慢性乙型肝炎患者的乙型肝炎病毒基因型与细胞免疫功能的关系

目的探讨慢性乙型肝炎（cHB）患者的乙型肝炎病毒（HBV）基因型与细胞免疫功能的关系及其临床意义。方法对108例CHB患者用聚合酶链反应（PCR）微板核酸杂交-酶联免疫吸附测定（ELISA）技术进行HBV基因分型,用流式细胞仪检测T细胞亚群、非特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）、辅助性T细胞（Th）1、Th2、自然杀伤（NK）细胞,对其中55例人白细胞抗原（HLA）-A2阳性CHB患者检测HBV特异性CTL。结果108例CHB患者中,B基因型59例（54．6％）,C基因型48例（44．4％）,B、C混合型1例（0．9％）,HLA—A2阳性55例（51．4％）中,C基因型感染者27例,B基因型感染者28例;乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）阳性率高于B基因型感染者（75．0％VS49．2％）（P〈0．01）,C基因型的HBVDNA水平高于B基因型感染者（6．12±0．81）log10copies／mlvs（5．02±0．61）log10 copies／ml（P〈0．01）,HBV特异性CTL低于B基因型感染者（0．21±0．06）％vs（0．39士o．12）％（P〈0．01）。非特异性CTL高于B基因型感染者（19．84±6．17）％vs（16．81±3．56）％（P〈0．01）,丙氨酸转氨酶（ATL）高于B基因型感染者（505．12±312．91）U／Lvs（222．11±205．16）U／L（P〈0．01）,血清总胆红素（TBIL）高于B基因型感染者（45．71±41．12）μmol／Lvs（28．18±15．12）μmol／L（P〈0．05）。结论与CHBB基因型感染者相比,C基因型感染者的HBV特异性CTL较低,导致HBVDNA水平高于B基因型感染者,HBeAg阳性率也高于B基因型感染者,因此C基因型感染者的肝功能损害比B基因型感染者重,C基因型感染者的肝功能损害比B基因型感染者重,可能也与C基因型感染者的非特异性CTL比B基因型感染者高有关。     

拉米夫定耐药感染者HBV基因与YMDD变异的相关性探讨

目的探讨拉米夫定耐药感染者HBV基因型与YMDD变异的相关性。方法采用PCR扩增后测序的方法,对162例拉米夫定耐药感染者进HBV基因型的分析。实时荧光定量PCR法检测HBVYMDD变异及HBVDNA载量。率的比较采用Y2检验法,两组均数间的比较采用t检验法。结果162例拉米夫定耐药感染者中,B基因型102例（63．0％）,C基因型60例（37．0％）。YMDD变异111例（68．5％）,其中YIDD变异30例（18．5％）,YVDD变异32例（19．7％）,YIDD／YVDD混合型变异49例（30．3％）。统计结果显示,不同性别之间HBV基因型分布没有显著性差别（P〉0．05）。B型患者的年龄（29．7岁±10．2岁）显著低于C型患者的年龄（35．3岁±11．3岁）,差异有统计学意义（P〈0．05）。YMDD变异的发生率在B、C基因型之间差异无统计学意义（P〉0．05）。C基因型患者血清的HBVDNA含量（6．08±0．71）显著高于B基因型组（5．73±0．90）（P〈0．05）,而血清ALT水平没有显著性差别（P〉O．05）。结论拉米夫定耐药感染者YMDD变异与基因型无关。但C基因型患者平均年龄、病毒载量显著高于B基因型,可能是导致CHB患者对拉米夫定耐药的重要因素。     

上海市金山地区乙型肝炎病毒基因型分布及其与临床的关系

目的了解上海金山地区乙型肝炎病毒（HBV）感染者基因型分布及其与临床的关系。方法401例HBVDNA阳性患者采用聚合酶链反应（PCR）-酶联免疫吸附试验（ELISA）进行HBVDNA定量、微流基因芯片法进行基因分型、ELISA检测e抗原（HBeAg）及肝功能检查后进行综合分析。结果B型198例（49．38％）,C型169例（42．14％）,B／C混合型20例（4．99％）,未分型14例（3．49％）,未发现其他基因型。B型在慢性乙型重度肝炎（CSHB）患者中的比例显著低于无症状携带者（ASC）和慢性乙型轻、中度肝炎（CMHB）（P〈0．01）,而C型在CSHB患者中的比例显著高于ASC和CMHB（P〈0．01）。ASC中B型患者的HBVDNA水平最低。C型患者的丙氨酸氨基转移酶（ALT）和γ-谷氨酰基转移酶（GGT）水平均高于B型。结论上海金山地区HBV感染者基因型以B型为主,C型次之,少量B／C混合型,C型与重肝病关系比B型密切。     

实时荧光聚合酶链反应检测HBV基因型方法的建立和临床研究

目的 建立实时荧光聚合酶链反应（PCR）检测乙型肝炎病毒（HBV）基因型方法并对检测的慢性乙型肝炎（CHB）患者基因型进行临床分析。方法 根据GenBank中已发表的明确分型的143株HBV全序列，设计特异的组合引物探针，建立实时荧光PCR方法，检测128例慢性乙型肝炎患者基因型；同时检测HBVDNA、HBV-M。结果 （1）128例标本中B型检出率为20．3％（26／128），C型占71．9％（92／128），D型占7．8％（10／128）；18株HBV克隆标本S基因测序结果与本分型法完全一致。（2）男性与女性的HBV基因型构成比无明显差异（P=0．561）。B型与C型比较，C基因型HBVDNA含量（P〈0．05）和HBeAg阳性率（P〈0．01）明显高于B基因型。基因型B具有更高的HBeAb水平（P〈0．05）。结论 （1）实时荧光聚合酶链反应HBV基因分型法能够简便、灵敏、快速、准确地鉴定HBV基因型。（2）HBV基因型主要以C型为主，其次为B型、D型。在CHB患者中，性别不是基因型构成差别的因素，C基因型易引起较重的肝脏病变，B型易发生免疫逃逸，致病情较轻。     

不同临床类型慢性乙肝患者乙肝病毒基因型检测

目的探讨本院慢性乙型肝炎患者乙肝病毒基因型分布特征及与临床类型的关系。方法利用线性探针分析法进行乙肝病毒基因分型。结果52例慢性乙肝患者检出乙肝病毒基因型B型24例（46．2％）,C型26例（50％）,A、B混合型2例（3．8％）,B、C两型均以男性多见,两型间性别比例差异无统计学意义（X2=0．65,P〉0．05）;在慢性肝炎轻度、中度、重度、肝硬化及肝癌中,B和C基因型的分布差异无统计学意义（P〉0．05）;A、B混合型2例分别为慢性乙型肝炎轻度和慢性乙型肝炎中度。C型HBeAg阳性率高于B型,差异有统计学意义（P〈0．05）,HBVDNA载量两组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论本组慢性乙肝患者的乙肝病毒基因型以B、C为主要亚型,且C型稍多,C型HBeAg阳性率高于B型。     

200例乙型肝炎患者HBV基因型分布及临床意义

目的探讨200例武汉地区乙型肝炎病毒（HBV）感染者病毒基因型的分布及其与肝病严重程度的相关性。方法采用半巢式PCR对200例来自武汉地区的乙肝病毒感染者血浆HBV进行扩增后,Sanger测序法进行基因分型。结果200例HBV血浆样本的基因型分布为B型142例（71．0％）,C型55例（27．5％）,D型1例（O．5％）和B／C混合型1例（O．5％）,B／F／G混合型1例（O．5％）。在基因型B和基因型C中,无症状携带HBV患者、轻中度慢性乙肝患者、重度肝炎及肝硬化患者、肝癌患者的构成比分别为：37．32％,44．37％,14．08％,4．23％和23．64％,36．36％,21．82％,18．18％,两种基因型在肝病严重程度中的构成比差异有统计学意义（P〈O．05）。结论分离的200例HBV样本基因型以B,C为优势基因型,且基因型与HBV感染者发生肝病的严重程度有显著相关性。     

乙型肝炎病毒基因型与基本核心启动子及前C区变异对疾病进展的影响

目的 应用测序列的方法，探讨乙型肝炎病毒（HBV）基因型在南京地区的流行病学状况和HBV基因型与基本核心启动子（BCP）及前C区变异对疾病进展的影响。方法 选用南京地区94例HBV感染患者血清，其中慢性乙型肝炎（CHB）44例、慢性重型乙型肝炎（CSH）、肝硬化（LC）和肝细胞癌（HCC）50例，应用测序列的方法测定HBV的S基因序列以确定其基因型，测定C基因序列以确定其变异状况。结果 南京地区94例HBV感染患者的HBV基因型以B型和C型为主，分别为40例（42．6％）和54例（57．4％），未发现其他型和混合型，CHB组与HCC、CSH和LC组病毒基因型分布差异有统计学意义（P〈0．01），对于不同病情的HBV感染患者，基本核心启动子变异区（T1762／A1764双变异）变异差异有统计学意义（P〈0．05）；而不同基因型的患者基本核心启动子变异差异有统计学意义（P〈0．05）。前C区变异（A1896变异）在不同病情和不同基因型的患者中，差异均无统计学意义。结论 南京地区流行的HBV主要基因型是B和C，C型感染可以引起较重的肝病，尤其是BCP发生双变异者；HBV基因型是影响临床表现的重要因素之一。     

济宁地区HBV基因型分布及临床特点

目的了解济宁地区乙型肝炎病毒（hepatitis Bvirus,HBV）基因型分布情况,研究不同HBV基因型感染者的临床特点。方法随机选择济宁地区HBV感染者共142例,其中无症状携带者（ASC）39例,慢性乙型肝炎（CHB）51例,乙型肝炎肝硬化（HIE）27例,原发性肝细胞癌（HCC）25例。应用实时荧光PCR试剂盒进行血清HBV基因分型测定。结果对HBV—DNA阳性的137例标拳进行HBV基因分型,其中B基因型35例（25．55％）,C基因型98例（71．53％）,B＋C混合基因型4例（2.92％）,未检出非B非C型。ASC感染者中B型基因占多数,而其它三种感染者中以C型基因居多。结论济宁地区HBV基因型主要以C型为主,其次为B型。HBV基因C型与基因B型比较有显著不同的临床特点,在ASC感染者中基因C型的比例明显低于CHB、加Z及HCC患者。     

乙型肝炎病毒基因型与恩替卡韦抗病毒疗效关系

目的探讨乙型肝炎病毒（HBV）基因型与恩替卡韦抗病毒治疗疗效的关系。方法应用聚合酶链反应（PCR）-微板核酸分子杂交-酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测103例慢性乙型肝炎（CHB）患者HBV的基因型,给予恩替卡韦（O．5mg／d）抗病毒治疗48周;治疗前、治疗后分别检测肝功能、乙型肝炎5项和HBVDNA定量,同时注意药物不良反应。结果103例CHB患者中感染B基因型者34例,感染C基因型者69例。治疗48周,感染B基因型和C基因型患者丙氨酸转氨酶（ALT）复常、HBVDNA转阴、乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）消失和HBeAg／乙型肝炎病毒e抗体（HBeAb）血清转换差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论HBV基因型不影响恩替卡韦抗病毒疗效。     

阜阳市慢性乙型肝炎病毒感染者HBV基因型调查

目的了解阜阳市慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者HBV基因型分布状况。方法选择165例HBVDNA阳性的慢性HBV感染者,采用型特异性聚合酶链反应(PCR)检测HBV基因型。结果 165例慢性HBV感染者中HBV基因型B型46例(27.9%)、B/C混合型29例(17.6%)、C型90例(54.5%),未发现其他基因型。结论阜阳市慢性HBV感染者基因型为B、B/C和C型,其中基因C型是主要流行株。     

型特异性引物巢式PCR快速检测HBV基因型及其临床意义

目的　应用型特异性引物巢式PCR检测HBV基因型并初步了解山东地区HBV基因型的分布状况。方法　随机选择山东地区HBVDNA阳性患者共 178例 ,其中无症状携带者 (ASC) 5 3例 ,慢性活动性肝炎 (CH) (包括轻、中、重度 ) 87例 ,肝硬化(LC) 38例 ,先通过外引物进行第一轮PCR ,然后 ,将 6对型特异性引物分到两个反应体系 (MixA和MixB)中分别对第一轮扩增产物进行第二轮PCR ,根据阳性结果判断出样本的基因型。结果　C基因型 85例 (47.8% ) ,B基因型 6 3例 (35 .4 % ) ,B C混合基因型 30例 (16 .8% )。C基因型在活动性肝病 (CH及LC)中占优势 ,而ASC组则是以B基因型为主 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。C基因组中HBeAg阳性率、HBVDNA定量及ALT水平均较B基因组为高 (P <0 .0 0 1或P <0 .0 0 5 ) ,而抗HBe阳性率则在B基因型组显著升高 (P <0 .0 0 5 )。结论　山东地区存在C、B及B C混合基因型 ,并以C基因型为主。型特异性引物巢式PCR敏感性高 ,特异性强 ,可以快捷准确地检测HBV基因型。     

Genotype analysis,using PCR with type-specific primers,of hepatitis B virus isolates from patients coinfected with hepatitis delta virus genotype II from Miyako Island,Japan

OBJECTIVES: The aims of this study were to determine the hepatitis B virus (HBV) genotypes in hepatitis delta virus (HDV) RNA-positive patients and to characterize the HBV nucleotide sequences that may be found on a distant island of Japan. METHODS: This study included three patients with chronic hepatitis who were positive for hepatitis B surface antigen (enzyme-linked immunosorbent assay; ELISA), HDV antibody (ELISA) and HDV RNA by polymerase chain reaction (PCR). The HBV genotype was determined by nested PCR using type-specific primers. The first-round PCR products from two patients were sequenced, followed by an investigation of nucleotide homology. RESULTS: Viruses from all three patients in this study were classified as HBV genotype B. Comparison with HBV isolates from geographically neighboring regions revealed that the two HBV isolates had 97.9-98.6% identity at the nucleotide level to a Chinese isolate, 98.3-98.6% identity to the Okinawa isolate and 98.6-98.8% identity to a Japanese isolate of genotype B. On phylogenetic analysis, the HBV isolates from the two patients were classified as HBV genotype B. The HBV isolates of cases 1 and 3 clustered in the same group as isolates from the Chinese mainland and Japanese mainland, which are geographically near Miyako Island. CONCLUSION: The HBV isolates coinfected with HDV found on Miyako Island were of genotype B. The PCR method based on genotype-specific primers was useful in determining HBV genotypes.     

多对型特异性引物巢式PCR检测乙型肝炎病毒基因型分析

目的采用多对型特异性引物通过巢式PCR法检测HBeAg阳性患者血清中乙肝病毒(HBV)基因型的分布情况。方法根据从前S1基因到S基因中的保守序列设计出10条内外引物,并将其中8条内引物分成A、B两组分别扩增A、B、C和D、E、F型HBV,然后将第2轮PCR的两组产物分别用3%琼脂糖进行电泳,根据PCR产物片段大小直接判定HBV基因型。用该法检测15例慢性乙肝患者血清中HBV基因型,了解HBV基因型分布情况。结果 HBV基因分型结果为B型7例(46.7%)、C型4例(26.7%)、B+C型2例(13.3%),另有2例未能分型。结论人群HBV优势基因型以B型为主,C型次之。     

Hepatitis B virus genotypes in Korea: an endemic area of hepatitis B virus infection

OBJECTIVES: It has been reported that distribution of hepatitis B virus (HBV) genotypes shows geographic difference and are associated with clinical outcomes of HBV infection, including response to antiviral therapy and progression of chronic liver diseases. In this study, we analyzed the distribution of HBV genotypes according to the various clinical outcomes of chronic HBV infection in Korea, which is one of the most endemic areas of HBV infection. METHODS: A total of 200 patients with chronic HBV infection were enrolled. Clinical diagnoses of the 200 patients with chronic liver diseases were as follows: hepatitis B e antigen (HBeAg)-positive healthy carrier (defined as HBeAg(+), anti-HBe(-), HBV DNA(+) by hybridization, normal transaminase; n = 40); inactive HBsAg carrier (n = 40); chronic hepatitis B (n = 40); liver cirrhosis (n = 40); hepatocellular carcinoma (n = 40). HBV genotypes were determined by nested polymerase chain reaction using genotype-specific primers. RESULTS: All patients except 2 (inactive HBsAg carriers) were positive for nested PCR and they have genotype C regardless of clinical outcomes. CONCLUSIONS: HBV genotype was genotype C regardless of various clinical outcomes of chronic HBV infection in Korea. Considering that HBV genotypes have clinical relevance, distribution of HBV genotype in each area should be monitored when management for chronic HBV infection is planned.     

江苏省南通地区乙型肝炎病毒基因分型与临床相关性

目的了解江苏省南通地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型分布状况及其临床相关性。方法选择南通地区HBV-DNA阳性的乙型肝炎病毒感染者300例,其中乙型肝炎表面抗原携带者(ASC)28例,慢性乙型肝炎(CHB)189例,重型肝炎(CSH)26例,肝硬化(LC)30例,肝细胞癌(HCC)27例,采用多对型特异性引物巢式PCR法检测HBV基因型。结果300份血清标本中B型89例(29.7%),C型196例(65.3%),BC混合型15例(5.0%);C基因型在LC组、HCC组中的比例显著高于ASC组和CHB组(P<0.05)。结论南通地区HBV基因型可能以B、C型为主,C型为优势基因型并与肝硬化、肝癌的发生相关。     

乙型肝炎病毒基因型分析以及与血清标志物的关系

目的乙型肝炎病毒六种主要基因型的分析,并探讨与乙肝血清标志物的关系。方法提取200例北京同仁医院乙型肝炎感染者血清核酸,采用型特异性引物PCR进行基因分型。用电化学发光法检测血清的乙型肝炎病毒表面抗原、表面抗体、e抗原、e抗体、核心抗体。结果B型占26%、C型64%、BC复合型10%;C型的HBeAg阳性率显著性高于B型,在不同的基因型中HBsAg转阴率无显著性差异。结论北方人群中C型占优势,且C型HBV不易发生HBeAg血清学转换。     

初诊慢肝患者血清中乙肝病毒DNA载量与血清标志物的关系

目的探讨初诊慢性乙型肝炎血清标志物与HBV DNA的关系。对象与方法采用酶联免疫方法和荧光定量聚合酶链反应分别对512例不同乙肝病人及202例HBeAg阴性、257例HBeAg阳性慢肝病人进行血清标志物、HBV DNA定量检测并分析结果。结果慢肝组有315例(68.9%)病毒颗粒浓度高于107,肝硬化组7例(13.2%)病毒颗粒浓度高于107;HBeAg阳性慢肝组245例(95.3%)患者病毒颗粒含量高浓度,HBeAg阴性慢肝组68例(33.7%)患者病毒颗粒含量在105-7copy/mL区段。结果慢肝组与肝硬化组相比,高浓度病毒以慢肝组中最明显,病情发展至肝硬化期病毒含量多数不高;慢肝病人中不同乙肝血清标志物模式其病毒含量分布特点不同,与HBeAg阳性慢肝组相比HBeAg阴性组体内病毒复制水平低(p<0.01),传染性较前者弱。最常见前C区突变,导致HBeAg阴性CHB病情加重和病毒复制增加。     

延安地区乙型肝炎病毒基因型分布与临床的相关性

目的了解延安地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型分布特征,探讨其与慢性HBV感染者的性别、年龄、不同临床疾病谱等的相关性。方法随机选取HBVDNA阳性患者122例,将可检出基因型的121例患者分为慢性无症状携带者(ASC)58例,慢性乙型肝炎(CHB)46例,肝硬化(LC)17例。采用HBV核酸扩增荧光定量PCR检测HBVDNA载量,采用反向杂交技术测定HBV基因型。结果延安地区HBV基因型主要以C型为主。在121例可检出基因型的患者中,C型116例,B型2例,D型2例,B+C混合型1例。结论延安地区HBV基因型主要以C型为主。基因型C主要分布于LC、HBeAg(+)、年龄大于或等于35岁组的患者中。提示基因型C与较严重的肝脏疾病有关。     

江苏地区乙型肝炎患者HBV基因分型与血清HBV DNA水平研究

目的了解江苏地区乙型肝炎病毒基因型分布特征,探讨HBV各基因型与血清HBV DNA水平、患者年龄之间的关系。方法采用荧光定量PCR结合Taqman MGB探针技术,对江苏地区176份乙型肝炎患者血清中的HBV DNA进行基因分型和定量检测。结果176例血清中,C型117人(66.5%),B、C型40人(22.7%),B型9人(5.1%),D型1人(0.6%),A型1人(0.6%)。C型与B、C混合型在HBV DNA水平上存在显著差异(t=2.413,P<0.05),B、C混合型的HBV DNA水平明显高于C型。C基因型在慢性乙型肝炎患者中的所占比例(71.4%)比在急性乙型肝炎、肝硬化和肝癌患者中所占的比例较高,但差异无显著性。HBV DNA各基因型在患者年龄水平上没有明显差异(P>0.05)。结论江苏地区HBV基因型以C型为主、B、C混合型次之,B型较少,D型、A型极少;B、C混合型患者的HBV DNA数量水平显著高于C型。