华蟾素对人胃癌SGC7901细胞增殖及Rho GTPase表达的影响

目的 研究华蟾素对人胃癌SGC7901细胞增殖及Rho GTPase表达的影响.方法 将人胃癌SGC7901细胞分为华蟾素组和对照组,利用Cell Counting Kit-8检测(0.5、1.0、1.5、2.0 mg/mL)华蟾素组和对照组的人胃癌SGC7901细胞的增殖抑制情况,利用Western blot和RT-PCR分别检测不同浓度(0.5、1.0、2.0 ng/mL)华蟾素组和对照组的人胃癌SGC7901细胞内Rho GTPase(RhoA、Cdc42、Rac1)蛋白和mRNA表达的水平.结果 与对照组相比,0.5、1.0、1.5、2.0 mg/mL华蟾素组对SGC7901细胞均具有增殖抑制作用(P＜0.05).0.5、1.0、2.0 mg/mL华蟾素组的SGC7901细胞内Rho GTPase(RhoA、Cdc42、Rac1)蛋白和mR-NA表达明显降低且呈剂量依赖性(P＜0.05).结论 华蟾素抑制胃癌SGC7901的增殖的机制可能与下调Rho GTPase(RhoA、Cdc42、Rac1)信号通路的表达有关.     

Rac1蛋白在卵巢癌组织中的表达及其对卵巢癌细胞株SKOV3增殖及迁移的作用

目的 研究Rac1蛋白在人卵巢浆液性腺癌组织中的表达及其对卵巢癌细胞株SKOV3恶性增殖和迁移的影响.方法 Western blot检测人卵巢浆液性腺癌组织、卵巢良性浆液性囊腺瘤组织及卵巢正常组织中Rac1蛋白的表达水平;构建Rac1表达缺失的细胞株SKOV3-Rac1i;分别用细胞划痕实验、MTT及平板克隆实验检测SKOV3-Rac1i细胞迁移能力、细胞增殖及克隆形成能力.结果 卵巢浆液性腺癌组织中Rac1蛋白表达水平显著高于卵巢良性浆液性囊腺瘤组织[(0.89 ±0.17)vs(0.69 ±0.24),P＜0.05]和卵巢正常组织[(0.89±0.17) vs (0.72±0.12),P＜0.05];与亲代细胞相比,SKOV3-Rac1i细胞表现出迁移能力减弱(P＜0.05)和增殖能力明显受限(P＜0.05).结论 Rac1在人卵巢浆液性腺癌组织中呈高表达,其可能是通过影响细胞迁移能力及细胞的增殖而促进卵巢癌细胞的恶性生物行为.     

L-NAME调控EMT抑制卵巢癌细胞迁移

目的探讨一氧化氮合酶泛抑制剂左旋硝基精氨酸甲基酯(L-NAME)对卵巢癌SKOV3细胞体外增殖、迁移以及对上皮间充质转化(EMT)标志物的影响。方法利用L-NAME抑制卵巢癌SKOV3中一氧化氮合酶(NOS)功能,以L-NAME处理组为实验组,二甲基亚砜(DMSO)组为对照组,采用CCK8增殖实验、平板克隆形成试验、划痕试验和Transwell小室迁移实验检测L-NAME对卵巢癌SKOV3细胞增殖和迁移功能的影响;并利用荧光定量PCR和Western blot检测卵巢癌细胞上皮细胞标志物E-cadherin和间充质细胞标志物N-cadherin、Vimentin和Fibronectin的表达,观察L-NAME对卵巢癌SKOV3细胞EMT标志物的调控作用。结果 CCK8增殖实验和平板克隆形成实验显示L-NAME抑制SKOV3细胞增殖功能(P0.05);划痕实验和Transwell小室实验显示L-NAME抑制SKOV3细胞迁移功能(P0.05);荧光定量PCR和Western blot结果显示L-NAME上调E-cadherin的表达,下调N-cadherin、Vimentin和Fibronectin的表达(P0.05)。结论 L-NAME抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移功能,调节EMT标志物变化。     

miR-599靶向YAP1对卵巢癌细胞迁移及侵袭的影响

目的：探讨miR-599靶向Yes相关蛋白1(YAP1)对卵巢癌细胞迁移及侵袭的影响。方法：采用qRT-PCR检测正常卵巢上皮细胞IOSE-80与卵巢癌细胞SKOV3中miR-599的表达;将SKOV3细胞分为6组：空白组、miR-NC组、miR-599 mimics组、siRNA-NC组、YAP1 siRNA组、YAP1 siRNA+miR-599 inhibitor组,划痕实验检测各组细胞迁移;Transwell实验检测各组细胞侵袭;Western Blot检测各组细胞中YAP1蛋白表达;双萤光素酶实验验证miR-599与YAP1的关系。结果：miR-599在SKOV3细胞中的表达水平显著低于IOSE-80细胞（P<0.05）;过表达miR-599或沉默YAP1均可抑制SKOV3细胞的迁移和侵袭;miR-599可靶向调控YAP1表达;抑制miR-599可逆转沉默YAP1对SKOV3细胞迁移和侵袭的抑制作用。结论：过表达miR-599通过下调YAP1来抑制SKOV3细胞的迁移和侵袭。     

PI3K/AKT信号转导途径、NF-KB蛋白及FSH在卵巢癌发展作用中的意义

目的探讨卵泡刺激素(FSH)促进上皮性卵巢癌细胞增殖、侵袭的作用途径,以期从分子水平上进一步了解卵巢癌的发病机制。方法培养正常人卵巢上皮细胞(HOSE细胞)、卵巢浆液性囊腺癌细胞株(SKOV3细胞),粘液性囊腺癌细胞株(3AO细胞),取对数期进行实验,分为3组:对照组、FSH组、LY294002组、FSH+LY294002组。采用四甲基偶氮蓝法(MTT法)检测不同浓度FSH刺激下的HOSE细胞、SKOV3细胞、3AO细胞的增殖情况,并筛选出峰浓度;在FSH峰浓度实验条件下,体外侵袭实验检测各组细胞的侵袭能力;通过蛋白印迹法(Western-blot)检测各组细胞的卵泡刺激素受体(FSHR)、磷酸化Akt(p-Akt)、NF-KB的表达水平。结果 40U/L浓度下的FSH处理SKOV3细胞、3AO细胞,其细胞增殖率最高。FSH组的细胞侵袭能力显著高于其他各组,即SKOV3细胞、3AO细胞的穿过细胞数较其他各组显著增高,P0.05。与对照组相比,FSH组SKOV3细胞中p-Akt蛋白表达水平和NF/KB蛋白表达水平均显著增高,而FSH+LY294002组p-Akt蛋白表达水平和NF/KB蛋白表达水平较LY294002组的表达也明显升高,差异均有统计学意义(P0.05)。结论在卵巢癌的发生发展中,PI3K/Akt信号被激活、NF/KB活性增加,从而使得卵巢癌细胞的增殖和侵袭能力增强,因此,PI3K/Akt信号通路活化和NF/KB活性增强在卵巢癌的发生中有重要意义。     

NCOA5通过调控上皮间质转化促进卵巢癌细胞的侵袭转移能力

目的 研究核受体共激活因子5 (NCOA5)对卵巢癌细胞侵袭和转移能力的作用及分子机制。方法 常规培养卵巢癌细胞株SKOV-3、A2780、OC3、HO-8910和正常卵巢上皮细胞系IOSE80,Western blot检测各细胞中NCOA5蛋白的表达水平。选取高表达NCOA5的卵巢癌细胞SKOV-3 和A2780,各分为si-NC组、si-NCOA5组,并分别转染NC siRNA和NCOA5 siRNA。Boyden实验检测各组细胞侵袭能力,Transwell实验检测各组细胞转移能力,Western blot检测各组细胞上皮间质转（EMT）相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、vimentin和Slug蛋白的表达水平。结果 Western blot结果显示NCOA5在卵巢癌细胞中的表达显著上调(P<0.05)。在SKOV-3和A2780细胞中干扰NCOA5的表达均显著抑制卵巢癌细胞侵袭和转移能力 (P<0.05),并促进EMT相关蛋白E-cadherin的表达,抑制细胞中EMT相关蛋白N-cadherin、vimentin和Slug蛋白的表达(P<0.05)。结论 NCOA5促进卵巢癌侵袭转移能力,具有作为卵巢癌新型预后生物标志物和治疗分子靶点的潜力。     

RNAi沉默N-cadherin通过MEK-ERK信号通路抑制卵巢癌细胞增殖、侵袭、迁移及上皮-间质转化过程

目的 探讨沉默神经性钙黏附蛋白(N-cadherin)对卵巢癌细胞增殖、侵袭、迁移与上皮-间质转化的影响及分子机制。方法 收集2021年3月～2021年12月我院卵巢癌患者手术切除的卵巢癌组织与邻近癌旁正常组织,采用免疫组织化学染色检测N-cadherin蛋白表达。通过RNAi技术沉默卵巢癌细胞SKOV3细胞中N-cadherin的表达后分为空白对照组、空载体组、siRNA-N-cadherin组。CCK-8法、细胞克隆形成实验、流式细胞术分别检测各组细胞增殖活性、克隆形成能力以及细胞周期分布,Transwell实验和细胞划痕实验分别检测各组细胞侵袭与迁移能力,实时荧光定量PCR检测各组细胞中N-cadherin、上皮性钙粘附分子(E-cadherin)mRNA表达,免疫细胞化学染色检测各组细胞中N-cadherin、E-cadherin、基质金属蛋白酶2(MMP2)和基质金属蛋白酶9(MMP9)蛋白表达,Western blot检测各组细胞中MEK、ERK蛋白表达。结果 与癌旁正常组织比较,卵巢癌组织中N-cadherin呈高表达(P<0.05)。与空白对照组和空载体组比较,沉...     

岩藻糖基转移酶Ⅶ通过sLeX糖基化诱导肺癌A549细胞上皮间质转化的研究

目的研究岩藻糖基转移酶Ⅶ（FUT7）对肺癌A549细胞上皮间质转化（EMT）的影响。方法采用质粒转染法对A549细胞中FUT7基因进行过表达;划痕实验检测细胞侵袭能力;Westernblot法检测唾液酸化的路易斯寡糖-X抗原（sLeX）糖抗原以及EMT相关蛋白表达水平。结果转染FUT7过表达质粒后A549细胞中FUT7蛋白的表达明显增强（P＜0.01）,与空白质粒转染组相比,sLeX抗原表达增高（P＜0.05）,细胞侵袭能力增强。FUT7过表达质粒转染组与空白质粒转染组相比,E-cadherin蛋白表达减少,N-cadherin、Vimentin蛋白表达均增加（均P＜0.01）,利用sLeX抗体封闭细胞表面sLeX抗原后FUT7过表达细胞E-cadherin蛋白表达增加（P＜0.05）,而N-cadherin、Vimentin蛋白表达减少（P＜0.05或0.01）。结论FUT7可通过sLeX糖基化作用诱导肺癌A549细胞发生EMT,导致细胞侵袭转移能力增强。     

slfn5基因在卵巢癌上皮-间质转化中的作用及机制

目的 探讨slfn5基因在卵巢癌组织中的表达及其对卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮-间质转化(EMT)的影响。方法 收集杭州市第一人民医院确诊的卵巢癌患者手术切除标本,采用荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测卵巢癌组织中slfn5 mRNA的相对表达量。采用Western blot法检测并比较卵巢癌细胞系A2780、SKOV3、OVCAR3、HO8910中SLFN5蛋白的相对表达量;选取表达高的SKOV3、OVCAR3细胞株转染沉默slfn5基因,分为si-NC组,si-slfn5^#1组、si-slfn5^#2组。Transwell和细胞划痕实验比较各组细胞侵袭、迁移能力。Western blot法考察各组细胞SLFN5及E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形纤维蛋白(Vimentin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和Snail等EMT相关蛋白和Wnt/β-链环蛋白(β-catenin)信号通路关键蛋白β-catenin的相对表达量。结果 相比正常组织,卵巢癌组织slfn5 mRNA相对表达量明显增高,差异有统计学意义(P<...     

hsa-miR-302a-3p靶向VEGFA抑制胃癌细胞增殖的机制研究

目的 探讨过表达hsa-miR-302a-3p下调血管内皮生长因子A（VEGFA）对胃癌细胞SGC-7901存活、运动和上皮间质转化的调节作用。方法 采用细胞转染,将hsa-miR-302a-3p mimic转染于miR组细胞,pc-VEGFA转染于VEGFA组细胞,同时将两个基因共转染于miR+VEGFA组。采用RT-PCR和Western blot检测转染效率,生物信息学靶向预测和荧光素实验验证两个基因靶向关系,采用CCK-8法检测各组细胞增殖,Transwell检测各组细胞侵袭能力,划痕实验检测各组细胞迁移能力,显微镜下观察细胞的形态是否发生上皮间质转化（EMT）,采用Western blot检测各组细胞存活相关蛋白Ki67和Caspase-3、EMT相关蛋白E-cadherin、Vimentin、N-cadherin和Snail以及VEGFA下游靶基因p-P38、p-MAPKAPK和p-Hsp27蛋白表达水平。结果 VEGFA是miR-302a-3p的预测靶位点;与对照组相比,miR组细胞数量、侵袭和迁移率均下降（ P<0.05）,VEGFA组细胞数量、侵袭和迁移率均升高（ P<0.05）;与VEGFA组相比,miR+VEGFA组细胞数量、侵袭和迁移率均下降（ P<0.05）,E-cadherin蛋白表达水平上调（ P<0.05）,Vimentin、N-cadherin和Snail蛋白表达水平下调（ P<0.05）,p-P38、p-MAPKAPK和p-Hsp27蛋白表达水平下调（ P<0.05）。结论 hsa-miR-302a-3p通过抑制VEGFA的表达,抑制胃癌细胞SGC-7901的增殖、侵袭和迁移。     

白藜芦醇对食管鳞癌Eca-109细胞侵袭迁移及EMT的影响

目的:研究白藜芦醇(RES)对食管鳞癌Eca-109细胞侵袭迁移及上皮间质转化(EMT)的影响.方法:用不同浓度(50和100 μmol/L)的RES处理Eca-109细胞,采用细胞划痕实验、Transwell小室实验检测细胞迁移侵袭能力,荧光定量PCR检测EMT蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin和MMP-2、MMP-9 mRNA的表达,Western blot检测E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、MMP-2和MMP-9蛋白表达.结果:与对照组比较,RES各浓度(50 μmol/L和100 μmol/L)组均可明显抑制Eca-109细胞侵袭迁移(P<0.01),下调N-cadherin、Vimentin、MMP-2、MMP-9 mRNA和蛋白表达(P<0.05~P<0.01),增加E-cadherin mRNA和蛋白表达(P<0.01).结论:RES抑制Eca-109细胞侵袭迁移能力,其机制可能通过下调MMP-2、MMP-9的表达,调控EMT蛋白(E-cadherin、N-cadherin和Vimentin)的表达、抑制上皮间质转化过程.     

外源性α1-抗胰蛋白酶对非小细胞肺癌转移与侵袭的促进作用研究

目的 探讨α1-抗胰蛋白酶(A1AT)对非小细胞肺癌(NSCLC)转移与侵袭的促进作用.方法 向细胞培养液中加入不同质量浓度A1AT(0,600,1 200,2 400 ng/mL),采用免疫印迹法和免疫荧光技术分别检测上皮细胞标志物E-cadherin、间质细胞标志物N-cadherin、Vimentin;采用细胞transwell实验和划痕试验检测细胞的转移和侵袭能力.结果 A1AT质量浓度越高,E-cadherin表达越低,N-cadherin和Vimentin表达含量越高,细胞的转移和侵袭能力越强.结论 外源性A1AT能够促进NSCLC的转移与侵袭.     

褪黑素对卵巢癌SKOV3细胞侵袭、迁移和血管生成的影响

研究褪黑素对卵巢癌SKOV3细胞侵袭、迁移和血管生成的影响。MTT实验、划痕实验和Transwell侵袭实验分别观察褪黑素对SKOV3细胞增殖、侵袭和迁移的影响。诱导HUVECs成管,观察褪黑素对其影响。Western blot法检测SKOV3细胞内血管内皮生长因子(VEGF)、钙黏附蛋白E(E-cadherin)、基质金属蛋白酶9(MMP9)和波形蛋白(Vimentin)的表达。建立卵巢癌移植瘤模型,免疫组化检测CD31的表达。结果显示,褪黑素能抑制卵巢癌SKOV3细胞的侵袭和迁移,并且明显下调MMP-9、Vimentin和VEGF蛋白的表达,上调E-cadherin的表达。此外,褪黑素抑制了HUVECs的小管生成,体内CD31的免疫组化结果也显示褪黑素能够抑制微血管密度。结果提示,褪黑素能抑制卵巢癌细胞的侵袭、迁移和血管生成。     

肿瘤坏死因子受体相关因子6高表达对子宫内膜癌细胞侵袭、迁移及上皮间质转化的影响

目的:探究肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)高表达对子宫内膜癌细胞侵袭、迁移及上皮间质转化的影响。方法:将Ishikawa细胞随机分为三组：对照组(子宫内膜癌细胞Ishikawa未转染)、NC组(子宫内膜癌细胞Ishikawa转染空载质粒)和TRAF6高表达组(子宫内膜癌细胞Ishikawa转染TRAF6过表达质粒);实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹(WB)检测TRAF6 mRNA以及蛋白表达情况;Transwell实验、划痕实验以及裸鼠移植瘤实验检测细胞侵袭、迁移能力;WB检测上皮间质转化标志蛋白E型钙黏蛋白(E-cadherin)、闭合蛋白(Occludin)、N型钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)表达水平。结果:相较于人子宫内膜上皮细胞,子宫内膜癌细胞Ishikawa中TRAF6 mRNA和蛋白表达显著降低(均P<0.05)。相较于对照组和NC组,TRAF6高表达组的TRAF6 mRNA水平和蛋白表达显著升高,细胞侵袭、迁移能力和Vimentin、N-cadherin蛋白表达显著降低,Occludin、E-cadherin...     

miR-4458靶向STAT3对结直肠癌细胞增殖、凋亡及上皮间质转化的影响

目的 探讨miR-4458对人结肠癌细胞(H T-29)增殖、凋亡及上皮间质化(EM T)的影响及其作用机制.方法 体外培养HT-29细胞,分为对照组、miR-4458阴性对照(NC)组和miR-4458模拟物(mimics)组,另将人正常结肠上皮细胞(HCoEpiC)设置为正常组.逆转录定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测正常组、各组HT-29细胞、结肠癌组织及癌旁组织中miR-4458和信号转导与转录激活因子(STAT3)mRNA表达水平;细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测各组HT-29细胞存活率变化;划痕实验和Transwell实验分别检测各组细胞迁移和侵袭变化;Western blot检测各组HT-29细胞上皮型钙粘蛋白(E-cadherin)、神经性钙粘蛋白(N-cad-herin)和波形蛋白(Vimentin)表达变化;双荧光素酶报告实验验证miR-4458与STAT3的靶向关系.结果 与癌旁组织和正常组细胞相比,结肠癌组织和细胞中miR-4458均低表达,STAT3 mRNA均高表达.Targetscan human数据库预测miR-4458与STAT3 mRNA 3′UTR区有结合位点.与STAT3-3′UTR-WT+miR-4458 NC组比较,STAT3-3′UTR-WT+miR-4458 mimics组荧光素酶活性降低(P<0.05).与对照组和miR-4458 NC组相比,miR-4458 mimics组细胞miR-4458表达、凋亡率、E-cadherin蛋白表达水平显著升高(P<0.05),存活率、划痕迁移率、侵袭数量、STAT3 mRNA和蛋白表达、N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平显著降低(P<0.05).此外,体内实验证实,过表达miR-4458可显著抑制HT-29移植瘤的生长.结论 miR-4458可能通过靶向抑制S T A T 3表达,抑制人结直肠癌细胞的增殖、凋亡和上皮间质化行为.     

Cdc42蛋白参与中性粒细胞弹性蛋白酶诱导的人气道上皮细胞黏蛋白高分泌

目的 探讨细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)与中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)诱导的气道上皮细胞黏蛋白(MUC)5AC高分泌的关系。方法 体外培养人气道上皮细胞(16HBE),以Cdc42 siRNA和NE进行干预,将细胞分为6组：对照组、NE组、NE+Cdc42 siRNA组、Cdc42 siRNA组、阴性siRNA组、NE+阴性siRNA组。采用Western blot法检测Cdc42蛋白的相对含量,ELISA和免疫荧光检测各组细胞MUC5AC蛋白的表达水平。结果 与对照组相比,NE组Cdc42蛋白含量明显增加(P<0.05),细胞MUC5AC蛋白表达水平亦显著增高(P<0.001);与NE组比较,NE+Cdc42 siRNA组的MUC5AC蛋白水平显著降低(P<0.05),其Cdc42蛋白含量亦明显降低(P<0.001);Cdc42 siRNA组以及阴性siRNA组的Cdc42蛋白、MUC5AC蛋白含量相较于对照组变化不大(P>0.05)。结论 Cdc42在NE诱导的气道上皮细胞黏液高分泌的形成过程中可能发挥着重要的介导作用。     

Eg5通过c-Myc/SP1/CDK1通路调节去势抵抗性前列腺癌细胞的恶性增殖

目的：探究纺锤体有丝分裂驱动蛋白（Eg5）对去势抵抗性前列腺癌细胞株DU145生长、凋亡、细胞周期及侵袭转移的调节作用及机制。方法：Eg5 shRNA干扰Eg5在DU145细胞内的表达,小分子抑制剂SB-743921抑制Eg5在DU145细胞内的功能。实验分为对照组、NC shRNA组、Eg5 shRNA组和SB-743921组,MTT实验和单克隆形成实验测定各组细胞生长;Annexin V-FITC和PI双染实验测定各组细胞凋亡;PI单染实验分析各组细胞周期;划痕实验分析各组细胞迁移能力;q-PCR和Western blot评价各组细胞内c-Myc、SP1、CDK1、Cyclin A1、Cyclin B1、CDC25B、N-cadherin、Vimentin及E-cadherin的表达情况。结果：NC shRNA组与对照组各指标差异均无统计学意义（P ＞0.05）。Eg5 shRNA组、SB-743921组与对照组比,细胞增殖及迁移能力降低、细胞凋亡增加,细胞周期阻滞在G2/M期,差异均有统计学意义（P ＜0.05）。Eg5 shRNA组、SB-743921组与对照组相比,细胞内c-Myc和SP1的表达量降低（P ＜0.05）,调控G2/M期基因CDK1、Cyclin A1、Cyclin B1及CDC25B的表达降低（P ＜0.05）,同时调控细胞迁移基因N-cadherin和Vimentin的表达量降低,E-cadherin的表达量增加（P ＜0.05）。结论：有丝分裂驱动蛋白Eg5可能通过c-Myc/SP1/CDK1通路调节去势抵抗性前列腺癌的恶性增殖和侵袭转移,是治疗前列腺癌的潜在靶点。     

二烯丙基三硫下调肉毒素底物1和细胞分裂周期蛋白42的表达对Hela细胞运动的影响

目的研究二烯丙基三硫(DATS)对Hela细胞迁移运动能力的影响及其作用机制。方法用100μmol/L的DATS处理Hela细胞24 h(以等量的PBS为对照),Transwell小室观察细胞体外迁移能力的变化,Western blot检测Ras相关的C3肉毒素底物1(Rac1)和细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)蛋白表达情况。结果 DATS处理组的迁移运动能力比对照组明显减弱(P<0.01),且Rac1和Cdc42蛋白表达明显下调(P<0.05)。结论 DATS可以抑制Hela细胞的迁移运动能力,下调Rac1和Cdc42蛋白的表达是其作用机制之一。     

ω-3多不饱和脂肪酸抑制人前列腺癌细胞黏附和侵袭的体外实验研究

目的 观察两种ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3 polyunsaturated fatty acid, ω-3 PUFA)二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)和二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)对高转移性人前列腺癌细胞PC-3体外黏附和侵袭能力的影响,并探讨其相关分子机制. 方法 MTT法观察EPA和DHA对PC-3细胞增殖的影响;以体外黏附和侵袭实验观察EPA和DHA对肿瘤细胞黏附和侵袭能力的影响;RT-PCR法观察EPA和DHA对与细胞骨架相关的RhoA、Rac1、Rac2和Cdc42基因mRNA表达的影响.结果 EPA及DHA均能抑制PC-3细胞的增殖,并呈剂量效应关系;PC-3细胞以60 μmol/L EPA和DHA分别处理后,体外黏附和侵袭能力均降低,在matrigel基质胶上黏附30、60、90 min和120 min的黏附率均低于对照组(P＜0.05,P＜0.01),侵袭18 h后的抑制率分别为(35.65±7.76)%和(41.32±5.86)%(P＜0.01),RhoA、Rac2和Cdc42基因mRNA表达均不同程度下降.结论 ω-3 PUFA可能通过下调Rho GTP酶mRNA的表达,抑制PC-3细胞体外黏附和侵袭能力.     

下调MTHFD2对前列腺癌PC3细胞的侵袭和转移的作用及影响机制

目的：观察线粒体亚甲基四氢叶酸脱氢酶2(mitochondrial methylenetetrahydrofolate dehydrogenase 2,MTHFD2)基因表达对人前列腺癌PC3细胞侵袭和转移能力的影响。方法：人前列腺癌PC3细胞分为3组：空白对照组(ctrl组)、阴性对照组(si-NC组)及转染siRNA-MTHFD2组(si-MTHFD2组)。采用qRT-PCR法检测人正常前列腺上皮细胞RWPE-1以及前列腺癌PC3细胞中MTHFD2的mRNA表达,通过流式细胞术检测MTHFD2对PC3细胞凋亡的影响,通过划痕实验检测细胞迁移能力的变化,通过Transwell实验检测细胞侵袭能力的变化,采用Western blotting检测E-cadherin、Vimentin和N-cadherin蛋白表达变化。结果：前列腺癌PC3细胞较正常前列腺上皮细胞中MTHFD2表达水平升高(P<0.05),si-MTHFD2组MTHFD2 mRNA表达水平较ctrl组和si-NC组降低(P<0.05);si-MTHFD2组细胞迁移和侵袭能力较ctrl组和si-NC组降低(P&l...