含人胚胎骨髓基质细胞层体系对脐血造血干/祖细胞的扩增效果

目的 研究含人胚胎骨髓基质细胞层体系对脐血造血干／祖细胞的扩增效果。方法 分别建立人胚胎骨髓基质细胞层和成人骨髓基质细胞层,观察他们单独及其与造血生长因子联合,在不同时间对脐血ＣＤ＾＋３４细胞,ＣＤ＾＋３４ＣＤ＾－３８细胞,粒单系祖细胞,多向祖细胞,早期红系祖细胞的扩增作用。结果 （１）人胚胎骨髓基质细胞单独作用及其与ＨＧＦｓ「包括脐血浆,干细胞因子（ＳＣＦ）,ＩＬ－３,ＩＬ－６,白细胞介素１β（     

二、脐血CD34~+细胞体外扩增的研究

二、脐血ＣＤ３４~＋细胞体外扩增的研究隋星卫，张洪泉，沈柏均山东医科大学附属医院新生儿脐血富含造血干、祖细胞，是一种可移植利用的造血细胞源。而各种重组造血调节因子（细胞因子）的问世，为脐血造血细胞的体外扩增创造了条件。本研究利用甲基纤维素半固体培养体?..     

FLt-3配基和促血小板生成素对脐血造血祖细胞的协同扩增作用

目的 探讨体外同时扩增粒／巨噬细胞系祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ）、巨核细胞系祖细胞（ＣＦＵ－ＭＫ）的最佳细胞因子组合。方法 利用免疫磁珠法分离经脐血ＣＤ３４细胞,在液体２体系中经干细胞因子（ＳＣＦ）白细胞介素（ＩＬ）－３、ＩＬ－６、粒系集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）、ＦＬｔ－３配基、促血小板生成素等不同细胞组合扩增１４ｄ,检测瓣微增倍数。结果 ＴＰＯ可协同ＳＣＦ、ＩＬ－３、ＩＬ－６、Ｇ－ＣＳＦ对ＣＦＵ－ＧＭ     

造血干细胞LTC—IC的研究进展

长期培养起始细胞是应用细胞外长期增减技术发现的一群早期未成熟的造血干细胞。本文综述了在体外增减时ＬＴＣ－ＩＣ与基底层细胞因子的关系、培养前筛选及提纯ＣＤ３４＾＋造血干细胞和提高ＬＴＣ－ＩＣ体外扩增能力的关系。     

恶性肿瘤患儿动员后外周血中CD34^＋造血干细胞中LTC—IC的研究

对１０例恶性肿瘤患儿动员后外周血中ＣＤ３４造血干细胞中的长期培养起细胞（ＬＴＣ－ＩＣ）进行研究，结果提示，恶性肿瘤患儿动员后的外周血中含有足够丰富的ＬＴＣ－ＩＣ，约１５０～３００ｍｌ的外周血可就可含３００００个左右的ＬＴＣ－ＩＣ，１０例患儿病例和病种之间无明显差异，在ＬＴＣ－ＩＣ培养中，６种细胞因子在ＬＴＣ－ＩＣ的集落形成起了重要的作用，不同的细胞因子所产生的作用各有不同，在ＩＬ－３，造血干细胞刺     

造血干细胞LTC-IC的研究进展

长期培养起始细胞（ＬＴＣ－ＩＣ）是应用细胞外长期培养技术发现的一群早期未成熟的造血干细胞。本文综述了在体外培养时ＬＴＣ－ＩＣ与基底层细胞因子的关系、培养前筛选及提纯ＣＤ３４＋造血干细胞和提高ＬＴＣ－ＩＣ体外扩增能力的关系；临床上概述了ＬＴＣ－ＣＩ在造血干细胞移植时的作用、在慢性粒细胞性白血病（慢粒）诊疗上的应用和化疗药物对其影响，以及通过造血干细胞的基因转化达到治疗免疫缺陷的目的。     

三种重组人细胞因子对急性粒细胞白血病和非白血病骨髓细胞增殖的影响

应用重组人粒单细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭＣＳＦ）、白细胞介素３（ｒｈＩＬ－３）和白细胞介素６（ｒｈＩＬ－６）作为刺激因子，通过集落形成和细胞周期动力学变化，观察急性粒细胞白血病和非白血病骨髓细胞增殖影响，以及它们之间的关系。结果表明：ｒｈＩＬ－３促成ＣＦＵ－ＧＭ形成率高于ｒｈＧＭ－ＣＳＦ和ｒｈＩＬ－６的作用，ＩＬ－３＋ＩＬ－６配伍时ＣＦＵ－ＧＭ产率大于任何一种因子单独应用组和其它两因子配伍组；ｒｈＩＬ－６与ｒｈＧＭＣＳＦ或ｒｈＩＬ－６与ｒｈＩＬ－３配伍在非白血病骨髓和白血病骨髓动力学方面影响不一致。在集落形成和动力学之间存在一定关系。     

HGFs联合对体外人脐血造血干细胞及SCID小鼠体内扩增作用的研究

本实验应用外源性重组人多种造血生长因子（ｒｈＨＧＦｓ）处理人ＨＳＣ／ＳＣＩＤ小鼠模型，以体外半固体培养法及ＦＣＡＳ检测ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－ＧＥＭＭ及ＣＤ３４＾＋细胞，从而评价ＨＧＦｓ对受鼠体内人造血干细胞的扩增作用。结果：人脐血及骨髓ＭＮＣ经孵育２４小时后ＣＤ３４＾＋细胞含量，ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－ＧＥＭＭ产率皆得到明显扩增（Ｐ〈０．０１）；且脐血组优于骨髓组（Ｐ〈０．０１）。输脐血ＭＮＣ＋ＨＧ     

三种不同来源的CD+34细胞中的长期培养起始细胞含量的研究

目的 研究三种不同来源的长期培养起始细胞（ＬＴＣ－ＩＣ）是否存在含量区别。方法 应用ｄｅｘｔｅｒ方法，在６种细胞因子刺激下，对正常骨髓、动员后的外周血以及脐带血的ＣＤ３４＾＋细胞中的ＬＴＣ－ＩＣ进行评价。结果 ＣＤ３４＾＋细胞中的ＬＴＣ－ＩＣ含量以脐带血为最高，与外周血和骨髓相比差异有显著意义（Ｐ〈０．０１）。但将每毫升标本中所含的ＬＴＣ－ＩＣ绝对值相比，由于脐带血中单个核细胞（ＭＮＣ）和ＣＤ３４     

三种重组人细胞因子对急性粒细胞白血病和非白血病骨髓细胞增殖的影响

应用重组人粒单细胞集落刺激因子（ｒｈ ＧＭＣＳＦ）、白细胞介素３（ｒｈＩＬ－３）和白细胞介素６（ｒｈＩＬ－６）作为刺激因子，通过集落形成和细胞周期动力学变化，观察急性粒细胞白血病和非白血病骨髓细胞增殖影响，以及它们之间的关系。结果表明：ｒｈＩＬ－３促成ＣＦＵ－ＧＭ形成率高于ｒｈＧＭ－ＣＳＦ和ｒｈＩＬ－６的作用，ＩＬ－３＋ＩＬ－６配伍时ＣＦＵ－ＧＭ产率大于任何一种因子单独应用组和其它两因子配伍组；ｒ     

问：脐血中造血细胞有何特点？

问：脐血中造血细胞有何特点？答：１９７４年Ｋｎｕｄｔｚｏｎ等首先报告人类脐血中粒－巨噬细胞系集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）产率远较成人血多。此后，人们对脐血造血细胞进行了较多研究，发现：（１）脐血中存在骨髓所含有的所有造血干／祖细胞，如高增殖潜能集落形...     

造血因子对被化疗药物抑制的骨髓造血功能的影响

将２５例正常骨髓标本，经阿糖胞苷（Ａｒａ－ｃ）和柔红霉素（ＤＮＲ）抑制后，再以不同方式给予造血生长因子（ＨＧＦ），即重组人粒一单细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）和白细胞介素３（ｒｈＩＬ一３）。观察其对骨髓造血功能恢复的影响。结果表明，用ＨＧＦ组骨髓集落形成数量高于不用ＨＧＦ组；在使用化疗药物前后均用ＨＧＦ，骨髓造血功能的恢复能力比仅在化疗药物后用好。提示ＨＧＦ对被细胞毒药物抑制的正常骨髓造血功能有明显的促进作用。     

脐血造血调节因子活性的研究

探讨脐血中造血调节因子含量，来源及其与造血细胞间间的关系。方法：双抗夹心酶联免疫肿附（ＥＬＩＳＡ）法和细胞因子依赖细胞株增殖反应ＭＴＴ法测定脐血和脐血细胞培养上清中颗粒细胞集落刺激因了（Ｇ－ＣＳＦ）、颗粒－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）、白细胞介素－６（ＩＬ－６）和肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦα），并观察脐血造血调节因子与脐血（ＣＦＵ－ＧＭ、ＭＮＣ、ＷＢＣ相关关系。结果：正向造血调节因子Ｇ－ＣＳ     

人脐血间充质干细胞对脐血CD+34细胞体外扩增作用的研究

目的 探讨含人脐血来源的间充质干细胞(MSCs)体系在体外对脐血造血干细胞(HSCs)扩增作用。方法 (1)用含人脐血MSCs及不同造血生长因子(HGFs)组合的无血清扩增体系对人脐血CD34^ 细胞进行体外扩增。(2)于扩增前及扩增后第6、12天分别用双色流式细胞仪动态检测HSCs表面抗原标记：CD34^ 、CD34^ CD38^-、CD34^ CD3^ 、CD34^ CD19^ 、CD34^ 和CD34^ CD41^ 。细胞的含量。(3)按本实验室方法行体外半固体培养,观察扩增前后脐血细胞粒-单核细胞集落形成单位(CFU-GM)、爆式红系集落形成单位(BFU-E)、混合集落形成单位(CFU-Mix)及高增殖集落形成单位(CFU-HPP)集落形成情况。结果(1)含人脐血MSCs体系对脐血CD34^ CD38^ 细胞的扩增倍数在第6天和第12大分别为159和437倍。该业群百分比在单纯因子组扩增第12天时为1．98％,而在含脐血MSCs组为9．98%,明显高于扩增前。(2)集落培养表明,含脐血MSCs组扩增第12天与扩增第6天相比,其CFU-Mix和CFU-HPP的扩增倍数增加,而单纯因子组这两种集落的扩增倍数下降。(3)随扩增天数的增加,两组扩增体系中CD34^ CD3^ 和CD34^ CD41a^ 细胞均明显增加,而CD34^ CD19^ 和CD34^ CD3^ 细胞均明显减少。两组相比,含脐血MSCs组差异更显著。结论 (1)含脐血MSCs体系不仅能扩增更原始的造血干／祖细胞(HSPC),且具有在短期内(12d)保持HSCs不耗竭。(2)含脐血MSCs体系对脐血CD34^ 细胞向定向祖细胞的扩增,主要为髓系及巨核系祖细胞,而对其向淋巴系祖细胞的扩增具有抑制作用。     

rhG—CSF抑制剂血CD3AK细胞和其培养上清液诱导K562细胞凋亡 …

目的 探讨重组粒细胞集落刺激因子（ｒｈＧ－ＣＳＦ,Ｇ－ＣＳＦ）对脐血ＣＤ３ＡＫ细胞及其培养上清液诱导Ｋ５６２细胞凋亡的影响。方法 用细胞形态学观察,ＤＮＡ琼脂糖电泳,原位末端标记法对Ｋ５６２;ＣＤ３ＡＫ细胞诱导的Ｋ５６２;ＣＤ３ＡＫ细胞与大小剂量的Ｇ－ＣＳＦ共同诱导的Ｋ５６２;ＣＤ３ＡＫ细胞培养上清液（ｃｕｌｔｕｒａｌ ｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔｓ,ＣＳ）诱导的Ｋ５６２;ＣＳ与大小剂量的Ｇ－ＣＳＦ共同     

儿童肿瘤强烈化疗联用rhG-CSF动员外周血造血干细胞

观察了７例（２例非何杰金ｉ淋巴瘤Ⅲ期、３例急淋、１例急粒及１例神经母细胞瘤Ⅳ期）儿童恶性肿瘤病人接受强烈化疗联用ｒｈＧ－ＣＳＦ后，外周血干细胞（Ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｂｌｏｏｄｓｔｅｍｃｅｌｌ，ＰＢＳＣ）动员上升情况。ＰＢＳＣ上升的最明显特点是与外周血白细胞总数上升的幡度平行；ＷＢＣ的上升幅度与患儿骨髓是否受肿瘤细胞侵犯有关。本文显示ＣＤ３４＋细胞与粒单细胞集落形成单位（ＧＭ－ＣＦＵ）有较好的相关关系（ｒ＝０．８７，Ｐ＜０．００１），提示ＣＤ３４＋细胞可以预测ＰＢＳＣ开始单采的时机。     

脐血输注后再生障碍性贫血、白血病患者造血祖细胞体外培养及血浆造血刺激活性变化

为探讨脐血输注的疗效机理，评价脐血输注的实用价值，我们用新鲜脐血静脉输注（ＵＣＢＴ），治疗慢性再生障碍性贫血（ＣＡＡ）１０例和急性白血病（ＡＬ）８例，观察ＵＣＢＴ前后患者粒单细胞系集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）、红系爆式集落形成单位（ＢＦＵ－Ｅ）、集落刺激活性（ＣＳＡ）、爆式集落刺激活性（ＢＰＡ）及外周血象变化。结果提示：ＵＣＢＴ后①可迅速升高ＣＦＵ－ＧＭ和ＢＦＵ－Ｅ；②可改善外周血象，尤其是ＷＢＣ、及ＡＮＣ和Ｈｂ；③可使病理性增高的ＣＳＡ、ＢＰＡ降至正常。结果提示可能系脐血中的祖细胞和造血因子刺激病人骨髓，并使造血功能得到改善。在某些病理情况下ＣＳＡ和ＢＰＡ的增高是机体的一种生物代偿反应，ＵＣＢＴ使病理增高的ＣＳＡ和ＢＰＡ显著下降并趋于正常可能是通过反馈调节作用而使细胞因子水平下降。     

儿童肿瘤强烈化疗联用rhG—CSF动员外周血造血干细胞

观察了７例（２例非何杰金ｉ淋巴瘤Ⅲ期、３例急淋、１例急粒及１例神经母细胞瘤Ⅳ期）儿童恶性肿瘤病人接受强烈化疗联用ｒｈＧ－ＣＳＦ后，外周血干细胞（ＰＢＳＣ）动员上升情况。ＰＢＳＣ上升的最明显特点是与外周血白细胞总数上升的幡度平行；ＷＢＣ的上升幅度与患儿骨髓是否受肿瘤细胞侵犯有关。本文显示ＣＤ３４＾＋细胞与粒单细胞集落形成单位（ＧＭ－ＣＦＵ）有较好的相关关系（ｒ＝０．８７，Ｐ〈０．００１），提示ＣＤ３     

应用细胞生长因子提高再生障碍性贫血患者造血干细胞质量的研究

为探讨再障发病机制中各种造血生长因子（ＨＧＦｓ）对其造血干细胞的影响,了解各种ＨＧＦｓ对造血干细胞生长、增殖的具体作用及相互间的协同作用,采用甲基纤维素半固体体外短期培养及长期液体培养的方法,观察ＨＧＦｓ如粒一巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ—ＣＳＦ）、粒细胞集落刺激因子（Ｇ—ＣＳＦ）、白细胞介素－３（ＩＬ—３）、ＩＬ—６、干细胞因子（ＳＣＦ）、促红细胞生成素（Ｅｐｏ）以及ＨＧＦｓ不同组合方式对再障患者骨髓造血干细胞增殖、分化的调控作用。发现再障患者的克隆形成细胞（ＣＦＣ）形成巨噬细胞粒细胞集落形成单位（ＣＦＵ—ＧＭ）和红系爆发式集落形成单位（ＢＦＵ—Ｅ）的能力受限,但大部分患者（１０／１２）骨髓中长期培养起始细胞（ＬＴＣ—ＩＣ）接近正常,提示再障的造血干细胞可能在分化成熟过程中受到阻碍所致。此外,各种ＨＧＦｓ均有不同程度的提高造血干细胞形成集落的能力,且不同ＨＧＦｓ之间对再障患者ＣＦＣ形成ＣＦＵ—ＧＭ、ＢＦＵ—Ｅ的能力同样具有协同作用,其中以ＳＣＦ、ＩＬ—３和ＣＭ—ＣＳＦ的联合应用更为显著（Ｐ＜０．００１）。     

脐血造血干细胞的体外扩增

脐血（ＣＢ）已经成为一个重要的干细胞来源,以其采集方便、干细胞含量丰．富、移植物抗宿主病发生率低受到欢迎。但因ＣＢ中有核细胞、 ＣＤ３４＋细胞绝对数较低,所以不能广泛应用于成人及体重较重的患者。将ＣＢ的造血干细胞体外诱导扩增可以解决ＣＢ量不足的问题。本文就ＣＢ造血干细胞体外扩增的条件、扩增后造血重建能力检测及其临床应用做一综述。