叶绿酸铜钠抗突变作用的实验研究

用小鼠骨髓细胞微核试验和小鼠睾丸染色体畸变试验探讨叶绿酸铜钠的抗突变作用。结果：叶绿酸铜钠能有效地抑制由环磷酰胺诱导的小鼠ＰＣＥ微核的发生;在睾丸染色体畸变试验中,表现为对环磷酰胺诱导的小鼠精母细胞染色体畸变的抑制作用,由此表明,叶绿酸铜钠是一种有效的抗突变物质。     

碱性成纤维细胞生长因子的染色体畸变试验

目的　检测碱性成纤维细胞生长因子 (ｂＦＧＦ)的致突变性。方法　采用ＣＨＬ细胞染色体畸变试验。ｂＦＧＦ最大浓度为ＣＨＬ细胞 5 0 %抑制浓度。在±Ｓ9ｍｉｘ条件下 ,2 4及 48ｈ收获细胞做染色体畸变分析。结果　溶媒、Ｓ9ｍｉｘ对照染色体畸变率正常 ,ｂＦＧＦ 2 5、5 0、10 0、2 0 0 μｇ ｍｌ浓度染色体畸变率为1 5 %～ 4 5 % (正常 <5 % )。阳性对照丝裂霉素Ｃ染色体畸变率显著增高 ,环磷酰胺无Ｓ9ｍｉｘ染色体畸变率正常 ,有Ｓ9ｍｉｘ染色体畸变率显著增高 ,表明本试验系统可靠。结论　在本试验系统条件下 ,ｂＦＧＦ在 2 5～ 2 0 0 …     

绞股蓝总皂甙对环磷酰胺诱变性的影响

采用已知的化学诱变剂环磷酰胺诱发小鼠微核，染色体畸变及精子畸变为指标，观察了绞股蓝总皂甙的抗诱变作用。结果表明，绞股蓝总皂甙对环磷酰胺所致微核、染色体畸变及精子畸变均有抑制作用，并有一定程度的剂量依赖性关系。     

小鼠体内卵母细胞及第一次分裂合子染色体畸变分析方法及其应用

采用超排卵技术使ICR雌性小鼠排卵,排卵前用环磷酰胺(CYC 25、50、100mg/kg)处理后与雄性小鼠交配,分析小鼠卵母细胞(MⅡ)及第一次分裂合子的染色体非整倍体及结构畸变。 对照小鼠MⅡ及第一次分裂合子均未发现有染色体非整倍体及结构畸变。环磷酰胺100mg/kg处理组小鼠MⅡ非整倍体率显著增加,但未见染色体结构畸变。 在小鼠第一次分裂合子中,环磷酰胺可使雌原核染色体非整倍体率增加,并诱发多种染色体结构畸变,畸变率随环磷酰胺剂量的增加而增加。该分析技术具有自然畸变率低、灵敏、快速等 优点。     

基于构效关系模型和体外实验的acetylnerolin遗传毒性评价（英文）

目的评价萘普生的杂质acetylnerolin(Ace)的遗传毒性。方法采用基于定量构效关系的方法ADMET、Derek和Sarah,预测Ace的遗传毒性,利用体外染色体畸变和细菌反向突变(Ames)实验验证上述结果。在染色体畸变实验中,中国仓鼠肺(CHL)细胞与Ace 10,20,40 mg·L~(-1)在有/无代谢活化系统混合液(S9 mix)的条件下,分别以甲基磺酸甲酯(MMS)20 m L·L~(-1)及环磷酰胺(CP)12 mg·L~(-1)作为阳性对照,孵育4 h后,对每个畸变中期(包括断裂、交换、环状、分裂和多倍体)的染色体数目计数并记录,当畸变率<5%为阴性,>10%为阳性。在Ames实验中,用5种鼠伤寒沙门氏菌(TA97,TA98,TA100,TA102和TA1535)对Ace进行致突变评价。这5种菌种分别与Ace 5,25,125和625μg(每个平板)在有无S9 mix条件下孵育48～72 h。在不添加S9 mix的条件下,敌克松50μg(每个平板)作为TA97和TA98组的阳性对照;MMS2.0μL(每个平板)作为TA100和TA102组的阳性对照;叠氮化钠1.5μg(每个平板)作为TA1535的阳性对照;在添加S9 mix的条件下,2-氨基芴100μg(每个平板)作为TA97,TA98和TA100的阳性对照;1,8-二羟基蒽醌100μg(每个平板)和CP 50μg(每个平板)分别作为TA102和TA1535的阳性对照,当菌落数≥2×阴性对照时,则认为该化合物具有致突变性,反之则为阴性。结果 Derek和Sarah软件预测NPX杂质不具有遗传毒性,但ADMET数据显示Ace可诱发染色体畸变。在染色体畸变实验中,Ace 40 mg·L~(-1)致畸变率>5%,但<10%;Ace <20 mg·L~(-1)时致畸变率<5%,提示Ace可能诱发染色体畸变,这与ADMET结果一致;Ames试验结果表明,与阴性对照组相比,5种菌种每个平板给药Ace 5～625μg后,各组的细菌数量没有显著增加,提示Ace无致突变性,这与ADMET结果相反。结论 Ace有潜在的致染色体畸变性,对于长期服用萘普生的患者,为保障用药安全,建议将Ace的含量从普通杂质的0.15%降至0.015%。     

邓老凉茶对小鼠致突变安全性评价

目的以小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠睾丸染色体畸变试验为指标,研究邓老凉茶对哺乳动物的致突变安全性。方法(1)小鼠骨髓细胞微核试验:邓老凉茶设10、5.0和2.5g/kg3个剂量组,另设溶剂对照及环磷酰胺阳性对照组(40mg/kg,ip.),对NIH小鼠连续两次灌胃给药,首次给药后30h检查各组小鼠的股骨骨髓多染红细胞微核发生率。(2)小鼠睾丸染色体畸变试验:邓老凉茶设10、5.0和2.5g/kg3个剂量组以及溶剂对照、环磷酰胺阳性对照组(40mg/kg,ip.),对NIH小鼠连续灌胃给药5d,1次/d,首次给药后13d制备睾丸染色体标本,油镜下观察100个初级精母细胞中期分裂相,检查性染色体单价体、常染色体单价体、链状多价体、环状多价体和染色体结构畸变发生率以及畸变细胞率。结果及结论(1)小鼠骨髓细胞微核试验:邓老凉茶高、中、低剂量组的微核发生率分别为0.3‰、0.5‰和0.2‰,与溶剂对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),阳性对照组微核发生率为10.2‰,高于溶剂对照组(P<0.01);在本实验条件下邓老凉茶没有诱发小鼠骨髓微核的作用。(2)小鼠睾丸染色体畸变试验:邓老凉茶高、中、低剂量组的畸变细胞率分别为4.2%、3.5%和3.7%,与溶剂对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),阳性对照组畸变细胞率为26.6%,高于溶剂对照组(P<0.01);在本实验条件下邓老凉茶没有诱发小鼠初级精母细胞睾丸染色体畸变的作用。     

六种新药对CHL细胞染色体畸变的影响

<正> 采用CHL细胞染色体畸变试验,在有或无S9条件下,观察了6种新药对染色体畸变作用的影响,每一实验均同时设阳性对照,S9对照,空白对照或溶媒对照.当药物为非水溶性时,以二甲基亚砜(dimethylsulphoxide,DMSO)作溶媒. 实验在予先测试药物50％生长抑制(IG50)浓度基础上,以其最高浓度,依次按倍量递减设3～4个给药浓     

卡莫氟对细胞的诱变性

<正> 本文采用染色体畸变和微核实验,对抗癌新药(卡莫氟1-hexylcarbamoyl-5-fluorouracil,HCFU)的细胞钙变性进行了检测。 微核实验用昆明种小鼠,每组10只,??各半。于动物处死前24和30 h分别po HCFU混悬液259、51.8和25.9 mg/kg,阴性对照给予蒸馏水,阳性对照ip环磷酰胺40mg/kg。取小鼠股骨骨髓,观察嗜多染红细胞微     

南德士遗传毒性的研究

目的检测南德士的遗传毒性,为临床前安全性评价提供依据。方法按《新药(西药)临床前研究指导原则汇编》的设计要求,分别应用Ames试验、小鼠骨髓微核试验法、体外培养CHO细胞染色体畸变试验方法、CHO细胞和人肝细胞Changliver单细胞凝胶电泳法。结果Ames实验选用组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium)TA97、TA98、TA100、TA102及TA1535为指示菌株,在加和不加代谢活化系统(S9)条件下进行,南德士在5000、500、50、5和0.5μg/皿受试剂量下,加和不加代谢活化系统(S9)时对鼠伤寒沙门氏菌无致突变性。小鼠骨髓微核试验结果显示:在所设剂量范围(250.0~62.5mg/kg)内,对ICR小鼠的微核诱发率(‰)与阴性对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05),表明受试物南德士在受试剂量下对ICR小鼠无诱发骨髓嗜多染红细胞微核的效应。染色体畸变试验设8.0、4.0和2.0μg/ml(IC50为8.0μg/ml)3个剂量组以及阴性对照组(DMSO)和阳性对照组(环磷酰胺)。结果显示:阳性对照组CHO细胞的染色体畸变率与阴性对照组比较,差异有统计学意义;受试物南德士在4.0和8.0μg/ml2个剂量组24hS9诱发的细胞染色体畸变率均>5%,与阴性对照组比较,结果显示差异具有统计学意义(P<0.05)呈阳性结果;在2.0和4.0μg/ml剂量组48h,-S9诱发的细胞染色体畸变率均>5%,与阴性对照组比较,结果显示差异具有统计学意义上(P<0.05),呈阳性结果。但在 S9条件下受试物各剂量组染色体畸变率均小于5%,呈阴性结果。细胞彗星试验采用CHO细胞和正常人肝细胞Chang liver2个细胞株。采用16.0、8.0和4.0μg/ml3个剂量组(IC50为8μg/ml)。另设溶剂对照和阳性对照组。结果显示在各试剂量的拖尾率和尾长与溶剂对照组相比较,差异无统计学意义,表明南德士在受试剂量下无损伤CHO细胞和人肝细胞Chang liverDNA的能力。结论南德士对体外培养的CHO细胞在-S9条件下染色体畸变试验呈阳性,有一定的遗传毒性。但彗星试验显示南德士无损伤CHO细胞和人肝细胞Chang liverDNA的能力。说明南德士所致染色体畸变,可能不是通过损伤DNA机制所致。     

蜂王浆软胶囊对小鼠精子和睾丸细胞染色体畸变研究

目的通过小鼠小鼠精子畸变和睾丸细胞染色体畸变试验,探讨蜂王浆软胶囊对雄性小鼠的生殖毒性。方法试验设3个剂量组为2.5g.kg-1、5.0g.kg-1、10.0g.kg-1BW,经口灌胃进行试验,取小鼠睾丸制备标本,分别观察并计算各剂量组小鼠的精子畸变和睾丸细胞染色体畸变率。结果蜂王浆软胶囊各剂量组小鼠的精子和睾丸细胞染色体畸变率与空白对照均无显著性差异(P>0.05),而阳性对照组环磷酰胺与空白对照组比较有显著性差异(P<0.01)。结论蜂王浆软胶囊各剂量组对雄性小鼠无生殖毒性作用。     

哺乳动物细胞染色体畸变试验的标准化与背景数据采集

染色体畸变试验作为保健食品、化妆品、药品、医疗器械上市前常规开展的毒理学试验项目,是检测化学物质对染色体数量和结构影响的基本方法。确立标准化试验方法并积累一定的背景数据,是试验系统和数据真实可靠性的有力保障,可为科研人员和审评专家的数据分析提供有力依据。首先就影响染色体畸变试验结果的因素进行简要综述,继而通过回顾国内外2012-2017年期间发表的47篇有关哺乳动物细胞染色体畸变试验的研究来讨论如何规范化试验条件,并以国家药物安全评价监测中心2002-2017年汇总的背景数据为例阐释建立历史背景数据的要点。总之,严格参考OECD指导原则开展规范化的染色体畸变试验并通过长期积累建立一套对照受试物的背景数据是临床前遗传毒性研究的关键环节,有利于更好地对药物等受试物的潜在致染色体损伤作用进行合理而有效的判断。     

西洋参胶囊对小鼠骨髓细胞染色体和微核的影响

目的通过小鼠骨髓细胞染色体畸变和微核实验,探讨昂立西洋参胶囊对小鼠骨髓细胞的遗传毒性。方法以0.9,1.8,3.6 g.kg 1剂量的昂立西洋参胶囊给小鼠灌胃,取小鼠股骨骨髓制备骨髓细胞标本,分别观察并计算各组小鼠的染色体畸变率和微核率。结果各剂量组小鼠骨髓细胞染色体畸变率和微核率与空白对照组比较均无显著性差异(P>0.05),而阳性对照组环磷酰胺与空白对照组比较有显著性差异(P<0.01)。结论昂立西洋参胶囊各剂量组对小鼠骨髓细胞染色体和微核均无影响。     

桑黄多糖对小鼠骨髓细胞微核和染色体的影响

目的通过小鼠细胞染色体畸变和微核试验,探讨桑黄多糖对小鼠骨髓细胞的遗传毒性。方法试验设3个剂量组为2.5g·kg-1、5.0g·kg-1、10.0g·kg-1BW,经口灌胃进行试验,取小鼠骨髓制备骨髓细胞标本,分别观察并计算各剂量组小鼠的染色体畸变率和微核率。结果桑黄多糖各剂量组小鼠骨髓细胞染色体畸变率和微核率与空白对照均无显著性差异（P〉0.05）,而阳性对照组环磷酰胺与空白对照组比较有显著性差异（P〈0.01）。结论桑黄多糖各剂量组对小鼠骨髓细胞染色体和微核均无影响。     

蜂王浆软胶囊对小鼠骨髓细胞染色体和微核的影响

目的通过小鼠细胞染色体畸变和微核试验,探讨蜂王浆软胶囊对小鼠骨髓细胞的遗传毒性。方法试验设3个剂量组为2.5g·kg-1、5.0g·kg-1、10.0g·kg-1bw,经口灌胃进行试验,取小鼠骨髓制备骨髓细胞标本,分别观察并计算各剂量组小鼠的染色体畸变率和微核率。结果蜂王浆软胶囊各剂量组小鼠骨髓细胞染色体畸变率和微核率与空白对照均无显著性差异(P>0.05),而阳性对照组环磷酰胺与空白对照组比较有显著性差异(P<0.01)。结论蜂王浆软胶囊各剂量组对小鼠骨髓细胞染色体和微核均无影响。     

低纯度熊果酸对小鼠致变性及其拮抗作用的研究

目的研究熊果酸(Ursolic Acid,UA)的致突变作用及其拮抗作用。方法采用小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验、小鼠染色体畸变实验、小鼠精子畸形实验和改进的小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验、染色体畸变实验、小鼠精子畸形实验,通过检测骨髓嗜多染红细胞微核率、染色体畸变率和精子畸形率来研究熊果酸的致突变性和抗突变性。结果熊果酸各致突变实验组(HUA、MUA、LUA)与阳性对照组(环磷酰胺,CP)相比,差异有统计学意义(P0.05),表明熊果酸没有致突变性;熊果酸抗突变实验组(HUA+CP、MUA+CP和LUA+CP)与阳、阴性对照组相比,差异有统计学意义(P0.05),表明熊果酸可降低环磷酰胺诱发的细胞微核、染色体畸变率和精子畸形率。结论在本试验条件下,熊果酸无致突变作用,具有一定的拮抗作用。     

盐酸特拉唑嗪对仓鼠肺细胞染色体畸变试验

目的　检测抗高血压药盐酸特拉唑嗪的致突变性。　方法　采用中国仓鼠肺 (ＣＨＬ)细胞体外染色体畸变试验。盐酸特拉唑嗪的最大浓度为ＣＨＬ细胞 5 0 %抑制浓度 ,再依次递减共设 4个给药浓度。同时设溶剂、Ｓ9混合液阴性对照及阳性对照 (丝裂霉素Ｃ)。试验在±Ｓ9混合液条件下 ,于 2 4及 48ｈ ,分别收获细胞做染色体畸变分析。每一试验浓度在油镜下分析 10 0个中期分裂相细胞。　结果　无论是 2 4及48ｈ收获细胞 ,溶剂、Ｓ9混合液阴性对照染色体畸变率为 0～ 4% (正常ＣＨＬ细胞染色体畸变率 <5 % ) ,盐酸特拉唑嗪17 5、35 0、70 0、140 …     

环磷酰胺对小鼠免疫功能的影响

环磷酰胺(Cyclophosphamide)作为抗癌药广泛用于临床及科研。它是一种免疫抑制剂,接受环磷酰胺后,可抑制机体免疫功能,使宿主抵抗力降低。在免疫毒理学研究中以环磷酰胺作为阳性对照物时,选     

PT-141染色体畸变试验

目的采用中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL)进行染色体畸变试验,评价PT-141在体外有无致突变性,为临床应用提供安全依据。方法CHL细胞用含质量浓度为20%的小牛血清和双抗(青霉素、链霉素的总浓度分别为100U/ml、100μg/ml)的1640培养液于37℃,恒温培养。(1)细胞毒性试验:采用苔盼蓝染色检测CHL细胞接触PT-14148h的半数细胞生长抑制浓度(IC50),作为剂量选择的依据。(2)染色体畸变试验:以CHL细胞进行加与不加S9的染色体畸变试验。不加S9时,培养瓶内加入4.95ml细胞培养液,50μl受试物,培养24和48h;加S9时,培养瓶内加入4.45ml细胞培养液,50μl受试物,0.5mlS9混合物,培养6h后,弃培养液,PBS洗涤3遍,再加入1640细胞培养液5ml,继续培养至24和48h。分别于收获前4h加入终浓度为0.2μg/ml的秋水仙碱。实验设PT-141高,中,低3个剂量组、并设阴性对照组,阳性对照组分不加S9试验阳性对照组(MMC0.25μg/ml)和加S9试验阳性对照组(CP20μg/ml,作用6h)。收获细胞后,常规低渗、固定、制片和Giemsa染色,每个剂量组油镜下观察分裂中期相细胞100个,记录畸变类型,计算细胞染色体畸变率(%)。各试验剂量均作平行样3份。结果细胞毒性实验显示,PT-141各剂量组,细胞数未发生显著差异,说明PT-141在高剂量5mg/ml未显示毒性反应。故正式实验选择高剂量为5mg/ml、按等比倍量稀释法,中、低剂量分别设定为1mg/ml、200μg/ml。染色体畸变结果显示,阳性对照组的畸变率明显高于阴性对照组,差异具有统计学意义(P<0.01),畸变类型以断裂、缺失、交换为主;CHL细胞接触PT-1412448h,加S9还是不加S9,各剂量组的染色体畸变率与阴性对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论PT-141在体外CHL细胞染色体畸变试验中结果为阴性,在本实验条件下,未发现其具有潜在的致突变性。     

甲磺酸甲酯对小鼠精子染色体畸变的影响

利用(C_(57)×CBA)F_1小鼠精子与NIH小鼠体外受精、经培养制备的受精卵染色体标本,观察了甲磺酸甲酯(MMS)对小鼠精子染色体畸变的影响。MMS体内(25、50、100mg/kg),体外(75、150μg/ml)处理精子后,精子染色体畸变率明显升高,呈剂受量-反应关系。畸变类型以染色体型为主。本研究表明,由MMS诱导的精子DNA损伤可传递至精卵;所用模型是一种监测化学物质对生殖细胞(精、卵子)诱变作用的可靠方法。     

五味子多糖的抗突变作用研究

目的:研究五味子多糖对环磷酰胺(CP)致小鼠微核率、染色体畸变率改变的影响,以探讨其对突变的拮抗作用。方法:50只小鼠随机分成5组,连续7d给予不同剂量的五味子多糖,于第8天给予环磷酰胺,之后取骨髓常规制片,光学显微镜观察计数微核和染色体个数。结果:五味子多糖可抑制微核率;还可降低染色体畸变率。结论:五味子多糖具抗突变作用。