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目的 探究miR-145-5p和SERPINE1在胃癌上皮细胞中的潜在调控机制,希望能够为胃癌的精准治疗提供新的思路.方法 从TCGA数据库中下载TCGA-STAD的miRNA成熟体、mRNA和临床数据.利用Edg-eR包对mRNA进行差异分析获得DEGs,并与预测基因取交集获得靶标基因.通过qRT-PCR检测miR-... 相似文献
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《热带医学杂志》2020,(3)
目的探讨miR-1-3p靶向端锚聚合酶2(TNKS2)基因对宫颈癌Ca-Ski细胞增殖、迁移及侵袭的调控作用。方法采用实时荧光定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)检测正常宫颈鳞状细胞及不同宫颈癌细胞中miR-1-3p的表达情况,选取宫颈癌Ca-Ski细胞进行转染实验,利用脂质体转染法将miR-1-3p模拟物(miR-1-3p mimics)及模拟物对照(NC mimics)分别转染至Ca-Ski细胞,分别记为miR-1-3p mimics组和miR-NC组,将未经转染处理的Ca-Ski细胞记为Blank组(空白对照)。qRT-PCR检测各组Ca-Ski细胞中miR-1-3p的表达,噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,通过生物信息学软件分析和双荧光素酶报告基因实验验证miR-1-3p和TNKS2靶向关系,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞中TNKS2蛋白表达。结果 miR-1-3p在宫颈癌细胞中的表达显著低于正常宫颈鳞状细胞(P0.05)。转染miR-1-3p mimics 48 h后,Ca-Ski细胞中miR-1-3p的表达显著升高(P0.05)。过表达miR-1-3p能够明显抑制Ca-Ski细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P0.05)。生物信息学软件分析显示miR-1-3p和TNKS2 3’UTR存在结合位点,双荧光素酶报告基因实验显示TNKS2是miR-1-3p的靶基因,Western blot检测结果显示miR-1-3p可抑制TNKS2的表达。结论 miR-1-3p可靶向TNKS2基因抑制宫颈癌Ca-Ski细胞增殖、迁移及侵袭。 相似文献
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目的 探讨miR-744-5p/CCND1轴在肾透明细胞癌(ccRCC)中的作用及机制。方法 qRT-PCR检测ccRCC组织和细胞系中miR-744-5p 的表达水平。实验分组:miR-744-5p 模拟物(miR-744-5p mimic)、阴性对照(NC mimic)、CCND1 模拟物(CCND1 mimic)及其阴性对照(NC mimic)。CCK-8实验、划痕愈合实验和transwell实验验证miR-744-5p对ccRCC细胞增殖、迁移及侵袭功能的影响。通过生物信息学预测miR-744-5p的下游靶分子,qRT-PCR和Western blot验证CCND1在786-O及OSRC2细胞中的表达水平,双荧光素酶报告基因实验进一步验证miR-744-5p和CCND1的关系,最后通过回复实验验证miR-744-5p/CCND1轴在ccRCC中的作用。结果 MiR-744-5p在ccRCC组织和细胞系中显著下调(P<0.05),过表达miR-744-5p可以抑制ccRCC细胞的增殖、迁移和侵袭(P<0.05)。生物信息学分析结果和双荧光素酶报告基因实验结果显示,CCND1是miR-744-5p的下游靶标。回复实验结果显示,上调CCND1可以部分逆转上调miR-744-5p对ccRCC细胞增殖、迁移以及侵袭的抑制作用(P<0.05)。结论 miR-744-5p通过靶向CCND1抑制ccRCC细胞的恶性表型,miR-744-5p/CCND1轴可能是ccRCC诊断和治疗的一个新的靶点。 相似文献
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目的探讨微小RNA-140-3p (miR-140-3p)对子宫肌瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法选取于2016年2月至2018年9月在西安市中医医院行手术治疗的59例子宫肌瘤患者为研究对象,同时期41例因子宫肌瘤切除全子宫的正常子宫肌组织作为对照,实时荧光定量PCR (RT-qPCR)检测组织中miR-140-3p和锚蛋白B (ANK2) mRNA表达水平。子宫肌瘤细胞分为miR-140-3p组(转染miR-140-3p模拟物mimics)、miR-NC组(转染mimics阴性对照序列)、si-ANK2组(转染ANK2小干扰RNA)、si-NC组(转染乱序无意义阴性序列)、miR-140-3p+pcDNA-ANK2组(共转染miR-140-3p mimcs与ANK2过表达载体)和miR-140-3p+pcDNA组(共转染miR-140-3p mimcs与空载体)。RT-qPCR和蛋白印迹(Western blot)分别检测miR-140-3p或ANK2蛋白水平验证转染效果,四甲基噻唑蓝染色法(MTT)检测各组细胞增殖情况,Transwell检测各组细胞的迁移和侵袭能力,W... 相似文献
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[目的]探讨miR-195-5p对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用机制.[方法]运用qRT-PCR法检测肝癌细胞Hep G2和正常肝细胞L02中miR-195-5p的表达;将miR-NC组、miR-195-5p组(转染miR-195-5p mimics)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-... 相似文献
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目的:探讨miR-129-5p在肝细胞癌(HCC)发展中的作用及其机制。方法:通过实时荧光定量-PCR(qRT-PCR)检测miR-129-5p在正常血清及肝癌患者血清、人正常肝细胞LO2和人肝癌细胞系中的表达情况。采用脂质体转染技术将miR-129-5p mimics转染至人肝癌细胞HCCLM3细胞,应用Western印迹检测人类婆罗双树样基因-4(SALL4)和程序性死亡受体-配体1(PD-L1)蛋白的表达。通过CCK-8实验、克隆形成实验、细胞周期检测、细胞划痕实验和Transwell实验等检测在体外过表达miR-129-5p对肝癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。此外,通过生物信息学工具、数据库分析和荧光素酶报告基因检测实验,探索miR-129-5p在HCC中的靶点,并探讨靶点SALL4是否介导miR-129-5p对HCC细胞的作用。结果:与正常血清相比,肝癌患者血清miRNA-129-5p表达量显著降低(t=13.32,P<0.001),与LO2相比,肝癌细胞系HepG2、Hep3B、HCCLM3、BEL-7402和QGY-7703的miR-129-5p表达量均显著降低(... 相似文献
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目的:探讨长链非编码RNA肌联蛋白反义RNA 1(lncRNA TTN-AS1)是否可通过靶向微小RNA-204-3p(miR-204-3p)调控胃癌细胞迁移、侵袭及上皮-间质转化(EMT)。方法:采用qRT-PCR法检测胃癌组织、癌旁组织中TTN-AS1、miR-204-3p的表达量;体外培养人胃癌细胞AGS,分别将si-NC、si-TTN-AS1、miR-NC、miR-204-3p mimics、si-TTN-AS1与anti-miR-NC、si-TTN-AS1与anti-miR-204-3p转染至AGS细胞;采用qRTPCR法检测AGS细胞中TTN-AS1、miR-204-3p的表达量;采用Transwell小室实验检测迁移及侵袭能力;双荧光素酶报告实验检测TTN-AS1、miR-204-3p的靶向关系。结果:胃癌组织中TTN-AS1的表达水平比癌旁组织增加约2.90倍(P <0.05),miR-204-3p的表达水平比癌旁组织减少约0.57倍(P <0.05);转染si-TTN-AS1或转染miR-204-3p mimics可明显减少迁移及侵袭细胞数(P <0.05);双荧光素酶报告实验证实TTN-AS1可靶向结合miR-204-3p;共转染si-TTN-AS1与anti-miR-204-3p可明显增加迁移及侵袭细胞数(P <0.05)。结论:抑制TTN-AS1表达可通过上调miR-204-3p的表达从而抑制胃癌细胞迁移、侵袭及EMT。 相似文献
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目的:探讨miR-552-3p在肝细胞性肝癌(Hepatocellular carcinoma, HCC)中的表达及其促进细胞增殖和迁移、侵袭功能的机制。方法:qRT-PCR检测HCC细胞系及人正常肝细胞系中miR-552-3p的表达情况;下载TCGA数据库的HCC样本的微阵列数据分析miR-552-3p在HCC癌组织及癌旁组织中是否存在表达差异;miR-552-3p mimics以及miR-552-3p inhibitor转染HCC细胞,荧光素酶报告基因验证miR-552-3p与DACH1是否存在靶向关系,CCK8及Transwell实验检测miR-552-3p及其与DACH1相互作用对于HCC细胞增殖、迁徙、侵袭功能的影响。结果:TCGA数据库中HCC样本的分析结果表明miR-552-3p在HCC中高表达,同时qRT-PCR显示miR-552-3p在HCC细胞系中的表达水平显著高于人肝细胞系L02;miR-552-3p的高表达促进HCC细胞的增殖、迁移、侵袭功能而抑制miR-552-3p的结果则相反;荧光素酶报告实验验证了miR-552-3p靶向作用于DACH1的3’-UTR,上调miR-552-3p的表达抑制DACH1而下调miR-552-3p则DACH1表达增加;DACH1的过表达可抑制HCC细胞相关功能,但同时过表达miR-552-3p后DACH1对于HCC细胞相关功能的抑制即可解除;miR-552-3p正向调控Wnt/β-catenin 信号通路的激活。结论:miR-552-3p靶向作用于DACH1促进HCC细胞增殖、迁移、侵袭功能,并参与调控Wnt/β-catenin 信号。可能作为HCC的诊疗策略提供潜在靶点。 相似文献
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目的 探讨miR-98-3p在食管癌组织和细胞中的表达,并研究其对食管癌细胞增殖和凋亡的影响及作用机制.方法 qRT-PCR法检测miR-98-3p在食管癌组织及细胞系中的表达水平;miR-98-3p模拟物(miR-98-3p mimics)和miR-98-3p抑制物(miR-98-3p inhibitors)瞬时转染... 相似文献
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目的 探讨microRNA-338-3p (miR-338-3p)对结直肠癌细胞侵袭与迁移能力的影响及其调控机制.方法 脂质体分别转染miR-338-3p前体(pre-miR-338-3p)和miR-338-3p特异性抑制剂(miR-338-3p-inhibitor)至人结直肠癌SW620及SW480细胞系中,应用实时荧光定量PCR(Real-time RT-PCR)检测细胞中miR-338-3p表达状况,运用半定量RT-PCR及Westernblot分析Smoothened(SMO)mRNA及蛋白表达状况,Transwell侵袭、迁移实验检测转染前后细胞体外侵袭迁移能力;在经anti-SMO-siRNA预先处理的SW480细胞中转染miR-338-3p-inhibitor,检测转染细胞中SMO蛋白的表达变化以及侵袭能力的改变.结果 通过生物信息学网站预测SMO可能是miR-338-3p的作用靶基因;SW620细胞中miR-338-3p表达水平较SW480细胞减低,而SMO蛋白增高.转染pre-miR-338-3p至SW620细胞,miP-338-3p表达上调,SMO蛋白表达降低,且肿瘤细胞的侵袭及迁移能力下降;而转染miR-338-3p-inhibitor至SW480细胞后,miR-338-3p表达下降,SMO蛋白表达上升,肿瘤细胞侵袭、迁移能力增强,且此种增强效应可被an-ti-SMO-siRNA所部分逆转,说明miR-338-3p确实是通过抑制SMO而发挥抗癌作用.结论 MiR-338-3p通过下调SMO表达而抑制结直肠癌细胞侵袭与迁移. 相似文献
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目的 探讨miR-671-5p影响骨肉瘤的迁移侵袭的相关机制。方法 通过NCBI在线数据库筛选骨肉瘤中差异表达的微小RNA(miRNA)、预测miRNA的靶蛋白并进行功能分析;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)用于检测转染过表达miR-671-5p质粒后con组和miR-671-5p组骨肉瘤细胞中miR-671-5p的表达情况;通过Transwell实验检测转染质粒后骨肉瘤细胞的迁移和侵袭能力;Western blot实验检测相关蛋白在骨肉瘤细胞中的表达情况;荧光素酶报告基因检测重组人SMAD家族成员3(SMAD3)的 3’UTR中是否含有miR-671-5p的结合位点。结果 MiR-671-5p在骨肉瘤组织和细胞中表达下调(P<0.05)。qRT-PCR证明转染过表达miR-671-5p质粒后,细胞转染成功(P<0.05)。过表达骨肉瘤细胞中的miR-671-5p后细胞的迁移和侵袭能力明显降低(P<0.05),并且miR-671-5p能够抑制骨肉瘤细胞的上皮间质转化(EMT)(P<0.05);Western blot结果显示SMAD3在骨肉瘤细胞中表达上调(P<0.05);荧光素酶报告基因检测证实miR-671-5p与SMAD3的3’UTR之间存在结合位点(P<0.05);Western blot结果显示转染过表达SMAD3质粒后,SMAD3表达明显升高(P<0.05),而miR-671-5p能明显抑制SMAD3的表达(P< 0.05);Transwell实验证明SMAD3能够促进骨肉瘤细胞的迁移和侵袭能力(P<0.05),而miR-671-5p则能够逆转这种促进作用(P<0.05)。结论 MiR-671-5p能够通过负向调控SMAD3抑制骨肉瘤细胞迁移和侵袭能力。 相似文献
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目的:探讨miR-149-5p对胃癌细胞迁移侵袭能力的影响及分子机制。方法:qRT-PCR检测胃癌细胞株和组织标本中miR-149-5p的表达,分析其表达水平与胃癌患者临床病理特征参数及预后的相关性,建立过表达和干扰miR-149-5p的胃癌细胞株,Transwell实验检测miR-149-5p表达水平对胃癌癌细胞迁移侵袭能力的影响;生物信息学网站预测miR-149-5p的靶基因,采用荧光素酶报告基因实验加以验证。结果:miR-149-5p在胃癌组织和细胞株中均低表达(均P<0.05)。miR-149-5p的表达水平与胃癌患者的浸润深度(P=0.016)、淋巴结转移(P=0.001)和TNM分期(P=0.023)相关。miR-149-5p低表达是胃癌患者总生存期的独立危险因素。与对照组相比,miR-149-5p mimics明显抑制胃癌细胞的迁移侵袭能力(均P<0.01),而转染miR-149-5p inhibitors后得到了相反的结果(均P<0.05)。miR-149-5p靶向调控脂肪细胞增强结合蛋白1(Adipocyte enhancer binding pro... 相似文献
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目的探讨GLI4在结肠癌中的表达及对癌细胞生物学行为的影响。 方法使用TCGA数据库对GLI4的差异表达进行分析和验证。行Kaplan-Meier和log-rank检验以评估不同GLI4水平对结肠癌患者中位生存期的影响。纳入结肠癌患者160例,免疫组织化学染色检测GLI4在癌组织和癌旁正常组织中的表达水平,转录组测序和免疫浸润分析GLI4对免疫细胞的潜在影响。过表达或敲低GLI4后,分析其对结肠癌细胞LoVo和SW1116增殖、上皮间充质转化能力和干性的影响。 结果GLI4在结肠癌组织中的表达显著高于癌旁正常组织(P<0.05);GLI4高表达结肠癌患者中位生存期低于低表达患者,GLI4表达与淋巴结转移和分期具有相关性(P<0.05)。过表达GLI4后,结肠癌细胞LoVo和SW1116增殖、上皮间充质转化能力和干性水平上升(P<0.05)。CD56bright NK细胞数与GLI4呈正相关。结肠癌细胞LoVo和SW1116中CD56bright NK细胞抑制因子IL-4、IL-5、IL-6、IL-10在过表达GLI4后上升,在敲低GLI4后下降。 结论高GLI4表达与结肠癌患者癌症进展和中位生存期显著相关。GLI4可以促进结肠癌细胞的增殖水平、上皮间充质转化能力和干性水平。 相似文献
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目的:探讨GDP解离抑制因子2(GDI2)对结直肠癌(CRC)细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡以及细胞周期的影响及其机制。方法:TCGA数据库分析GDI2 mRNA在CRC肿瘤组织中的表达。将CRC细胞分为sh-NC组和sh-GDI2组,采用CCK-8法检测细胞活力,克隆形成实验检测细胞增殖,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭,流式细胞术检测细胞凋亡和周期,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测GDI2基因表达,western blotting检测GDI2蛋白和神经生长因子受体(p75NTR)通路关键因子(IKK、p-NF-κB和p-IκB)的表达。构建异种移植瘤裸鼠模型,观察GDI2对CRC肿瘤生长的影响。结果:与癌旁正常组织和正常结肠上皮细胞相比,GDI2在CRC患者肿瘤组织和细胞系中的表达上调(P<0.05)。sh-GDI2能抑制CRC细胞增殖、迁移、侵袭,阻滞细胞周期进程,并促进凋亡(均P<0.05)。与sh-NC组相比,sh-GDI2组p75NTR蛋白表达上调,IKK、p-NF-κB、p-IκB蛋白表达下调(均P<0.05)。敲低GDI2可明显抑制裸鼠体内... 相似文献
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目的:探讨miR-431-3p对胃癌细胞增殖和凋亡的影响,阐明其可能的分子机制。方法:取经病理诊断确诊为胃癌的68例患者的胃癌组织及其癌旁组织。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测胃癌组织、癌旁组织和人正常胃黏膜上皮GES-1细胞、人胃癌细胞(MKN-28、MGC-803、 MKN-45、 SGC-7901和HGC-27)中miR-431-3p及羧基末端结构域磷酸酶1 (CTDP1)mRNA表达水平,Western blotting法检测上述细胞中CTDP1蛋白和各组SGC-7901细胞中细胞色素C(Cyt C)、B细胞淋巴瘤2 (Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达水平。采用Pearson相关分析法分析miR-431-3p与CTDP1 mRNA表达水平的相关性,双荧光素酶报告基因实验检测miR-431-3p和CTDP1的靶向关系。将miR-431-3p mimic和CTDP1过表达慢病毒分别或同时转染至SGC-7901细胞中,将细胞分为空白组、空载过表达(mimic NC)组、miR-431-3p过表达(miR-431-3p mimic)组、空载慢病毒(Ve... 相似文献