正丁酸钠对肺纤维化大鼠高迁移率族蛋白B1 和α平滑肌肌动蛋白表达影响

目的:观察正丁酸钠对肺纤维化大鼠高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)和a平滑肌肌动蛋白(smooth muscle actin-a,α-SMA)表达的影响.方法:将30只大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组.每组10只.3组大鼠用水合氯醛腹腔注射麻醉,竖立固定,经口气管播管...     

牛磺酸对博莱霉素肺纤维化大鼠的干预作用及对TGF-β1、α-SMA表达的影响

目的:研究牛磺酸对博莱霉素肺纤维化大鼠的干预作用及其可能的机制.方法:54只清洁SD大鼠随机分为牛磺酸组(T组)、模型组(B组)、正常组(CN组).T组和B组实验当天气管内滴入博莱霉素5mg/kg,CN组气管内滴入等量生理盐水.在气管内滴药后第7、14、28天每组各处死6只动物,行HE、Masson染色并做肺泡炎、肺纤维化评分,测羟脯氨酸含量、免疫组化法测转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平表达.结果:B组TGF-β1、α-SMA蛋白表达明显高于CN组和T组.B组各时间点肺泡炎评分均高于同一时间点CN组和T组.实验第14、28天肺纤维化程度及羟脯氨酸含量也高于同期CN组及T组.结论:牛磺酸可减轻博莱霉素肺纤维化大鼠的肺纤维化程度,其机制可能与抑制肺组织TGF-β1表达及成纤维细胞转化为肌成纤维细胞有关.     

不同功率微波照射对博莱霉素诱导的肺纤维化大鼠的效应研究

目的：研究不同功率微波照射(electromagnetic wave irradiation)对博莱霉素(bleomycin,BLM)诱导大鼠肺纤维化(pulmonary fibrosis)不同病程阶段的效应。方法：气管注入5mg/kg博莱霉素构建肺纤维化模型。将大鼠随机分为4组,正常对照组、模型组、10min小功率照射组、20min大功率照射组;在造模7d、14d、28d,两组微波照射组分别接受不同功率的微波照射,正常对照组和模型组不接受微波照射。HE、Masson、天狼猩红染色及组织免疫组化染色法观察肺组织病理学改变以及纤维化相关分子(α-SMA、COL1a1)的表达,q RT-PCR检测大鼠肺组织中的炎症因子水平,PET-CT检测大鼠的肺组织的代谢情况。结果：(1)组织病理染色以及免疫组化结果显示,随着病程的进展,模型组肺组织以先增强后稳定的肺泡炎和不断增强的纤维化病变为主。在造模28d,小功率微波照射可明显改善肺泡炎和肺纤维化(肺泡炎评分P=0.0078、肺纤维化评分P=0.0248、α-SMA P<0.0001、COL1a1 P=0.0449),大功率微波照射组仅α-S...     

红景天苷抑制大鼠肺纤维化机制研究

目的探讨红景天苷对大鼠肺纤维化的抑制作用机制。方法 SD大鼠18只,随机分为3组:对照组(6只),生理盐水组(A组,6只),红景天苷组(B组,6只)。大鼠气管内注射博来霉素制备肺纤维化模型后,A组每天腹腔注射生理盐水(5 mg/kg),B组每天腹腔注射红景天苷(5 mg/kg)。对照组气管和腹腔内注入等体积生理盐水。4周后处死动物,提取肺组织分别行Masson染色,免疫组化检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA),PCR检测胶原I的mRNA表达。结果与对照组相比,A组Masson染色纤维化程度增强,α-SMA表达、胶原I mRNA表达明显升高(P0.05);同A组相比,B组Masson染色纤维化程度减弱,α-SMA表达、胶原I mRNA表达降低(P0.05)。结论红景天苷对肺纤维化有一定治疗作用,其机制可能与调控胶原相关蛋白有关。     

正丁酸钠对失血性休克大鼠肺部HMGB1 mRNA的调节

目的 研究正丁酸钠(sodium butyrate)对失血性休克大鼠肺部HMGB1 mRNA的影响.方法 由股动脉抽血建立失血性休克模型.30只动物随机分为假手术组、休克复苏组及正丁酸钠治疗组,于复苏后12 h处死动物.检测肺湿/干质量(W/D)比值、支气管肺泡灌洗液(BALF)中中性粒细胞(PMN)百分比和总蛋白浓度;测定肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性、丙二醛(MDA)含量; RT-PCR法检测肺组织HMGB1 mRNA表达.结果 正丁酸钠组与休克复苏组相比,肺W/D、BALF中总蛋白含量及PMN百分比显著减少(P<0.05),肺组织MPO和MDA含量、肺组织HMGB1 mRNA表达明显降低(P<0.05).结论 正丁酸钠对失血性休克诱发的肺损伤有保护作用,可能与下调HMGB1 mRNA表达有关.     

α-平滑肌肌动蛋白在高氧肺损伤中的表达变化及意义

目的 探讨高氧暴露下大鼠肺损伤中肌成纤维细胞表面标志α-平滑肌肌动蛋白(α -SMA)的表达变化及意义.方法 将64只3周龄SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组(置于空气中,吸入氧浓度0.21)和高氧暴露组(置于玻璃氧舱中,95％氧),每组于高氧暴露1、7、14、21d随机处死8只大鼠.苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理改变,免疫组化法观察α -SMA在肺组织中的表达与分布,蛋白质免疫印迹法( Western blotting)检测肺组织α-SMA表达.结果 HE染色发现,早期高氧肺损伤时肺组织以炎症水肿表现为主,后期则以间质纤维增生为主.免疫组化结果显示,正常对照组α -SMA在细支气管上皮、肺泡表面及肺泡间隔上表达极为微弱;高氧暴露后随时间的延长α-SMA在肺泡表面及肺泡间隔上表达逐渐增强,以21d时最为明显.Western blotting检测发现,与正常对照组相比,高氧暴露1d、7d时肺组织α-SMA表达无明显差异(1.02±0.12比1.00±0.13,1.05±0.14比0.99±0.12,均P＞0.05),高氧暴露14d、21d时α-SMA表达明显增强(1.27±0.21比1.05±0.15,2.26±0.28比1.05±0.14,P＜0.05和P＜0.01).结论 大鼠高氧暴露后随时间延长,α-SMA在肺组织中的表达逐渐升高,肺纤维化逐渐加重,说明肌成纤维细胞在肺组织纤维化重构过程中起重要作用.     

芪丹颗粒剂对大鼠肺纤维化的干预作用与氢化可的松比较

背景特发性肺纤维化治疗反应性差,首选治疗药物为糖皮质激素,仅对30%的患者有效.中药对肺纤维化的防治作用是研究热点,许多中药已经在临床中试用,并且取得了一定的治疗效果.转化生长因子β1和肿瘤坏死因子α是致肺纤维化的重要细胞因子,抑制其表达可能对治疗肺纤维化有效.目的探讨芪丹颗粒剂对博莱霉素A5所致大鼠肺纤维化的干预作用及对肺组织转化生长因子β1和肿瘤坏死因子α蛋白表达的影响,并与糖皮质激素氢化可的松进行比较.设计随机区间分组设计.单位山东大学山东省立医院呼吸内科.对象实验于2003-05/2004-03在山东省医学科学院病理实验室进行.取雄性SD大鼠105只,随机分为4组正常对照组(n=15),模型组、芪丹组和氢化可的松组,每组30只;各组又分为7,14,28 d 3个时间点,正常对照组每个时间点5只,其他3组每个时间点10只.方法[1]造模正常对照组经气管内一次性灌注生理盐水0.25 mL,其他3组经气管内一次性灌注博莱霉素A5 0.25 mL左右(5 mg/kg,4g/L)制备肺纤维化模型.[2]给药造模次日开始,芪丹组每天给于芪丹颗粒剂灌胃(黄芪、丹参、川芎等组成,3 125 mg/kg);氢化可的松组每天给于腹腔注射氢化可的松(25 mg/kg);正常对照组和模型组每天给于生理盐水灌胃(2 mL/只).[3]观察指标各组动物均于给药后第7,14,28天麻醉状态下处死,取肺组织,用苏木素-伊红染色评价肺组织病理学变化、免疫组化测定转化生长因子β1、肿瘤坏死因子α蛋白的表达.主要观察指标各组大鼠不同时间点肺组织病理学观察和转化生长因子β1、肿瘤坏死因子α表达情况.结果100只大鼠进入结果分析.[1]肺组织病理学观察结果正常对照组结构正常,模型组第7天表现为肺泡炎;14 d肺泡炎加重,28 d广泛纤维化;芪丹组经治疗后肺泡炎和肺纤维化病变明显轻于模型组,有正常肺泡结构存在;氢化可的松组第7,14天肺泡炎较模型组轻,但肺纤维化与模型组比较无差异.[2]肺组织转化生长因子β1蛋白表达模型组第28天表达最多,显著高于正常对照组(3.6±0.4,1.2±0.4,P＜0.01),芪丹组和氢化可的松组均显著低于模型组(1.7±0.5,2.5±0.4,P＜0.01),且芪丹组低于氢化可的松组(P＜0.01).[3]肺组织肿瘤坏死因子α蛋白表达模型组各时间点均持续高表达,芪丹组和氢化可的松组均少于模型组,差异有显著性(P＜0.05或P＜0.01),而且而且芪丹组明显少于氢化可的松组(P＜0.01).结论芪丹颗粒剂可明显减轻博莱霉素A5诱导的大鼠肺纤维化的程度,降低肺组织转化生长因β1、肿瘤坏死因子α蛋白的表达,其效果较氢化可的松好.     

瘦素在肺纤维化大鼠肺组织中的表达及意义

[目的]探讨肺纤维化大鼠肺组织中瘦素的表达及意义.[方法]选择Sprague-Dawley雄性大鼠36只,随机分为实验组和对照组,每组18只,实验组应用博莱霉素气管内注入建立实验性大鼠肺纤维化模型,对照组注入生理盐水,采用HE染色、Masson三联染色检测肺组织病理变化,免疫组织化学染色、RT-PCR等方法检测其肺组织中瘦素蛋白和mRNA表达水平.[结果]实验组大鼠d7呈现典型的肺泡炎、d14纤维组织增生、d28稳定的肺纤维化;瘦素蛋白和瘦素mRNA在对照组肺组织表达较弱,在实验组d7表达增强,d14进一步增强,d28减弱,但仍强于对照组（P〈0.05）.[结论]肺组织内瘦素表达的上调可能参与肺纤维化的发生和发展.     

芪丹颗粒剂对大鼠肺纤维化的干预作用与氢化可的松比较

背景：特发性肺纤维化治疗反应性差,首选治疗药物为糖皮质激素,仅对30%的患者有效.中药对肺纤维化的防治作用是研究热点,许多中药已经在临床中试用,并且取得了一定的治疗效果.转化生长因子β1和肿瘤坏死因子α是致肺纤维化的重要细胞因子,抑制其表达可能对治疗肺纤维化有效.目的：探讨芪丹颗粒剂对博莱霉素A5所致大鼠肺纤维化的干预作用及对肺组织转化生长因子β1和肿瘤坏死因子α蛋白表达的影响,并与糖皮质激素氢化可的松进行比较.设计：随机区间分组设计.单位：山东大学山东省立医院呼吸内科.对象：实验于2003-05/2004-03在山东省医学科学院病理实验室进行.取雄性SD大鼠105只,随机分为4组：正常对照组（n=15）,模型组、芪丹组和氢化可的松组,每组30只;各组又分为7,14,28 d 3个时间点,正常对照组每个时间点5只,其他3组每个时间点10只.方法：[1]造模：正常对照组经气管内一次性灌注生理盐水0.25 mL,其他3组经气管内一次性灌注博莱霉素A5 0.25 mL左右（5 mg/kg,4g/L）制备肺纤维化模型.[2]给药：造模次日开始,芪丹组每天给于芪丹颗粒剂灌胃（黄芪、丹参、川芎等组成,3 125 mg/kg）;氢化可的松组每天给于腹腔注射氢化可的松（25 mg/kg）;正常对照组和模型组每天给于生理盐水灌胃（2 mL/只）.[3]观察指标：各组动物均于给药后第7,14,28天麻醉状态下处死,取肺组织,用苏木素-伊红染色评价肺组织病理学变化、免疫组化测定转化生长因子β1、肿瘤坏死因子α蛋白的表达.主要观察指标：各组大鼠不同时间点肺组织病理学观察和转化生长因子β1、肿瘤坏死因子α表达情况.结果：100只大鼠进入结果分析.[1]肺组织病理学观察结果：正常对照组结构正常,模型组第7天表现为肺泡炎;14 d肺泡炎加重,28 d广泛纤维化;芪丹组经治疗后肺泡炎和肺纤维化病变明显轻于模型组,有正常肺泡结构存在;氢化可的松组第7,14天肺泡炎较模型组轻,但肺纤维化与模型组比较无差异.[2]肺组织转化生长因子β1蛋白表达：模型组第28天表达最多,显著高于正常对照组（3.6&;#177;0.4,1.2&;#177;0.4,P＜0.01）,芪丹组和氢化可的松组均显著低于模型组（1.7&;#177;0.5,2.5&;#177;0.4,P＜0.01）,且芪丹组低于氢化可的松组（P＜0.01）.[3]肺组织肿瘤坏死因子α蛋白表达：模型组各时间点均持续高表达,芪丹组和氢化可的松组均少于模型组,差异有显著性（P＜0.05或P＜0.01）,而且而且芪丹组明显少于氢化可的松组（P＜0.01）.结论：芪丹颗粒剂可明显减轻博莱霉素A5诱导的大鼠肺纤维化的程度,降低肺组织转化生长因β1、肿瘤坏死因子α蛋白的表达,其效果较氢化可的松好.     

大鼠肺移植后高迁移率族蛋白B1表达增强

目的观察大鼠肺移植后肺组织高迁移率族蛋白B1（HMGB1）表达和血清HMGB1水平的改变。方法 42只大鼠随机分为对照组（6只）、移植2h组（12只）、移植6h组（12只）和移植12h组（12只）,三套管法建立大鼠左肺原位移植模型。使用实时荧光定量逆转录多聚酶链反应检测肺组织HMGB1mRNA水平,使用免疫印迹法和免疫荧光染色分析肺组织HMGB1蛋白水平。血清中HMGB1、TNF-α、IL-1β和IL-6含量采用ELISA法检测。结果大鼠肺移植后2h肺组织HMGB1mRNA表达和HMGB1蛋白含量即见显著升高（P〈0.01）,并随时间延长而增强。大鼠肺移植后各时间点血清HMGB1、TNF-α、IL-1β和IL-6水平均明显升高（P〈0.01）。结论大鼠肺移植术后HMGB1表达发生明显改变,HMGB1参与肺移植缺血再灌注损伤过程。     

肺纤维化进程中肺泡上皮细胞进行性减少的动态变化:P16,CyclinD1,CDK4的参与及作用?

背景:研究发现肺纤维化进程中肺组织肺泡上皮细胞进行性减少,但其原因不明.课题组设想在肺纤维化进程中可能存在P16,CyclinD1,CDK4蛋白异常表达,P16-CyclinD1/CDK4细胞周期调控通路异常可能参与肺纤维化肺泡上皮细胞减少过程.目的:研究P16,CyclinD1,CDK4在博来霉素诱导的小鼠肺纤维化肺组织中的动态表达及其意义.方法:向6周龄KM小鼠气管内注射博莱霉素制备肺纤维化模型,对照组给予等体积的生理盐水.分别于造模后的第3,7,14和28天,苏木精-伊红染色观察肺组织的病理形态改变;免疫组织化学及Western blot检测肺组织P16,CyclinD1,CDK4蛋白的表达.结果与结论:模型组小鼠肺组织出现典型的纤维化改变,肺组织P16,CDK4蛋白表达随时间增加而增强,CyclinD1蛋白表达随时间增加而减少.与对照组比较,模型组P16,CDK4蛋白阳性细胞数增多,P16蛋白量于造模后14,28 d多于对照组(P<0.01),而CDK4蛋白量于造模后7,14,28 d多于对照组(P<0.05);CyclinD1蛋白阳性细胞数及蛋白量于造模后3,7 d多于对照组(户<0.05),而28 d则明显少于对照组(P<0.05),造模后14 d,模型组的CyclinD1蛋白阳性细胞数多于对照组,而蛋白量少于对照组(P<0.05).说明在肺纤维化进程中存在P16,CyclinD1,CDK4蛋白异常表达,P16-CyclinD1/CDK4细胞周期调控通路异常可能是肺纤维化肺泡上皮细胞减少的重要原因.     

转化生长因子-β1、肿瘤坏死因子-α在老龄肺纤维化大鼠血清中表达变化的实验研究

目的:对比观察老龄大鼠和成年大鼠转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在博来霉素诱导肺纤维化模型中表达水平的变化,探索老年肺纤维化发病率升高的可能机制.方法:大鼠气管内灌注博来霉素(模型组)或生理盐水(对照组),于第7、14、21、28天分别处死5只,测定血清中TGF-β1、TNF-α的浓度;测定肺组织匀浆中羟脯氨酸(HYP)的浓度;通过HE染色观察肺组织形态的变化.结果:各时间点模型组大鼠肺组织HYP含量、血清中TGF-β1、TNF-α的浓度均较对照组明显增高,差异有显著性(P＜0.05);成年和老龄模型组第7天至第28天肺组织HYP含量、血清中TGF-β1、TNF-α水平逐渐升高,但是成年模型组第21、28天与同组第14天比较差异无显著性(P＞0.05),而老龄模型组在第21天和第28天时仍明显继续升高,且与同组第14天比较差异有显著性(P＜0.05).结论:气管内灌注博来霉素后老龄大鼠HYP、TGF-β1、TNF-α的浓度长时间及高水平表达,是肺纤维化随年龄增加的分子基础,也是老年人肺纤维化发病率升高原因之一.     

氯沙坦对百草枯中毒致大鼠肺损伤的改善作用及与ACE2/Ang-(1-7)/Mas受体轴表达的关系

目的分析氯沙坦对百草枯中毒致大鼠肺损伤的改善作用及与ACE2/Ang-(1-7)/Mas受体轴表达的关系。方法将36只清洁级雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和实验组,三组各12只。对照组给予生理盐水;模型组给予百草枯溶液18 mg/kg,于一次性腹腔注射;实验组给予百草枯溶液18 mg/kg,于一次性腹腔注射,待0. 5 h后应用氯沙坦溶液进行灌胃,每日10 mg/kg。1周、2周、3周取各组大鼠肺组织,对其肺系数进行计算以评估其肺水肿的状况;采用HE染色对各组大鼠肺泡炎的程度进行观察,并用Masson染色评估大鼠肺纤维化的严重程度;采用酶联免疫吸附试验法检测各组大鼠肺组织匀浆中Ang-(1-7)和转化生长因子β1(TGF-β1)的水平,并通过免疫组织化学法对各组大鼠肺组织中Mas受体和血管紧张素转换酶II(ACE2)蛋白的表达水平进行检测。结果在染毒后1周、2周、3周时,模型组和实验组肺系数较对照组均显著升高(P 0. 01),而实验组各时间点时的肺系数较模型组均显著下降(P 0. 01)。在染毒后1周、2周、3周,模型组出现明显肺泡炎症,且随着染毒时间的增加,可出现肺纤维化,实验组肺泡炎症程度轻于模型组,实验组肺纤维化程度较模型组明显减轻。随着染毒时间的增加,Ang-(1-7)和TGF-β1在模型组与实验组肺组织匀浆中的水平均逐渐升高,且模型组与实验组各时间点Ang-(1-7)和TGF-β1的含量较对照组均显著升高(P 0. 01);染毒后1、2、3周,Ang-(1-7)在实验组肺组织匀浆中的水平较模型组明显升高,而TGF-β1的含量较模型组显著下降(P 0. 01)。随着染毒时间的增加,模型组与实验组大鼠肺组织中Mas受体和ACE2蛋白的表达水平均显著升高(P 0. 05),且实验组染毒后2周、3周Mas受体和ACE2蛋白的表达水平较模型组均显著升高(P0. 05)。结论在百草枯中毒后,肺组织匀浆中Ang-(1-7)和TGF-β1的表达水平明显上调,而氯沙坦可能通过升高ACE2/Ang-(1-7)/Mas受体轴的表达水平而起到下调纤维化因子TGF-β1表达的作用,因此可改善百草枯中毒所引起的肺损伤和肺纤维化的形成。     

N-乙酰半胱氨酸对大鼠肺纤维化模型中TGF—β1表达影响的研究

目的探讨N-乙酰半胱氨酸（N—acetylcysteine,NAc）对博莱霉素（bleomycin,BLM）诱导的大鼠肺纤维化模型的肺组织转化生长因子岛（TGF-β1）的蛋白和基因表达的影响及其意义。方法取健康、雌性Wistar大鼠30只,随机分为BLM组（B组）,NAC治疗组（N组）及正常对照组（C组）,每组10只。B组及N组通过气管内注入BLM法制备肺纤维化模型。C组在同样条件下向气管内注射等量的生理盐水,N组于BLM处理前一周及此后每日经强饲法口服NAC（3mmol·kg·day^-1）。三组动物分别于气管灌注后第7天、第14天随机处死5只,取大鼠的肺组织进行病理检测、免疫组化测定肺组织中TGF-β1的蛋白表达;通过RT-PCR检测肺组织TGV-β1 mRNA的表达变化。结果病理学观察发现B组大鼠肺纤维化程度最重,N组的肺泡炎和肺纤维化程度均比B组减轻（P〈0．05）,C组无明显肺泡炎和肺纤维化。B组与C组比较各时间点肺组织的TGF-β1的蛋白含量均增高（P〈0．05）,mRNA的表达升高,相比有显著性差异（P〈0．05）;N组与B组相比较,NAC能够显著降低大鼠的TGF-β1的蛋白水平,其mRNA的表达下降,相比有显著性差异（P〈0．05）。结论NAC可以使肺泡炎及纤维化病变减轻,能降低肺纤维化大鼠肺组织TGF-β1的蛋白水平,下凋TGF-β1 mRNA的表达,对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化具有显著的抑制作用。     

布地奈德雾化吸入干预博菜霉素致大鼠肺纤维化实验研究

目的探讨布地奈德（budesonide,BUD）雾化吸人对博莱霉素所致大鼠肺纤维化模型的干预作用。方法60只SD大鼠随机分为雾化吸入BUD 0．5mg／kg者为干预1组、雾化吸入BUD 1mg／kg者为干预2组、肺纤维化模型组（模型组）、生理盐水对照组（对照组）各15只。干预1组,干预2组和模型组采用气管内滴注博来霉素建立肺纤维化大鼠模型,对照组采用生理盐水滴注。0～6d每天雾化吸入,干预1组和干预2组雾化吸人BUD,模型组和对照组雾化吸人生理盐水。分别于7,14,28d后每组各处死大鼠5只,进行肺组织形态学观察、肺系数测量、病理HE和Masson染色评价其肺组织肺泡炎及肺纤维化程度。结果肺系数、肺泡炎和肺纤维化程度干预1组第7天与模型组比较差异无统计学意义（P〉0．05）,第14,28天低于模型组（P〈0．05）;干预2组各时间点大鼠肺系数、肺泡炎和肺纤维化程度均明显低于模型组及干预1组（P〈0．05）。结论雾化吸人BUD可减轻中、后期博莱霉素致大鼠肺泡炎和肺纤维化程度,加大BUD雾化吸入剂量可减轻前期肺泡炎,缓解后期肺纤维化的产生。     

布地奈德雾化吸入干预博莱霉素致大鼠肺纤维化实验研究

目的探讨布地奈德(budesonide,BUD)雾化吸入对博莱霉素所致大鼠肺纤维化模型的干预作用。方法 60只SD大鼠随机分为雾化吸入BUD 0.5mg/kg者为干预1组、雾化吸入BUD 1mg/kg者为干预2组、肺纤维化模型组(模型组)、生理盐水对照组(对照组)各15只。干预1组,干预2组和模型组采用气管内滴注博来霉素建立肺纤维化大鼠模型,对照组采用生理盐水滴注。0～6d每天雾化吸入,干预1组和干预2组雾化吸入BUD,模型组和对照组雾化吸入生理盐水。分别于7,14,28d后每组各处死大鼠5只,进行肺组织形态学观察、肺系数测量、病理HE和Masson染色评价其肺组织肺泡炎及肺纤维化程度。结果肺系数、肺泡炎和肺纤维化程度干预1组第7天与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05),第14,28天低于模型组(P<0.05);干预2组各时间点大鼠肺系数、肺泡炎和肺纤维化程度均明显低于模型组及干预1组(P<0.05)。结论雾化吸入BUD可减轻中、后期博莱霉素致大鼠肺泡炎和肺纤维化程度,加大BUD雾化吸入剂量可减轻前期肺泡炎,缓解后期肺纤维化的产生。     

CCR6、Th9细胞、Th17/Treg细胞失衡在大鼠肺纤维化中的表达及意义

目的研究CCR6、Th9细胞、Th17/Treg失衡在大鼠肺纤维化中的表达及意义。方法采取随机分组原则将63只雄性SD大鼠分为三组:生理盐水对照组(N组)、肺纤维化模型组(F组)、地塞米松治疗组(D组),经气管内注入博来霉素制作大鼠肺纤维化模型,分别于第7d、第14d、第28d留取各组大鼠肺组织、肺泡灌洗液,应用HE染色观察大鼠模型肺组织病理改变;免疫组化法评价三组肺组织中CCR6、IL-9表达情况;荧光PCR法检测肺泡灌洗液PU.1mRNA水平,流式细胞术检测Th17、Treg的表达;并分析CCR6、Th9细胞与Th17/Treg的相互关系。结果1.F组、D组与N组相比,肺组织炎症程度、肺纤维化程度显著,肺部炎症以造模第7d最明显。2.对于CCR6、PU.1mRNA、IL-9、Th17,与N组相比较,F、D组大鼠不同时间点表达均明显增高(P0.05),以造模第7d最明显;F、D组大鼠Treg细胞表达水平较对照组降低(P0.05)。3.CCR6、Th9、PU.1mRNA表达水平与Th17有显著正相关性,与Treg有显著负相关(P均0.01)。结论本研究大鼠肺纤维化模型CCR6、Th9细胞与Th17/Treg比值各时间点表达水平较对照组均升高;推断CCR6、Th9细胞可能参与Th17/Treg失衡在肺纤维化免疫炎症的发生过程,进而促进肺组织纤维细胞增殖,在肺纤维化的发生机制中起到重要作用。     

内皮素受体拮抗剂对博莱霉素所致大鼠肺纤维化模型的影响

目的探讨内皮素受体拮抗剂BQ-123对肺纤维化大鼠的治疗作用。方法实验分为模型组、治疗组及对照组。模型组用博莱霉素5mg/kg气管内注射复制大鼠肺纤维化模型,治疗组予内皮素受体拮抗剂BQ-12350μg/kg每周2次腹腔注射,对照组以等量生理盐水替代。造模后d28d处死大鼠,测定肺泡灌洗液中细胞计数及分类、肺组织及肺泡灌洗液中内皮素含量、肺组织羟脯氨酸含量,并进行组织病理学观察。结果模型组、治疗组支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数均显著高于对照组(P<0.01),各组间细胞分类无统计学差异;上述两组肺组织及BALF中内皮素均高于对照组(P<0.05、P<0.01);模型组羟脯氨酸明显高于对照组(P<0.01),治疗组羟脯氨酸降低(P<0.05);组织病理学提示模型组Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达增加,治疗组较之模型组有不同程度减少。结论内皮素参与肺纤维化的发病过程,内皮素受体拮抗剂BQ-123对肺纤维化大鼠具有一定的治疗作用。     

阻断局部肾素-血管紧张素-醛固酮系统不同环节对大鼠肺间质纤维化肿瘤坏死因子α表达的影响

目的:观察阻断肾素-血管紧张素-醛固酮系统不同环节对实验性肺纤维化大鼠肺组织肿瘤坏死因子α的影响。方法:实验于2005-08/2006-08在南华大学附属第一医院临床研究所及南华大学医学院组胚、生理实验室完成。取6周龄SD大鼠50只,随机分为正常对照组、模型组、卡托普利组、螺内酯组和氯沙坦组,每组10只。正常对照组气管内注入生理盐水,其他40只SD大鼠气管内注入博莱霉素5mg/kg复制肺纤维化模型。次日胃管内灌注血管紧张素转换酶抑制剂卡托普利60mg/kg(卡托普利组)、血管紧张素Ⅱ的Ⅰ型受体阻断剂氯沙坦10mg/kg(氯沙坦组)、醛固酮受体拮抗剂螺内酯100mg/kg(螺内酯组)、等量生理盐水(模型组和正常对照组),1次/d。各组动物均于给药后第28天处死,通过苏木精-伊红染色和Mallory染色观察肺组织病理变化,用免疫组织化学法和图像分析系统定量检测肺组织肿瘤坏死因子α的表达。结果:41只大鼠进入结果分析。①肿瘤坏死因子α蛋白表达:模型组高于正常对照组(166.82±4.14,61.44±1.94,P<0.01),卡托普利组、氯沙坦组、螺内酯组低于模型组(107.50±4.60,113.64±8.47,118.00±7.14,P<0.01),各用药组间无差异。②模型组肺泡炎程度、肺纤维化程度显著高于正常对照组(P<0.01,0.05),卡托普利组、氯沙坦组、螺内酯组较模型组好转(P<0.01),各用药组间无差异。结论:肺局部肾素-血管紧张素-醛固酮不同环节可能通过刺激肺部肿瘤坏死因子α表达而发挥致纤维化作用,阻断其不同环节可阻止肿瘤坏死因子α水平升高,抑制肺纤维化形成。     

骨髓间充质干细胞对肺损伤大鼠转化生长因子β及单核细胞趋化蛋白1的影响

背景:转化生长因子β及单核细胞趋化蛋白1是肺纤维化形成过程中的重要细胞因子,已证实骨髓间充质干细胞可降低损伤肺组织中的胶原含量,减轻肺纤维化.目的:观察骨髓间充质干细胞对肺损伤大鼠转化生长因子β及单核细胞趋化蛋白1的影响.设计、时间及地点:随机对照,细胞学体外实验,于2005-05/2006-02在解放军第四军医大学完成.材料:清洁级雌性SD大鼠20只,随机分为正常对照组、细胞对照组、肺损伤组、细胞移植组,5只/组.雄性SD大鼠5只用于骨髓间充质干细胞的采集.方法:肺损伤组、细胞移植组大鼠经气管注入5 mg/kg博来霉素0.2～0.3 mL诱发建立肺损伤模型.造模后12 h,细胞移植组、细胞对照组大鼠经尾静脉注入骨髓间充质干细胞悬液0.5 mL,约5×106个细胞;肺损伤组、正常对照组大鼠同法注入无血清DMEM-F12 0.5 mL.主要观察指标:苏木精-伊红染色观察肺组织形态学变化.酸解法测定肺组织羟脯氨酸含量.ELISA法检测血清及支气管肺泡灌洗液中转化生长因子β、单核细胞趋化蛋白1的表达.结果:细胞移植2周后,正常对照组及细胞对照组的肺泡腔均匀完整;肺损伤组的肺泡结构破坏,肺泡间隔增厚,间质增生;细胞移植组肺损伤程度明显减轻.与正常对照组比较,肺损伤组、细胞移植组的肺组织羟脯氨酸含量均显著升高(P<0.01或0.05),细胞移植组升高幅度明显低于肺损伤组(P<0.01).各组大鼠血清及支气管肺泡灌洗液中转化生长因子β、单核细胞趋化蛋白1的表达水平与肺组织羟脯氨酸含鼍基本相似.结论:骨髓间充质干细胞可减少肺损伤大鼠肺组织羟脯氨酸含量,减轻大鼠肺损伤及纤维化程度,可能与降低转化生长因子β、单核细胞趋化蛋白1的表达有关.