白色念珠菌的生长曲线和世代时间测定

白色念珠菌是引起临床上深部真菌感染常见的病原菌,80％以上AIDS患者受真菌尤其是白念珠菌感染比较常见,深部真菌感染已成为许多疾病的主要死亡原因之一。测定白色念珠菌的生长曲线对了解其生长规律从而选择合适的药物有非常重要的作用。本研究用比浊法和活菌计数法测定白色念珠菌的生长曲线和世代时间,并探讨了两种方法的优缺点。     

白色念珠菌的菌落形态分型法

白色念珠菌的菌落形态分型法＊温旺荣１吴定昌２王德春３陈红１戴庚孙１关键词白色念珠菌，分型；菌落形态分型＊：福建省教委三项费资助项目（Ｋ９３０４２）１．福建医科大学临床微生物学教研室（福州３５０００４）２．福建省龙岩地区第一医院检验科３．南京军区福州总...     

乳酸杆菌对抑制阴道白色念珠菌感染的实验研究

乳酸杆菌作为阴道微生态优势菌,在降低阴道pH值,维持阴道清洁度,保持阴道微生态平衡,具有重要的生理作用[1]。已有报道乳酸杆菌对阴道多种微生物有拮抗作用,乳酸杆菌数量下降是某些阴道感染的发病因素。本研究采用体外白色念珠菌感染模型进行实验观察,以探讨乳酸杆菌能否对阴道念珠菌感染起到抑制作用。1　材料与方法1.1　菌液与阴道上皮细胞置备1.1.1　乳酸杆菌悬液:取妇科门诊就诊者阴道分泌物,经培养生物鉴定后,用比浊法调整细菌浓度为105个CFu/L,部分乳酸杆菌灭活后亦调整细菌浓度为105个CFu/L。1.1.2　白色念珠菌悬液:取妇科门诊阴…     

白色念珠菌感染现状与实验诊断进展

白色念珠菌（Candida albicans)是人体口腔、咽喉、肠道、阴道粘膜的正常菌群,也是重要的条件致病菌,可引起皮肤感染、指甲感染虚弱患者严重的全身感染等,随着皮质类固醇、免疫抑制剂和抗生素的广泛应用,念珠菌感染的发病率呈不断上升趋势,在免疫抑制患者中念珠菌的发病率列居第一位,白色念珠菌为主要致病菌,已引起国内外医学真菌学界的重视。本文就白色念珠菌的感染现状及实验诊断进展综述如下。     

IgY联合乳酸杆菌防治阴道白色念珠菌感染的实验研究

目的:观察特异性抗白色念珠菌IgY和乳酸杆菌的体内外生物学效应,探讨将二者复合应用的可能性。方法:分离人阴道上皮细胞,用抗白色念珠菌IgY和乳酸杆菌对阴道上皮细胞预处理后进行白色念珠菌黏附抑制试验;建立小鼠白色念珠菌性阴道炎模型,通过阴道局部给抗白色念珠菌IgY和乳酸杆菌来观察其疗效。结果:抗白色念珠菌IgY和乳酸杆菌均能抑制白色念珠菌黏附阴道上皮细胞,并能减少白色念珠菌在小鼠阴道内的定植和减轻小鼠阴道局部的炎症反应。结论:特异性抗白色念珠菌IgY具有良好的体内外生物学效应且优于单独使用乳酸杆菌,二者复合应用效果最佳。     

乳酸杆菌对系统性白色念珠菌感染小鼠保护作用的实验研究

目的:探讨乳酸杆菌对系统性白色念珠菌感染的免疫抑制小鼠保护作用的机理。方法:建立系统性白色念珠菌感染小鼠模型,随机分为生理盐水对照组,低剂量、中剂量、高剂量组。造模后24h分别给予4组小鼠腹腔注射生理盐水,1×108、1×109、1×1010/ml乳酸杆菌悬液0.2ml/d×10。ELISA法检测小鼠血清IFN-γ、IL-12水平,MTT法测小鼠脾脏T淋巴细胞增殖活性,计算小鼠肾负荷真菌数。结果:中、高剂量组小鼠血清IFN-γ、IL-12水平与生理盐水对照组、低剂量组差异明显(P<0.05),中、高剂量组小鼠脾脏T淋巴细胞增殖活性与生理盐水对照组、低剂量组差异明显(P<0.05),中、高剂量组小鼠肾负荷真菌数与生理盐水对照组、低剂量组差异明显(P<0.05)。结论:乳酸杆菌可通过增强系统性白色念珠菌感染小鼠细胞免疫功能对其发挥保护作用,且保护作用与乳酸杆菌的剂量有关。     

耐药白色念珠菌弥散性感染小鼠模型的建立

目的为新药筛选建立耐药白色念珠菌弥散性感染小鼠模型。方法对免疫抑制ICR小鼠静脉注射临床耐氟康唑白色念珠菌CaR,通过临床症状、生存情况、组织载菌量、组织病理、细胞因子分析以及药物治疗等方法对模型评价。结果 CaR感染小鼠在接种后第1天出现死亡,相比临床药敏菌株Ca S感染组,16 d观察期内动物死亡率无显著性差异(CaR,90.7%;Ca S,86.2%,P=0.158),但观察早期CaR组死亡比Ca S组快。感染第4天,不同组织均可检测到念珠菌,并发现与Ca S组相比,肾、脑组织载菌量具有显著性差异。真菌引起的典型肉芽肿样是肾、脑、心的主要组织病理学特征。利用流式细胞仪检测肾组织细胞因子,IL-1α、IL-6、TNF-α、IFN-γ等细胞因子变化显著,与Ca S组比较,IL-1α和IFN-γ显著升高,TNF-α显著下降。CaR和Ca S感染小鼠给予10 mg/kg氟康唑治疗,死亡率分别为83.3%、37.5%,具有显著性差异。结论本研究成功建立了耐药白色念珠菌弥散性感染小鼠模型,有望成为抗感染新药研发的重要工具。     

白念珠菌和新生隐球菌系统感染裸小鼠模型的建立

目的建立白念珠菌和新生隐球菌系统感染裸小鼠模型。方法采用对裸小鼠腹部注射白念珠菌及隐球菌菌悬液的方法,观察记录1～2d内裸小鼠的毒性反应情况和死亡分布,并进行病理检查。根据寇氏法设计测定半数致死量(LD50),并检测感染前后脾脏自然杀伤(NK)细胞活性的变化。结果分别观察白念珠菌和新生隐球菌菌悬液对裸小鼠的急性毒性;检测到裸小鼠腹腔注射白念珠菌菌悬液的LD50为1.6×107cfu/ml,注射新生隐球菌菌悬液的LD50为2.0×107cfu/ml。白念珠菌、新生隐球菌感染裸小鼠时,脾脏组织NK细胞的活性下降。结论建立了白念珠菌和新生隐球菌系统感染裸小鼠模型,为讨论在T细胞为主的细胞免疫缺失的情况下,以B细胞NK细胞为主的体液免疫系统如何应对白念珠菌和新生隐球菌感染提供了一个极好的实验动物模型。     

建立兔浅层白色念珠菌性角膜炎模型

目的　建立浅层真菌性角膜炎兔动物模型。方法　应用角膜表层镜片术 ,向角膜层间注入真菌 ,建立模型 ,并进行病理研究。结果　成功建立浅层真菌性角膜炎的兔动物模型。病理染色显示真菌的生长特点。结论　应用角膜表层镜片术可以成功建立浅层真菌性角膜炎的兔动物模型。     

白念珠菌生物膜形成不同时期对氟康唑的敏感性

目的研究白念珠菌生物膜生长动力学特征，其不同时期对氟康唑敏感性的差异及经氟康唑预处理的生物材料表面对生物膜形成的影响。方法采用96孔微量培养皿进行白念珠菌生物膜的培养，用MTT法检测生物膜不同时期的活性及对氟康唑的敏感性。结果白念珠菌生物膜形成早期（8h）生长较快，当成熟生物膜形成后，生物膜活性则维持在一个较高的代谢水平，不再增加；早期（2h）的生物膜对氟康唑MIC50为2～4μg／m｜，中晚期（12～72h）生物膜MIC50均〉128μg／ml。与对照组比较，低浓度氟康唑（0．5～8μg／ml）处理的生物材料上生物膜活性差异无显著性意义（P〉0．05），高浓度氟康唑（32～64μg／ml）处理的生物材料差异有显著性意义（P〈0．05）。结论早期生物膜对氟康唑敏感性较高，中晚期则产生明显耐药。经抗菌性处理的生物材料对预防生物膜的形成有一定作用。     

抗白色念珠菌鸡卵黄抗体(IgY)的研制

目的：观察鸡蛋黄中抗体的产量、纯度、来源及稳定性。方法：应用白色念珠菌作为抗原免疫25周龄Leghorn鸡，通过改良水溶法（WD）提取蛋黄中抗体IgY，双紫外光测定抗体含量，SDS-APGE电泳检测抗体纯度，Western blot免疫印迹法测定该抗体来源，ELISA检测热处理后的抗体活性。结果：抗体含量13mg/ml蛋黄液，抗体纯度达到95%，Western blot免疫印迹证明该抗体与鸡血清中的IgG具有相同的分子量和抗原性。ELISA检测热处理后的抗体活性，其具有良好的热稳定性。结论：鸡蛋黄内含有丰富的抗体，通过WD水溶提取法可得到高产量，高纯度的特异性抗体IgY，证明其来源于鸡血清中的IgG，对热具有高度稳定性。     

口腔扁平苔藓与白色念珠菌感染关联性的Meta分析

目的：采用Meta分析方法评价口腔扁平苔藓（OLP）与白色念珠菌感染的关联性,为OLP的抗真菌治疗提供依据。方法：计算机检索PubMed数据库、EMBase数据库、Medline数据库、Cochrane图书馆、中国知网数据库（CNKI）、中文科技期刊数据库（VIP）和万方数字化期刊库,检索从建库至2016年12月30日所有相关文献。由2位研究者按照纳入和排除标准筛选文献、提取资料并评价质量后,采用RevMan 5.3及Stata12.0软件进行Meta分析,计算优势比（OR）和95%可信区间（95% CI）以评价关联性,采用漏斗图及Egger's法评估文献的发表偏倚。结果：本组共纳入13篇病例对照研究,其中OLP患者1073例,正常对照者766名。OLP患者白色念珠菌检出率明显高出对照组（OR_合并=2.30,95% CI：1.60~3.31,P < 0.01）。其中7篇研究对OLP患者进行临床分型,糜烂型OLP（E-OLP）患者白色念珠菌感染风险明显升高（OR=10.12,95% CI：4.05~25.28,P < 0.01）。结论：OLP与白色念珠菌感染有关,这一关联性在EA-OLP患者中尤为明显。     

口腔扁平苔藓患者白色念珠菌分离株的基因型分析

目的 研究健康人和口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)患者口腔白色念珠菌分离株的基因型分布特征．方法 应用随机扩增片段多态性分析法(randomly amplified polymorphic DNA,RAPD),对来自于健康人(26株)、糜烂型OLP患者(62株)以及非糜烂型OLP患者(24株)共112株白色念珠菌菌株做基因型分型,比较OLP患者与健康对照组白色念珠菌分离株的基因型分布差异．结果 本研究采用的RAPD分析法可大致将所有白色念珠菌分离株分为A、B、C、D四种基因型;健康对照组、糜烂型OLP和非糜烂型OLP患者组的白色念珠菌分离株的基因型构成具有差异,其中,健康对照组以B、D型为主,糜烂型OLP患者组以A、C型为主,非糜烂型OLP患者组以A、D型为主。结论 某些具有特定基因型的白色念珠菌与OLP的发生发展可能相关。     

血清磷酸丙酮酸水合酶检测对诊断侵袭性白念珠菌感染的临床价值

目的 通过对侵袭性白念珠菌感染时磷酸丙酮酸水合酶血清水平检测,评价磷酸丙酮酸水合酶抗原在诊断中的价值。方法 选择40例患者,其中确诊、临床拟诊、浅表定植白念珠菌患者分别为18、12、10例作为实验组,同时选择健康体检人员10例作为阴性对照组,留取血标本。采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法测定血清中磷酸丙酮酸水合酶的OD值,通过标准曲线反应出待测血清中抗原含量。结果 确诊组和临床诊断组血清磷酸丙酮酸水合酶的平均浓度与后两组差异显著;用ELISA检测血清磷酸丙酮酸水合酶的浓度,以0.35μg/mL诊断阈值的敏感性、特异性分别为77%、100%。结论 侵袭性白念珠菌感染时血清磷酸丙酮酸水合酶水平明显高于定植组和健康组,提示血清磷酸丙酮酸水合酶抗原检测可作为侵袭性白念珠菌感染的诊断指标,以0.35μg/mL为诊断阈值对诊断侵袭性白念珠菌感染的敏感性、特异性较为理想。     

15种中草药对小鼠吞噬细胞吞噬白假丝酵母菌的影响

目的：探讨黄芩等中草药50%乙醇提取物对小鼠中性粒细胞吞噬白假丝酵母菌的影响.方法：采用BALB/c小鼠体内吞噬实验法,设立对照组与试验组,对比观察实验组与对照组小鼠中性粒细胞对白假丝酵母菌的吞噬百分数及吞噬指数.结果：（1）吞噬百分数均值及P值：黄芩85.1%、P〈0.01,牡丹皮87.6%、P〈0.01,羌活51.7%、P〈0.05,大黄53.8%、P〈0.05,千里光66.3%、P〈0.05;（2）吞噬指数均值及P值：黄芩2.09、P〈0.05,牡丹皮1.523、P〈0.05;（3）知母、五蓓子、大蒜、茵陈、白花蛇舌草、黄精、补骨脂、金银花、桑枝、海金沙吞噬百分数及吞噬指数的P值均大于0.05.结论：黄芩、牡丹皮、羌活、大黄、千里光具有增强中性粒细胞对白假丝酵母菌的吞噬作用,知母、五蓓子、大蒜、茵陈、白花蛇舌草、黄精、补骨脂、金银花、、桑枝、海金沙对中性粒细胞吞噬作用无明显影响.     

小鼠腹腔吞噬细胞对二相性白念珠菌的吞噬研究

目的 :探讨腹腔吞噬细胞对二相性白念珠菌的吞噬作用。方法 :分别用小鼠腹腔中性粒细胞 (PMN)、巨噬细胞 (MФ)对二相性白念珠菌进行吞噬 ,计算吞噬率、吞噬指数。结果 :PMN对孢子相白念珠菌的吞噬率、吞噬指数分别为 1 6 1± 4 93、0 1 8± 0 0 5 ,对菌丝相白念珠菌的吞噬率、吞噬指数分别为 1 0 5± 3 2 8、0 1 1± 0 0 3,PMN对孢子相白念珠菌的吞噬作用强于对菌丝相白念珠菌的吞噬作用 (P <0 0 0 1 ) ;MФ对孢子相白念珠菌的吞噬率、吞噬指数分别为 2 9 8± 6 98、0 34± 0 0 7,对菌丝相白念珠菌的吞噬率、吞噬指数分别为 2 1 2± 5 38、0 2 3±0 0 6 ,MФ对孢子相白念珠菌的吞噬作用强于对菌丝相白念珠菌的吞噬作用 (P <0 0 0 1 )。结论 :中性粒细胞、巨噬细胞对孢子相白念珠菌的吞噬能力强于对菌丝相白念珠菌的吞噬能力     

黄根醇提物体外抗白念珠菌生物膜作用的研究

目的观察黄根醇提取物体外对白色念珠菌生物膜及相关基因的影响。方法 M27-A2测定黄根醇提取物对白色念珠菌的最小抑菌浓度(MIC);XTT法评价黄根醇提取物对白色念珠菌生物膜形成的影响;实时荧光定量RT-PCR(q RT-PCR)检测黄根醇提取物作用后,ALS基因的表达情况。结果黄根醇提取物对白色念珠菌的MIC为8μg/m L;随着浓度的增加,黄根醇提取物对白色念珠菌生物膜的抑制作用增强,呈正相关性;16μg/m L黄根醇提取物对不同生长阶段的白色念珠菌生物膜均有抑制作用,抑制率随生物膜成熟逐渐降低;q RT-PCR结果显示,药物作用后ALS2、ALS3基因表达降低(7.87±0.27比5.15±0.34;6.24±0.51比2.13±0.23,P<0.05),ALS1基因表达无明显变化(6.11±0.14比5.95±0.31,P>0.05)。结论黄根醇提取物对体外白色念珠菌生物膜有较明显的抑制作用,可能通过抑制ALS2、ALS3基因的表达而实现。