脱氢酶（G6PD）缺陷,是常见的红细胞酶病。常因某些诱因发生溶血,而引起G6PD缺陷的主要原因是G6PD基因突变1,以往检测已知突变主要用错配PCR／酶切法、寡核苷酸探针杂交法（ASD）。最近,杜传书等2已报道用突变特异性扩增系统（ARMS）来检测中国人G6PD基因3种常见的突变,大大加快了寻找新突变的速度。 1 G6PD的分子生物学 人的G6PD是一种X连锁性酶,1986年Persico等分离出G6PD的cDNA克隆,进行了其核苷酸的序列分析,阐明了G6PD基因的结构,并以cDNA推导出酶蛋白的一级结构是由479个氨基酸所…     

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶定量比值法的临床应用

目的了解葡萄糖-6-磷酸脱氢酶定量比值法临床应用的意义.方法采用四氮唑蓝定量显色,检测红细胞G6PD、6PGD活性,求其比值,取代高铁血红蛋白还原试验,检测G6PD缺乏患儿的酶活性.结果3年来,检出G6PD缺乏者80例,其中,蚕豆病17例、新生儿G6PD缺乏11例、药物性溶血3例、地贫复合G6PD缺乏7例、慢性溶贫42例.并对其中18例患者做了家系调查,13例男性患者中检出母亲杂合子9例,父亲半合子2例(包括父母G-6-PD活性均下降),5例女性患者中检出母亲杂合子2例,父亲半合子1例,父母酶活性正常6例.结论G6PD/6PGD定量比值法,检测酶活性的准确率高、快速、简便,有利于临界上对G6PD缺乏的明确诊断.     

福建畲族葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因突变型

目的研究福建畲族葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）基因突变型特点，调查其G6PD缺乏症发生率及基因频率。方法用硝基四氮唑蓝（NBT）纸片法进行G6PD缺乏症定性筛查，用突变特异性扩增系统、错配碱基PCR介导酶切位点／限制性内切酶图谱分析、聚合酶链反应．单链构象多态性分析（PCR-SSCP）和DNA测序进行基因突变型鉴定结果在1820名青水畲族和764名穆云畲族人中，分别发现101例和104例酶活性异常，两地的致病基因频率分别为0．0607和0．1706。在穆云乡54例纯畲族血缘的样本中，共检出nt1376G→T突变38例、nt1388G→A突变12例、nt95A→G突变6例，三种基因突变型分别占70．3％，18．5％和11．1％；并发现1例nt1376G→T复合nt95A→G突变、1例nt1376G→T复合nt1388G→A突变。在青水畲族中发现6例nt1024C→T突变，占8．6％；发现1例392G→T突变，结论①nt1376G→T、nt1388G→A是幅建畲族中主要的基因突变型，中华民族具有共同的G6PD基因突变型，因而可能源于共同的祖先。②在畲族人群中发现nt1376G→T、nt1388G→A、nt95A→G、nt1024C→T和nt392G→T 5种基因突变型。③发现nt1376G→T复合nt95A→G突变、nt1376G→T复合nt1388G→A突变④nt95A→G是穆云畲族中另一种常见的基因突变型；1024C→T是青水畲族中常见的一种G6PD基因突变型。⑤明确青水畲族中G6PD基因频率为0．0607，穆云畲族中为0．1706，为上述地区G6PD缺乏症的防治提供决策参考。     

广西瑶族与汉族葡萄糖—6—磷酸脱氢酶基因三种常见突变型？…

目的 研究广西瑶族葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ６ＰＤ）基因突变特点,并与汉族作比较。方法 用突变特异性扩增系统（ＡＲＭＳ）法对广西瑶族３４例和汉族３７例Ｇ６ＰＤ缺乏进行中国常见的三种Ｇ６ＰＤ基因突变型筛查。结果 广西３４例瑶族Ｇ６ＰＤ缺乏的基因型分别为Ｇ１３７６Ｔ １４例（４１．２％）,Ｇ１３８８Ａ９例（２６．５％）,Ａ９５Ｇ５例（１４．７％）,Ｃ１３１１Ｔ１例（２．９％）。     

1128例幼儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶筛查结果分析

目的了解盐田区幼儿园儿童葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症的发生率。方法采用G6PD/6PGD定量比值法测定G6PD活性,筛查盐田区幼儿园1 128例儿童的G6PD缺乏症发生情况。结果 1 128例儿童中,共筛查出G6PD缺乏症患儿56例,发生率为4.96%。其中男性发生率(6.47%)明显高于女性的发生率(3.50%),差异有统计学意义(P0.05);男性患儿中,重度缺乏的发生率(5.21%)高于中度缺乏的发生率(1.26%),女性患儿中,中度缺乏的发生率(2.28%)高于重度缺乏的发生率(1.22%),差异均具有统计学意义(P0.05)。结论盐田区属G6PD缺乏症的高发地区,应加强人群的筛查,早期发现和诊断G6PD缺乏症对防治该病引起的溶血具有重要意义。     

用等位基因特异聚合酶链反应检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因突变

葡萄糖 6 磷酸脱氢酶 (Ｇ6ＰＤ)缺乏症是中国南方人群中一种常见的遗传病之一 ,与药物性溶血、感染性溶血及新生儿高胆红素血症等有密切的关系。引起Ｇ6ＰＤ缺乏症的主要原因是Ｇ6ＰＤ基因点突变[1] 。现已发现引起中国人Ｇ6ＰＤ缺乏症的突变主要是 1376Ｇ→Ｔ、1388Ｇ→Ａ、95Ａ→Ｇ、392Ｇ→Ｔ、5 92Ｃ→Ｔ及 10 2 4Ｃ→Ｔ等六种突变[2 5] 。以往检测这些已知的突变 ,主要用错配扩增酶切法、等位基因寡核苷酸探针杂交等方法[2 5] 。最近 ,杜传书等[6] 报道用突变特异性扩增系统(ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｒｅｆｒａｃｔｏｒｙｍｕｔ…