CXXC4调控胰腺癌PANC-1细胞迁移和侵袭的实验研究

目的 探究CXXC指蛋白4(CXXC4)对胰腺癌PANC-1细胞迁移、侵袭及上皮-间充质转化(EMT)进程的影响。方法 组织芯片免疫组织化学染色实验检测14份癌旁胰腺组织和87份胰腺癌组织中CXXC4表达情况。采用免疫荧光实验检测人正常胰腺导管上皮细胞HPNE及人胰腺癌细胞PANC-1、AsPC-1和BxPC-3中CXXC4蛋白的表达水平。采用Western blot实验检测CXXC4敲降和过表达的转染有效性,划痕和Transwell实验分析敲降或过表达CXXC4对PANC-1细胞迁移、侵袭的影响。采用Western blot和免疫荧光实验检测细胞EMT标志物E-cadherin、Vimentin和ZEB2的表达水平。通过STRING网站预测与CXCC4有相互作用的蛋白,筛选出的蛋白进行GO和KEGG富集分析。结果 免疫组化分析结果表明,CXXC4在胰腺癌组织中的表达水平低于癌旁胰腺组织(P<0.05)。免疫荧光实验结果显示,与HPNE细胞相比,CXXC4在PANC-1、AsPC-1和BxPC-3中的荧光强度均显著降低(均P<0.05)。划痕和Transwell实验结果显示...     

带有CFP标签的LC3自噬表达载体的构建

目的构建带有樱桃红色荧光蛋白(cherry fluorescent protein,CFP)标签的微管相关蛋白1轻链3(LC3)自噬真核表达载体,并进行初步表达鉴定。方法采用PCR方法,从质粒载体pCMV-GFP-LC3为模板扩增LC3片段,通过T4 DNA连接酶将纯化后的PCR产物LC3与经过ApaI和BamHI双酶切的pm-cherry-c1载体连接,命名为PM-CFP-LC3。该载体经酶切及测序验证后,在fugene6转染试剂介导下转染293细胞,通过荧光显微镜观察CFP在细胞内的分布来观察LC3表达情况。结果带有CFP标签的LC3表达载体构建成功,在荧光显微镜下可观察到转染细胞中樱桃红色荧光以及细胞自噬现象。结论成功构建了带有CFP标签LC3的重组质粒并成功表达,为深入研究细胞的自噬奠定了实验基础。     

妇科恶性肿瘤细胞系中RASSF1A基因启动子区的甲基化及其表达

目的 研究Ras相关结构域家族1A基因(RASSF1A)启动子区域在妇科恶性肿瘤细胞中的甲基化状态及其与RASSF1A基因表达的关系.方法 采用RT PCR及甲基化特异性PCR检测9种妇科恶性肿瘤细胞系中RASSF1A基因mRNA表达水平及其启动子区域的DNA甲基化状态.结果 A2780、Anglne、CaOV3、SKOV3、HEC-1B和Ishikawa细胞系中RASSF1A基因启动子区域DNA呈现高甲基化,而相应的mRNA表达缺失或低表达,COC1、Hela和Siha细胞系中RASSF1A启动子区域DNA仅部分甲基化,可检测到这些细胞系RASSF1A基因的表达.结论 妇科恶性肿瘤细胞系普遍存在RASSF1A基因启动子区域DNA的高甲基化,这可能在妇科恶性肿瘤的发生发展中起作用.     

RAD51连接蛋白1在恶性肿瘤中的研究进展

恶性肿瘤一直是严重威胁人类健康的医学难题,尽管科学技术在进步,人类生活质量在提高,恶性肿瘤的发病率依然持续上升,其发病机制及治疗也是错综复杂。RAD51连接蛋白1(RAD51AP1)属于RAD51连接蛋白家族的蛋白质,与DNA的同源重组和修复作用有关,其过表达与多种恶性肿瘤的发生发展密切相关,本文就RAD51AP1与多种恶性肿瘤的关系进行综述如下。     

胸苷激酶1的研究进展

恶性肿瘤是威胁人类健康最主要的疾病之一,目前主要靠病理学及影像学来诊断,只有患者具有明显占位性病变和临床症状后才能确诊,而此时已非癌变最早期,且已过最佳治疗时期。因此,对恶性肿瘤具有早期诊断作用的血清肿瘤标志物是目前研究的重点。随着现代血清学肿瘤标志物相关研究的迅速发展,一种新的细胞增殖标志物,即胸苷激酶1(TK1)被证实在肿瘤早期发现、疗效评估、预后判断等方面具有重要意义。现从TK1的结构、功能、与DNA合成及肿瘤的关系等方面予以综述。     

转录因子FoxM1调控恶性肿瘤病理性发展研究论述

在临床医学中[1,2],恶性肿瘤的发生及发展过程是一个多因素、多阶段和多步骤的过程, 其中涉及大量的分子参与到复杂的网络调控中,现在又多种分子靶向药物难以满足相关的临床治疗需要。因此有效的挖掘肿瘤发生及发展过程中新的关键分子,确定其作为肿瘤识别和药物设计靶点的潜在价值已经成为相关肿瘤学的研究热点。目前FOXM1属于Forkhead家族的转录因子,充分享受了其家族保守进化的翼状螺旋DNA结合结构域,相关的研究已经证实,FOXM1可以有效的调控其下游相关靶基因的调控,同时给予细胞周期一定的调控性,控制细胞的有丝分裂过程和细胞增殖趋势,进一步去的研究证实,,FOXM1在诸多恶性肿瘤内呈现出高表达的趋势,可以通过多种机制参与到肿瘤组织细胞的发生及发展过程中,目前已经逐步成为各种恶性肿瘤的研究热点[3-5]。     

细胞DNA修复系统与肿瘤发生及化疗耐药性

研究发现,MMR及MGMT蛋白表达缺失与大肠癌等恶性肿瘤的发生密切相关,胃癌及非小细胞肺癌常出现MMR和MGMT蛋白表达增高。本文通过介绍DNA修复系统中ERCC1、XRCC1和MMR、MGMT的作用机制及它们与肿瘤发生和化疗耐药性的关系,提出DNA修复系统关键蛋白的表达降低与肿瘤发生有关,在肿瘤发展过程中也会出现表达增高,且它们表达的增高或降低均与肿瘤化疗耐药性有关。     

高迁移率族蛋白B1在妇科恶性肿瘤中的研究进展

高迁移率族蛋白B1(HMGB1)是一种广泛存在于人体各种细胞中的核蛋白,它参与基因的转录、DNA修复、细胞的增殖、侵袭、凋亡及分化等生物学行为。本文就近年来HMGB1在妇科恶性肿瘤发生、发展、早期诊断、治疗和预后中的研究进展进行综述。     

LncRNA OTUD6B-AS1在恶性肿瘤中的作用及机制研究进展

长链非编码RNA(LncRNA)是一组长度超过200个核苷酸且不具备编码蛋白质功能的RNA分子。LncRNA OTUD6B反义RNA 1(LncRNA OTUD6B-AS1)与其相对DNA链上的蛋白质编码基因OTUD6B呈反义方向。最近的研究揭示了LncRNA OTUD6B-AS1在脑胶质瘤、甲状腺癌、肝细胞性肝癌、结直肠癌等多种恶性肿瘤中的重要作用,可以调节肿瘤细胞的增殖、侵袭、迁移及凋亡,影响患者的预后。本文就LncRNA OTUD6B-AS1在恶性肿瘤中的作用及机制研究进展进行综述,旨在探索新的潜在治疗靶点,为后续小分子靶向药物研究提供理论依据。     

LONP1在常见恶性肿瘤中表达和作用的研究进展

线粒体离子肽酶1(lon peptidase 1, mitochondrial,LONP1)是由核DNA编码的ATP依赖的蛋白质,位于线粒体基质中,在调节线粒体基因的表达、维持线粒体稳定等方面具有重要作用。线粒体稳态的破坏是正常细胞发生致瘤性转化的普遍特性。有研究显示LONP1在多种恶性肿瘤中的表达显著增高,这一高表达与线粒体稳态破坏引起的恶性肿瘤的低氧生存、侵袭转移、抗凋亡、治疗抵抗等方面密切相关 。故本文就LONP1在结肠癌、黑色素瘤、胃癌、宫颈癌等常见恶性肿瘤中的研究进展进行综述。     

PD-1/PD-L1通路在妇科恶性肿瘤中的研究进展*

PD-1/PD-L1通路是近年来癌症领域的研究热点。PD-1/PD-L1信号通路影响T淋巴细胞浸润及功能,参与肿瘤局部抑制性免疫微环境。阻断该通路可以促进微环境中免疫细胞增殖分化从而发挥抗肿瘤功能。现就PD-1/PD-L1通路在常见妇科恶性肿瘤的研究进展进行论述。     

未分化胚胎细胞转录因子1与恶性肿瘤关系的研究现状

未分化胚胎细胞转录因子1(UTF1)是干细胞相关基因之一,是参与胚胎干细胞分化的重要转录因子,能促进干细胞的自我更新及分化,调控胚胎细胞和生殖细胞的增殖分化。目前,对UTF1的研究大多在干细胞和生殖细胞中,而关于UTF1与肿瘤关系的研究成果较少。越来越多的证据显示,干细胞相关基因的异常表达与肿瘤发生、转移、复发及耐药性等密切相关。其转录和表观遗传胚胎程序可以在癌细胞中重新激活,使癌细胞具有干细胞表型,并参与肿瘤的发生、发展。为获得更好的疗效,部分学者长期致力于寻找各种有效的肿瘤标志物,其中UTF1在恶性肿瘤的诊断、治疗及预后方面具有重要的潜在应用价值。     

细胞周期蛋白E1基因在卵巢癌诊治中的作用

肿瘤细胞中基因拷贝数变异可影响细胞稳态,导致细胞恶变.细胞周期蛋白E1基因(CCNE1)编码细胞周期蛋白E1(Cyclin E1),CCNE1扩增或过表达改变Cyclin E1的表达,并影响其他基因的表达,参与多种恶性肿瘤的发生、发展.CCNE1扩增或过表达与卵巢癌的发生、耐药、靶向治疗及预后密切相关.该文综述CCNE...     

Dot1及其同源物的研究进展

 Dot1(disruptor of telomeric silencing 1)最初在芽殖酵母中通过遗传筛选基因被发现, 缺失则会引起端粒沉默。Dot1和其脊椎动物同源物DOT1L(Dot1-like)都具有催化组蛋白H3第79位赖氨酸(H3K79)甲基化的组蛋白甲基转移酶活性。在人类各种组织中, DOT1L基因启动子区域的CpG岛均呈现极低的DNA甲基化水平, 说明DOT1L基因在人体中广泛中等程度表达。DOT1L基因在EBV转化的细胞及睾丸中表达水平升高。Dot1/DOT1L介导的H3K79甲基化参与多种生物学过程, 并在小鼠基因损伤实验中发现DOT1L在心功能、红细胞生成、白血病及多种肿瘤的疾病发展中起重要的作用, 因而DOT1L已成为针对表观遗传修饰因子的重要药物靶点。本文对Dot1/DOT1L在生理和病理方面的研究进展作一综述。     

乳腺癌中p21WAF1的表达

目的:探讨乳腺癌中p21WAF1的表达与细胞增殖活性及预后的关系。方法:采用免疫组化法检测p21WAF1在58例无淋巴结转移的乳腺癌中的表达,采用流式细胞术分析DNA含量。结果:在乳腺癌中p21WAF1的阳性率为43%,阳性反应产物见于瘤细胞核,p53阳性者的p21WAF1阳性表达率(54%)高于p53阴性者(35%),p21WAF1的表达与SPF(S期细胞比例)和患者预后无关。结论:乳腺癌中p21WAF1的表达不能作为判断肿瘤细胞增殖活性和患者预后的独立标志物。     

结核杆菌cfp10真核载体的构建、表达与基因免疫

目的: 构建以结核分枝杆菌H37Rv cfp10基因为基础的基因疫苗. 方法: 采用BamH I和Xba I双酶切质粒pGEM-Teasy-CFP10中,10 g*L-1琼脂糖凝胶电泳回收约300 bp大小片段,以亚克隆法构建于真核表达载体pcDNA3.1的相应酶切位点. 阳性克隆提取质粒,体外电穿孔转化CHO细胞,RT-PCR法检测cfp10特异的mRNA的表达. 质粒肌注免疫BALB/c小鼠,ELISA检测小鼠血清中相应抗体的滴度. 结果: 用BamH I和XbaⅠ酶切鉴定证实目的基因正确插入载体pcDNA3.1,命名为pcCFP10; pcCFP10转化的CHO细胞RNA提取物中,RT-PCR扩增出300 bp大小的条带. 肌注免疫BALB/c小鼠,ELISA检测小鼠血清中相应抗体平均滴度为1∶ 4,000. 结论: 以CFP10的编码基因为基础的真核表达质粒的构建成功.     

RET、Mucin1和Galectin-3在甲状腺良恶性肿瘤中的表达

目的：探讨滤泡源性甲状腺肿瘤及结节性甲状腺肿中RET、Mucin-1和Galectin-3蛋白的表达，寻找有助于诊断良恶性甲状腺肿瘤的标志物。方法：采用免疫组化S－P法，检测19例结节性甲状腺肿，54例腺瘤（其中不典型腺瘤19例），43例乳头状癌（其中11例乳头状微癌），16例滤泡性癌中上述3种蛋白的表达情况。结果：良性病变（结节性甲状腺肿和腺瘤）与恶性病变（乳头状癌和滤泡性癌）中3种蛋白的表达有极显著意义（P＜0.01)，而良恶性病变中的不同类型间的差异无显著性（P＞0.05)。11例微癌患者中Galectin-3全部阳性，RET8例阳性，Mucin-1阳性仅3例；结节性甲状腺肿RET的表达与甲状腺癌比较虽无统计学意义（P＞0.05)，但前者为弱阳性，后者多为强阳性；腺瘤中不典型腺瘤Galectin-3的表达与其他腺瘤相比差异显著（P＜0.05)，与滤泡性癌相比差异无显著意义（P＞0.05)；部分腺瘤中见灶性Mucin-1和Galectin-3同时阳性。结论：RET、Mucin-1和Galectin-3的同时检测可作为良恶性滤泡上皮性肿瘤鉴别诊断的指标，其中以Galectin-3的敏感性最佳，RET次之。Mucin-1高表达可能是去分化、浸润和转移的标志，Galectin-3阳性的不典型腺瘤是滤泡性腺瘤和滤泡性癌的交界性病变，良性腺瘤中Mucin-1和Galectin-3同时阳性应视为恶变的高危状态。