尿激酶型纤溶酶原激活剂及其受体、抑制剂在卵巢腺癌中的表达及临床意义

目的：探讨尿激酶型纤溶酶原激活剂（uPA)及其受体（uPAR)和纤溶酶原激活剂抑制剂（PAI－1）在卵巢癌发生发展中的可能作用和临床意义。方法：采用免疫组化SABC法检测uPA,uPAR,PAI-1在40例卵巢腺癌,10例卵巢良性肿瘤及10例正常卵巢组织中的表达。结果：卵巢腺癌组织中uPA,uPAR和PAI－1的阳性表达率明显高于卵巢良性肿瘤组织和正常卵巢组织（P＜0．05）,在卵巢腺癌组织中uPA,uPAR同时阳性19例,uPA,PAI-1同时阳性14例,三者同时阳性表达13例,三者间存在着相关性（P＜0．05）,uPA,uPAR,PAI-1在不同分化程度和不同临床分期卵巢腺癌中的阳性表达率无显著性差异（P均＞0．05）,结论：卵巢腺癌中uPA,uPAR,PAI-1的阳性表达明显升高,三者的阳性表达间存在着相关性。三者的阳性表达率与卵巢腺癌的分化程度及临床分期无关。     

上皮性卵巢癌组织uPA、uPAR及PAI-1表达及意义

目的 探讨尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)、uPA受体(uPAR)及其抑制剂(PAI-1)在上皮性卵巢癌组织中的表达及意义.方法 采用免疫组织化学PV-9000法检测60例上皮性卵巢癌、30例良性卵巢肿瘤及30例正常卵巢组织中uPA、uPAR及PAI-1蛋白表达,并结合临床病理因素进行分析.结果 uPA、uPAR、PAI-1在上皮性卵巢癌中的表达率(75.0%、65.0%、66.7%)明显高于良性肿瘤(40.0%、33.3%、30.0%)及正常组织(30.0%、26.7%、33.3%),差异均有显著性(χ2=11.779～19.510,P<0.05),而良性肿瘤与正常组织比较无明显差异.uPA、uPAR、PAI-1在上皮性卵巢癌组织表达与手术病理分期、组织分级和有无淋巴结转移有关(χ2=8.242～36.906,P<0.05).结论 uPA、uPAR、PAI-1在上皮性卵巢癌组织高表达,可能与卵巢癌发生、发展及浸润有关.     

尿激酶型纤溶酶原激活剂系统在子宫内膜腺癌中的表达

目的：研究尿激酶型纤溶酶原激活剂（uPA),uPA受体（uPAR）和纤溶酶原激活剂抑制剂（PAI－1）在子宫内膜腺癌中的表达,探讨肿瘤侵袭转移的机制。方法：利用免疫组化方法测定正常子宫内膜,子宫内膜癌癌前病变,子宫内膜腺癌中uPA、uPAR,PAI-1的表达差异,结果：子宫内膜腺癌组uPA,uPAP,API-1的表达明显高于正常子宫内膜及癌前病变组,其定位也不同,而正常子宫内膜与癌前病变的表达无显著差异。结论：uPA,uPAR,PAI-1的表达可以作为诊断和判断子宫内膜腺癌预后的一个新的依据;uPA,uPAR,PAI-1可能与子宫内膜腺癌的侵袭转移有关。     

尿激酶型纤溶酶原激活剂mRNA在卵巢癌组织中的表达及其意义

目的研究尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)mRNA在卵巢癌组织中的表达及其意义.方法应用荧光定量RT-PCR方法,分别检测23例卵巢癌组织中uPA mRNA的表达,与卵巢良性肿瘤相比较.同时,分析uPA mRNA的表达与卵巢癌的临床分期之间的关系.结果 23例卵巢癌组织中uPA mRNA的表达阳性率为60.9%,卵巢良性肿瘤uPA mRNA表达阳性率为30.0%,且uPA mRNA表达卵巢癌的临床分期呈正相关.结论 uPA mRNA表达可作为判断卵巢癌恶性程度及预后的指标之一.     

子宫内膜癌组织uPA和PAI-1 mRNA表达及其意义

目的 探讨纤溶酶原激活因子(uPA)及纤溶酶原抑制因子-1(PAI-1) mRNA在子宫内膜癌组织表达及意义.方法 采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测35例子宫内膜癌、18例子宫内膜增生和16例正常子宫内膜组织中uPA及PAI-1 mRNA的表达情况.结果 uPA 、PAI-1 mRNA在子宫内膜癌组织中表达水平均显著高于子宫内膜增生组织及正常子宫内膜组织(F=55.22、51.78,q=11.696～12.218,P<0.01);而子宫内膜增生组织中uPA 、PAI-1 mRNA的表达与正常子宫内膜组织比较,差异无统计学意义(q=0.215、0.441,P>0.05).子宫内膜癌组织中uPA、PAI-1 mRNA的表达水平随手术病理分期(F=17.28、21.88,q=9.347～84.716,P<0.01)及组织学分级的增高(F=31.22、27.95,q=6.960～10.931,P<0. 01)、肌层浸润深度的增加(t=2.885、3.316,P<0.01)及淋巴结的转移显著增高(t=5.177、3.954,P<0.01),与病人病理类型无关(t=0.060、0.115,P>0.05).结论 子宫内膜癌组织uPA及PAI-1 mRNA的高表达与子宫内膜癌发生、发展及浸润转移有一定关系,并且与疾病进展、预后有关.     

卵巢恶性肿瘤组织中uPA及其PAI-1表达的临床意义

目的：探讨卵巢恶性肿瘤组织中尿型纤溶酶原激活因子（uPA）及其1型抑制因子（PAI-1）表达的临床意义。方法：采用免疫组化SABC法检测uPA、PAI-1在40例卵巢恶性肿瘤、20例卵巢良性肿瘤及20例正常卵巢组织中的表达情况并分析其与临床病理因素及预后的相关性。结果：①uPA、PAI-1在卵巢恶性肿瘤组织中的阳性表达率明显高于卵巢良性肿瘤组织和正常组织（P〈0.05）。②在临床分期Ⅲ～Ⅳ期者其卵巢恶性肿瘤组织中uPA、PAI-1阳性表达率明显高于Ⅰ～Ⅱ期（P〈0.05）。③uPA、PAI-1表达阳性者,平均生存时间分别均为29.32、31.78个月,明显低于uPA、PAI-1表达阴性者的49.0、52.23个月（P〈0.05）。Cox模型分析显示PAI-1表达为影响卵巢癌预后的独立因子。结论：uPA、PAI-1表达与卵巢恶性肿瘤的发生及侵袭、转移相关,并与卵巢恶性肿瘤的不良预后关系密切。     

Expression and Significance of Plasminogen Activator Inhibitor in Osteoarthritis Synovial Membrane

目的探讨两种纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)在骨关节炎的发生发展中的意义。方法采用免疫组化方法检测滑膜组织中尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA),组织型纤溶酶原激活物(tPA),PAI-1,PAI-2的表达。结果骨关节炎滑膜中PAI-1,PAI-2的阳性表达比例高于正常滑膜(P<0.05),骨关节炎滑膜中PAI-1与uPA、tPA蛋白表达阳性细胞百分比呈直线正相关关系。结论 PAI可能与骨关节炎软骨退变表现为长期慢性过程有关。     

探讨肝细胞生长因子和尿激酶型纤溶酶原激活剂在卵巢癌中的表达及意义

目的探讨肝细胞生长因子（HGF）和尿激酶型纤溶酶原激活剂（uPA）在卵巢癌组织中的表达及其与卵巢癌生物学行为之间的关系。方法应用免疫组化SP法检测HGF和uPA在正常卵巢组织、良性肿瘤和卵巢癌中的表达。结果（1）HGF和uPA在卵巢癌中的表达水平显著高于正常卵巢组织和良性肿瘤（P〈0．05）,良性肿瘤和正常卵巢组织表达水平差异无统计学意义（P〉0．05）。②HGF和uPA的表达随卵巢癌的临床分期、组织分级（恶性程度）的增加,表达水平均相应增加（P〈0．05）;淋巴结转移组HGF和uPA的表达水平均显著高于无淋巴结转移组（P〈0．05）。结论①HGF高表达可能与卵巢癌细胞的恶性增殖及浸润转移有关。②uPA的高表达可能与卵巢癌的浸润转移有关     

uPA、uPAR在上皮性卵巢癌的表达及与MMPs相关性研究

目的:探讨尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)及其受体(uPAR)在上皮性卵巢癌组织中的表达意义,研究uPA、uPAR与MMPs在肿瘤侵袭、转移中的相互关系。方法:采用免疫组化S-P法检测100例上皮性卵巢癌原发灶、30例相应的转移灶和20例正常卵巢组织中uPA、uPAR的表达;采用免疫荧光双染法检测uPA、uPAR与MMP-2、MMP-9在上皮性卵巢癌组织中的联合表达。结果:①uPA、uPAR在大多数上皮性卵巢癌原发灶及转移灶组织中均高表达,而在正常卵巢组织中不表达。②uPA和uPAR的高表达与肿瘤分化程度、临床分期、腹水及肿瘤复发显著相关(P<0.01),而与组织学类型及术后残留肿瘤无关(P>0.05)。③uPA、uPAR与MMPs在上皮性卵巢癌原发灶及转移灶组织中均联合表达。结论:uPA和uPAR在上皮性卵巢癌的发展和转移过程中起重要作用;uPA、uPAR与MMPs的相互作用可以促进肿瘤的生长与侵袭;uPA、uPAR可成为晚期、复发卵巢癌治疗的靶向目标。     

尿激酶型纤溶酶原激活因子在上皮性卵巢癌中的表达及其与临床预后的关系

目的 探讨尿激酶型纤溶酶原激活因子(urokinase-type plasminogen activator,uPA)在不同类型的上皮性卵巢肿瘤中的表达及其与临床预后的关系. 方法 应用SP法,对85例上皮性卵巢癌、16例上皮性卵巢交界性肿瘤、39例上皮性卵巢良性肿瘤、24例正常卵巢组织的手术标本进行uPA表达的检测,并对uPA的表达与肿瘤分化程度、临床分期、有无淋巴转移、有无大网膜转移以及生存期的关系进行统计分析. 结果 uPA在上皮性卵巢癌中的阳性表达率为75.3%,明显高于上皮性卵巢交界性肿瘤(43.8%)、上皮性卵巢良性肿瘤(35.9%)及卵巢正常组织(12.5%).高、中分化的上皮性卵巢癌中uPA的表达率为45.5%,明显低于低分化的上皮性卵巢癌(84.6%).uPA在Ⅲ-Ⅳ期的上皮性卵巢癌的表达率(85.5%)高于Ⅰ-Ⅱ期的上皮性卵巢癌(26.7%).有淋巴转移、有大网膜转移、生存期＜5年的上皮性卵巢癌中uPA的阳性表达率分别高于无淋巴转移、无大网膜转移、生存期≥5年的上皮性卵巢癌中uPA的阳性表达率,其间存在统计学差异(P＜0.05). 结论 uPA的高表达与上皮性卵巢癌的发生、发展、侵袭、转移以及预后密切相关.     

EXPRESSION AND ROLE OF PLASMINOGEN SYSTEM IN PROCESS OF RESTENOSIS

Objective To study the expression and role of plasminogen system in the process of restenosis. Methods We established a double-injury model of atherosclerotic restenosis in rabbit iliac artery mimicking human arterial restenosis. The time course of tissue plaminogen activator （ tPA ）, urokinase plasminogen activator （ uPA ）, urokinase plasminogen activator receptor （uPAR） and plasminogen activator inhibitor-1 （ PAI-1 ） was investigated by immunohistochemistry. The mRNA expression of uPA and uPAR were detected after vascular procedures by in situ hybridization. Results In uninjured arteries, the weak expression of tPA and PAI-1 was detected in intimal and endothelial cells. The expression of tPA, uPA, uPAR and PAI-1 was significantly induced after double-injury, but after double-injury 14d, the expression of tPA restore to preinjury levels. The expression of uPA and uPAR in intimal was higher than that of media and maintain high levels in intimal within 42d and 56d. Conclusion Whereas t-PA is primarily involved in clot dissolution and play a limited role in the process of restenosis, in plasminogen system, uPA and uPAR play a prominent role in the process of restenosis.     

转染Smad7基因的大鼠肾系膜细胞uPA及PAI-1表达的改变

目的通过对大鼠肾小球系膜细胞(mesangial cell，MsC)转染Smad7基因，观察转染阳性细胞克隆uPA及PAI-1表达的改变，以进一步阐明Smad7阻断组织纤维化过程的作用机制。方法经脂质体介导将含有Smad7重组表达质粒转染大鼠MsC，用G418筛选及PT-PCR、Western blot法鉴定；又分别采用RT-PCR与Western blot法，检测转染阳性细胞克隆uPA及PAI-1表达改变。结果成功建立高表达Smad7的阳性MsC克隆(S-22、S-26)，并证实其uPA mRNA及蛋白表达明显增加，而PAI-1 mRNA及其蛋白的表达显著下降。结论Smad7可能通过增强组织内uPA酶的生成和减少PAI-1的合成而减轻组织纤维化进展。     

实验性肺癌尿激酶型纤溶酶原激活物和抑制物的表达及意义

目的 研究尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase type plasminogen activator,uPA)和抑制物-1(PA inhibitor．PAI-1)在实验性肺癌的发生、发展及侵袭转移过程中的作用。方法 将Lewis肺癌瘤株腹腔注射C57／BL小鼠．于接种后9、17、13天各处死6只．取瘤、肺组织匀浆．低温离心取上清液．采用酶联免疫吸附(enzyme-liked immunosorbent assav．ELISA)法检测血浆和组织中uPA和PAI-1的含量．按环磷酰胺 刺五加组、环磷酰胺组、刺五加组、肿瘤对照组和正常对照组分别进行对比分析。结果 肿瘤组uPA和PAI-1含量高于正常对照组;环磷酰胺一刺五加组血浆、瘤和肺组织中uPA和pAI-1活性低于肿瘤组。结论 检测实验性肺癌uPA和PAI-1含量可能对其侵袭转移、预后等有一定的参考价值。     

uPA和PAI-1基因克隆及真核表达载体的构建及鉴定

目的：克隆人卵巢上皮癌组织uPA和PAI-1基因cDNA全长,构建表达uPA和PAI-1基因的真核表达载体。方法：采用RT-PCR技术从人卵巢上皮癌组织总RNA中逆转录uPA和PAI-1基因的cDNA全长,克隆到pGEM-TEasy Vector上,通过酶切和测序进行鉴定;酶切后与真核表达载体pcDNA3.1/myc-his（-）B连接,酶切及测序再次鉴定;采用脂质体法将重组质粒DNA转染至卵巢癌上皮细胞SKOV3细胞;采用有限稀释法和G418分别加压筛选并培养SKOV3-uPA和SKOV3-PAI-1细胞及对照细胞;Western blot法检测转染前后SKOV3细胞uPA和PAI-1基因的表达。结果：成功扩增出uPA和PAI-1基因的cDNA的全长,并克隆入T载体,DNA测序证实序列正确,通过连接成功构建含正确目的基因的表达载体pcDNA3.1-uPA和pcDNA3.1-PAI-1,Western blot能检测到uPA和PAI-1基因蛋白分别在SKOV3-uPA和SKOV3-PAI-1细胞中的表达。结论：成功构建了uPA和PAI-1表达基因的真核表达载体,为进一步研究uPA和PAI-1基因在卵巢癌侵袭转移中的作用提供了实验基础。     

二烯丙三硫对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和侵袭的抑制及对uPA系统的调节

目的 研究二烯丙三硫（DATS）对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和侵袭能力的影响及对尿激酶型纤溶酶激活物（uPA）系统的调节作用。方法 实时定量PCR法(real time PCR)检测乳腺癌细胞株uPA系统中uPA、uPA受体（uPAR）和uPA抑制物（PAI-1）的表达;使用不同浓度DATS处理乳腺癌细胞,MTS比色法测定细胞的增殖能力;Matrigel体外浸润实验检测DATS（20~60μmol/L） 对细胞浸润能力的影响;Transwell小室迁移实验和划痕试验评价60μmol/L DATS对细胞迁移能力的影响;RT-PCR和Western blot分别测定60μmol/L DATS作用后,乳腺癌细胞中uPA、uPAR和PAI-1 mRNA和蛋白表达的变化;ELISA法检测细胞培养液中PAI-1蛋白含量的变化。结果 20~80μmol/L DATS对高侵袭性乳腺癌细胞株MDA-MB-231的生长有明显的抑制作用,且呈浓度和时间依赖性。60μmol/L DATS明显抑制MDA-MB-231细胞的浸润和迁移能力,并在mRNA和蛋白水平上,显著上调PAI-1的表达,但对uPA和uPAR的表达水平无显著影响。结论 DATS抑制MDA-MB-231细胞的增殖和侵袭能力,并在mRNA和蛋白水平上,显著上调PAI-1的表达。     

乳腺肿瘤组织中Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂的表达

探查乳腺肿瘤组织中Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂（ＰＡＩ－１）的表达，并比较乳腺恶性肿瘤组织与良性纤继腺瘤及正常组织中ＰＡＩ－１的差异。用免疫组织化学和原位杂交的方法，确定了乳腺癌、乳腺纤维腺瘤及瘤旁正常组织中ＰＡＩ－１的分布；用发色底物法检测组织提取液中ＰＡＩ－１的活性；用图象分析的方法对组织切片上的ＰＡＩ－１进行灰度定量。结果：ＰＡＩ－１主要分布在乳腺正常腺上皮细胞、瘤上皮细胞和腺癌细胞的胞浆中，但恶性组织中的成纤维细胞、巨噬细胞以及癌旁纤维组织也有染色。癌组织中ＰＡＩ－１的活性（Ｐ＜０．００１）和含量（Ｐ＜０．００５）均高于良性乳腺纤维腺瘤及瘤旁正常组织。结论：ＰＡＩ－１在乳腺恶性肿瘤组织中明显升高，ＰＡＩ－１的检测可能为临床乳腺肿瘤的诊断、预后提供新的指标。     

Gene expression of fibrinolytic factors urokinase plasminogen activator and plasminogen activator inhibitor-1 in rabbit temporo-mandibular joint cartilage with disc displacement

Background The urokinase plasminogen activator system is believed to play an important role in degradation of the extracellular matrix associated with cartilage and bone destruction; however its precise roles in temporomandibular disorders have not yet been clarified. The aims of this study were to investigate the gene expression of fibrinolytic factors urokinase plasminogen activator (uPA) and plasminogen activator inhibitor-1(PAI-1) in the articular cartilage of rabbit temporomandibular joint (TMJ) with disc displacement (DD) and to probe the relationship between fibrinolytic activity and cartilage remodeling.Methods Disc displacement of right joints was performed in 36 of 78 rabbits under investigation. The animals were sacrificed at 4 days and 1, 2, 4, 8 and 12 weeks after surgery, respectively. The right joints of these animals were harvested and processed for the examination of mRNA expression of uPA and PAI-1 in articular cartilage using in situ hybridization techniques.Results The expression of uPA and PAI-1 was co-expressed weakly in the chondrocytes from transitive zone to hypertrophic zone and mineralized zone, while no hybridizing signals were shown in proliferative zone and superficial zone in control rabbits. The most striking was the up-regulation of uPA and PAI-1 mRNA in 4-day rabbits postoperatively at the onset of cartilage degeneration. The strongest hybridizing signals for uPA and PAI-1 were seen in 2-week rabbits postoperatively. After 2 weeks, the expression of uPA and PAI-1 began to decrease and reached nearly normal level at 12 weeks.Conclusions The expression of the uPA/PAI-1 system coincides with the pathological changes in condylar cartilage after DD. The uPA/PAI-1 system may be one of the essential mediators in articular cartilage remodeling.