miR-373-3p通过靶向Rab22a调节结肠癌SW480细胞增殖和转移

目的探究miR-373-3p通过靶向Rab蛋白22a(Rab22a)对结肠癌SW480细胞增殖和转移的调节作用。方法 RT-PCR检测结肠癌组织和细胞中miR-373-3p的表达。荧光素酶报告检测miR-373-3p和Rab22a相互作用关系。将SW480细胞分为空白对照组(SW480组)、阴性对照组(mimic NC组)、miR-373-3p mimic组、pLV-Rab22a组、pLV-Rab22a+miR-373-3p组,各组分别转染miR-373-3p或Rab22a重组慢病毒,RT-PCR检测miR-373-3p和Rab22a转录水平,CCK-8法检测细胞增殖水平,划痕愈合法检测细胞迁移,Transwell法检测细胞侵袭,Western blot检测Rab22a、Ki67、上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)、神经性钙黏附蛋白(N-cadherin)蛋白表达。结果与正常结肠组织比较,结肠癌组织中miR-373-3p表达降低。与人正常结肠细胞NCM460比较,结肠癌细胞株miR-373-3p均降低。在荧光素酶报告实验中,与Rab22a WT+mimic NC比较,Rab22a...     

miR-145-5p通过调节PHB2基因发挥对非小细胞肺癌细胞A549增殖迁移的影响

目的:探讨miR-145-5p通过靶向调控PHB2基因抑制非小细胞肺癌细胞(NSCLC)的增殖和迁移的作用及机制.方法:使用RT-PCR法评估miR-145-5p在NSCLC组织和癌旁组织正常人支气管上皮细胞系(BEAS-2B)和非小细胞肺癌细胞系(A549)中的表达;MTT及EDU测定miR-145-5p过表达后A5...     

circ_0000069靶向miR-338-3p对非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的探讨环状RNA 0000069(circ_0000069)是否靶向miR-338-3p调控非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞增殖、迁移和侵袭。 方法采用qRT-PCR技术检测NSCLC患者癌组织、癌旁正常组织中circ_0000069和miR-338-3p表达量。采用CCK-8、Transwell实验分析抑制circ_0000069或过表达miR-338-3p对A549细胞增殖活力、迁移和侵袭的影响。使用荧光素酶酶报告实验和qRT-PCR分析circ_0000069和miR-338-3p之间的相互作用。 结果NSCLC组织中circ_0000069表达量较癌旁组织升高(P＜0.05),而miR-338-3p表达量显著降低(P＜0.05)。抑制circ_0000069或过表达miR-338-3p后A549细胞活力、迁移和侵袭细胞数显著降低(P＜0.05)。miR-338-3p是circ_0000069的靶基因,circ_0000069靶向负调控miR-338-3p表达。干扰miR-338-3p表达显著减弱circ_0000069对A549细胞增殖、迁移和侵袭的抑制(P＜0.05)。 结论抑制circ_0000069通过上调miR-338-3p抑制NSCLC细胞A549增殖、迁移和侵袭。     

肺癌患者血浆miR-197-3p和miR-361-3p表达的诊断评价

目的:评价血浆miR-197-3p和miR-361-3p用于肺癌诊断的价值。方法:采用实时定量PCR法检测57例肺癌患者和53例良性肺病患者血浆中miR-197-3p和miR-361-3p的表达水平。建立这两个血浆miRs的受试者工作特征(ROC)曲线评价其诊断肺癌的效果,并与血清癌胚抗原和细胞角蛋白19(Cyfra21-1)诊断效果进行比较。结果:miR-197-3p和miR-361-3p在肺癌患者血浆中的表达水平明显高于良性肺病患者(均P<0.001)。两指标诊断肺癌的ROC曲线下面积分别为0.908和0.869(均P<0.001)。血浆miR-197-3p表达与肺癌的病理组织学类型显著相关(P=0.011);而血浆miR-361-3p表达与肺癌的分化程度及临床分期相关(P=0.005和P=0.015)。血浆miR-197-3p和miR-361-3p测定诊断肺癌的敏感性(78.9%和71.9%)和准确性(81.8%和80%)高于血清癌胚抗原(42.6%和60%)和Cyfra21-1(25%和58.9%),两种miR的联合检测可较大程度提高诊断的敏感性(89.5%)和准确性(85.5%),但特异性略有下降。结论:血浆miR-197-3p和miR-361-3p可作为诊断肺癌的肿瘤标志物,诊断效果优于血清癌胚抗原和Cyfra21-1。     

山奈素通过下调circ-RPL15抑制肺癌细胞A549的增殖和迁移

目的：探索山奈素是否通过circ-RPL15 影响肺癌细胞A549 的生物行为。方法：使用25、50 和75 μg/mL山奈素处理肺癌细胞A549。在细胞A549中沉默circ-RPL15,或过表达circ-RPL15并使用75 μg/mL山奈素处理。采用细胞计数试剂盒8（CCK-8）检测各组肺癌细胞A549 活力变化,平板克隆法检测细胞克隆形成,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹（Western blot）法检测裂解-含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Cleaved-caspase3）蛋白的表达,使用Transwell法检测细胞迁移,并使用实时定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测circ-RPL15、miR-489-3p表达。双荧光素酶报告实验分析circ-RPL15对miR-489-3p的靶向调控。结果：与对照组相比,不同质量浓度（25、50 和75 μg/mL）山奈素作用于肺癌细胞A549 后,细胞活力、克隆形成数、迁移数、circ-RPL15表达量降低,而凋亡率、Cleaved-caspase3蛋白和miR-489-3p的表达量升高（P ＜0.05）,且均呈浓度依赖性。沉默circ-RPL15 增强肺癌细胞A549 的miR-489-3p表达量、凋亡率和Cleaved-caspase3蛋白的表达量,并减弱细胞活力、克隆形成数、迁移数（P ＜0.05）。circ-RPL15靶向调控miR-489-3p。过表达circ-RPL15逆转了山奈素作用的肺癌细胞增殖、凋亡和迁移情况（P ＜0.05）。结论：山 奈素通过下调circ-RPL15并靶向调控miR-489-3p,抑制肺癌细胞的增殖和迁移,并诱导其凋亡。     

血清miR-1228-3p和miR-369-3p水平与非小细胞肺癌患者预后的关系

目的:分析血清miR-1228-3p和miR-369-3p水平与非小细胞肺癌(NSCLC)患者预后的关系.方法:比较106例NSCLC患者(恶性组)和40例肺部良性病变者(良性组)的基线资料、血清癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)及鳞状上皮细胞癌抗原(SCC-Ag),RT-qPCR法测定miR-1228-3p、miR-369-3p,分析其与病理参数关系,对比存活组、死亡组患者入院时各血清指标并分析预测价值.结果:恶性组血清CEA、CA125、CYFRA21-1、miR-1228-3p、miR-369-3p水平均高于良性组(P<0.05),两组基线资料及SCC-Ag水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);NSCLC中,miR-1228-3p表达水平与病理类型、肿瘤分期、肿瘤大小、有无远处转移有关(P<0.05),miR-369-3p表达水平与肿瘤分期、有无远处转移有关(P<0.05);死亡组患者入院时血清CEA、CYFRA21-1、miR-1228-3p、miR-369-3p水平高于存活组(P<0.05);ROC曲线显示,miR-1228-3p、miR-369-3p预测NSCLC患者预后的曲线下面积(AUC)优于CEA、CYFRA21-1.结论:NSCLC患者血清miR-1228-3p、miR-369-3p呈高表达,且其与病理、预后密切相关.     

溪黄草对circ_0091579/miR-515-5p、肺癌细胞A549增殖及凋亡的影响

目的探讨溪黄草对circ_0091579/miR-515-5p及肺癌细胞A549增殖和凋亡的影响。 方法将肺癌A549细胞分为对照组、溪黄草(20、40、80 mg/L)组、si-circ_0091579组、si-NC组、pcDNA-circ_0091579组、pcDNA组、溪黄草+pcDNA-circ_0091579组。CCK-8、平板克隆实验、流式细胞术检测A549细胞抑制率、克隆形成数以及凋亡率。qRT-PCR检测circ_0091579和miR-515-5p表达。双荧光素酶报告实验验证circ_0091579和miR-515-5p相互作用。 结果溪黄草显著降低A549细胞的增殖和克隆形成能力,促进细胞凋亡,诱导cleaved-Caspase-3表达上调及circ_0091579下调,且呈质量浓度依赖性。下调circ_0091579可降低A549细胞的增殖和克隆形成能力,促进细胞凋亡,诱导cleaved-Caspase-3表达上调。上调circ_0091579可逆转溪黄草对A549细胞的增殖抑制和凋亡促进功能。circ_0091579和miR-515-5p直接特异性结合。 结论溪黄草可抑制肺癌细胞A549增殖,诱导其凋亡,其机制与下调circ_0091579/miR-515-5p途径有关。     

miR-214-3p通过靶向PTEN抑制骨肉瘤U2OS细胞凋亡的研究

目的:研究骨肉瘤中显著高表达的miR-214-3p对骨肉瘤细胞凋亡的影响及相关作用机制.方法:以骨肉瘤细胞U2OS为研究对象,采用慢病毒感染方法,建立miR-214-3p的稳定转染细胞系,设置过表达negative control慢病毒为对照组,采用流式细胞术检测2组细胞凋亡情况,并对凋亡相关信号通路进行研究.结果:(1)流式结果显示,与对照组比较miRNA-214-3p稳转U2OS细胞系后凋亡细胞减少;(2)Dual-Glo Luciferase方法证实在U2OS细胞中miR-214-3p可以直接结合pten的3'UTR区域,WB实验证实miR-214-3p蛋白水平抑制pten;(3)miR-214-3p可以上调pAKT蛋白表达.结论:miR-214-3p通过直接靶向抑癌基因pten,活化AKT通路,抑制骨肉瘤细胞的凋亡从而在骨肉瘤中发挥了癌基因的作用,可能促进了骨肉瘤的进展.     

lncRNA MNX1-AS1通过调控miR-218-5p影响非小细胞肺癌细胞的增殖、凋亡及迁移

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)MNX1-AS1通过调控miR-218-5p的表达对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法qRT-PCR检测MNX1-AS1和miR-218-5p在肺癌细胞系及肺正常上皮细胞系中的表达;采用双荧光素酶报告基因实验和RNA pull down实验验证MNX1-AS1和miR-218-5p之间的靶向关系;干扰A549细胞中MNX1-AS1和miR-218-5p的表达后,MTT、流式细胞术和Transwell实验检测MNX1-AS1靶向miR-218-5p对癌细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响。结果与肺正常上皮细胞系相比,肺癌细胞系中MNX1-AS1表达升高,miR-218-5p表达降低(P＜0.05);荧光素酶报告基因实验显示,MNX1-AS1可与miR-218-5p结合导致荧光素酶活性显著降低(P＜0.05);RNA pull down实验证实miR-218-5p能特异性结合MNX1-AS1(P＜0.05);抑制A549细胞中MNX1-AS1的表达后,miR-218-5p水平上调,细胞的增殖、迁移和侵袭能力均显著降低,凋亡率显著升高;与MNX1-AS1抑制剂组相比,共抑制MNX1-AS1和miR-218-5p的细胞增殖、迁移、侵袭能力升高,凋亡率下降(P＜0.05)。结论MNX1-AS1可以通过靶向下调miR-218-5p的表达影响非小细胞癌的增殖、凋亡、迁移和侵袭。     

miR-519b-3p调控IL-6/STAT3通路对宫颈癌细胞凋亡、迁移、侵袭的影响

目的探讨miR-519b-3p调控IL-6/信号转导和转录激活因子3(STAT3)通路对宫颈癌细胞(SiHa)凋亡、迁移、侵袭的影响。 方法qRT-PCR检测miR-519b-3p在宫颈癌组织中的表达。SiHa细胞分为miR-NC组、miR-519b-3p组、miR-NC+RhIL-6组、miR-519b-3p+RhIL-6组。流式细胞术评估SiHa细胞凋亡率,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭情况。Western blotting检测B细胞淋巴瘤-2基因(Bcl-2)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-cadherin、Bcl相关x蛋白(Bax)、STAT3和p-STAT3蛋白水平。 结果与癌旁组织比较,宫颈癌组织miR-519b-3p表达下调(P＜0.05)。SiHa细胞凋亡率、Bax和E-cadherin蛋白水平miR-519b-3p组高于miR-NC组,miR-NC+RhIL-6组低于miR-NC组,miR-519b-3p+RhIL-6组低于miR-519b-3p组(P＜0.05)。SiHa细胞迁移数、侵袭数、Bcl-2、N-cadherin、p-STAT3蛋白水平miR-519b-3p组低于miR-NC组,miR-NC+RhIL-6组高于miR-NC组,miR-519b-3p+RhIL-6组高于miR-519b-3p组(P＜0.05)。 结论miR-519b-3p通过抑制IL-6/STAT3通路来抑制宫颈癌细胞迁移和侵袭,并增加细胞凋亡。     

miR-28-5p对结肠癌细胞增殖和迁移的影响

目的 探究miR-28-5p对结肠癌细胞增殖和迁移能力的影响.方法 采用qRT-PCR检测miR-28-5p在正常结肠细胞NCM460与结肠癌细胞HCT116、SW480、SW620中表达量的差异.将HCT116、SW480、SW620各分为三组:对照组,过表达组,沉默组.对照组不予特殊处理,其余两组分别转染miR-2...     

Effects of ursolic acid on the proliferation and apoptosis of human ovarian cancer cells

This study examined the effects of ursolic acid （UA） on the proliferation and apoptosis of a human ovarian cancer cell line, CAOV3. The CAOV3 cells were cultured in the RPMI 1640 media and treated with different concentrations of UA （0, 10, 20, 40 μmol/L）. The proliferation rate of the CAOV3 cells was determined by MTT assay. The apoptosis rate was measured by flow cytometry. ERK activity was detected by immunoprecipitation and the expressions of p-ERK1/2, MKP-1, Bax and Bcl-2 by Western blotting. The results showed that the proliferation rate was significantly decreased in the cells treated with UA as compared with that in the non-treated cells （P〈0.05）. The intracellular ERK activity and p-ERK1/2 expression were also reduced in the UA-treated cells, while the MKP-1 expression was elevated. Moreover, the apoptosis was found in the CAOV3 cells exposed to UA; the Bax expression was increased and the Bcl-2 expression decreased. The apoptosis rate in the UA-treated cells was much higher than that in the non-treated cells （P〈0.05）. It is concluded that UA can inhibit the proliferation of CAOV3 cells by suppressing the ERK activity and the expression of p-ERK1/2. And it can also induce the apoptosis of the CAOV3 cells by up-regulating the Bax expression and down-regulating the Bcl-2 expression.     

熊果酸对舌癌细胞Tca8113生长、迁移和凋亡的影响及机制研究*

目的 探究熊果酸对人舌癌细胞Tca8113体外生长、迁移和凋亡的影响及机制。方法 采用噻唑蓝（MTT）法及克隆形成实验检测熊果酸对Tca8113细胞活性的影响;采用划痕实验检测熊果酸在0、12及24?h对Tca8113细胞迁移能力的影响;通过Heochst33342染色和流式细胞术观察熊果酸对Tca8113细胞凋亡的影响;Western blotting检测熊果酸对细胞中磷酸化局部黏着斑激酶（p-Fak）、局部黏着斑激酶（Fak）、活化冬氨酸蛋白水解酶-3（Cleaved caspase-3）、Bcl-2-Associated X的蛋白质（Bax）、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）蛋白表达的影响。结果 熊果酸能抑制Tca8113细胞的活性并促进其凋亡（P?<0.05）,并呈时间、浓度依赖性。熊果酸抑制Bcl-2,并促进Bax、Cleaved caspase-3表达,促进Tca8113细胞凋亡;能降低p-Fak、Fak的表达,抑制Tca8113细胞的迁移。结论 熊果酸能抑制Tca8113细胞的生长及迁移,其机制可能与调节Bcl-2/Bax凋亡通路和抑制Fak的激活相关。     

lncRNA TTN-AS1通过靶向miR-204-3p调控胃癌细胞迁移、侵袭及上皮-间质转化

目的：探讨长链非编码RNA肌联蛋白反义RNA 1（lncRNA TTN-AS1）是否可通过靶向微小RNA-204-3p（miR-204-3p）调控胃癌细胞迁移、侵袭及上皮-间质转化（EMT）。方法：采用qRT-PCR法检测胃癌组织、癌旁组织中TTN-AS1、miR-204-3p的表达量;体外培养人胃癌细胞AGS,分别将si-NC、si-TTN-AS1、miR-NC、miR-204-3p mimics、si-TTN-AS1与anti-miR-NC、si-TTN-AS1与anti-miR-204-3p转染至AGS细胞;采用qRTPCR法检测AGS细胞中TTN-AS1、miR-204-3p的表达量;采用Transwell小室实验检测迁移及侵袭能力;双荧光素酶报告实验检测TTN-AS1、miR-204-3p的靶向关系。结果：胃癌组织中TTN-AS1的表达水平比癌旁组织增加约2.90倍（P ＜0.05）,miR-204-3p的表达水平比癌旁组织减少约0.57倍（P ＜0.05）;转染si-TTN-AS1或转染miR-204-3p mimics可明显减少迁移及侵袭细胞数（P ＜0.05）;双荧光素酶报告实验证实TTN-AS1可靶向结合miR-204-3p;共转染si-TTN-AS1与anti-miR-204-3p可明显增加迁移及侵袭细胞数（P ＜0.05）。结论：抑制TTN-AS1表达可通过上调miR-204-3p的表达从而抑制胃癌细胞迁移、侵袭及EMT。     

人参皂苷通过NF-κB/NLRP3途径改善狼疮性肾炎小鼠肾损伤

目的探讨土贝母苷甲通过调控miR-215-5p表达对膀胱癌T24细胞增殖、迁移及侵袭的影响。 方法不同质量浓度土贝母苷甲(10、20、30 mg/L)处理人膀胱癌细胞T24。细胞分别转染miR-NC、miR-215-5p mimics、anti-miR-NC、anti-miR-215-5p,随后用土贝母苷甲(30 mg/L)处理T24细胞。CCK-8实验检测细胞增殖;平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;Transwell实验检测细胞迁移及侵袭;qRT-PCR法检测miR-215-5p的表达;Western blotting法检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9蛋白表达。 结果土贝母苷甲作用于T24细胞后,细胞存活率和MMP-2、MMP-9蛋白水平、细胞克隆形成、迁移及侵袭降低(P＜0.05),而miR-215-5p表达升高(P＜0.05),且呈剂量依赖性递减或递增。miR-215-5p过表达可抑制细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭(P＜0.05);抑制miR-215-5p可逆转土贝母苷甲对T24细胞恶性行为的抑制作用。 结论土贝母苷甲可通过促进miR-215-5p的表达而抑制膀胱癌细胞恶性行为。