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目的:探讨检测原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血 CD4+ CD25+ Foxp3+调节性 T 淋巴细胞的水平与意义。方法采用流式细胞术检测32例 PBC 患者和23例健康体检者外周血 CD4+ CD25+ Foxp3+调节性 T 淋巴细胞亚群比例;采用实时荧光定量聚酶链反应(PCR)技术检测人叉头型基因 p3(Foxp3)mRNA 表达的水平。结果PBC 患者外周血 CD4+ CD25+ Foxp3+调节性 T 淋巴细胞明显低于对照组(P <0.05);Foxp3的 mRNA 水平差异无统计学意义(P >0.05)。结论PBC 患者外周血 CD4+ CD25+ Foxp3+调节性 T 淋巴细胞减少,免疫抑制功能减弱,提示 CD4+ CD25+ Foxp3+调节性 T 淋巴细胞在 PBC 的免疫发病机制中可能起重要作用,对评估 PBC 患者细胞免疫状态和预后有重要价值。 相似文献
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调节性T细胞主要在机体免疫系统中发挥负向调节作用,既能抑制不恰当的免疫反应,又能限定免疫应答的范围、程度及作用时间,对效应细胞的增殖、免疫活性的发挥起抑制作用。近年来,CD4^+CD25^+调节性T细胞在自身免疫性甲状腺疾病中的作用日益引起人们的关注,动物实验和人体研究发现CD4^+CD25^+调节性T细胞数目和功能的异常与自身免疫性甲状腺炎(autoimmune thyroiditis,AIT)的关系密切,可能在AIT的发病机制中发挥关键作用。综述如下。 相似文献
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目的 探讨原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)患者外周血Th9细胞所占百分比并初步探讨其临床意义。方法 应用流式细胞术检测PBC患者(n=38)和健康对照者(n=38)外周血Th9细胞所占百分比,利用临床资料对患者进行Mayo评分。采用实时荧光定量PCR法检测患者组和健康对照组外周血单个核细胞(PBMC)中IL-9,PU-1,TGF-β的表达量。并采用ELISA方法检测患者血清中IL-9的表达量。进一步分析Th9细胞百分比与PBC患者生化指标和Mayo评分的相关性。结果 与健康对照组相比,PBC患者Th9细胞百分比增高(t=27.29; P<0.01),且随疾病分期加重逐渐增高。IL-9,PU-1和TGF-β mRNA的表达量显著增高(t=14.69,23.92,10.48; 均P<0.01),且血清中IL-9的表达量也显著增高(t=11.66; P<0.01)。生化指标(ALP,AST,ALT,GGT,TBIL)较健康对照组均显著增高(t=10.94,12.95,10.56,14.92,27.70; 均P<0.01)。Th9细胞百分比与患者Mayo评分、AST,ALT,GGT和TBIL间呈正相关(P<0.05)。结论 Th9细胞可能参与了PBC发病机制,且与疾病的发展相关,这为未来免疫调节治疗靶点的探索提供了新的依据。 相似文献
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背景:CD4+CD25+T细胞增殖能力低,且在人外周血中仅占单个核细胞的4%左右.若能在体外高效扩增CD4+CD25+T细胞,并保持其免疫调节特性,将会对临床移植产生积极的影响.目的:观察C57BL/6小鼠来源的CD4+CD25+T细胞体外增殖情况及其扩增后的功能变化.设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2007-10/2008-05在南方医科大学珠江医院血液科完成.材料:SPF级C57BL/6及BALB/C雄性小鼠购白南方医科大学动物所.小鼠白血病细胞EL9611由珠江医院血液科惠赠.方法:利用免疫磁珠法分选小鼠CD4+CD25+T细胞;以抗鼠CD3ε单抗、抗鼠CD28单抗、鼠重组白细胞介素2及辐射过的BALB/C小鼠脾细胞为共刺激因子,通过实时定量RT-PCR检测扩增后CD4+CD25+T细胞FoxP3基因mRNA表达变化,以确定增殖效率;3H-TdR掺入法检测扩增后的CD4+CD25+T细胞对CD4+CD25T细胞增殖的影响:LDH释放法检测扩增后的CD4+CD25+T细胞对CD4+CD25T细胞杀伤小鼠白血病细胞EL9611的影响,以CD4+CD25T细胞为效应细胞,以EL9611细胞为靶细胞.结果:经免疫磁珠分选可获得高纯度及较强活性的CD4+CD25+T细胞.扩增后CD4+CD25+T细胞FoxP3基因mRNA的表达平均为扩增前的5.46倍,最高可达14.39倍.扩增后CD4+CD25+T细胞可明显抑制CD4+CD25T细胞的增殖,且随着CD4+CD25+T细胞数的增加,这种抑制增殖的能力也逐渐增强,当两者比例为1:1时抑制率最大,达62.05%.与单纯CD4+CD25+T细胞对EL9611细胞杀伤率比较,效靶比为10:1时扩增后的CD4+CD25+T细胞联合CD4+CD25-T细胞的杀伤率无明显变化(t=2.199,P>0.05):效靶比为5:1时扩增后的CD4+CD25+T细胞联合CD4+CD25-T细胞的杀伤率则明显降低(t=5.839,P<0.05).结论:单抗加异源性抗原能宵效扩增CD4+CD25+T细胞;扩增后的CD4+CD25+T细胞比新鲜分离的CD4+CD25+T细胞能更有效地抑制CD4+CD25-T细胞的增殖,其对CD4+CD25-T细胞杀伤白血病细胞的作用则取决于其与CD4+CD25-T细胞的相对比例. 相似文献
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原发性胆汁性肝硬化患者外周血T淋巴细胞亚群检测的意义 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血T淋巴细胞亚群及细胞因子的特点及意义。方法 以35倒健康人作为对照组,用流式细胞术分析了35例确诊的PBC患者外周血T淋巴细胞亚群及其分泌IL-4和IFN-γ情况。结果 PBC患者组CD^4+T细胞升高,CD8^+T细胞下降,CD4^+T/CD8^+T比值上升(P〈0.05);PBC患者CD4^+T细胞IFN-1表达显著升高(P〈0.05),而IL-4水平与对照组比较无显著性差异(P〉0.05)。结论 在PBC发病机制中,CD4^+T细胞和TH1亚群细胞超重要作用。 相似文献
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目的探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者肝硬化期外周血淋巴细胞总数及T细胞亚群的特点并分析影响因素及临床意义。方法对86例肝硬化期PBC患者的临床资料、实验诊断数据进行回顾性分析,比较40例代偿期和46例失代偿期PBC患者肝功、免疫学指标和外周血淋巴细胞亚群特点,对可能的影响因素进行相关性分析。结果失代偿期PBC患者年龄、血清总胆红素(TBil)水平、血清总IgA水平、Mayo评分高于代偿期患者(P0.05),而ALT、ALB、外周血淋巴细胞绝对数(LYMPH)、淋巴细胞百分率(LYMPH%)、T淋巴细胞绝对数(CD3+)、T辅助细胞绝对数(CD3+CD4+)和T抑制细胞绝对数(CD3+CD8+)均低于代偿期患者(P0.05);LYMPH、LYMPH%、CD3+、CD3+CD4+和CD3+CD8+结果中,失代偿期减低者频率均高于代偿期(45.7%vs.10%,34.8%vs.7.5%,58.7%vs.17.5%,45.7%vs.5%,60.9%vs.27.5%,P0.05),失代偿期增高者频率均低于代偿期(54.3%vs.90%,6.5%vs.27.5%,0 vs.20%,2.2%vs.22.5%,2.2%vs.10%,P0.05)。在可能的影响因素中,年龄、Mayo评分、上消化道出血、脾大或脾切除、腹水等肝硬化失代偿表现对结果影响呈负相关;而ALT、ALB对结果影响呈正相关。结论随着肝硬化程度的加深,PBC患者外周血淋巴细胞总数及T细胞亚群数量降低;从淋巴细胞定量角度分析,随着疾病的进展,PBC患者免疫水平下降。 相似文献
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目的研究CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T细胞在自身免疫性甲状腺炎(AITD)大鼠外周血中的比例变化,并初步探讨其在疾病进程中的意义。方法选取17例A1TD大鼠,取静脉血,应用流式细胞术及定量PCR的方法,分别在蛋白质和mRNA水平检测Foxp3^+表达,并与甲状腺炎球蛋白抗体(TgAb),甲状腺过氧化酶抗体(TPOAb),甲状腺微粒体抗体(TmAb)和甲状腺组织活检结果作相关分析。取正常大鼠作为对照。结果AITD大鼠CD4^+CD25^+调节性T细胞(5.35%±1.27%)显著低于正常对照组(8.02%±2.29%,P〈0.01),AITD大鼠CD4^+CD25^+Foxp3^+T细胞占CD4‘T细胞比例(3.12%±0.78%)明显低于正常对照组(6.45%±2.12%,P〈0.01),AITD大鼠Treg与TgAb、TmAb、TPOAb呈负相关(r=-0.291,-0.357,-0.389,P〈0.05,0.05,0.05),并与小鼠甲状腺组织的炎症程度呈负相关(r=-0.511,P〈0.01);Foxp3mRNA表达水平与蛋白质表达水平变化相一致。结论AITD大鼠CD4^+CD25^+T细胞明显减少,这群调节性T细胞可能参与了AITD的病理进程。 相似文献
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目的用聚肌苷酸胞苷酸(polyinosinic polycytidylic acid,PolyI:C)注射C57BIL/6小鼠以研究建立原发性胆汁性肝硬化(PBC)动物模型,探讨CD40配体(CD40L)在外周血T淋巴细胞表面的表达,和在PBC中T淋巴细胞的活化情况。方法20只C57BIM6小鼠随机分对照组和模型组。将polyI:C以5ms/kg的剂量腹腔注射模型组小鼠,对照组注射PBS,每周2次,120d后处死,留取外周血和肝组织,间接免疫荧光法检测血清抗线粒体抗体(AMA),HE染色观察胆管病理变化,生化分析仪测定血清碱性磷酸酶(ALP)含量,流式细胞术分析外周血CD4^+、CD8^+T淋巴细胞所占比例及CD40L在T淋巴细胞表面的表达情况。结果PolyI:C注射120d后模型组小鼠均出现AMA阳性,肝组织小胆管周围有不同程度的炎性细胞浸润,血清ALP明显高于对照组(P〈0.001);对照组胆管及血清ALP均未发生明显变化;模型组小鼠CD40L^+/CD4^+、CD40L^+/CD8^+T淋巴细胞[(4.35±0.34)%,(1.42±0.10)%)显著高于对照组[(0.78±0.10)%,(0.43±0.04)%,P〈0.01];而模型组小鼠CD4^+、CD8^+T淋巴细胞所占比例[(25.83±1.80)%,(24.84±2.70)%]与对照组[(20.51±3.46)%,(17.84±1.53)%]比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。结论PolyI:C腹腔注射C57BIM6小鼠120d可引起PBC病变,活化的CD4^+、CD8^+T淋巴细胞在PBC发病中起重要作用。 相似文献
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Loss of functional suppression by CD4+CD25+ regulatory T cells in patients with multiple sclerosis 总被引:53,自引:0,他引:53
Viglietta V Baecher-Allan C Weiner HL Hafler DA 《The Journal of experimental medicine》2004,199(7):971-979
CD4+CD25+ regulatory T cells contribute to the maintenance of peripheral tolerance by active suppression because their deletion causes spontaneous autoimmune diseases in mice. Human CD4+ regulatory T cells expressing high levels of CD25 are suppressive in vitro and mimic the activity of murine CD4+CD25+ regulatory T cells. Multiple sclerosis (MS) is an inflammatory disease thought to be mediated by T cells recognizing myelin protein peptides. We hypothesized that altered functions of CD4+CD25hi regulatory T cells play a role in the breakdown of immunologic self-tolerance in patients with MS. Here, we report a significant decrease in the effector function of CD4+CD25hi regulatory T cells from peripheral blood of patients with MS as compared with healthy donors. Differences were also apparent in single cell cloning experiments in which the cloning frequency of CD4+CD25hi T cells was significantly reduced in patients as compared with normal controls. These data are the first to demonstrate alterations of CD4+CD25hi regulatory T cell function in patients with MS. 相似文献
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Allergen-responsive CD4+CD25+ regulatory T cells in children who have outgrown cow's milk allergy 总被引:21,自引:0,他引:21
Cow's milk allergy in children is often of short duration, which makes this disorder an interesting clinical model for studies of tolerance to dietary antigens. Here, we studied T cell responses in 21 initially allergic children who, after a milk-free period of >2 mo, had cow's milk reintroduced to their diet. Children who outgrew their allergy (tolerant children) had higher frequencies of circulating CD4(+)CD25(+) T cells and decreased in vitro proliferative responses to bovine beta-lactoglobulin in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) compared with children who maintained clinically active allergy. No significant difference in proliferative activity stimulated by the polyclonal mitogen phytohemagglutinin was observed between the two groups. Depletion of CD25(+) cells from PBMCs of tolerant children led to a fivefold increase in in vitro proliferation against beta-lactoglobulin. This suggests that tolerance is associated with the appearance of circulating CD4(+)CD25(+) regulatory T (Treg) cells that are capable of suppressing the effector T cells generated 1 wk after reintroduction of cow's milk. The suppressive function of the CD4(+)CD25(+) Treg cells was shown to be partly cell contact dependent. Collectively, our study provides human data to suggest that mucosal induction of tolerance against dietary antigens is associated with the development of CD4(+)CD25(+) Treg cells. 相似文献
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目的:初步探讨再生障碍性贫血(AA)患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)的表达及临床意义;探讨临床使用异体骨髓间充质干细胞(MSC)治疗对CD4+CD25+Foxp3+Treg表达的影响。方法:(1)流式细胞仪检测13例重型再生障碍性贫血(SAA),17例慢性再生障碍性贫血(CAA)及10例健康对照者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg表达;(2)检测7例AA患者MSC治疗前后外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg表达。结果:(1)AA患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg表达明显低于健康对照者(P<0.01);(2)SAA患者CD4+CD25+Foxp3+Treg表达较CAA者低(P<0.05);(3)MSC治疗后AA患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg表达升高(P<0.05)。结论:(1)AA患者存在外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg表达减低,其表达异常可能参与AA的发病;(2)CD4+CD25+Foxp3+Treg表达在SAA患者更低,提示其表达水平可能可以作为判断AA病情轻重的指标;(3)MSC治疗可上调AA患者CD4+CD25+Foxp3+Treg表达,为MSC纠正AA患者的免疫异常提供了临床依据。 相似文献
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目的 探讨脓毒症患者外周血中CD4+ CD25+调节性T细胞(Treg)对脓毒症患者预后预测的价值.方法 收集上海长征医院2013年12月至2014年4月入院的28例确诊脓毒症患者,根据出院结局分为存活组和死亡组,分别于入院的第1天及第7天采集外周血,流式细胞术检测CD4+ CD25+ Treg细胞比例,以及检测血常规、CRP、胆红素、PCT、凝血功能等,并统计APACHEⅡ、SOFA评分,分析各指标第1天及第7天值以及差值对脓毒症预后的预测准确性.结果 入组28例病例,年龄(60.36 ± 15.03)岁,APACHEⅡ评分(16.68 ±7.00),SOFA评分(7.18±3.78);伴有严重创伤患者12例(42.9%),感染性休克患者10例(35.7%),死亡9例(32.2%).存活组与死亡组第1天、第7天CD4+ CD25+ Treg细胞比例中位数(四分位数)分别为:2.10% (0.80,3.10)%vs.1.80% (1.15,3.65)% (Z=-0.148,P=0.883); 0.90%(0.30,2.80)%vs.5.70% (2.60,8.30)%(Z=-2.905,P=0.004).结论 动态监测CD4+CD25+ Treg细胞能够准确预测脓毒症患者预后,具有较好的临床应用前景. 相似文献
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目的我们通过体外诱导、扩增并分选出CD4+CD25+T-reg回输入受体大鼠,并协同低剂量西罗莫司去诱导大鼠肝移植免疫耐受,研究探讨CD4+CD25+T-reg细胞亚群在移植免疫耐受过程中扮演的角色。方法将实验动物分为急性排斥组(DA→LEW)、免疫耐受组(LEW→DA)、低剂量西罗莫司(0.1 mg·kg-1·d-1)和CD4+CD25+T-reg协同作用组(实验组)。每组8只实验动物。各组肝移植大鼠的存活率比较,应用HE染色法观察移植肝术后7 d组织病理学变化,检测CD4+CD25+Foxp3+T-reg细胞亚群在各组大鼠移植肝脏、外周血总单核细胞数中所占的百分比。RT-PCR检测术后7 d移植肝脏Foxp3 m RNA的表达水平。用ELISA检测血浆中细胞因子IL-10、TGF-β的水平。结果实验组对比排斥组,能够长期存活,获得免疫耐受(P<0.05)。实验组移植肝脏中CD4+CD25+Foxp3+T-reg细胞亚群所占的比例明显高于排斥组(P<0.001),且在移植肝脏中,实验组Foxp3 m RNA表达含量明显增加(P<0.001)。实验组血浆中细胞因子IL-10、TGF-β的表达水平高于排斥组(P<0.001)。结论我们通过流式细胞分选技术将体外扩增诱导成熟的受体大鼠CD4+CD25+T-reg细胞分离收集,然后回输受体协同低剂量的西罗莫司能够成功地诱导了长期肝移植免疫耐受。从而为临床应用CD4+CD25+T-reg细胞抑制免疫排斥反应,诱导移植免疫耐受提供了一条新思路和理论实验依据。 相似文献
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目的探讨CD4^+CD25^+调节性T细胞在哮喘患者外周血的变化及意义。方法采用流式细胞术检测60例哮喘患者和40例健康对照者外周血中CD4^+CD25^+调节性T细胞的表达量,同时测定20例急性发作期哮喘患者的肺功能。结果哮喘患者外周血CD4^+CD25^+调节性T细胞占CD4^+T细胞的百分比明显低于健康对照组,差异有统计学意义(P〈0.01);急性发作期哮喘患者外周血CD4^+CD25^+调节性T细胞明显低于非急性发作期患者,差异也有统计学意义(P〈0.01)。结论CD4^+CD25^+调节性T细胞参与了哮喘的发生。 相似文献
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目的利用不同种类树突状细胞(dendritic cells,DC)体外扩增获得表型和功能稳定的CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)。方法免疫磁珠法(MACS)分离Balb/c小鼠CD4+CD25+调节性T细胞,利用与调节性T细胞同基因或异基因成熟DC、未成熟DC和调节性DC刺激其扩增,流式细胞术测定其纯度和表型。以CD4+CD25-T细胞作为反应细胞,验证扩增前后Treg细胞的免疫抑制功能。结果MACS分离的CD4+CD25+调节性T细胞纯度达到(95.38±1.82)%,同基因和异基因DC都能有效刺激Treg细胞体外扩增,其中同基因成熟DC扩增效果最为明显。而且同基因成熟DC扩增后CD4+CD25+调节性T细胞纯度达到(94.16±1.88)%,而且高表达Foxp3分子。当CD4+CD25+调节性T细胞与效应T细胞比例为1∶1时,能够有效的抑制效应T细胞的增殖,而且,同基因成熟DC扩增的CD4+CD25+调节性T细胞的抑制效果比新分离的Treg效果更好。结论同基因成熟DC能够体外扩增表型和功能稳定的Treg细胞。 相似文献
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目的分析原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者出现的抗线粒体抗体(AMA)和抗核抗体(ANA)及其特征。方法对58例确诊的PBC患者采用间接免疫荧光法(IFA)检测AMA、ANA,进一步采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫条带法分别检测AMA和ANA的亚型抗体。结果58例PBC患者AMA抗体均为阳性,89.2%的患者AMA的滴度≥1∶320;AMA亚型M2、M4和M9的检出率分别为100%、75.9%和24.1%。M2≥200 RU/L的患者丙氨酚转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转氨酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TB il)明显高于M2<200 RU/L的患者。M4阳性组ALT、AST明显高于M4阴性组。25.9%的患者出现了ANA,ANA的主要荧光模式为着丝点型11例、核膜型9例、核点型5例,集中出现在AMA高滴度以及M2≥200RU/L的患者。结论PBC患者一般均有高水平的AMA和M2,且滴度和病情相关。M4、M9在PBC有一定的检出率。多数PBC患者还伴有高滴度的ANA并有主要的荧光模式。 相似文献
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卵巢癌患者外周血CD4~+ CD25~+调节性T细胞的检测及其临床意义 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨卵巢癌患者CD4+CD25+调节性T细胞的比例变化及其可能的机制。方法利用流式细胞仪检测20例卵巢癌患者外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocytes,PBLs)、肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocytes,TILs)及肿瘤相关淋巴细胞(tumor associated lymphocytes,TALs)中CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Tcells,Tregs)所占的比例。10例健康人外周血PBLs中Tregs所占的比例。同时检测卵巢癌患者CD4+外周血淋巴细胞中CD69+细胞的比例。健康人PBLs在含有卵巢癌细胞株SKOV3培养上清的RPMI1640培养液(有或没有血清植物血凝素)中培养72小时后,检测Tregs所占的比例。结果卵巢癌患者外周血淋巴细胞中CD4+CD25+调节性T细胞所占比例与健康人相比明显增加.卵巢癌患者外周血肿瘤浸润淋巴细胞中CD4+CD25+调节性T细胞所占比例高于在外周血淋巴细胞和肿瘤相关淋巴细胞中的比例,但是没有统计学意义。卵巢癌患者CD4+外周血淋巴细胞中无CD69表达。结论卵巢癌患者外周血淋巴细胞中、肿瘤浸润淋巴细胞及肿瘤相关淋巴细胞中CD4+CD25+调节性T细胞所占的比例增加,这可能与卵巢癌细胞分泌的可溶性分子上调有关。 相似文献