中低压制备色谱从枳实中制备柚皮苷与新橙皮苷对照品的研究

目的 建立从枳实中分离制备柚皮苷和新橙皮苷对照品的方法。方法 结合大孔树脂、中低压制备色谱分离制备枳实中柚皮苷和新橙皮苷单体。结果 分离制备的柚皮苷的质量分数达98.76%,新橙皮苷的质量分数达99.50%。结论 该方法可有效制备高纯度的柚皮苷和新橙皮苷,可用于制备中药定性、定量分析使用的对照品。     

玳玳果黄酮提取物效应组分新橙皮苷及柚皮苷敲出分离制备

目的对玳玳果黄酮提取物主要效应组分新橙皮苷及柚皮苷进行敲出分离纯化。方法采用制备薄层色谱法结合高压制备液相色谱分离技术,以氯仿-甲醇-水（13∶6∶2）下层溶液为展开体系,碘蒸气为定位显色剂,初步敲出分离新橙皮苷及柚皮苷;再用色谱性高压制备柱Ultiamte XB-C18（10 mm×250 mm,5μm）,保护柱XB-C18（5μm）,流速3.0 mL/min,检测波长284 nm,温度为室温,进样量100μL,进一步分离纯化新橙皮苷与柚皮苷,高效液相色谱法检测其纯度。结果制备薄层色谱法敲出分离得柚皮苷及新橙皮苷纯度为69.24%和75.45%,得率分别为23.15%和26.77%;高压制备液相色谱法进一步分离得柚皮苷及新橙皮苷纯度为98.81%和98.84%,得率分别为21.73%和24.87%。结论采用制备薄层色谱结合高压制备液相色谱可从玳玳果黄酮提取物敲出分离纯度大于98%的主要效应组分新橙皮苷及柚皮苷。     

蒲黄总黄酮大孔树脂纯化工艺研究

[目的]优选分离蒲黄总黄酮的工艺条件。[方法]以总黄酮的含量为指标,分别考察以D-101大孔吸附树脂和聚酰胺树脂作为吸附剂,30%、50%、70%三种浓度的乙醇作为洗脱剂,正丁醇萃取和未萃取的前处理方法,筛选蒲黄总黄酮的纯化工艺。[结果]蒲黄醇提液经正丁醇萃取后,上大孔树脂柱,用70%乙醇作为洗脱溶剂,分离得到的总黄酮含量高于其他纯化工艺。[结论]该实验筛选的纯化工艺能有效分离蒲黄总黄酮,纯化效率较高,操作简单、重复性好,适用于蒲黄总黄酮纯化。     

黄花败酱草提取物镇静活性部位的研究

目的建立黄花败酱草各部位的分离方法,并确定黄花败酱草镇静作用的活性部位。方法黄花败酱全草先用70%的乙醇提取,得到的提取物进一步用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇依次萃取,得到极性由小到大的3个提取部位。活性筛选采用常规的镇静催眠实验,观察黄花败酱3个不同极性提取物在戊巴比妥钠协同下对小鼠睡眠时间的影响。结果 3个不同极性的提取物中,以正丁醇萃取部分的镇静作用最明显。结论黄花败酱的正丁醇萃取部分是镇静作用的主要有效部位。     

宁夏枸杞叶中的化学成分

目的研究中药宁夏枸杞叶中的化学成分。方法使用70%乙醇对宁夏枸杞叶进行提取,所得浸膏混悬后依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取。分别取乙酸乙酯层和正丁醇层,使用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、制备液相色谱及薄层色谱等色谱技术进行分离纯化,利用理化常数和核磁共振、质谱等波谱学技术对分离得到的化合物进行结构鉴定。结果从宁夏枸杞叶70%乙醇提取物乙酸乙酯萃取层和正丁醇萃取层中分离鉴定了10个化合物,分别为对甲氧基苯甲酸(1),对甲氧基肉桂酸(2),东莨菪素(3),对羟基苯甲醛(4),对羟基苯乙酮(5),(Z)-2-亚乙基-3-甲基丁二酸(6),槲皮素(7),腺苷(8),东莨菪苷(9),芦丁(10)。结论化合物1,2,4,6,8为首次从枸杞属植物中分离得到,化合物3,5,9为首次从宁夏枸杞叶中分离得到。     

RP-HPLC法测定枳壳药材中柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷

目的 建立用RP-HPLC对枳壳中柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷同时定量的方法,并对不同产地枳壳药材进行考察。方法 高效液相色谱法,色谱柱为Waters Sunfire columns C₁₈(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸(19∶81);检测波长283 nm;柱温为30 ℃;进样量为10 μL。同时测定了枳壳中柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷的量。结果 柚皮苷在0.147～2.944 μg线性关系良好(r=0.999 9)、橙皮苷在0.050～1.006 μg线性关系良好(r=0.999 9)、新橙皮苷在0.065～1.309 μg线性关系良好(r=0.999 9)。平均回收率柚皮苷为103.31%,RSD为1.45%;橙皮苷为103.13%,RSD为1.96%;新橙皮苷为97.42%,RSD为2.49%。结论 本方法测定了3个不同产地、不同批号枳壳样品中3种化学成分的量,该方法分离度好,快速,简便,重现性好。     

不同产地枳壳中柚皮苷和新橙皮苷的测定

目的 测定不同产地枳壳中柚皮苷和新橙皮苷的量,研究不同产地枳壳的质量差异。方法 采用高效液相色谱法测定,色谱条件为Kromasil C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈-水（20∶80）（用磷酸调节pH值为3）;体积流量1.0 mL/min;柱温30 ℃;检测波长283 nm。结果 朱栾枳壳未检出柚皮苷和新橙皮苷成分;江枳壳、川枳壳、湘枳壳和常山胡柚均检出柚皮苷和新橙皮苷成分;陕西枳壳未检出新橙皮苷。江枳壳含7.5%柚皮苷、5.6%新橙皮皮苷,量均为最高。结论 朱栾枳壳与其他产地枳壳的成分有差异,不含有《中国药典》2010年版规定的柚皮苷和新橙皮苷成分。     

衢枳壳及其近缘种中4种黄酮苷类成分含量测定与相关性分析

摘要：目的 检测衢枳壳、成熟胡柚及其近缘种瓯柑中四种黄酮苷类成分的含量,并分析其与生境因子的相关性。方法 收集衢枳壳、成熟胡柚及其近缘种瓯柑的新鲜样品,建立高效液相色谱HPLC法同时检测样品中新橙皮苷、橙皮苷、柚皮苷与芸香柚皮苷的含量,并考察其与经纬度、海拔之间的相关性,用 SPSS 与EXCEL 2010软件处理数据,组间比较采用ANOVA单因素方差分析。结果 新橙皮苷、橙皮苷、柚皮苷与芸香柚皮苷在1.0~100 μg/mL范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为99.51 %、98.15 %、100.35 %与100.63 %;衢枳壳中芸香柚皮苷、柚皮苷的含量显著高于有籽瓯柑、无籽瓯柑与胡柚,分别达7.1651±0.071 mg/g与26.9576±0.2737 mg/g,瓯柑中新橙皮苷、橙皮苷的含量显著高于衢枳壳与胡柚（*P<0.05）;芸香柚皮苷、柚皮苷含量与纬度、海拔呈显著正相关关系,与经度呈显著负相关关系;橙皮苷、新橙皮苷含量与纬度、海拔呈显著负相关关系,与经度呈显著正相关关系。结论 该方法准确、快速、简便,可用于衢枳壳药材质量控制及其近缘种中黄酮苷类成分的含量测定。     

离心分配色谱法对达乌里芯芭中毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷的分离纯化

目的:建立一种分离纯化达乌里芯芭中毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷的方法.方法:以70％ 乙醇加热回流提取达乌里芯芭全草,依次采用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取后,经高效液相色谱法确认毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷主要存在于正丁醇部位.采用离心分配色谱法,以乙酸乙酯:正丁醇:水(4:1:5)为溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,流速为3 mL/min,转速为1500 r/min,降相模式运行,对正丁醇部位中的毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷进行分离.结论:离心分配色谱法可以高效、快速地分离纯化达乌里芯芭中的毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷.     

虎杖中白藜芦醇的纯化工艺研究

目的:研究虎杖中白藜芦醇的纯化工艺条件及参数,得到高纯度的白藜芦醇。方法:采用萃取和硅胶柱层析相结合的方法,得到高纯度的白藜芦醇。结果:原药液白藜芦醇的纯度为5.86%,得率为1.77%;经过萃取后白藜芦醇的纯度为61.00%,得率为1.61%;萃取后的样品采用硅胶柱层析纯化后白藜芦醇的纯度为98.38%,得率为1.17%。结论:采用萃取和硅胶柱层析相结合的方法,得到了高纯度的白藜芦醇。     

高效液相色谱法对枳实提取物中黄酮类药效组分的定量分析

目的:建立同时对枳实提取物中柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷和枸橘苷进行定量分析的HPLC方法。方法:采用BDS液相色谱柱(5μm,4.6mm×250mm),流速1mL/min,检测波长283nm,流动相条件为乙腈和0.05%磷酸水梯度洗脱系统。0～5min为乙腈:0.05%磷酸水(19:81);5～45min之间乙腈由19%等度梯度上升至40%。结果:柚皮苷在0.03200～0.07466μg(r=0.9995),橙皮苷在0.00095～0.00475μg(r=0.9994),新橙皮苷在0.04888～1.4664μg(r=0.9993),枸橘苷在0.01700～0.34900μg(r=0.9999)之间线性关系良好;精密度和重现性试验中待测的各黄酮类组分RSD值均小于2%;稳定性试验中样品在32h内各黄酮类组分RSD值均小于3%;柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷和枸橘苷的加样回收率结果分别为100.51%(RSD=2.90%,n=5)、99.86%(RSD=2.79%,n=5)、102.83%(RSD=2.17%,n=5)、98.86%(RSD=1.97%,n=5)。结论:检测方法稳定,精密度、重现性和回收率好,可作为控制枳实提取物质量的依据之一。     

中药枳壳提取物对大鼠不同肠段平滑肌运动功能的影响

【目的】观察枳壳提取物对大鼠十二指肠、空肠、回肠及结肠不同肠段平滑肌收缩功能的影响。【方法】采用离体肠平滑肌实验方法,利用BL-410生物机能分析仪记录给药前后大鼠各肠段平滑肌的收缩幅度和频率,探讨不同浓度枳壳提取物对各肠段收缩的影响。【结果】随着枳壳提取物浓度的不断增加,对正常大鼠十二指肠、空肠、回肠及结肠平滑肌的自发性收缩表现出显著的抑制作用,并能够拮抗乙酰胆碱所致的平滑肌收缩功能的亢进,使阿托品所致平滑肌的舒张作用进一步增强。而枳壳提取物对十二指肠、空肠、回肠及结肠4个肠段平滑肌的舒张作用的强度不同,其中对回肠的作用最强。【结论】枳壳提取物对大鼠离体肠平滑肌的舒张作用强弱表现为回肠>空肠>结肠>十二指肠。     

0.2μm无机陶瓷膜微滤枳实、陈皮水提液理化参数与通量变化关系的研究

目的 通过考察无机陶瓷膜微滤对不同中药水提液物理化学性质的影响，探索中药水提液复杂体系在无机陶瓷膜分离过程中的规律。方法 测定膜分离前后枳实、陈皮2味药材水提液的pH、浊度、电导率、粒径分布等指标。结果 枳实、陈皮水提液在膜分离前后的pH、浊度、粘度、电导率及粒径分布等方面表现出不同的特征。结论 枳实、陈皮水提液的理化性质与其通量衰减变化在一定程度上表现出相关性。     

枳壳活性成分对人神经母细胞瘤株SH-SY5Y生长的影响

目的：探讨枳壳醇提有效部位及其所含部分单体成分对人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y生长的影响。方法：将细胞分为不同给药组,给以枳壳醇提有效部位及其所含的川陈皮素、红橘素、伞形酮和葡萄内酯不同浓度的试药,以四甲基偶氮唑盐（MTT）法测定细胞的活力,分析药物对SH-SY5Y细胞生长的作用。结果：红橘素和伞形酮在实验浓度下对SH-SY5Y细胞生长无显著性影响;枳壳醇提有效部位、川陈皮素和葡萄内酯在实验浓度下对SH-SY5Y细胞生长有显著性影响,且呈浓度效应关系。结论：枳壳醇提有效部位、葡萄内酯和川陈皮素对神经细胞生长有保护作用。     

不同产地枳实药材柚皮苷含量分析

目的：测定不同产地枳实中柚皮苷的含量.方法：采用高效液相色谱法对不同产地枳实中柚皮苷进行含量测定,流动相为乙腈-0.3％磷酸（20∶ 80） （V/V）,色谱柱Agilent Zobax Eclipse XDB 18（4.6 mm×250 mm,5μm）,流速1.0 mL/min,柱温25℃,检测波长为283nm.结果：柚皮苷在481.20～ 2887.20 ng范围内呈良好线性关系（r=0.99993）,平均回收率98.16％,RSD为1.82％;不同产地枳实中柚皮苷含量存在差异,以四川泸州产地的含量最高.结论：枳实药材的品质与产地有关,所建立的方法操作简便、结果准确可靠,完善了现行版《中国药典》枳实的质量标准.     

响应面分析法优选枳壳黄酮的提取工艺

目的:采用 Box-Behnken 实验设计优化枳壳总黄酮的超声辅助提取工艺。方法:以枳壳为原料,总黄 酮提取率为指标,利用单因素实验和 Box-Behnken 实验设计对乙醇浓度、提取时间及料液比进行优化。结果: 该实验确立的最佳工艺为乙醇浓度 14%,超声提取时间 27 min,料液比 1∶44,验证最优工艺,结果枳壳总黄酮 提取率为 18.81 mg·g-1,与模型预测值接近,表明该模型可信。结论:采用超声辅助提取枳壳中总黄酮具有提取 时间短、提取率高等优点,该研究可为枳壳的进一步研究奠定基础。     

维吾尔药核桃分心木不同提取物对肾阳虚模型小鼠的实验研究

目的探讨维吾尔药核桃分心木对肾阳虚小鼠模型作用的有效溶剂部位。方法以大剂量氢化可的松造成小鼠肾阳虚模型后,分别以分心木不同溶剂提取部位高、中、低剂量组给予干预,观察小鼠体质量增长率、各相关脏器系数等指标变化以及下丘脑、肾脏的病理组织学变化。结果 (1)肾阳虚组小鼠出现大剂量皮质激素所致的全身耗竭现象,分心木乙醇提取物、正丁醇提取物以及水提取物组小鼠的全身耗竭现象出现不同程度的改善;(2)在小鼠体质量变化和脏器系数方面,各提取部位组与空白组、肾阳虚组比较均在不同程度上表现出改善作用;(3)正丁醇高剂量组、95%乙醇低剂量组降低肾小球毛细血管通透性,对毛细血管扩张起到拮抗作用;95%乙醇低剂量组、水煎液中剂量组改善肾小管上皮细胞水肿现象;正丁醇高中低剂量组、水煎液高中剂量组对胶质细胞水肿表现出改善作用。结论核桃分心木95%乙醇提取物、正丁醇提取物以及水提取物各剂量组均不同程度地改善了小鼠模型肾阳虚症状。     

枳实破壁粉粒对小肠推进及急性毒性作用的研究

目的探讨枳实破壁粉粒对小鼠小肠推进作用的影响及对小鼠的急性毒性作用。方法通过考察小鼠小肠炭末推进率,评价枳实破壁粉粒对小肠的推进作用;采用最大给药量法观察枳实破壁粉粒的毒性。结果临床等效剂量的枳实破壁粉粒对小鼠小肠推进有显著的促进作用,1/2临床等效的破壁粉粒对小鼠小肠的推进作用相当于常规饮片临床等效剂量的效果;未见枳实破壁粉粒对小鼠的急性毒性反应。结论枳实破壁粉粒具有促进小肠推进作用且无急性毒性作用。     

内标多控法测定枳实中黄酮类成分及其不确定度评定研究

目的 建立HPLC内标多控法测定枳实药材中黄酮类成分的方法,并对测定结果进行不确定度评定。方法 以柚皮苷为内标,建立柚皮苷与橙皮苷、新橙皮苷的相对校正因子,计算枳实中黄酮类成分的含量,再根据数学模型,对测定过程中引入的不确定度进行评估,由此计算测定结果不确定度。结果 采用本方法测定枳实中柚皮苷与橙皮苷、新橙皮苷含量的扩展不确定度分别为W×2.94%、W×3.49%、W×3.34%。结论 建立的不确定度评定法可为内标多控法测定中药有效成分的不确定度分析提供参考。     

中药对比格犬慢性实验模型胃肠动力的影响

【目的】观察大腹皮、番泻叶、草果、砂仁、白术、枳壳、枳实等7种中药及乙酸龙脑酯、辛弗林等2种中药活性物质对比格犬慢性实验模型胃肠动力的影响。【方法】应用6只比格犬制备慢性实验模型,在全部犬的胃窦、十二指肠、空肠、回肠和结肠浆膜植入应力传感器,安装胃瘘供中药汤剂灌服,安装颈外静脉置管供静脉给药。造模后,每天观察比格犬空腹状态下胃肠运动特点,连续7 d。造模后第7天开始,记录给药前空腹状态下胃肠运动,作为基础对照,到消化间期移行性复合运动(MMC)I相,依次记录大腹皮、番泻叶、草果、砂仁、白术、枳壳、枳实(均经胃瘘给予煎剂200 m L),生理盐水(给予等体积灌胃),乙酸龙脑酯(为枳实、枳壳的主要活性物质,静脉输注),辛弗林(为砂仁活性物质,静脉输注)作用下的胃肠运动。全部犬1 d只观察1种药物,每种药物重复观察2次。通过植入的应力传感器记录清醒犬胃肠运动,观察MMC周期、收缩波频率、收缩波总数、收缩波振幅、平均振幅、动力指数(MI)。【结果】术后1~6 d,比格犬胃肠动力低下,未出现MMC周期。至术后第7天,在空腹状态下消化间期,胃窦、十二指肠、空肠和回肠均出现典型MMC周期,而结肠出现不规则MMC周期。与给药前及生理盐水组比较,大腹皮、乙酸龙脑酯干预后胃窦、十二指肠、空肠、回肠和结肠收缩波数及MI均升高,番泻叶、草果干预后十二指肠、空肠、回肠和结肠收缩波数及MI升高,砂仁干预后胃窦、十二指肠收缩波数及MI升高(均P0.05)。枳壳干预后空肠MI降低,枳实干预后空肠、结肠MI降低,辛弗林干预后胃窦收缩波数和胃窦、空肠MI降低(均P0.05)。【结论】应用比格犬慢性实验模型可有效进行胃肠动力中药筛选。大腹皮、番泻叶、草果、砂仁和乙酸龙脑酯可增强胃肠运动;枳实、枳壳和辛弗林可抑制胃肠运动;白术则对胃肠运动无影响。