上皮性卵巢癌组织uPA、uPAR及PAI-1表达及意义

目的 探讨尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)、uPA受体(uPAR)及其抑制剂(PAI-1)在上皮性卵巢癌组织中的表达及意义.方法 采用免疫组织化学PV-9000法检测60例上皮性卵巢癌、30例良性卵巢肿瘤及30例正常卵巢组织中uPA、uPAR及PAI-1蛋白表达,并结合临床病理因素进行分析.结果 uPA、uPAR、PAI-1在上皮性卵巢癌中的表达率(75.0%、65.0%、66.7%)明显高于良性肿瘤(40.0%、33.3%、30.0%)及正常组织(30.0%、26.7%、33.3%),差异均有显著性(χ2=11.779～19.510,P<0.05),而良性肿瘤与正常组织比较无明显差异.uPA、uPAR、PAI-1在上皮性卵巢癌组织表达与手术病理分期、组织分级和有无淋巴结转移有关(χ2=8.242～36.906,P<0.05).结论 uPA、uPAR、PAI-1在上皮性卵巢癌组织高表达,可能与卵巢癌发生、发展及浸润有关.     

子宫内膜癌组织uPA 和PAI-1 mRNA表达及其意义

目的 探讨纤溶酶原激活因子(uPA)及纤溶酶原抑制因子-1(PAI-1) mRNA在子宫内膜癌组织表达及意义.方法 采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测35例子宫内膜癌、18例子宫内膜增生和16例正常子宫内膜组织中uPA及PAI-1 mRNA的表达情况.结果 uPA 、PAI-1 mRNA在子宫内膜癌组织中表达水平均显著高于子宫内膜增生组织及正常子宫内膜组织(F=55.22、51.78,q=11.696～12.218,P<0.01);而子宫内膜增生组织中uPA 、PAI-1 mRNA的表达与正常子宫内膜组织比较,差异无统计学意义(q=0.215、0.441,P>0.05).子宫内膜癌组织中uPA、PAI-1 mRNA的表达水平随手术病理分期(F=17.28、21.88,q=9.347～84.716,P<0.01)及组织学分级的增高(F=31.22、27.95,q=6.960～10.931,P<0. 01)、肌层浸润深度的增加(t=2.885、3.316,P<0.01)及淋巴结的转移显著增高(t=5.177、3.954,P<0.01),与病人病理类型无关(t=0.060、0.115,P>0.05).结论 子宫内膜癌组织uPA及PAI-1 mRNA的高表达与子宫内膜癌发生、发展及浸润转移有一定关系,并且与疾病进展、预后有关.     

胰腺癌组织中Smad7、uPA及PAI-1的表达及临床意义

目的: 研究Smad7、uPA及PAI-1在胰腺癌组织及细胞中的表达水平,以阐明Smad7对胰腺癌侵袭和转移的作用机制.方法: 构建胰腺癌组织芯片,采用免疫组织化学方法检测Smad7、uPA及PAI-1蛋白表达情况,并与临床病理资料作对照分析.结果: 88例胰腺癌组织标本中Smad7、uPA和PAI-1阳性率分别为72.7%,76.1%和71.6%,明显高于正常胰腺组织中的表达水平(P<0.01).Smad7、uPA和PAI-1蛋白的阳性表达与胰腺癌患者的性别、年龄、肿瘤的位置及大小、组织病理学分级均无关(P>0.05),而与胰腺癌的临床TNM分期及淋巴结转移密切相关(P<0.01).Smad7、uPA和PAI-1在胰腺癌组织中的蛋白表达均呈正相关(P<0.01).结论: Smad7、uPA及PAI-1在胰腺癌中共同高表达,Smad7可能通过增强胰腺癌组织内uPA及PAI-1的生成而起到促进胰腺癌进展的作用.     

RT-PCR半定量法检测人脐静脉内皮细胞t-PA和PAI-1 mRNA表达

目的 建立一种敏感的检测组织型纤溶酶原激活物（ｔ－ＰＡ）及其抑制剂（ＰＡＩ－１）基因表达的方法。方法 用异硫氰酶胍一步法提取细胞总ＲＮＡ。用单管ＲＴ＿ＰＣＲ法逆转录－扩增ｔ－ＰＡ、ＰＡＩ－１和内参照三磷酸甘油醛脱氢酶（ＧＡＰＤＨ）ｍＲＮＡ，扩增产物经电泳分离后，用凝胶图像分析仪照相和扫描分析，测定各条带分子量和光密度值。结果 ＰＣＲ产物均与预期长度相吻合，且ＰＣＲ产一与扩增初始模板量之间存在良好的     

骨关节炎滑膜组织中uPA、uPAR及PAI-1mRNA的表达及其临床意义

目的:检测尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA) 、其受体(uPAR)及其抑制剂(PAI-1)mRNA在骨关节炎(OA)滑膜中的表达,探讨uPA、uPAR及PAI-1 基因在OA 细胞外基质降解中的作用. 方法:采用RT-PCR检测了36例骨关节炎(OA) 和21 例正常滑膜组织中uPA、uPAR及PAI-1 mRNA 的表达情况.结果:实验组总共36例,经RT-PCR实验,uPA阳性例数21例,uPAR阳性例数17例,PAI-1阳性例数15例,对照组创伤患者总共21例,uPA、uPAR及PAI-1阳性例数均为2例;再将实验组按年龄及软骨破坏程度分组,三种RNA表达除按年龄分组外差异均有统计学意义(P<0.05).结论:OA滑膜组织存在高水平uPA、uPAR及PAI-1mRNA 的表达,提示在OA的发生发展过程中, uPA、uPAR及PAI-1 基因起着重要作用,为骨关节炎的治疗提供了一个崭新的思路.     

卵巢恶性肿瘤组织中uPA及其PAI-1表达的临床意义

目的：探讨卵巢恶性肿瘤组织中尿型纤溶酶原激活因子（uPA）及其1型抑制因子（PAI-1）表达的临床意义。方法：采用免疫组化SABC法检测uPA、PAI-1在40例卵巢恶性肿瘤、20例卵巢良性肿瘤及20例正常卵巢组织中的表达情况并分析其与临床病理因素及预后的相关性。结果：①uPA、PAI-1在卵巢恶性肿瘤组织中的阳性表达率明显高于卵巢良性肿瘤组织和正常组织（P〈0.05）。②在临床分期Ⅲ～Ⅳ期者其卵巢恶性肿瘤组织中uPA、PAI-1阳性表达率明显高于Ⅰ～Ⅱ期（P〈0.05）。③uPA、PAI-1表达阳性者,平均生存时间分别均为29.32、31.78个月,明显低于uPA、PAI-1表达阴性者的49.0、52.23个月（P〈0.05）。Cox模型分析显示PAI-1表达为影响卵巢癌预后的独立因子。结论：uPA、PAI-1表达与卵巢恶性肿瘤的发生及侵袭、转移相关,并与卵巢恶性肿瘤的不良预后关系密切。     

uPA、MUC1和p53在大肠癌中的表达及意义

目的探讨尿纤溶酶原激酶(uPA)、黏蛋白1(MUC1)和p53蛋白在大肠癌组织中的表达和临床意义。方法采用SP法免疫组织化学检测78例大肠癌、30例大肠腺瘤和20例正常大肠组织中uPA、MUC1和p53蛋白的表达。结果 (1)大肠癌组织中uPA、MUC1蛋白表达定位于细胞质,p53蛋白定位于细胞核,三者的表达均明显高于癌旁正常肠腺上皮和大肠腺瘤(P<0.05)。(2)三者的表达与大肠癌组织分化程度、淋巴结转移及临床病理分期有关(P<0.05);三者之间表达呈正相关(P<0.05)。结论 uPA、MUC1和p53蛋白在大肠癌呈高表达,与大肠癌的进展密切相关。     

Smad7基因转染人胰腺癌细胞后uPA及PAI-1表达的变化

目的: 通过对人胰腺癌细胞BxPC3转染Smad7基因,观察转染阳性细胞克隆尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)及纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)表达的改变,进一步阐明Smad7在胰腺癌侵袭和转移中的作用.方法: 经脂质体介导将含有Smad7重组表达质粒转染BxPC3细胞,用G418筛选及RT-PCR、蛋白质印迹法鉴定;又分别采用RT-PCR与蛋白质印迹法检测转染阳性细胞克隆uPA及PAI-1的表达.结果: 成功建立高表达Smad7的阳性BxPC3克隆(F-16、F-21),并证实其uPA、PAI-1 mRNA及蛋白表达均显著增加.结论: Smad7可能通过增强胰腺癌组织内uPA及PAI-1的生成而起到促进胰腺癌进展的作用.     

uPA/PAI-1在乳腺癌中的表达及其临床意义的研究进展

 恶性肿瘤的侵袭及转移需要细胞外基质（extracellular matrix, ECM)的降解,涉及到很多蛋白水解酶类,其中包括尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase type plasminogen,uPA)系统。uPA系统不仅促进肿瘤的侵袭及转移,还参与癌细胞增殖与肿瘤血管形成。目前,一些研究已证明uPA系统对乳腺癌患者有重要的临床意义,特别是对腋窝淋巴结阴性的患者。本文对uPA/纤溶酶原激活物抑制因子 1(plasminogen inhibitor 1,PAI 1)在乳腺癌中的表达及其临床意义的研究进展作一综述。     

上皮性卵巢癌病人血清uPA、uPAR和CA125含量检测及其临床意义

目的 探讨上皮性卵巢癌病人血清中尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)及其受体(uPAR)和糖蛋白抗原125 (CA125)含量的变化及其临床意义.方法 采集 44例上皮性卵巢癌(卵巢癌组)、35例卵巢良性上皮性肿瘤(良性肿瘤组)和30例正常卵巢(对照组)病人血清标本,用ELISA方法检测血清中uPA、uPAR 含量,化学发光法检测血清CA125含量.结果 卵巢癌组uPA、uPAR和CA125的分泌水平较良性肿瘤组及对照组明显升高,差异有显著性(F=9.49～4 824.97,q=5.183～119.350,P<0.01);良性肿瘤组与对照组各指标比较差异无统计学意义(P>0.05).卵巢癌组uPA、uPAR和CA125的分泌水平随着手术病理分期的增高及组织分化程度的降低而增高,差异有显著性(F=15.00～649.46,q=4.467～56.536,P<0.01).卵巢癌组有淋巴结和(或)大网膜转移者中uPA和uPAR含量较无转移者明显增高,差异有极显著性(t=8.445～18.608,P<0.01).卵巢癌病人血清uPA、uPAR和CA125联合检测的阳性率和敏感度较血清CA125单一检测升高,差异有显著意义(χ2=3.123,P<0.05).结论 联合检测血清中uPA、uPAR和CA125的含量,对判断卵巢癌的发生发展、浸润和转移有重要意义.     

上皮性卵巢癌组织RRM1和RRM2表达及其意义

目的 探讨核苷酸还原酶亚单位M1(RRM1)及M2(RRM2)在上皮性卵巢癌组织表达及意义.方法 采用免疫组化PV-6000二步法,分别检测15例正常卵巢组织、15例良性卵巢肿瘤组织和46例上皮性卵巢癌组织中RRM1和RRM2蛋白的表达,并分析RRM1和RRM2表达之间的关系.结果 上皮性卵巢癌组织RRM1蛋白表达阳性率为58.70%,高于正常卵巢组织(0)和良性卵巢肿瘤组织(26.67%),差异均有显著意义(x2=15.80、4.64,P＜0.05).上皮性卵巢癌组织RRM2蛋白表达阳性率为67.39%,高于正常卵巢组织(0)和良性卵巢肿瘤组织(20.00%),差异均有显著性(x2=15.80、10.30,P＜0.05).RRM1蛋白在上皮性卵巢癌低分化组表达阳性率(66.67%)高于高中分化组(30.00%),RRM2蛋白在FIGOⅢ～Ⅳ期上皮性卵巢癌表达阳性率(77.42%)高于Ⅰ～Ⅱ期(46.67%),差异均有显著性(x2=4.340、4.350,P＜0.05).上皮性卵巢癌组织RRM1和RRM2表达无相关性(r=0.264,P＞0.05).结论 RRM1和RRM2在上皮性卵巢癌组织表达上调,有望成为新的卵巢肿瘤分子标记物,两者在上皮性卵巢癌的发生发展过程中可能起到不同的作用.     

p27蛋白、细胞周期素E和增殖细胞核抗原在上皮性卵巢肿瘤的表达及其临床意义

目的探讨p27、细胞周期素E(CyclinE)和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)在上皮性卵巢肿瘤组织中的表达及其与上皮性卵巢癌的临床分期、分化程度和病理类型的关系。方法应用流式细胞技术检测64例上皮性卵巢肿瘤组织中p27、CyclinE和PCNA的表达,并进行对比分析。结果p27在卵巢癌组织中呈低表达(P<0.01),而CyclinE和PCNA在卵巢癌组织中呈高表达(P<0.01,P<0.05);在Ⅲ~Ⅳ期和低分化患者中p27表达下降,而CyclinE和PCNA表达升高。p27与CyclinE和PCNA表达呈负相关(r=-0.532,P<0.01,r=-0.564,P<0.01),CyclinE和PCNA表达呈正相关(r=0.556,P<0.05)。结论p27、CyclinE和PCNA的表达与上皮性卵巢肿瘤的临床分期和病理分级有关,而与病理类型无关。     

胰腺癌组织Syndecan-1与E-cadherin表达及意义

目的探讨Syndecan-1和E-cadherin在胰腺癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学PV6000法检测47例胰腺癌组织和10例正常胰腺组织中Syndecan-1及E-cadherin的表达。结果 10例正常胰腺组织中Syndecan-1均呈阴性表达,而E-cadherin均为阳性表达。胰腺癌组织中Syndecan-1和E-cadherin的表达阳性率分别为44.7%和46.8%,二者均与胰腺癌的分化程度、有无淋巴结转移和临床分期有关(χ2=6.01~9.75,P<0.05),与病人性别、年龄、肿瘤大小和1年生存期无关(χ2=0.28~3.63,P>0.05)。结论 Syndecan-1和E-cadherin在胰腺癌的发生发展中起重要作用,其表达水平可作为判断胰腺癌生物学行为的参考指标。     

前列腺癌组织中VIP与VEGF的表达及意义

目的了解血管活性肠肽(VIP)和血管内皮生长因子(VEGF)在前列腺增生及前列腺癌组织中的表达,探讨VIP在前列腺癌中的作用及其机制。方法应用免疫组织化学SP法,检测20例前列腺增生和39例前列腺癌组织中VIP和VEGF的表达。结果前列腺癌组织中VIP和VEGF表达高于前列腺增生组织,差异有显著性(χ2=8.255、11.520,P<0.01)。不同分化程度、不同临床分期前列腺癌组织中VIP和VEGF的表达差异有差异性(χ2=6.184~8.143,P<0.05),且VIP和VEGF表达与前列腺癌病理学分级及临床分期相关(r=0.368~0.418,P<0.01)。VIP和VEGF在前列腺癌中的表达具有相关性(χ2=9.920,r=0.498,P<0.01)。结论 VIP在前列腺癌的发生、发展过程中起重要作用,这种作用可能是通过诱发血管生成来实现的。     

卵巢癌组织PTTG蛋白表达及其与bFGF和微血管密度的关系

①目的 探讨垂体肿瘤转化基因（PTTG）在卵巢癌组织中的表达及其与碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）蛋白表达和微血管密度（MVD）的关系。②方法 应用免疫组化SP法分别检测63例卵巢癌、23例卵巢良性上皮性肿瘤和12例正常卵巢组织中PTTG和bFGF蛋白的表达,并用CD34免疫组化染色计数肿瘤血管数量。③结果 卵巢癌组织PTTG蛋白表达率为66.7％,显著高于卵巢良性上皮性肿瘤及正常卵巢组织的表达率（X^2=19.957,P〈0.01;P=0.035）。手术病理分期Ⅲ、Ⅳ期组PTTG蛋白表达率显著高于Ⅰ、Ⅱ期组（X^2=4.823,P〈0.05）,淋巴结转移组PTTG蛋白表达率显著高于无淋巴结转移组（X^2=5.799,P〈0.05）。卵巢癌组织中PTTG蛋白表达与bFGF蛋白表达及MVD呈明显正相关（X^2=6.758,t=2.008,P〈0.05）。④结论 卵巢癌组织中PTTG蛋白高表达,可能通过激活bFGF蛋白的表达促进微血管形成而在卵巢癌的发生发展中起重要作用。     

p53和nm23在大肠癌中的表达及其生物学意义

①目的探讨大肠癌组织中ｐ５３及ｎｍ２３的表达与浸润转移的关系。②方法应用免疫组织化学ＬＳＡＢ法检测７５例大肠癌中ｐ５３及ｎｍ２３的表达。③结果大肠癌组织中ｐ５３，ｎｍ２３的阳性率分别为５３．３％和６５．３％．ｐ５３过表达和ｎｍ２３低表达均与大肠癌的浸润深度及淋巴结转移有关。ｐ５３在低分化癌中的表达明显高于高分化癌（χ２＝１０．０８，Ｐ＜０．０１），而ｎｍ２３表达与大肠癌分化程度无关（χ２＝３．３９，Ｐ＞０．０５）。④结论ｐ５３高表达和ｎｍ２３低表达在大肠癌的浸润转移中起重要作用，大肠癌淋巴结转移可能与多基因异常有关     

Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂cDNA表达质粒的构建及其在哺乳动物细胞中的表达

建立Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂（ＰＡⅠ－１）ｃＤＮＡ哺乳动物细胞表达体系。用人工合成的６个寡核苷酸连接成编码ＰＡⅠ－１Ｎ－端１０个氨基酸和２３个氨基酸的信号肽顺序；将构成的完整ＰＡⅠ－１ｃＤＮＡ插入真核表达质粒ｐＳＶ２ｄｈｆｒ中，获得真核表达质粒ｐＺＹＳ－１；将ｐＭＡ２１２中的ｈＭＴ－ⅡＡ的起动子再插入ｐＺＹＳ－１，使ＰＡⅠ－１ｃＤＮＡ受ＳＶ４０和ｈＭＴ－ⅡＡ双启动子控制，得ｐＺＹＳ－２。２个表达质粒分别在ＣＯＳ－７细胞中进行表达。结果：获得两个真核表达质粒，在ＣＯＳ－７细胞中得到表达，在培养液中的ＰＡⅠ－１活性和抗原含量分别为２３４．７ＩＵ／ｍｌ和３０μｇ／Ｌ。结论：ｐＺＹＳ－１和ｐＺＹＳ－２两株ＰＡⅠ－１ｃＤＮＡ真核表达质粒在ＣＯＳ－７细胞中能有效表达和分泌。     

苦参碱对卵巢癌细胞生长及其尿型纤溶酶原激活因子和抑制因子表达的影响

目的:探讨苦参碱对卵巢癌细胞生长及其尿型纤溶酶原激活因子(uPA)和1型抑制因子(PAI-1)表达的影响.方法:采用四唑盐(MTT)比色法测定不同浓度苦参碱对卵巢上皮癌SKOV3细胞的抑制作用,采用HE染色法及免疫细胞化学法观察在不同浓度苦参碱作用前后SKOV3细胞形态学改变及其uPA、PAI-1的表达情况.采用细胞计数法观察在不同浓度苦参碱作用下SKOV3细胞的生长曲线变化,采用软琼脂集落观察在不同浓度苦参碱作用下对SKOV3细胞集落形成的影响.结果:①苦参碱对卵巢癌SKOV3细胞有明显的抑制作用.随苦参碱浓度升高,其抑制作用增强,两者呈正相关关系(r=0.965,P＜0.05);②苦参碱对SKOV3细胞的uPA、PAI-1表达有下调作用;③苦参碱对卵巢癌SKOV3细胞的生长曲线及集落形成均有明显的抑制作用.结论:苦参碱对体外培养的卵巢癌SKOV3细胞具有较强抑制作用并具有杀伤肿瘤干细胞的能力,苦参碱的抗肿瘤机制可能通过细胞毒作用、诱导细胞凋亡等多种机制参与,并可能与下调uPA、PAI-1蛋白的表达有关.