骨肉瘤细胞核因子κB免疫组化研究

细胞核因子ＮＦ－κＢ在肿瘤血管生成中可能具有核心调节作用,本文选择８０例有随访结果的骨肉瘤,应用免疫组化方法检测ＮＦ－κＢｐ６５亚单位以及血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ）的表达,同时观察肿瘤内微血管密度（ＭＶＤ）,旨在探讨ＮＦ－κＢ表达与骨肉瘤血管生成的关系。结果：８０例骨肉瘤中４８例ＮＦ－κＢｐ６５阳性,阳性产物主要定位于肿瘤细胞浆。ＮＦ－κＢ表达与ＶＥＧＦ表达和ＭＶＤ呈显著正相关,而且ＮＦ－κ     

大肠癌组织中细胞核因子表达与肿瘤血管生成的关系

目的 :检测细胞核因子κB(NF -κB)、VEGF在大肠癌组织中的表达并探讨其与大肠癌肿瘤血管生成的关系。方法 :应用免疫组织化学方法检测NF -κBp6 5及VEGF在 5 2例大肠癌组织及 10例正常大肠组织中的表达情况 ,同时观察肿瘤内微血管密度 (MVD)。结果 :5 2例大肠癌中 34例NF -κBp6 5阳性 ,阳性产物主要定位于肿瘤细胞浆。NF -κBp6 5表达与患者的性别、年龄、大肠癌组织学分型、淋巴结转移、Duκes’分期无关。 10例正常大肠组织中NF -κBp6 5无 1例阳性表达。NF -κBp6 5表达与VEGF、MVD表达呈显著正相关。结论 :NF -κBp6 5是一个大肠癌相关的癌蛋白 ,NF -κBp6 5对VEGF可能有正向调节作用 ,并影响大肠癌血管生成     

骨肉瘤细胞核因子кB免疫组化研究

细胞核因子ＮＦ－кＢ在肿瘤血管生成中可能具有核心调节作用,本文选择８０例有随访结果的骨肉瘤,应用免疫组化方法检测 ＮＦ－кＢ ｐ６５亚单位以及血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ）的表达,同时观察肿瘤内微血管密度（ＭＶＤ）,旨在探讨 ＮＦ－кＢ表达与骨肉瘤血管生成的关系。结果：８０例骨肉瘤中 ４８例 ＮＦ－кＢ ｐ６５阳性,阳性产物主要定位于肿瘤细胞浆。ＮＦ－кＢ表达与ＶＥＧＦ表达和ＭＶＤ呈显著正相关,而且ＮＦ－кＢ阳性组病人存活时间显著低于阴性组。该结果表明：①ＮＦ－кＢ ｐ６５是骨肉瘤相关的一种癌蛋白,在骨肉瘤的发生和发展中发挥重要的作用;②ＮＦ－кＢ对ＶＥＧＦ可能有正向调节作用,进而影响骨肉瘤血管生成;③ＮＦ－кＢ　对肿瘤血管生成的作用,可能是影响骨肉瘤预后的主要原因之一。     

Ang/Tie2系统与肿瘤血管生成的关系

促血管生成素(Ang)是近年来新发现的唯一含有受体激动剂和受体抑制剂的血管生长因子家族。Ang家族包括Ang-1、Ang-2、Ang-3和Ang-4,均作用于特异受体酪氨酸激酶受体2,参与肿瘤新生血管的形成、延续,影响肿瘤的生长、侵袭和转移。通过对它们结构、生物功能、信号转导通路及肿瘤血管生成关系的研究有助于阐明肿瘤血管新生的机制,为针对该分子的靶向治疗提供依据。     

血管新生与肿瘤生长的研究进展

肿瘤血管新生对于肿瘤的生长、转移具有重要作用。血管新生是一个由多因素参与调控的复杂过程。肿瘤内促进血管新生因子活性离子抑制血管新生因子活性，两者处于失衡状态，从而启动并促进血管新生。肿瘤血管网系乱，管腔不规则且基底膜不完整，有利于肿瘤转移。深入对肿瘤血管新生的研究有助于肿瘤临床治疗和预后。     

miR-383调控血管生成因子VEGFA的表达并抑制血管生成

目的 探讨miR-383对血管生成的影响及分子机制。 方法 通过生物信息学数据库进行预测,寻找miR-383调控的靶基因,挑选与血管生成相关的靶基因作为候选基因,采用荧光素酶报告基因检测系统进行验证。利用实时荧光定量PCR(qPCR)和Western-blot等实验证实miR-383对候选基因表达的靶向调控; 通过体外血管内皮细胞成管实验检测miR-383对血管生成的影响。 结果 生物信息学预测显示,miR-383靶向多个与血管生成相关的基因; 荧光素酶报告基因实验证实,miR-383可通过结合血管内皮生成因子(VEGFA)基因3''-非翻译区(3''-UTR)而抑制其表达; 过表达miR-383并不影响VEGFA的mRNA转录水平,而只是在蛋白水平下调VEGFA表达; 体外血管生成实验表明,miR-383所介导的VEGFA表达下调可明显抑制血管生成。 结论 miR-383可通过靶向结合VEGFA基因的3''-UTR,抑制其翻译效率而下调VEGFA的表达,并抑制内皮细胞血管生成能力。     

骨肉瘤预后相关的血管生成因子研究进展

骨肉瘤是实体性的肿瘤且血运丰富,其生长和转移都有依赖于肿瘤中血管的生成。已发现多种骨肉瘤血管生成相关的因子,其中一些血管生成因子和患者的预后及病程转归密切相关。文中就近年发现和骨肉瘤预后相关的血管生成因子：血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMP）、血小板衍生生长因子（platelet-derived growth factor,PDGF）、表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）、色素上皮衍生因子（pigment epithelium-derived factor,PEDF）、碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）做一综述。     

人骨肉瘤细胞系OS—732诱导微血管生成的解剖显微结构及超微结构观察

目的 观察人骨肉瘤细胞系OS-732诱导微血管生成的解剖显微结构及超微结构特点。方法 应用鸡胚绒毛尿囊膜模型。通过解剖显微镜，光镜及透射电镜观察该细胞系诱导生成微血管的解剖显微结构及超微结构特点。结果 OS-732细胞系具有较强的诱导血管生成能力，解剖显微镜下可见血管辐辏现象。透射电镜下可见新生血管壁由单层内皮细胞构成，内皮细胞裂隙增宽，基底膜不完整，缺乏平滑肌成分。结论 肿瘤诱导的新生血管在病理，生理及形态功能方面都具有特征性，以血管为靶点治疗骨肉瘤对改善预后可能具有重要意义。     

骨肉瘤核因子-κB、基质金属蛋白酶9、环氧合酶-2的表达及与血管生成的关系

目的:探讨核因子-κB(NF-κB)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及环氧合酶-2(COX-2)在骨肉瘤中的表达,分析三者的相关性及其与骨肉瘤组织中血管生成的关系。方法:应用免疫组织化学方法检测NF-κB、MMP-9、COX-2在52例骨肉瘤组织及40例骨软骨瘤中的表达,并采用抗CD34抗体标记微血管内皮细胞,计算微血管密度。结果:在骨肉瘤中NF-κB、MMP-9、COX-2的阳性率均高于骨软骨瘤(P0.05),且NF-κB与MMP-9、COX-2之间均呈正相关关系,三者与微血管密度值均具有相关关系。结论:NF-κB、MMP-9、COX-2在骨肉瘤中均高表达,三者可能对骨肉瘤的血管生成具有促进作用。     

胃癌组织Stathmin表达及其与血管生成关系

目的探讨微管不稳定蛋白(Stathmin)在胃癌发展过程中的作用及其对血管生成的影响。方法采用免疫组化方法检测120例胃癌组织、癌旁组织及30例非肿瘤胃黏膜组织中Stathmin和Endoglin(CD105)的表达,采用CD105标记3种组织微血管并检测微血管密度(MVD)值,分析两者与胃癌临床病理参数之间关系。结果胃癌组织Stathmin阳性表达率和MVD值明显高于癌旁组织、非肿瘤胃黏膜组织,差异有显著性(χ2=5 9.37,H=96.85,P<0.01)。两者的表达与病人性别、年龄、肿瘤直径无关(P>0.05),而与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移、临床分期有关(χ2=5.99～10.69,t=6.20～8.39,P<0.05);胃癌组织中Stathmin的表达与MVD值呈正相关(r=0.87,P<0.01)。结论高表达的Stathmin在胃癌浸润和淋巴结转移中起重要作用,并与胃癌组织中微血管生成有关,Stathmin可作为判断胃癌生物学行为的重要标记物之一。     

骨肉瘤微血管密度与血管内皮生长因子表达的关系

目的 研究骨肉瘤微血管密度（MVD）与血管内皮细胞生长因子（VEGF）的表达是否具有相关性。方法 对33例骨肉瘤组织标本应用CD34单克隆抗体标记血管内皮细胞。计数骨肉瘤MVD;用VEGF多克隆抗体检测肿瘤细胞浆中VEGF的表达情况。结果 （1）骨肉瘤MVD与VEGF表达程度呈正相关,VEGF高表达组的MVD平均值明显高于VEGF低表达组;（2）骨肉瘤中VEGF的表达和MVD与骨肉瘤组织病理分级无关。结论 VEGF是骨肉瘤血管形成的一种重要调节因子。     

Relationship between expression of cathepsin D and proliferating cell nuclear antigen and prognosis in osteosarcoma

The control of both progression and metastasis inmalignant tllmors is important for the prognosis of patients. Therefore, the mechanism by which malignantcells invade and metastasize to other tissues requiresfurther elucidation. Lots of investigations have suggested that some proteases can degrade extracellularmatrices, and thus contribute to the invasive ormetastatic activities of tumor cells. Cathepsin D(Cath-D) is an estrogen-regUlated lysosomal proteasethat may be over-expressed in breas…     

Relationship between the Expression of MTA-1 Gene and the Metastasis and Invasion in Human Osteosarcoma

Summary：To compare the expression level of metastasis associated-1 （MTA 1 ） gene in high and low metastatic： human osteosarcoma cell lines and examine the relationship of MTA 1 expression and the metastasis potentiality of osteosarcoma cells, the expression of MTA 1 in MC-63 osteosarcoma cell lines with high and low metastasis potential was detected by semiquantitative TR-PCR. Boyden chamber invasion assay was used to evaluate the invasive capacity in vitro in two osteosarcoma cell lines, The low metastasis MG-63 cells were transfected with MTA 1 full-length cDNA expression plasmid by lipofectamine and the changes of MTA 1 expression and in vitro invasion potential were examined after the transfection. Our results showed that MG63 cell line with high metastasis potential expressed significantly higher MTA 1 than that of MG63 cells with low metastasis as reavealed by RT-PCR The invasion potential of low metastasis MG63 cell line was increased after MTA 1 gene transfection. It is concluded that there may be a relationship between MTA 1 and invasive potentiality of human osteosarcoma cells, and the mechanism of MTA 1 in osteosarcoma metastasis and its possible role in associated gene therapy deserve further study.     

大肠癌中核因子-κB p65蛋白表达与细胞增殖的关系

目的 探讨核因子-κB(NF-κB)p65蛋白在大肠癌组织中表达与细胞增殖之间的关系.方法 采用免疫组织化学方法.检测32例大肠癌组织和30例癌旁组织中NF-κB p65蛋白的表达;用增殖细胞核抗原(PCNA)指数测定、分析其与NF-κB p65之间的关系.结果 NF-κB在大肠癌组织中的阳性表达率为67.8%,30例癌旁组织中无1例阳性表达,两者间阳性率比较差异有显著性(P<0.01).32例大肠癌组织PCNA指数为20.2%～78.5%,在高、中、低不同分化肿瘤组织中的表达差异有显著性,在淋巴结阳性组与阴性组之间阳性率比较,差异有显著性(P<0.01).结论 NF-κB p65蛋白与大肠癌的发生有关,NF-κB p65蛋白可能通过上调PCNA对大肠癌细胞增殖起重要作用.     

核转录因子κB与三氧化二砷耐药的关系

目的 研究核转录因子κB与急性早幼粒细胞性白血病(APL)细胞对三氧化二砷(As_2O_3)敏感性降低的关系.方法 应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法进行半数抑制浓度(IC_(50))测定以评估细胞对药物的敏感度;免疫细胞化学检测NF-κB p65的核转位;免疫组织化学染色法鉴定核转录因子KB抑制剂MG-132对耐药细胞p-gp表达的影响.结果 对照组比药物处理组的IC_(50)高6.4倍;药物处理组P-gp的表达阳性率为10.17%,对照组的p-gp的表达阳性率为30.43%,两者相比较差异显著(P<0.05).结论 用As_2O_3,治疗APL的同时可能会促进NF-κB p65的核转位和NF-KB的活化.抑制NF-κB的激活有助于增强As_2O_3,对急性早幼粒细胞性白血病细胞的杀伤效应;NF-κB抑制剂MG-132可以明显抑制As_2O_3引起的P-gp的表达以及NF-κB的活化,从而显著提高急性早幼粒细胞性白血病细胞对As_2O-3的敏感性.     

骨肉瘤iNOS过度表达与血管生成及预后的关系

目的 探讨骨肉瘤中诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）的表达及其与血管生成和预后的关系。方法 应用免疫组化方法检测８０例骨肉瘤标本ｉＮＯＳ的表达,ＦⅧ－ＲＡ和ＣＤ３１免疫组化染色显示肿瘤内微血管密度。结果 ８０例骨肉瘤中５２例ｉＮＯＳ阳性（６５％）,肿瘤细胞境质中的巨噬细胞和部分血管内皮细胞均为阳性。ｉＮＯＳ阳性表达和肿瘤内微血管密度（ＭＶＤ）显著正相关,而且ｉＮＯＳ阳性组病人生成率显著低于ｉＮＯＳ阴性     

人骨肉瘤细胞致瘤性与临床预后关系的实验研究

目的通过建立稳定的骨肉瘤体内模型,初步筛选出骨肉瘤的高致瘤性细胞群,分析骨肉瘤的致瘤性与临床患者预后的相关性。方法利用骨肉瘤患者的原代活组织检查标本及化疗后行保肢术或截肢术时所取的标本,接种裸鼠或非肥胖糖尿病/严重联合免疫缺陷(NOD/SCID)小鼠,致瘤后分离移植瘤,体内接种连续传代建立的骨肉瘤体内模型;应用流式细胞仪分析高致瘤骨肉瘤细胞表型,并对患者进行随访,统计其生存情况,了解骨肉瘤细胞的致瘤性与患者临床预后的关系。结果成功建立可稳定传代的人骨肉瘤小鼠体内模型,致瘤组预后差者占9/12,显著高于非致瘤组的3/18(P<0.01);致瘤性与患者复发、转移及死亡呈正相关(r=0.773,P=0.01)。移植瘤细胞中间充质干细胞标志CD44、CD90、CD166均呈高表达,分别为(56.1±2.0)%、(60.3±2.1)%、(61.4±4.1)%。结论高致瘤骨肉瘤患者的预后较非致瘤者差;CD44、CD90、CD166可作为临床判断骨肉瘤患者预后的指标。     

增殖细胞核抗原的表达与垂体腺瘤侵袭性关系的研究

目的 探讨增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)蛋白表达与垂体腺瘤侵袭性的关系.方法 应用免疫组化S-P法检测43例侵袭性垂体腺瘤和37例非侵袭性垂体腺瘤PCNA的表达情况.结果 PCNA在侵袭性垂体腺瘤中表达明显高于非侵袭性垂体腺瘤组(P<0 05),复发组高于非复发组(P<0 01).结论 PCNA蛋白表达异常与垂体腺瘤的发生及侵袭性有关,它的表达情况可作为垂体腺瘤侵袭性的参考指标.     

衰老心肌中热休克因子1的表达与线粒体损伤的关系

目的 探讨衰老心肌中热休克因子（heat shock factor 1,HSF1）的表达与线粒体损伤的相关性。方法 选用4月龄、24月龄的C57 BL/6小鼠作为年轻鼠和衰老鼠,运用透射电镜观察心肌组织中线粒体形态学的改变。用ATP检测试剂盒检测衰老心肌及H9C2心肌细胞中ATP的含量,利用活性氧（reactive oxygen species,ROS）检测试剂盒分析衰老心肌及H9C2心肌细胞中ROS的变化,采用JC-1染色法检测心肌细胞膜电位的改变,利用Western blotting法检测心脏组织及心肌细胞中HSF1的表达。结果 与年轻小鼠相比,衰老小鼠心肌组织中线粒体的形态异常;衰老小鼠心肌组织中ATP含量下降（1.253±0.059 vs 0.479±0.122,P=0.012）,ROS的含量上升（10.853±0.096 vs 1.550±0.233,P=0.025）;衰老小鼠心肌组织中HSF1的表达增高（0.980±0.112 vs 1.979±0.175,P=0.013）;衰老心肌中HSF1的表达与ATP的浓度呈负相关（r=-0.977,P=0.005）,与ROS的含量呈正相关（r=0.934,P=0.020）;过氧化氢（H₂O₂）刺激后H9C2心肌细胞线粒体膜电位下降,ATP含量下降,ROS的含量上升,HSF1表达升高（P<0.05）。结论 衰老的心肌中损伤的线粒体功能与HSF1的表达呈负相关。