B细胞转录激活因子、维甲酸相关孤儿核受体γt对急性哮喘小鼠气道炎症的影响

目的：探讨B细胞转录激活因子(BATF)、白细胞介素-17及维甲酸孤儿核受体γt (RORγt)对急性哮喘小鼠气道炎症的影响。方法(1)将24只健康雌性BALB/c小鼠随机分为生理盐水对照组(NS组)、哮喘模型组(AS组)、地塞米松治疗组(DEX组),每组8只。第0、7、14天,AS组、DEX组小鼠用卵清蛋白(OVA)抗原液腹腔内注射致敏,NS组用等体积生理盐水腹腔内注射。第21天起,NS组超声雾化吸入生理盐水,AS组、DEX组超声雾化吸入2%的OVA液,均为每天1次,每次40 min,连续5 d。每次雾化前30 min,DEX组以地塞米松1.0 mg/kg腹腔注射, NS组、AS组则以等体积的生理盐水腹腔注射。末次雾化结束24 h后,各组小鼠留取肺组织标本进行检测。结果(1)肺组织切片显示：NS组肺组织无明显炎症反应,AS组及DEX组均存在炎症反应,且AS组炎症反应明显高于DEX组。(2)免疫组化结果显示：AS组肺组织BATF、IL-17、RORγt的表达明显高于NS组、DEX组(P<0.05);DEX组肺组织IL-17、BATF、RORγt的表达较AS组明显降低(P<0.05)。(3)肺组织BATF的表达与BALF中白细胞(WBC)总数及中性粒细胞(NEU)计数、嗜酸性粒细胞(EOS)计数呈正相关(r=0.487、0.531、0.515,P<0.05);肺组织BATF的表达与IL-17、RORγt的表达呈正相关(r=0.502、0.493,P<0.05);肺组织IL-17的表达与RORγt的表达呈正相关(r=0.536,P<0.05)。结论(1)急性哮喘小鼠肺组织中BATF、IL-17、RORγt表达上调。(2)地塞米松可能是通过下调BATF、IL-17、RORγt的表达而减轻气道炎症性损害。     

维甲酸相关孤儿受体在免疫系统的研究进展

维甲酸相关孤儿受体属于类固醇激素受体超家族;在机体免疫系统的分化成熟中至关重要,其在次级淋巴组织发育、T淋巴细胞分化成熟及T细胞的谱系分化过程中均起重要作用。近年来,人们通过深入研究进一步阐明了该受体为配体依赖的转录因子;并揭示了其在一些疾病过程中的作用,包括自身免疫病及肿瘤。该文对其相关研究进行综述。     

维甲酸相关孤儿核受体-γ蛋白在肝细胞癌组织中的表达及其与上皮-间质转化的关系研究

目的 探讨维甲酸相关孤儿核受体-γ(retinoid-related orphan receptor-γ, ROR-γ)与肝细胞癌（hepatocellular carcinoma, HCC）临床病理特征及人肝癌细胞系HepG2上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）的关系,并探讨其作用机制。方法 选取2016年6月至2020年5月赤峰学院附属医院90例肝癌组织及56例癌旁正常组织石蜡标本、20例肝癌组织及癌旁正常组织新鲜术后标本,采用免疫组织化学法和蛋白质印迹法（Western blotting）检测ROR-γ在肝癌及癌旁正常组织中的表达。将ROR-γ小干扰RNA转染至HepG2细胞,采用Western blotting检测ROR-γ、Smad2以及EMT标志物（E-cadherin、vimentin）蛋白表达水平。结果 免疫组织化学染色和Western blotting结果显示,与癌旁正常组织比较,肝癌组织中ROR-γ蛋白阳性表达率显著升高（71.1%比42.9%）,差异有统计学意义（P<0.05）,且ROR-γ蛋白阳性表达...     

补肾法对再生障碍性贫血疗效及对Th17/Treg相关转录因子水平的影响

目的研究补肾法对再生障碍性贫血疗效及对Th17/Treg相关转录因子水平的影响。方法收集91例再生障碍性贫血患者为治疗组,辨证分为肾阴虚组,肾阳虚组,肾阴阳两虚组,用补肾方治疗。30例为对照组。统计2组有效率差异。同时采用RT-PCR方法检测2组治疗前后FOXP3m RNA,IL-17Am RNA,ROR-γtm RNA水平并比较。结果中医证候疗效治疗组优于对照组。治疗组ROR-γt m RNA治疗前高于治疗后,FOXP3 m RNA治疗前低于治疗后(有统计学意义)。对照组IL-17A m RNA治疗后低于治疗前。不同肾虚分型转录因子较治疗前明显变化,肾阴虚组IL-17A m RNA水平治疗后无明显下降。结论补肾法治疗再生障碍性贫血提高了中医证候有效率。补肾法疗效可能与干预Th17/Treg相关转录因子有关。     

豚鼠肺气肿模型肺组织Foxp_3、RORγt及IL-17的表达及意义

目的采用弹性蛋白主动免疫方法制造豚鼠肺气肿模型,与传统熏烟制造模型方法比较,探究弹性蛋白抗体对肺气肿的影响;探讨豚鼠肺气肿模型肺组织中叉头状/翅状螺旋蛋白3（Foxp3）、维甲酸相关孤儿受体γt（RORγt）、白细胞介素17（IL-17）的表达和意义。方法分别采用熏烟、弹性蛋白主动免疫的方法制造豚鼠肺气肿模型;测量各组模型中肺泡平均半径;免疫组化技术检测肺组织Foxp3、RORγt和IL-17。结果熏烟组及主动免疫组平均肺泡半径明显长于对照组（P〈0.05）。熏烟组及主动免疫组较对照组肺组织中Foxp3阳性细胞数减少,RORγt阳性细胞增多,Foxp3/RORγt比值表达失衡,IL-17表达水平增强（P〈0.05）,熏烟组与主动免疫组比较差异无统计学意义。相关性分析提示豚鼠肺组织Foxp3/RORγt阳性细胞比值与IL-17及平均肺泡半径呈负相关（P〈0.05）。结论弹性蛋白主动免疫可以导致豚鼠肺气肿发生;熏烟组及主动免疫组豚鼠肺气肿模型肺组织中存在Foxp3/RORγt表达失衡,这种失衡可能是免疫调节细胞CD4＋T细胞及效应细胞Th17细胞表达失调的重要机制,从而可能参与慢性阻塞性肺疾病（COPD）自身免疫调节,对COPD的发生发展有一定的促进作用。     

转录因子RORγt在胃癌中的表达及临床意义

目的: 探讨胃癌组织中RORγt mRNA的表达水平并观察其与临床病理组织分化程度的相关性.方法: 收集59例胃癌患者胃癌组织和癌旁组织标本,采用实时荧光定量PCR的方法检测RORγt mRNA的表达水平.结果: 胃癌组织RORγt表达水平为(1.26±0.42),明显高于癌旁组织(0.35±0.14),且与肿瘤组织分化程度相关,即RORγt mRNA表达水平越高,分化越低.结论: 胃癌患者肿瘤微环境存在RORγt的高表达,表明RORγt可能参与了胃癌的免疫病理进程.     

二烯丙基二硫对人胃癌细胞维甲酸相关孤核受体α表达的影响

目的 探讨二烯丙基二硫(DADS)处理前后人胃癌细胞中维甲酸相关孤核受体α(RORα)表达变化情况.方法 将胃癌SGC7901、MGC803细胞分为对照组和DADS处理组,进行体外细胞培养及细胞形态学观察,采用免疫细胞化学、Western blot分析RORα的表达;半定量RT-PCR检测RORα核酸水平的表达.结果 DADS处理24 h后,胃癌SGC7901、MGC803细胞形态学发生明显改变;RORα在人胃癌SGC7901、MGC803细胞核中呈强阳性表达,与对照组比较表达显著上调;半定量RT-PCR灰度扫描定量分析结果显示,DADS处理24 h后,SGC7901、MGC803细胞中RORα的表达量[(1.09±0.01)与(0.97±0.01)]较对照组[(0.45±0.03)与(0.44±0.02)]显著上调,差异均有统计学意义(P＜0.01);Western blot分析及灰度扫描显示,DADS处理人胃癌MGC803、SGC7901细胞8、12、24 h后,RORα蛋白表达量较未处理组显著上调,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 DADS可诱导人胃癌细胞分化,其诱导分化作用可能与上调RORα表达有关.     

Th17细胞相关因子在人脑胶质瘤中的测定

目的了解Th17细胞相关因子在人脑胶质瘤组织中的表达,确定Th17的存在及浸润程度。方法应用免疫组化二步法检测Th17细胞相关因子CD4+和IL-17在34例脑胶质瘤和10例正常脑组织病理切片中的表达,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(QRT-PCR)技术,检测IL-17mRNA、RORγtmRNA在人脑胶质瘤组织中的表达量。结果 IL-17、CD4+在正常脑组织表达不明显,在低级别脑胶质瘤中表达较少,CD4+和IL-17在高级别脑胶质瘤中表达明显,组间比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.05,P<0.01)。IL-17mRNA和RORγt mRNA在正常脑组织、低级别、高级别脑胶质瘤中的表达量随恶性程度升高而增加,组间比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。结论脑胶质瘤中存在Th17的浸润,其表达量随脑胶质瘤恶性程度的升高而增加。     

Th17转录因子RORγt和BATF及Th17相关细胞因子在中性粒细胞亚型哮喘发病中的作用

目的：检测中性粒细胞亚型哮喘（NA）患者痰上清中辅助性T细胞17（Th17）特异性转录因子维甲酸相关核孤儿受体γt（RORγt）、B细胞转录激活因子（BATF）及外周血中Th17细胞相关细胞因子白细胞介素8（IL-8）、白细胞介素17（IL-17）和白细胞介素22（IL-22）表达水平,探讨其在NA发病中的作用。方法：以56例支气管哮喘患者为研究对象,4.5%生理盐水雾化诱导痰,经细胞MGG染色进行哮喘的炎症亚型分型,分为嗜酸性粒细胞亚型哮喘（EA）组（26例）和NA组（30例）,以常规体检者为健康对照组（NC组,28人）。实时荧光定量PCR（RT-PCR）法检测痰上清中BATF和RORγt mRNA表达水平。空腹抽取各组研究对象肘静脉血10 mL,Ficoll密度梯度离心后分离外周血单个核细胞（PBMC）,ELISA法测定血清中IL-8、IL-17和IL-22蛋白表达水平,流式细胞术检测PBMC中Th17细胞（CD4⁺IL-17⁺细胞）的百分率。结果：与NC组和EA组比较,NA组患者血清中IL-8、IL-17和IL-22表达水平均明显升高（P<0.05）;与NC组比较,EA组患者血清中IL-8、IL-17和IL-22表达水平差异无统计学意义（P>0.05）。与NC组和EA组比较,NA组患者痰上清中BATF和RORγt mRNA表达水平明显升高（P<0.01）。与NC组和EA组比较,NA组患者PBMC中Th17细胞百分率均明显升高（P<0.01）;与NC组比较,EA组患者PBMC中Th17细胞百分率差异无统计学意义（P>0.05）。结论：IL-17转录因子RORγt和BATF参与了NA患者气道炎症发生过程,且Th17细胞及其相关细胞因子IL-17和IL-22的异常表达与NA的全身反应有关联。     

右美托咪定通过降低IL-17和RORγt的表达降低脓毒症小鼠的肺损伤

目的观察盲肠结扎法对小鼠血液和肺组织中白细胞介素(IL-17)和维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)表达的影响和右美托咪定的干预作用。方法雄性C57BL/6小鼠32只,体重20～25g,随机分为四组:S组(n=8)为假手术组;Dex组(n=8)为假手术加右美托咪定40μg/kg腹腔注射;Sep组(n=8)为盲肠结扎穿孔组;Sep+Dex组(n=8)为盲肠结扎穿孔加右美托咪定40μg/kg腹腔注射。24h后用眼球放血处死小鼠,并收集小鼠的血液和肺组织。采用苏木精-伊红法(HE)染色后,在光镜下观察肺组织损伤评分;检测小鼠肺湿重/干重比(W/D);ELISA法检测血浆和肺组织中IL-17的浓度;Western blot法检测肺组织RORγt蛋白的含量。结果 S组和Dex组未见明显损伤,Sep组肺出血、充血、炎性细胞浸润明显,Sep+Dex组肺损伤程度明显减轻(P<0.01)。与S组比较,Sep组小鼠外周血和肺组织W/D明显升高,IL-17浓度明显升高,肺组织中RORγt蛋白含量明显升高(P<0.05)。与Sep组比较,Sep+Dex组上述指标都明显降低(P<0.05)。结论盲肠结扎模型可导致小鼠外周血和肺组织IL-17及肺组织RORγt的表达水平明显升高,而右美托咪定可通过降低IL-17和RORγt的表达减轻盲肠结扎致脓毒症小鼠肺损伤程度。     

实验性葡萄膜炎大鼠眼部IL-23mRNA及IL-17mRNA的表达

目的 探讨白细胞介素(IL)-23、IL-17在实验性内毒素诱导葡萄膜炎(EIU)动物模型眼部表达的特点.方法 SD大鼠随机分为两组:正常对照组、EIU模型组.伤寒内毒素致敏诱导大鼠建立EIU模型,于建模后6、12、24、48、60 h用裂隙灯显微镜进行眼前节检查,并根据Hoekzema方法进行眼部炎症评分,RT-PC...     

IL-38对类风湿关节炎患者辅助性T细胞17转录因子的影响

目的 研究类风湿关节炎(RA)患者白细胞介素-38(IL-38)的表达水平,并探讨IL-38对辅助性T细胞17(Th17)细胞转录因子(RORC、STAT3)的影响.方法 收集RA患者30例,为RA组,30例体检中心的健康人群作为正常对照组.采用实时荧光定量PCR检测IL-38、RORC、STAT3mRNA水平;ELI...     

全反式维甲酸对儿童卵黄囊瘤细胞增殖及维甲酸β受体表达的影响

目的:研究全反式维甲酸(ATRA)对儿童卵黄囊瘤细胞诱导分化过程中细胞形态及维甲酸β受体表达的影响.方法:在体外细胞培养的基础上,观察细胞形态学的变化、细胞增殖动力学的变化,采用MTT比色法测定细胞细胞增殖活性,以半定量RT-PCR方法检测维甲酸β受体(RAR-β)mRNA的表达.结果:全反式维甲酸能使卵黄囊瘤细胞形态趋向良性分化,有效地抑制了肿瘤细胞增殖;半定量RT-PCR结果显示,经不同浓度的ATRA处理后的卵黄囊瘤细胞的RAR-β mRNA表达水平均上调.结论:ATRA对卵黄囊瘤细胞有诱导分化作用,ATRA通过上调维甲酸β受体基因表达实现其诱导分化作用.     

乙型肝炎肝硬化患者辅助性T淋巴细胞17和调节性T淋巴细胞及维甲酸相关核孤儿受体γt和叉状头/翅膀状螺旋转录因子3 mRNA表达水平的变化及其临床意义研究

目的 通过对乙型肝炎肝硬化患者外周血辅助性T淋巴细胞17（Th17）、调节性T淋巴细胞(Treg)及其特异性转录因子维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)和叉状头/翅膀状螺旋转录因子3(Foxp3) mRNA表达水平的检测探讨其临床意义。方法 选取2015年7-12月昆明医科大学第一附属医院诊治的慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染者64例,其中慢性乙型肝炎（CHB）患者21例（CHB组）、代偿期肝硬化（CLC）患者21例（CLC组）、失代偿期肝硬化（DCLC）患者22例（DCLC组）。同期选取本院体检健康者20例为对照组。收集研究对象一般资料〔性别、年龄及丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)〕;应用流式细胞术检测研究对象外周血Th17、Treg表达率,计算Th17/Treg比值;应用实时荧光定量反转录聚合酶链式反应（RT-qPCR）法测定外周血RORγt、Foxp3 mRNA表达水平。结果 4组年龄、ALT、AST、TBIL比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。CHB组、CLC组、DCLC组Th17、Treg表达率及Th17/Treg比值均高于对照组（P＜0.05）;DCLC组Th17、Treg表达率及Th17/Treg比值均高于CHB组,Th17表达率及Th17/Treg比值均高于CLC组（P＜0.05）。CHB组、CLC组、DCLC组RORγt mRNA及Foxp3 mRNA表达水平均高于对照组（P＜0.05）;DCLC组RORγt mRNA及Foxp3 mRNA表达水平均高于CHB组、CLC组（P＜0.05）。CHB组、CLC组、DCLC组外周血Th17表达率与RORγt mRNA表达水平均呈正相关（P＜0.05）;CHB组、CLC组、DCLC组外周血Treg表达率与Foxp3 mRNA表达水平均呈正相关（P＜0.05）;CHB组、CLC组、DCLC组外周血Th17表达率、RORγt mRNA表达水平与ALT呈正相关（P＜0.05）;CHB组外周血Foxp3 mRNA表达水平与ALT呈正相关（P＜0.05）;CHB组RORγt mRNA表达水平、Foxp3 mRNA表达水平与AST、TBIL呈正相关（P＜0.05）。结论 Th17、Treg及其特异性转录因子RORγt、Foxp3可能与乙型肝炎肝硬化患者的疾病进展与肝功能有关。     

电针刺激上巨虚、天枢对溃疡性结肠炎模型大鼠Th17相关特异性因子及Treg的影响

目的 观察电针刺激上巨虚、天枢对溃疡性结肠炎（ulcerative colitis, UC）模型大鼠辅助性T细胞17(T helper cell 17,Th17)相关特异性因子及调节性T细胞（T regulatory cell, Treg）的影响,探讨合募配穴理论指导下电针刺激大肠腑下合穴、募穴治疗UC的作用机制,为特定穴的临床应用提供实验依据。方法 50只SD大鼠随机分出10只作为空白组,剩余40只UC模型造模成功的大鼠随机分为模型组、合募配穴组、天枢组和上巨虚组,每组10只。2,4,6-三硝基苯磺酸（2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid,TNBS）/乙醇法制备UC大鼠模型。合募配穴组予以电针刺激双侧天枢、上巨虚,天枢组予以电针刺激双侧天枢,上巨虚组予以电针刺激双侧上巨虚,每次20 min,每天1次,共10次。观察大鼠一般情况,计算大鼠疾病活动指数（disease active index, DAI）;肉眼观察大鼠结肠黏膜损伤情况,评估结肠黏膜损伤指数（colonic mucosa damage index, CMDI）,HE染色观察结肠形态学变化;...     

RORγ基因对结肠癌细胞增殖及迁移的影响

目的 探究维甲酸相关孤儿核受体-γ(RORγ)基因对人结肠癌细胞增殖、转移能力的影响。方法 通过构建RORγ敲减细胞系,采用RT-qPCR及Western blot检测敲减效率;MTT、克隆形成、Transwell和划痕实验检测细胞增殖与转移能力;采用Western blot检测上皮间质转化(EMT)相关蛋白的表达情况;通过TIMER 2.0数据库分析RORγ基因的表达与肿瘤微环境中免疫细胞浸润的关系。结果 RORγ基因的敲减增强了结肠癌细胞的活力(F值=157.40,P<0.01)、克隆形成能力(F=61.35,P<0.01)、迁移能力(F=13.00,P<0.01)、侵袭能力(F=21.26,P<0.01)和划痕愈合能力(F=877.2,P<0.01),抑制了上皮型钙黏附蛋白(E-Cadherin)的表达,并促进了波形蛋白(vimentin)和神经型钙黏附蛋白(N-Cadherin)的表达; TIMER 2.0数据库分析显示结肠腺癌(COAD)组织中RORγ的表达水平与多种免疫细胞浸润相关。结论 RORγ表达的下调促进结肠癌细胞的增殖及转移。     

Th17/IL-17与病毒性肝炎的研究进展

病毒性肝炎是由多种肝炎病毒引起的一组全身性传染病。其中乙型、丙型多呈慢性感染,少数病例可发展为肝硬化或肝细胞癌。辅助性T细胞(Th17)细胞是近年来发现的不同于Th1、Th2及调节性T细胞(Treg)细胞的CD4+T细胞亚群,IL-17是Th17细胞的重要效应因子,具有强大的促炎作用,维甲酸相关核孤儿受体γt则是其重要的转录因子。有研究发现Th17细胞能够抑制T淋巴细胞的细胞不良反应,增加肝炎病毒的持续感染,导致肝炎的慢性化。     

免疫球蛋白对癫痫大鼠γ-氨基丁酸受体及谷氨酸脱羧酶表达的影响

目的探讨免疫球蛋白对癫痫大鼠脑内γ-氨基丁酸（GABA）受体数量、谷氨酸脱羧酶（GAD）表达和细胞凋亡的影响。方法健康SD大鼠10只为空白对照组,其余30只采用印防已毒素（PTX）腹腔注射制做大鼠癫痫模型,模型组大鼠分为癫痫模型对照组、生理盐水（NS）干预组和免疫球蛋白干预组,每组10只。第8天断头取脑分别测定大鼠脑内GABA、GAD和神经细胞凋亡数量。结果致痫大鼠发作后,脑组织GABA受体数量较对照组数量增加,GAD表达增强,凋亡细胞出现。经免疫球蛋白干预后,GABA受体数量增加明显,GAD表达也有所增强,而神经细胞凋亡数量与对照组比较明显减少。结论免疫球蛋白可通过提高GABA的数量,增强GAD的表达和阻止神经细胞凋亡来控制癫痫的发作。     

三七总皂苷对大鼠脑缺血再灌注后白细胞介素-1β和其相关因子及半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶表达的影响

目的:研究三七总皂苷(Panax notoginsengsaponins,PNS)对大鼠脑缺血再灌注后白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-1受体Ⅰ型(interleukin-1 receptor typeⅠ,IL-1RⅠ)、白细胞介素-1受体拮抗剂(interleukin-1 receptor antagonist,IL-1ra)、细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)和半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(cysteinyl-aspartate specific protease,caspase)-1、3、8 mRNA表达的影响。方法:采用颈内动脉线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,在脑缺血前5 min和脑缺血后12 h分别腹腔注射给药1次。在脑缺血2 h再灌注22 h后,以逆转录-聚合酶链反应测定缺血脑组织IL-1β、IL-1RⅠ、IL-1ra、ICAM-1和caspase-1、3、8 mRNA的表达。结果:在脑缺血2 h再灌注22 h后,模型组脑组织IL-1β、IL-1RⅠ、IL-1ra、ICAM-1和caspase-1、3、8 mRNA表达较假手术组均增强(P<0.05或P<0.01)。PNS组脑组织IL-1β、IL-1ra和IL-1RⅠ表达低于模型组,高于假手术组,与模型组和假手术组相比,差异均无统计学意义(P>0.05);PNS组脑组织caspase-3表达低于模型组(P<0.05),但PNS对ICAM-1、caspase-1和caspase-8表达无明显影响。结论:PNS可抑制caspase-3的表达,同时对脑缺血后IL-1β及其相关炎症因子的表达有一定抑制作用,从而对缺血性脑损伤发挥保护作用。