银杏叶提取物EGb 761对失神经骨骼肌Na+-K+-ATP酶活性的影响

目的观察银杏叶提取物(ginkgo biloba extract,EGb 761)对失神经肌肉Na+-K+-ATP酶活性的影响.方法选用SD大鼠16只,按术后注射药物的不同随机分为银杏叶提取物组(实验组)和生理盐水组(对照组).显露左侧坐骨神经,切断并切除0.5 cm神经段.分别将神经远、近端反折后结扎.术后两组分别经腹腔注射EGb 761(100 mg/kg-1*d-1)和同体积的生理盐水.术后6周取左侧小腿三头肌,测定其Na+-K+-ATP酶活性.结果实验组失神经肌肉Na+-K+-ATP酶的活性优于对照组,两者差异有显著性意义(t= 2.51,P < 0.05).结论银杏叶提取物能改善大鼠失神经骨骼肌Na+-K+-ATP酶的活性,表明其对失神经肌萎缩有一定的保护作用.     

丙泊酚预处理对大鼠心肌缺血-再灌注损伤心肌细胞膜ATP酶活性的影响

目的 研究丙泊酚预处理对大鼠心肌缺血-再灌注损伤心肌细胞膜ATP酶活性及心肌组织形态学的影响.方法 40只雄性SD大鼠随机分成五组,每组8只:对照组(C组),缺血-再灌注组(IR组),丙泊酚1组(P1组),丙泊酚2组(P2组),丙泊酚3组(P3组).各组于再灌注60 min后立即取左室心尖部心肌,检测心肌匀浆中心肌细胞膜Na+-K+-ATP、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性;光镜下观察心肌组织形态学变化.结果 IR时心肌细胞膜Na+-K+-ATP、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性与C组相比明显下降(P<0.01);O1、P2、P3组心肌细胞膜Na+-K+-ATP、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性与IR组相比明显升高,但仍低于C组(P<0.05).结论 丙泊酚可以减轻大鼠心肌缺血-再灌注损伤,其机制可能与恢复心肌细胞膜Na+-K+-ATP、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性有关.     

七氟醚后处理对大鼠心肌缺血再灌注时Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性的影响

目的 评价七氟醚后处理对大鼠心肌缺血再灌注时Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性的影响,探讨其减轻心肌缺血再灌注损伤的机制.方法 健康雄性Wistar大鼠45只,体重250～280 g,随机分为3组(n=15):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)和七氟醚后处理组(Spo组).I/R组和Spo组采用结扎左冠状动脉前降支30 min时进行再灌注的方法制备心肌缺血再灌注模型,S组仅在左冠状动脉前降支下穿线.Spo组再灌注前1 min开始吸入2.5%七氟醚持续5 min.于再灌注2 h时取心肌组织,测定心肌梗死体积、Na+-K+-ATP酶活性和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性.结果 与S组比较,I/R组心肌梗死体积扩大,心肌组织Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性降低(P＜0.05);与I/R组比较,Spo组心肌梗死体积缩小,心肌组织Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性升高(P＜0.05).结论七氟醚后处理可提高Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性,从而减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤.     

烫伤及内毒素/脂多糖对豚鼠胃肠动力的影响

目的探讨烫伤及内毒素/脂多糖(LPS)对豚鼠胃肠动力障碍发生的机制。方法将30只健康豚鼠随机分为烫伤组(造成30%TBSA深Ⅱ度烫伤)、LPS组(腹腔注射LPS)及对照组(腹腔注射等渗盐水),每组10只。3组豚鼠处理后30min予碳素墨水灌胃,然后测定其胃肠道碳素墨水推进距离;并取肠道组织匀浆检测其降钙素基因相关肽(CGRP)、Na -K -腺苷三磷酸(ATP)酶、Mg2 -ATP酶、Ca2 -ATP酶、Ca2 -Mg2 -ATP酶活性及结肠袋平滑肌细胞线粒体膜电位(△ψm).结果烫伤组及LPS组豚鼠肠道碳素墨水推进距离[(53±9)、(91±10)cm]较对照组[(142±11)cm]明显缩短(P<0·01);烫伤组与LPS组比较,肠道推进距离更短(P<0·01).烫伤组及LPS组豚鼠肠道组织中CGRP的含量为(52.0±39.0)、(20.0±23.0)μg/L,均高于对照组(0.8±2.0)μg/L(P<0.05或0·01)。而烫伤组与LPS组比较,其增高幅度更大(P<0.05).烫伤组、LPS组大鼠Na -K -ATP酶、Mg2 -ATP酶、Ca2 -ATP酶、Ca2 -Mg2 -ATP酶活性和线粒体膜电位与对照组比较呈不同程度降低(P<0·05),但烫伤组与LPS组各种ATP酶和线粒体膜电位改变程度比较,差异无统计学意义(P>0·05).结论烫伤及LPS对豚鼠肠道动力功能有明显抑制作用,尤以烫伤明显;重度烫伤时,引起肠道平滑肌细胞线粒体膜电位改变的主要因素可能是肠道LPS.     

七氟醚麻醉对大鼠脑ATP酶的动态影响

目的 观察七氟醚吸入麻醉不同时期大鼠各脑区Na~ 、K~ -ATP酶和Ca~(2 )-ATP酶活性动态变化规律,以了解脑ATP酶活性变化在七氟醚麻醉效应中的地位。方法 40只SD大鼠随机均分为对照组、诱导期组、麻醉期组、恢复期组和清醒期组。分光光度法测定不同时期大脑皮质、脑干、海马Na~ 、K~ -ATP酶和Ca~(2 )-ATP酶活性变化。结果 与对照组比较,大鼠大脑皮质、脑干、海马Na~ 、K~ -ATP酶活性在诱导期分别降低21.9％、10.5％、19.3％(P<0.05),麻醉期分别降低37.2％、33.5％、38.9％(P均<0.01),恢复期又开始回升,但仍低于对照组水平(P<0.05或P<0.01),而清醒期基本恢复至对照组水平(P>0.05);大脑皮质、脑干、海马Ca~(2 )-ATP酶活性在诱导期分别降低34.3％、44.3％、25.5％(P<0.05 or P<0.01),麻醉期分别降低39.6％、60.4％、57.6％(P均<0.01),恢复期开始回升,清醒期基本恢复至对照组水平(P>0.05)。结论七氟醚对大鼠大脑皮质、脑干、海马Na~ 、K~ -ATP酶和Ca~(2 )-ATP酶活性的抑制程度与麻醉时相相对应,ATP酶活性与麻醉深度具有相同的变化趋势,表明上述脑区ATP酶可能是七氟醚的作用靶点,与七氟醚的麻醉效应有关。     

内侧视前区毁损对异丙酚及氯胺酮麻醉作用的影响

目的 观察毁损前下丘脑的内侧视前区(mPOA)对静脉麻醉药异丙酚、氯胺酮诱发大鼠翻正反射消失潜伏期(RL)、恢复时间(RT)的影响,探讨mPOA在异丙酚、氯胺酮麻醉作用机制中的地位。方法 24只SD大鼠,随机分为两组,每组12只,即mPOA微量注射NS组(NS组),甲基天冬氨酸(NMDA)毁损组(NMDA-des组);7 d后再将其各分为两个亚组,即NS+异丙酚组,NS+氯胺酮组,NMDA-des+异丙酚组,NMDA-des+氯胺酮组。微量注射NMDA(5μg/0.2μl)毁损大鼠mPOA后,观察大鼠行为学和体重的变化;7 d后分别腹腔注射异丙酚(100mg·kg-1)和氯胺酮(100mg·kg-1),观察对大鼠翻正反射消失潜伏期和恢复时间的影响。结果 mPOA微量注射NS组大鼠行为学及体重无明显变化,NMDA毁损组与NS组比较体重显著减轻(P<0.01);腹腔注射异丙酚或氯胺酮后,毁损组大鼠RL较NS组均显著延长(P<0.01),RT显著缩短(P<0.01,P<0.05)。结论 mPOA可能参与了对异丙酚、氯胺酮麻醉作用的调节。     

严重烧伤大鼠胃粘膜血流量和Na^＋—K^＋—ATP酶活性的改变及对胃粘膜电位差的影响

目的观察大鼠严重烧伤后胃粘膜血流量(GMBF)和Na+-K+-ATP酶活性的变化,探讨其对胃粘膜电位差(GTPD)的影响. 方法制作烧伤大鼠模型,分别采用激光多普勒微循环血流计、电生理记录仪和生化法,检测大鼠伤前及伤后3、6、12、24、48 h时GMBF、GTPD和胃粘膜Na+-K+-ATP酶活性的改变;另设正常大鼠为对照组,于相同时相点检测以上指标.随后对各指标进行相关性分析. 结果与对照组比较,大鼠烧伤后3 ～24 h GMBF与Na+-K+-ATP酶活性均明显降低(P<0.05～0.01),GTPD于伤后6～48 h明显下降(P<0.05～0.01),3项指标均于12 h时降至最低.相关性分析结果显示Na+-K+-ATP酶活性随GMBF的降低而下降(r=0.417,P<0.01);GMBF的减少或Na+-K+-ATP酶活性的降低,均可引起GTPD降低(r=0.453或0.527,P<0.01). 结论大鼠严重烧伤后,GMBF减少,Na+-K+-ATP酶活性降低,二者均为引起胃粘膜屏障功能受损的主要原因.     

缺血预处理减轻大鼠供肝冷保存损伤的作用及其机制

目的 研究缺血预处理对大鼠冷保存供肝细胞质膜胆固醇含量和Na+ K+ -ATP酶活性的影响,以探讨缺血预处理减轻大鼠供肝冷保存损伤的可能机制.方法 将25只SD大鼠随机分为对照组、冷保存组、缺血预处理组、30和100μmol/L阿托伐他汀处理组(A30组和A100组),共5组,每组5只.分别测定5组大鼠肝细胞质膜胆固醇含量、磷脂含量及Na+ -K+ -ATP酶活性.结果 对照组、冷保存组、缺血预处理组、A30组及A1 00组大鼠肝组织细胞质膜的胆固醇含量分别为(310.4±27.5)、(187.7±13.1)、(394.3±25.9)、(201.8±14.6)和(122.6±7.7)nmol/mg蛋白,Na+-K+-ATP酶的活性分别为(46.55±3.20)、(27.4±2.81)、(52.71±3.02)、(30.67±2.78)和(19.64±2.11) μmol Pi·mg蛋白-1·h-1,5组间细胞质膜胆固醇含量及Na+ K+ -ATP酶的活性的两两比较,差异均有统计学意义(P＜0.05)；而5组间细胞质膜磷脂含量的两两比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 肝细胞质膜胆固醇含量和Na -K+-ATP酶活性下降是造成供肝冷保存损伤的因素之一,而缺血预处理可以明显改善细胞质膜Na+-K+ ATP酶的活性,并升高细胞质膜胆固醇含量.使用阿托伐他汀能够降低细胞质膜胆固醇的合成,使Na+ -K+ -ATP酶的活性明显下降,从而减轻供肝的冷保存损伤.     

大黄附子汤对重症急性胰腺炎肠黏膜上皮细胞线粒体超微结构和离子泵的影响

目的 观察大黄附子汤(DHFZT)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肠黏膜上皮细胞(IEC)线粒体离子泵Na+-K+-三磷酸腺苷(ATP)酶和Ca2-ATP酶以及超微结构的影响.方法 72只SD大鼠,随机分成3组:对照组、SAP组(模型组)及治疗组,每组再按1、3、6、12h分为4个亚组(n=6).经胰胆管注入5％牛磺胆酸钠(4 ml/kg)建立SAP模型.造模后0、4、8h对照组和模型组用0.9％ NaCl,治疗组用DHFZT保留灌肠(1ml/100 g).测定血清肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)、二胺氧化酶(DAO)及IEC线粒体Na+-K+-ATP酶、Ca2-ATP酶水平;电镜、光镜观察胰腺、小肠结构变化.结果 经DHFZT治疗后,治疗组大鼠较模型组IEC线粒体Na+-K+-ATP酶[μmol Pi/mg(protein,h),1 h:6.35±0.49比6.24 ±0.46,3 h:7.01±0.57比5.45±0.39,6 h:6.57 ±0.58比4.81±0.32,P＜0.05;12 h:5.98 ±0.39比4.24±0.29,P＜0.01]、Ca2+-ATP酶[μmol Pi/mg (protein·h),3 h:5.25±0.46比4.46±0.39,P＜0.05;6 h:4.68±0.41比3.49±0.30,12 h:4.85 ±0.35比3.26±0.28,P＜0.01]均增高,线粒体结构损伤显著减轻,血清iFABP和DAO显著降低[iFABP(μmol/L):6 h:74.67±8.57比132.46±16.43,12 h:121.48±14.35比243.43±35.91,P＜0.01;DAO(g/L):3 h:100.03±16.99比178.43±26.38,P＜ 0.05;6 h:135.58±20.86比258.32±36.31,12 h:172.55±22.53比288.49±40.29,P＜0.01].结论 DHFZT通过升高SAP时IEC线粒体离子泵Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性,维护IEC及其线粒体超微结构,降低血清iFABP、DAO水平.     

氯胺酮对大鼠脑内cAMP含量的影响

目的 动态观察氯胺酮对大鼠不同脑区3′5′－环腺苷酸（cAMP)含量的影响。方法 SD大鼠32只,随机分为对照组、麻醉组、恢复I组和恢复Ⅱ组。对照组腹腔注射（ip)生理盐水10ml/kg,其余各组均为ip氯胺酮100mg/kg,对照组在注射生理盐水后5分钟断头取材,麻醉组、恢复I组和恢复Ⅱ组分别在翻正反射消失后、翻正反射恢复后和动物完全清醒后断头取材。用蛋白竞争法分别测定大脑皮层、海马和脑干的cAMP含量。结果 大鼠ip氯胺酮100mg/kg明显增加大脑皮层cAMP含量,翻正反向恢复后比翻正反向消失时增加的幅度更大（P＜0．05或P＜0．01）,动物完全清醒后cAMP含量恢复（与对照组相比,P＞0．05）;对海马cAMP含量无明显影响;在脑干则表现为恢复Ⅱ组cAMP含量明显升高（P＜0．05）,而麻醉组和恢复I组无变化（P＞0．05）。结论 cAMP信号转导系统在氯胺酮全麻机理中可能发挥重要作用。     

热处理对回收血中肿瘤株细胞的杀伤作用和对红细胞Na+-K+-ATP酶活性的影响

目的探讨不同温度热处理对回收血中肿瘤细胞的杀伤作用和对红细胞Na^＋-K^＋-ATP酶活性的影响。方法将培养好的SGC-170胃癌细胞株和LOVO大肠癌细胞株分别加入浓缩红细胞中，采用水浴法加温处理。根据加温温度不同分为5组：37℃组、42℃组、43℃组、45℃组、47℃组，加热时间均为40min。采用密度梯度离心法分离肿瘤细胞，台盼蓝染色计数存活肿瘤细胞；测定肿瘤细胞的克隆形成、DNABrdUrd标记情况，测定红细胞膜Na^＋-K^＋-ATP酶活性。结果与37℃组比较，42℃-47℃组存活肿瘤细胞数均减少，肿瘤细胞克隆形成率减少，肿瘤细胞DNA BrdUrd标记率降低，43℃-47℃组红细胞膜Na^＋-K^＋-ATP酶活性降低（P〈0．01），42℃组红细胞膜Na^＋-K^＋-ATP酶活性差异无统计学意义（P〉0．05）。结论42～47℃温度加热40min不能完全杀灭肿瘤细胞，43—47℃温度加热40min对红细胞膜Na^＋-K^＋-ATP酶活性还有明显抑制作用。     

颈椎病与红细胞膜Na~＋、K~＋─ATP酶活性关系研究

为了从分子水平了解颈椎病发病与红细胞膜Ｎａ￣＋、Ｋ￣＋─ＡＴＰ酶活性的关系，采用改良后的微量测定法对４３例健康成人和３０例颈椎病患者进行了该酶测定，结果发现，正常人酶活性为２７．３±１２．１ｕ，而颈椎病患者则为３２．３±１５．１ｕ，较正常人升高了２６％，差异有显著性，（Ｐ＜０．０５）。我们认为这可能是机体整体代偿调节的一部分，并推测可能有中枢机制的参与。     

Changes of proton transportation across the inner mitochondrial membrane and H~+-ATPase in endotoxic shock rats

Protonelectrochemicalgradient (ΔμH+)intheinnermitochondrialmembrane (IMM )isthepowertosynthesizeATP .TransmembraneprotontranslocationisthebasistoformΔμH+.Thereisapaucityofliteratureconcerningthetransmembraneprotontranslocationinendotoxicshock .ThisstudyistoelucidatethechangesandmechanismofthetransmembraneprotontranslocationandH+ ATPaseactivityofthehepatocytemitochondriainendotoxicshock .METHODSEightyhealthyadultWistarratsweighing 2 5 0g± 5 0g ,eithersex ,weredividedrandomlyintobas…     

严重烧伤大鼠胃粘膜血流量和Na~+-K~+-ATP酶活性的改变及对胃粘膜电位差的影响

目的　观察大鼠严重烧伤后胃粘膜血流量 (GMBF)和Na+ K+ ATP酶活性的变化 ,探讨其对胃粘膜电位差 (GTPD)的影响。　方法　制作烧伤大鼠模型 ,分别采用激光多普勒微循环血流计、电生理记录仪和生化法 ,检测大鼠伤前及伤后 3、6、12、2 4、4 8h时GMBF、GTPD和胃粘膜Na+ K+ ATP酶活性的改变 ;另设正常大鼠为对照组 ,于相同时相点检测以上指标。随后对各指标进行相关性分析。　结果　与对照组比较 ,大鼠烧伤后 3～ 2 4hGMBF与Na+ K+ ATP酶活性均明显降低 (P <0 .0 5～ 0 .0 1) ,GTPD于伤后 6～ 4 8h明显下降 (P <0 .0 5～ 0 .0 1) ,3项指标均于 12h时降至最低。相关性分析结果显示 :Na+ K+ ATP酶活性随GMBF的降低而下降 (r =0 .4 17,P <0 .0 1) ;GMBF的减少或Na+ K+ ATP酶活性的降低 ,均可引起GTPD降低 (r =0 .4 5 3或 0 .5 2 7,P <0 .0 1)。　结论　大鼠严重烧伤后 ,GMBF减少 ,Na+ K+ ATP酶活性降低 ,二者均为引起胃粘膜屏障功能受损的主要原因     

Removal of Inhibitors of Brain Na+, K+-ATPase by Hemoperfusion in Fulminant Hepatic Failure

Serum from patients with fulminant hepatic failure inhibits rat brain Na+, K+-ATPase activity in vitro. The effect of hemoperfusion on the level of inhibition was investigated with both resin and charcoal columns in clinical use. In the patient perfusions, the mean inhibitory activity of serum fell from 34.7 +/- 1.6 (SE) to 20.9 +/- 1.5% compared with pooled control serum when a resin column was used for the first time and from 26.9 +/- 2.2 to 20.4 +/- 1.7% with charcoal hemoperfusion, a statistically significant (p less than 0.01) removal in both groups. Column chromatography on Sephadex G-25 of material eluted from the resin column post-hemoperfusion and of serum ultrafiltrates before and after in vitro adsorption with charcoal showed considerable overlap in the profile of the substances removed, but with some peaks removed by only one adsorbent. Combinations of resin and charcoal in one hemoperfusion should remove a wider range of potentially toxic substances.     

A comparison of Ca2+-, Mg2+-ATPase and alkaline phosphatase activities of rat incisor pulp

Summary A plasma membrane preparation derived from incisor pulps of 250-g rats was used as the source of alkaline phosphatase and an ATPase activated by either Ca²⁺ or Mg²⁺. Properties of the two enzymes were then compared under a variety of experimental conditions to determine if ATPase activity is clearly distinct from alkaline phosphatase activity. (a) The optimum pH for ATP hydrolysis was 8.0, compared with 10.2 forp-nitrophenylphosphate. (b) At the optimum pH, ATP hydrolysis required either Ca²⁺ or Mg²⁺ for activation, whereasp-nitrophenylphosphate hydrolysis did not require and was little influenced by the presence of divalent cations. (c) Alkaline phosphatase showed maximal activity at 40°C and ATPase at 50°C, with complete inactivation at 60°C and 70°C, respectively. (d) When the plasma membrane preparation was preincubated in the absence of substrate at varying temperatures of pH, alkaline phosphatase was less stable than ATPase at extreme pH and high temperatures. (e) Alkaline phosphatase activity was lost more rapidly than ATPase activity during storage at 4°C for up to 10 days. (f) Butanol extraction of the plasma membrane preparation to remove phospholipid destroyed ATPase activity and enhanced alkaline phosphatase activity approximately fivefold. On the basis of these comparisons it is concluded that ATP hydrolysis andp-nitrophenyl-phosphate hydrolysis are the result of separate enzyme activities.     

严重腹腔感染时大鼠胃黏膜血流量和Na+-K+-ATP酶活性变化对胃黏膜电位差的影响

目的探讨严重腹腔感染状态下大鼠胃黏膜血流量和Na+-K+-ATP酶活性变化对胃黏膜电位差的影响. 方法利用大鼠盲肠结扎穿孔造成腹腔严重感染动物模型,应用激光多普勒微循环血流计和电生理记录仪检测穿孔前和穿孔后3、6、12、24、48 h 胃黏膜血流量和胃黏膜电位差变化;应用生化法测定各时相大鼠胃黏膜Na+-K+-ATP酶活性. 结果胃黏膜血流量(mV)在盲肠穿孔后3 h (43.7±2.8)与对照组(57.9±2.7)相比明显降低(P<0.05),12 h(31.9±2.6)降至最低(P<0.01),24 h(44.7±2.7)开始回升,48 h(52.9±2.8)仍低于对照组.Na+-K+-ATP酶活性(nmol pi/min/mg蛋白)在盲肠穿孔后3 h(113±14)较对照组(153±12)显著降低(P<0.05),12 h(92±10)降至最低(P<0.01),仅为对照组(153±124)的48.5%,48 h(128±13)仍未恢复正常.胃黏膜电位差(mV)在盲肠穿孔后 6 h(15.2±1.4)较对照组(23.1±1.6)显著下降(P<0.05),12 h(11.6±1.4)降至最低(P<0.01),24 h(17.0±1.5)仍显著低于对照组[(22.6±1.6),P<0.05],48 h(18.9±1.5)显著低于对照组[(22.4±1.5),P<0.05]. 结论严重腹腔感染状态下胃黏膜血流量减少和Na+-K+-ATP酶活性降低是引起大鼠胃黏膜屏障功能受损的主要原因.