胃癌组织中T细胞及其亚群ICOS分子的表达及其意义

目的探讨胃癌组织中T细胞共刺激分子ICOS及其亚群的表达及意义。方法应用流式细胞术检测38例胃癌和21例健康人（对照组）外周血T细胞亚群及其共刺激分子ICOS的表达。结果胃癌组与对照组比较：CD3^＋T细胞表达（53．61±13．84）／（72．07±7．83）％,P〈0．01;CD3^＋CD4^＋T细胞表达（29．84±9．71）／（38．79±5．08）％。P〈0．01;CD3^＋ICOS^＋T细胞表达（25．80±10．56）／（0．82±0．98）％,P〈0．01;CD3^＋CD8^＋ICOS^＋T细胞表达（1．57±1．99）／（0．02±0．04）％,P〈0．01;CD3^＋CD8^＋ICOS^-T细胞表达（16．06±6．94）／（20．56±6．54）％,P〈0．05。胃癌组患者手术前和手术后1周外周血T细胞亚群的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论胃癌患者T细胞数量明显减少,T细胞共刺激分子ICOS表达增高,CD4^＋T细胞显著减少。     

胃癌组织中T细胞亚群及其ICOS分子的表达及意义

目的探讨胃癌组织中T细胞共刺激分子ICOS及其亚群的表达及意义。方法应用流式细胞术检测38例胃癌和21例健康人（对照组）外周血T细胞亚群及其共刺激分子ICOS的表达。结果胃癌组与对照组比较：CD3^＋T细胞表达（53．61±13．84）％和（72.07±7．83）％,P〈0．01;CD3^＋CD4^＋T细胞表达（29．84±9．71）％和（38．79±5．08）％,P〈0．01;CD3^＋ICOS^＋T细胞表达（25．80±10．56）％和（O．82±0．98）％,P〈0．01;CD3^＋CD8^＋ICOS^＋T细胞表达（1.57±1．99）％和（0．02±0．04）％,P〈0．01;CD3^＋CD8^＋ICOS^-T细胞表达（16．06±6．94）％和（20．56±6．54）％,P〈0．05。胃癌组患者手术前和手术后1周外周血T细胞亚群的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论胃癌患者T细胞数量明显减少,T细胞共刺激分子ICOS表达增高,CIM’T细胞显著减少。     

复方苦参注射液对肺癌术后化疗患者免疫功能的影响简

目的：观察复方苦参注射液对肺癌术后化疗患者的免疫增强作用。方法：将60例非小细胞肺癌术后化疗患者随机分为两组,对照组单纯GP方案化疗（吉西他滨加顺铂）,试验组化疗方案同对照组,并在化疗的第1—8天静滴复方苦参注射液20ml／d。所有患者均于化疗前1d及化疗第8d后测定其外周血T淋巴细胞亚群及血常规,并进行对照分析。结果：对照组化疗后外周血CD3^＋、CD4^＋及CD4^＋／CD8^＋细胞比值较化疗前显著下降（P〈0．05）,CD8^＋细胞水平显著升高（P〈0．05）;试验组化疗后外周血CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋及CD4^＋／CD8^＋细胞比值较化疗前无显著差异（P〉0．05）。化疗后试验组外周血CD3^＋、CD4^＋及CD4^＋／CD8^＋细胞比值均较对照组显著升高（P〈0．05）,CD8^＋细胞水平与对照组无显著差异（P〉0．05）,化疗后,试验组患者外周血白细胞计数及淋巴细胞转换率明显高于对照组（P〈0．01）。结论：复方苦参注射液能有效增强肺癌术后化疗患者的免疫功能。     

肺癌患者外周血及胸腔积液调节性T细胞的表达及其临床意义

目的探讨肺癌患者胸腔积液及外周血CD＋4CD＋25调节T细胞、T细胞亚群的特点及其临床意义。方法采用流式细胞术检测68例肺癌患者外周血和其中32例并发胸腔积液患者的胸腔积液及56名健康对照者外周血中CD＋4CD＋25T细胞和淋巴细胞亚群的水平。结果不同TNM分期肺癌患者外周血T淋巴细胞亚群表达比例不同,其中Ⅰ＋Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者外周血CDIcD击细胞占cD刍细胞比例分别为（19．52±3．32）％、（27．28±8．26）％、（32．31±15．60）％,均高于健康对照组的（11．12±3．32）％,差异均有统计学意义（t=31．0040、-7．9688、-4．9770,均P〈005）。合并胸腔积液患者胸腔积液CDICD嘉细胞占CD＋34细胞比例为（34．12±18．63）％,高于其外周血的（26．36±16．25）％,差异有统计学意义（t=21．164,P〈0．05）;合并胸腔积液肺癌患者胸腔积液及外周血CD＋4细胞比例分别为（25．32±13．45）％及（34．68±12．34）％,低于健康对照组的（43．24±8．68）％（t=7．3104、4．8818,均P〈0．05）,CD＋56细胞比例分别为（8．24±7．38）％及（11．23±7．65）％,低于健康对照组的（18．23±9．23）％（t=-14．7549、-11．7216,均P〈0．05）,CD＋4／CD＋8分别为（1．02±0．56）％及（1．32±0．82）％,低于健康对照组的（1．89±0．32）％,差异均有统计学意义（CD＋4／CD＋8;t=-24．78、-4．4564,均19〈0．05）。结论肺癌患者胸腔积液及外周血CD＋4CD＋25T细胞水平升高,与肿瘤患者免疫功能低下及肿瘤的发生、发展密切相关。     

大肠癌患者外周血OD4＋0D25＋CD127－调节性T细胞表达及其临床意义

目的：探讨OD4＋0D25＋CD127－调节性T细胞在大肠癌患者外周血中的表达水平及临床意义。方法：应用流式细胞仪检测200例大肠癌患者外周血OD4＋0D25＋CD127－调节性T细胞占CD4＋T细胞的百分比,并分析其与大肠癌组织的分化程度、淋巴结转移和临床分期的关系。结果：大肠癌患者外周血OD4＋0D25＋CD127－调节性T细胞占CD4＋T细胞的百分率[（4．84±1．35）％]明显高于健康对照组[（0．85±0．25）％],差异有统计学意义,P〈0．05。低分化者外周血调节性T细胞[（4．21±0．42）％]明显高于高分化者[（3．92±0．41）％],差异有统计学意义,P〈0．05;有淋巴结转移者外周血调节T细胞[（4．57±l_44）％]明显高于无淋巴结转移者[（2．36±0．68）％],差异有统计学意义,P〈0．01;Ⅲ和Ⅳ期患者外周血调节性T细胞[（3．53±1．41）％和（4．38±1．32）％]明显高于Ⅰ～Ⅱ期[（1．90±0．86）％],差异有统计学意义,P〈0．01。结论：大肠癌患者外周血OD4＋0D25＋CD127调节性T细胞占CD4＋T细胞的百分率明显升高,可能在大肠癌的免疫耐受和免疫逃逸中发挥重要作用,检测其结果对于判断大肠癌的病程进展及预后有一定参考价值。     

结肠癌患者外周血淋巴细胞CD8和CD28的表达

[目的]探讨结肠癌患者外周血淋巴细胞CD8、CD28的表达及其临床意义。[方法]用流式细胞术对51例结肠癌患者和30例健康体检者外周血淋巴细胞CD8及CD28进行了检测。[结果]结肠癌组CD8^＋ CD28^-细胞与对照组比较明显增高（P〈0．05），CD8^＋ CD28^＋细胞明显低于健康对照组（P〈0．01）。结肠癌患者手术后CD8^＋ CD28^-细胞与手术前比较明显减低（P〈0．01），手术后CD8^＋ CD28^＋细胞与手术前比较明显增高（P〈0．05）。结肠癌患者淋巴结转移组CD8^＋ D28^＋细胞明显低于未转移组（P〈0．01）。Dukes’C期结肠癌患者CD8^＋ CD28^-细胞与Dukes’A期和Dukes’B期相比明显增高（分别P〈0．01，P〈0．05），随着临床分期的进程，CD8^＋ CD28^＋细胞、CD8^- CD28^＋细胞逐渐减低（分别P〈0．01．P〈0．05）。[结论]检测结肠癌患者的外周血中的CD8 和CD28的表达，对了，解患者的免症状况，疾病进展和指导临床对患者进行免疫调节治疗方面有一定的价值。     

老年肺癌患者血清T淋巴细胞亚群CD28的检测及临床意义

目的：探讨老年肺癌患者淋巴细胞免疫功能状态、临床意义及与肺癌病理类型、临床分期的关系。方法：采用三色免疫荧光标记流式细胞术检测35名正常老年人及32例老年肺癌患者外周血的总T淋巴细胞（CD3^＋）、辅助／诱导T淋巴细胞（CD4^＋）、抑制／细胞毒T淋巴细胞（CD8^＋）、细胞毒T细胞（CD8^＋CD28^＋）和抑制T细胞（CD8^＋CD28）。结果：老年肺癌组CD4^＋Tz细胞（t=2．01,P〈0．05）和CD3^＋、CD8^＋T细胞及CD8^＋CD28^＋T细胞亚群明显低于老年正常对照组,t=2．01,P〈0．01;CD8^＋CD28T细胞亚群明显高于老年正常对照组,t=2．01,P〈0．01;老年肺癌患者中,T淋巴细胞及亚群CD28的表达在TNM临床分期及病理类型间差异均无统计学意义,t=2．11,P值均〉0．05。结论：老年肺癌患者存在明显的T淋巴细胞亚群免疫功能紊乱,抗肿瘤能力明显下降,并导致病情恶化更严重,且与病理类型及临床分期无关。     

肝癌荷瘤小鼠调节性T细胞数量的改变及其与肿瘤生长的关系

目的研究肝癌荷瘤小鼠调节性T细胞数量的改变及其与肿瘤生长的关系。方法采用小鼠肝癌细胞系H22接种BALB／c小鼠,建立肝癌模型;采用流式细胞术方法检测CD4^＋ CD25^＋T／CD4^＋T细胞的比例;以RT-PCR和流式细胞术检测Foxp3基因的表达。以免疫磁珠分选法纯化CD4^＋CD25^＋T和CD4^＋CD25^-T细胞;在体外,用3H-TdR掺入法检测T细胞的增殖情况;在体内,观察荷瘤小鼠来源的CD4^＋CD25^＋T细胞对肿瘤生长的作用。结果（1）荷瘤小鼠在引流淋巴结中,CD4^＋CD25^＋T细胞占CD4＋T细胞（18．80％±0．06％）比例增高,与对照组（9．50％±0．03％）相比,差异有统计学意义（P〈0．01）;在非引流淋巴结（LN）和脾脏（SP）中,荷瘤小鼠CD4^＋CD25^＋T／CD4^＋T比例分别为16．28％±0．02％和17．28％±0．06％,与对照组9．50％±0．03％和11．08％±0．04％相比,差异有统计学意义（P〈0．01,P〈0．05）;同时,调节性T细胞特异性标志Foxp3 mRNA的表达也升高。在同一只荷瘤小鼠中,引流淋巴结中CD4^＋CD25^＋T细胞数量（18．8％±0．06％）较对侧非引流淋巴结（16．28％±0．02％）略有升高,但差异无统计学意义（P〉0．05）。（2）从荷瘤小鼠中纯化的CD4^＋CD25^＋T细胞,在体外对抗CD3单抗的刺激无反应,但能抑制CD4^＋CD25^-T细胞的增殖。（3）CD4^＋CD25^＋T／CD4＋T比例与肿瘤大小呈正相关,并且可以抑制CD4^＋CD25^-T细胞的抗肿瘤效应。结论肝癌细胞在小鼠体内的生长可以提高调节性T细胞的数量,其数量的高低与肿瘤的大小呈正相关,提示清除调节性T细胞将是肿瘤免疫治疗的策略之一。     

化疗对卵巢癌患者外周血淋巴细胞亚群的影响

目的观察化疗对卵巢癌患者淋巴细胞亚群的影响。方法收集湖北省鄂州市中心医院自2007年1月—2013年3月间收治的卵巢癌患者62例,以同期门诊体检的健康妇女60例作为健康对照组。分别检测卵巢癌组化疗前及化疗后一周、一个月和对照组外周血淋巴细胞CD3、CD4、CD8及CD25的表达,分析各淋巴细胞亚群情况。结果卵巢癌患者外周血CD3＋、CD4＋细胞的比例以及CD4＋／CD8＋的比值均较正常对照组显著降低,差异有统计学意义（P〈0．05）;而CD4＋CD25＋细胞的比例较对照组显著增高（P〈0．05）;化疗前不同临床分期卵巢癌患者外周血淋巴细胞亚群之间差异无统计学意义（P〉0．05）。卵巢癌患者化疗后一周上述指标无显著改变（P〉0．05）;而化疗后一个月时上述指标较化疗前显著改善（P〈0．05）;有效组患者化疗后一个月时上述指标显著优于无效组（P〈0．05）。结论卵巢癌患者外周血淋巴细胞亚群存在比例失调,动态监测其变化有助于指导治疗及对疗效和预后进行判断。     

薏苡仁提取物注射液对晚期原发性肝癌患者免疫功能影响的研究

目的：探讨薏苡仁提取物（康莱特,KLT）注射液对晚期原发性肝癌（PHC）患者免疫功能的影响。方法：用KLT治疗晚期PHC 52例为治疗组,并以常规对症处理治疗42例蛟期PHC为对照组,检测两组患者治疗前后外周血T淋巴细胞亚群（T－LS）及血清可溶性白细胞介素－2受体（sIL-2R)水平。结果：治疗组患者外周血CD3＋细胞,CD4＋细胞,CD4＋／CD8＋细胞比值治疗后较治疗前明显增高（P均＜0．05）,CD8＋细胞无显著性改变（P＞0．05）,血清sIL-2R明显降低（P＜0．05）,而对照组患者治疗后外周血CD3＋细胞,CD4＋细胞,CD4＋／CD8＋细胞比值及sIL-2R较治疗前无显著性改变（P均＞0．05）,结论：KLT对晚期PHC患者的免疫功能有一定改善作用。     

非小细胞肺癌患者外周血髓样抑制细胞比例及其对CD8＋T细胞抑制作用的测定

目的：探讨非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血中髓样抑制细胞（MDSCs）的比例及其对CD8＋T细胞的抑制作用.方法：密度梯度离心法分离30例NSCLC患者及15例健康对照者外周血单个核细胞（PBMC）,流式抗体染色后经流式细胞仪检测MDSCs中CDllb、CD14和CD33的表达;磁珠分选法分离、纯化肿瘤患者外周血中的MDSCs及健康者外周血中的CD8＋T细胞,1∶1共培养72小时,用ELISA法测定24、48、72小时细胞培养上清液的INF-γ水平.结果：30例进展期NSCLC患者外周血中MDSCs比例为（25.1±16.8）％,明显高于健康对照组（8.2±3.6）％,两者差异有统计学意义（P＜0.001）;未观察到MDSCs比例与患者年龄、性别、分期及病理类型有关（P ＞0.05）;ELISA法显示：与CD8＋T细胞单独培养组相比,MDSCs与CD8＋T细胞组共培养24、48、72小时的培养上清IFN-γ水平由（201.3±14.57） ng/ml逐渐下降为（163.33±7.77） ng/ml、（132.0±6.9） ng/ml和（79.67±7.09） ng/ml,明显降低（P＜0.05）.结论：进展期NSCLC患者外周血中MDSCs的比例较健康者明显升高,且对CD8＋T细胞有抑制作用,MDSCs增多可能是NSCLC患者发生免疫抑制的重要原因之一.     

bFGF对鼻咽癌干细胞体外培养增殖及SCF表达的影响

目的：观察不同浓度碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）对体外培养鼻咽癌（nasopharyngeal carcinaoma,NPC）干细胞增殖的影响,及干细胞因子（stem cell factor,SCF）表达的变化.方法：以免疫磁珠技术从NPC细胞株CNE2中分选CD133＋干细胞.分别以5,10,20ng/ml bFGF作用于NPC干细胞,MTT比色法和平板克隆形成实验测定CD133＋细胞的体外增殖能力.ELISA检测各组细胞分泌SCF的含量;RT-PCR及Western-blot检测细胞中SCF的表达.结果：不同浓度bFGF作用于NPC干细胞,可促进干细胞的克隆形成,当bFGF作用第7天时干细胞增殖达峰值（P＜0.05）,呈剂量依赖性;同时分泌SCF含量显著增加,SCF mRNA及蛋白表达均显著上调（P＜0.05）,且呈剂量依赖特征.结论：bFGF可促进NPC干细胞增殖,其作用机制可能与促进SCF分泌、上调SCF的表达密切相关.     

DCIK细胞联合化疗治疗晚期消化道肿瘤的临床疗效

目的：评价树突状细胞调节的细胞因子诱导的杀伤细胞（DC activated and cytokins induced killer,DCIK）联合化疗治疗晚期消化道肿瘤的疗效。方法：实验采用武警总医院2005年6月至2007年8月应用DCIK联合全身化疗治疗晚期消化道肿瘤的患者23例作为联合治疗组。同期进行单纯化疗的20例晚期消化道肿瘤患者作为对照组。联合治疗组患者均于化疗前采集外周血单个核细胞（PBMC）。将PBMC体外培养产生DCIK细胞。联合治疗组患者首先行2周期全身化疗,化疗结束后回输质量合格的DCIK细胞。单纯化疗组仅进行2周期全身化疗。观察两组近期疗效、临床受益反应改善程度、肿瘤标志物、免疫指标及1年、3年生存率。结果：两组近期疗效无显著性差异（P〉0.05）。联合治疗组治疗后KPS评分升高（P〈0.05）,单纯化疗组治疗后KPS评分较治疗前无改善（P〉0.05）。联合治疗组患者治疗后外周血CD3＋CD8＋、CD3＋CD56＋细胞的比例大幅升高（P〈0.01）;而单纯化疗组患者无明显变化（P〉0.05）。联合治疗组1年生存率78.3%;单纯化疗组1年生存率80%（P〉0.05）。联合治疗组3年生存率52.2%;单纯化疗组3年生存率30%（P〈0.01）。结论：DCIK联合化疗治疗晚期消化道肿瘤具有更好的疗效,其临床受益反应有较大的提高,免疫功能有所改善,3年生存率提高。     

川芎嗪联合三氧化二砷逆转K562/ADM细胞多药耐药的实验研究

目的探讨川芎嗪与三氧化二砷联合逆转耐药人红白血病细胞株K562/ADM多药耐药的效果。方法采用WST-8法测定细胞的药敏性及抗药性逆转,应用流式细胞术检测细胞凋亡、细胞内ADM浓度、P-gp蛋白的表达,采用免疫细胞化学二步法检测细胞GST-π表达。结果非细胞毒性浓度的TMP（20μg/ml）及As2O3（0.5μmol/L）可降低ADM对K562/ADM细胞的IC50（P〈0.05）,2种药物联合应用对ADM的逆转倍数明显高于两者单独应用（P〈0.05）,而且也高于两者单独应用之和;两者以非细胞毒性浓度联合应用提高K562/ADM细胞内ADM浓度和细胞凋亡百分率,作用大于两药单独应用,并且明显下调细胞P-gp和GST-π表达（P〈0.05,P〈0.01）。结论非细胞毒性剂量的TMP和As2O3,均可部分逆转有多药耐药表型的细胞株K562/ADM对阿霉素的耐药性,两者联合应用效果优于单独应用,具有协同作用,其机制可能与下调P-gp和GST-π表达有关。     

Tim-3分子在胃癌患者外周血NK细胞上的表达及临床意义

目的：检测Tim-3分子在胃癌荷瘤个体NK细胞上的表达,探讨Tim-3在胃癌发生发展中的作用。方法：收集2012年8月-2013年1月在苏州大学附属第一医院初治的原发性胃癌患者32例,健康体检者28例为正常对照组。流式细胞仪检测胃癌患者及正常对照组外周血NK细胞上Tim-3的表达,分析其与胃癌患者临床病理特征的关系。结果：胃癌患者外周血CD56＋NK细胞上Tim-3的表达量为（49.27±21.06）%,显著高于健康对照组（37.00±17.16）%（P〈0.05）。有淋巴结转移者 Tim-3＋CD56＋NK 细胞高表达率（55%）高于无淋巴结转移患者（0%）;有远处转移患者Tim-3＋CD56＋NK细胞高表达率（100%）显著高于无远处转移者（40.7%）,差异均有统计学意义（P〈0.05）。Ⅲ-Ⅳ期胃癌患者Tim-3＋CD56＋NK细胞高表达率较Ⅰ-Ⅱ期患者高（73.7% vs 15.4%）,差异具有显著性（ P〈0.01）。结论：Tim-3在胃癌的发生发展中发挥着一定作用,是潜在的用于评估胃癌预后的指标。     

CD4、CD8、MSI表达与散发性结直肠癌预后关系的研究

目的探讨CD4、CD8与微卫星不稳定性（MSI）表达对散发性结直肠癌（SCRC）预后判断的价值。方法对50例SCRC手术标本,采用免疫组织化学SP法检测CD4、CD8,采用PCR-SSCP法检测SCRC组织中MSI表达。结果 50例SCRC中CD4和CD8表达均较相应的癌旁正常组织强,差异有显著性（P〈0.05）。50例SCRC患者术后5年生存率为48%。按CD4和CD8表达强弱分组,CD4（＋）和CD8（＋）组术后5年累积生存率分别高于CD4（-）和CD8（-）组,但差异无显著意义（P〉0.05）。当分成CD4/8（＋/＋）[CD4/8（＋）]、CD4/8（＋/-）、CD4/8（-/＋）、CD4/8（-/-）[CD4/8（-）]四组,则CD4/8（＋）组的5年累积生存率高于CD4/8（-）,差异有显著性（P〈0.05）。经Spearman等级相关分析显示,SCRC组织中CD4/8（＋/＋）表达与MSI（＋）表达密切相关（P〈0.01）,而与MSI（-）表达无相关性（P〉0.05）。结论散发性结直肠癌组织中有CD4和CD8呈阳性表达。CD4/8（＋）表达与MSI表达有同向关系。CD4/8和MSI表达均可作为散发性直肠癌预后的辅助判断指标。     

PHA—CD3AK细胞的体外诱导及其生物学特性初步研究

目的：研究PHA—CD3AK细胞的体外诱导方法及其生物学特性,并与LAK细胞进行比较。方法：分离人外周血单个核细胞（PBMC）,采用植物血凝素（PHA）、单克隆抗体（anti—CD3McAb）和基因重组人白细胞介素2（rhIL-2）、共同诱导制备PHA—CD3AK细胞;应用流式法分析PHA—CD3AK细胞的免疫表型、乳酸脱氢酶法（LDH）检测PHA—CD3AK细胞的杀伤活性,并观察其形态;吉姆萨染色法观察其核型。结果：微量anti—CD3McAb（0．05μg／m1）辅以少量rhIL～2（300U／ml）和PHA（100μg／m1）共同培养,即能诱导和大量扩增PHA—CD3AK细胞,其扩增倍数显著高于LAK细胞,维持高扩增的时间也远较LAK细胞持久;当效靶细胞比为80：1时,PHA—CD3 AK细胞对体外肿瘤细胞（K562）杀伤的百分率为56．5％;免疫表型检测PHA—CD3 AK细胞中CD3^＋、CD4^＋、Cd8^＋细胞的比率分别为（86．5±5．89）％、（38．20±5．27）％、（42．63±3．50）％;核型为正常二倍体,染色体数目为46条。结论：PHA—CD3 AK细胞是以CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋细胞为主的异质细胞群,并具有淋巴母细胞样特征,PHA—CD3AK细胞为正常二倍体细胞。PHA—CD3AK细胞是易于体外诱导、扩增能力强,体外存活时间长、杀瘤活性高的一种具有广阔应用前景的肿瘤过继免疫效应细胞。     

醉茄素A对非小细胞肺癌A549细胞增殖、凋亡及PI3K／Akt信号通路的影响

目的 探讨醉茄素A（WFA） 对非小细胞肺癌（NSCLC）A549细胞增殖、凋亡及PI3K／Akt信号通路的影响。方法 采用0、2.5、5.0、10.0、20.0μmol／L WFA 处理A549细胞,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测上述浓度处理24、48、72和96h的细胞增殖抑制率,Hoechst染色和磷酯酰丝氨酸结合蛋白 异硫氢酸荧光素／碘化丙啶双染法（Annexin V-FITC／PI）检测各浓度组48h的细胞凋亡情况,流式细胞仪检测各浓度组48h的细胞周期分布情况,免疫印迹检测各浓度组48h凋亡相关基因（Bcl-2、Bax和Cleaved caspase-3）和PI3K／Akt信号通路重要蛋白Akt及其磷酸化形式p-Akt的蛋白水平。结果 WFA 可抑制细胞增殖,并呈剂量和时间依赖性（P＜0.05）;0、2.5、5.0、10.0、20.0μmol／L WFA作用48h后A549细胞的凋亡指数分别为2.75±0.64、4.61±1.36、9.75±2.78、12.92±3.42和18.68±4.31,组间差异有统计学意义（P＜0.05）。除2.5μmol／L外,其余浓度组的早、晚期凋亡率、凋亡促进基因（Bax和Cleaved caspase-3）水平及G0／G1期细胞比例均高于0μmol／L,凋亡抑制基因Bcl-2水平及S期和G2／M期细胞比例均低于0μmol／L（P＜0.05）; 2.5、5.0、10.0、20.0μmol／L的组间差异有统计学意义（P＜0.05）。随着浓度升高,p-Akt／Akt值呈降低趋势,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 WFA能够抑制A549细胞的增殖及凋亡,可能通过抑制PI3K／Akt通路激活实现。     

CIK、DC-CIK细胞对神经母细胞瘤细胞杀伤作用的研究

目的：研究细胞因子诱导的杀伤细胞（ CIK）与树突状细胞（ DC）共培养后对神经母细胞瘤（ neuro-blastoma,NB）细胞株的杀伤作用。方法：取健康人和肿瘤患者外周血单个核细胞（ PBMC）,加入不同的细胞因子分别诱导出DC和CIK细胞,用流式细胞术测定诱导培养前后DC和CIK细胞的表型,MTT法测定不同组CIK细胞对NB细胞株的杀伤活性。结果：流式细胞仪检测健康人PBMC培养后CD3＋CD56＋淋巴细胞百分比以及对NB细胞株的杀伤活性均显著高于肿瘤患者（ P〈0.05）。此外,与单纯CIK细胞相比,DC-CIK细胞具有更强的杀伤NB细胞株的活性（ P〈0.05）。结论：DC-CIK细胞是一种细胞毒作用高于单纯CIK细胞的免疫活性细胞。健康人和肿瘤患者的PBMC经诱导培养获得的CIK细胞有显著差别,为临床进一步提高CIK细胞的治疗效果提供了实验依据。