三七茎叶总皂苷酶转化产物和C-K的抗肿瘤作用

目的:研究三七茎叶总皂苷酶转化产物和人参皂苷化合物K(C-K)的抗肿瘤作用。方法:利用β-葡聚糖苷酶转化三七茎叶总皂苷,转化产物经大孔吸附树脂富集和纯化,硅胶柱层析及制备薄层层析分离纯化后得到C-K。观察酶转化产物和C-K对S180肿瘤细胞生长的抑制作用及对艾氏腹水癌小鼠生存期的影响。结果:三七茎叶总皂苷酶转化产物和C-K的抑瘤率分别为41.8%和44.7%;对艾氏腹水癌小鼠延长存活期分别为3.9d和4.6d。结论:三七茎叶总皂苷酶转化产物和C-K具有较强的抗肿瘤作用。     

Fusarium sacchari转化三七茎叶皂苷的稀有抗肿瘤成分

大量现代药理研究证实,五加科植物如人参、三七、西洋参等的摄入对抑制肿瘤的生长具有明显的作用,且这些植物的抗癌活性是通过其体内含有的特殊活性成分——达玛烷型三萜皂苷中的稀有次生皂苷成分实现的[1,2],如人参皂苷Rg3、人参皂苷Rh2、人参皂苷C-K和原人参二醇等。利用生物     

酶转化三七叶总皂苷制备人参皂苷C-K的工艺优化

目的 研究以三七叶总皂苷制备人参皂苷C-K的酶转化工艺。方法 利用4种工业酶制剂对三七叶总皂苷进行转化，筛选出最佳酶制剂；以人参皂苷C-K的含量为指标，采用正交试验法进行酶转化工艺的优化；采用TLC及HPLC法检测酶转化产物。结果 酶转化三七叶皂苷的最佳工艺条件为：20％p葡聚糖苷酶，pH5．4，反应温度55℃，反应时间48h。反应时间的影响最大，其次是酶的体积分数。结论 β-葡聚糖苷酶对三七叶总皂苷的转化作用最强。     

三七茎叶总皂苷对心肌缺血再灌注损伤保护作用研究

目的：研究三七茎叶总皂苷（PNSSL）对缺血再灌注损伤大鼠心肌的保护作用,为PNSSL的开发利用提供基础。方法：将SD大鼠随机分为6组,即假手术组、模型组40,80,160 mg·kg-1组、地奥心血康组,连续给药七天,末次给药后通过结扎冠状动脉左前降支的方法建立大鼠缺血再灌注损伤模型。观察缺血再灌注大鼠II导联心电图ST段的变化情况,采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色法检测心肌梗死面积,测定大鼠血清中乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）活性以及心肌组织中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性和丙二醛（MDA）含量,通过苏木精-伊红（HE）染色法观察缺血再灌心肌的病理形态。结果：与模型组相比,PNSSL各剂量组对于大鼠心电图ST段升高均具有降低作用,能够减少心肌梗死范围,其中PNSSL80,160 mg·kg-1组降低显著（P<0.05）;PNSSL160 mg·kg-1剂量能够明显降低血清中心肌酶活性（P<0.05）,PNSSL80 mg·kg-1显著升高心肌组织中SOD和GSH-Px的活性（P<0.05）。病理染色中,PNSSL组心肌组织间质水肿明显减轻,纤维排列整齐,心肌组织损伤降低。结论：三七茎叶总皂苷能够改善 由缺血再灌注引起的心肌组织损伤,改善心电图变化,提高细胞膜稳定性,清除氧自由基,减少炎性浸润,具有心肌保护作用。     

三七茎叶皂苷水解产物中稀有抗肿瘤成分的化学研究

目的:研究三七茎叶皂苷水解产物的化学成分.方法:采用各种色谱技术进行分离纯化,利用理化常数测定和光谱数据分析进行结构鉴定.结果:从三七茎叶皂苷水解产物中分离得到8个化合物,分别鉴定为达玛烷-20(22)-烯-3β,12β,25-三醇 [dammarane-20(22)-en-3β,12β,25-panaxatriol,Ⅰ],20(R)-达玛烷-3β,6α,12β,20,25-五醇 [20(R)-dammarane-3β,6α,12β,20,25-pentol,Ⅱ],20(R).达玛烷-3β,12β,20,25-四醇[20(R)-dammarane-3β,12β,20,25-triol,Ш],20(S)-人参二醇[20(S)-panaxadiol,20(S)-PD,Ⅳ],20(S)-原人参二醇[ 20(S)-protopanaxadiol,20(S)-PPD,Ⅴ],20(R)-原人参二醇 [20(R)protopanaxadiol,20(R)-PPD,Ⅵ],20(S)-人参三醇[20(S)-panaxatriol,20(S)-PT,Ⅶ],20(S)-25-甲氧基-达玛烷-3β,12β,20-三醇 [20(S)-25-me-thoxyl-dammarane-3β,12β,20-triol,Ⅷ].结论:化合物Ⅱ和Ⅴ为首次从三七茎叶皂苷水解产物中分得.     

三七叶总皂苷酶解产物的制备及抗抑郁活性评价

目的： 优选三七叶总皂苷的酶解工艺并评价其酶解产物的抗抑郁活性。 方法： 以人参皂苷类成分的转化率为指标,通过单因素试验优选三七叶总皂苷的酶解工艺。建立小鼠慢性温和性不可预知应激模型评价酶解产物的抗抑郁活性。 结果： 选择蜗牛酶为转化酶,酶解pH 4.5,温度50 ℃,时间12 h,人参皂苷类成分的转化率达50%。小鼠建模6周后,呈现出体重下降、快感缺失、行动迟缓等抑郁症相似行为,表明建模成功。第7~9周给药期内给药组小鼠体重及糖水偏好率显著增加,自主活动水平亦有一定程度的改善。第9周时与模型组相比,酶解产物不同（低、中、高）剂量组、氟西汀组小鼠的体重分别增加了9.33%,12.44%,18.13%,15.03%;糖水偏好率分别提高了22.64%,19.87%,19.38%,20.85%;自主活动水平分别提高了8.35%,41.30%,13.33%,12.06%,其中酶解产物中剂量组呈现极显著性差异。 结论： 三七叶总皂苷酶解产物对抑郁小鼠模型具有良好的抗抑郁作用。     

阴离子交换树脂纯化三七发酵产物中总皂苷的工艺优选

目的:为了得到高纯度的三七总皂苷,利用阴离子交换树脂对三七发酵产物进行纯化,优选纯化工艺参数。方法:选用三七发酵产物为研究对象,以总皂苷含量或纯度为指标,采用单因素试验考察树脂型号、径高比、上样液质量浓度、上样流速、吸附时间、洗脱剂种类、洗脱液用量、洗脱流速、上样液p H等条件对洗脱液中总皂苷含量的影响。结果:选取D301型阴离子树脂,径高比1∶8.3,上样液质量浓度0.25 g·m L~(-1),树脂干重-生药量(1∶0.64),上样流速2 BV·h~(-1),上样液p H 9,吸附时间15 min,洗脱流速2 BV·h~(-1),加水5 BV洗脱杂质,加60%乙醇4 BV对目标成分进行洗脱。三七发酵产物中总皂苷纯度90%。结论:利用阴离子交换树脂纯化三七发酵产物中总皂苷的方法简便可行,纯化效果好,能满足于工业生产的要求,为该有效部位的新药及相关产品开发提供参考。     

微生物对人参果总皂苷中人参皂苷化合物K的转化作用

目的利用微生物转化法对人参果总皂苷(SFPG)进行生物转化,制备人参皂苷化合物K(C-K)。方法从种植人参的土壤中筛选、分离4种微生物m14、m3、m8、m9对SFPG进行转化,筛选最佳活性菌株;以C-K的量为指标,采用TLC和HPLC法检测微生物的转化结果。结果真菌m14为转化C-K的最佳活性菌株,最佳转化条件为转化时间6d,转化温度30℃,摇床转数160r/min,转化初始pH值为自然pH5.5,转化底物质量浓度为120mg/mL。转化后的C-K的量是转化前的41.65倍。结论真菌m14转化SFPG中C-K的专属性强、转化效率高,为C-K的工业化生产提供了一条新的途径。     

HPLC法测定西洋参茎叶总皂苷降解物中20（S）-人参皂苷Rg3的含量

西洋参 Panax quinquefolium L.为五加科人参属植物 ,根部入药。 1 998年尹建元等从野山参茎叶皂苷中首次分离得到人参皂苷 Rg3 [1] 。 2 0 0 2年孟勤等从西洋参叶中首次分离得到人参皂苷 Rg3 [2 ] 。人参皂苷 Rg3 具有明显抑制乙酰胆碱刺激牛肾上腺素嗜铬细胞分泌儿茶酚胺的作用 [3 ] ,并且人参皂苷Rg3 毒性小 ,生物活性强 ,是很具有开发价值的天然活性成分 ,但人参皂苷 Rg3 在自然界存在甚少。为了获得大量人参皂苷 Rg3 ,我们采用西洋参茎叶提纯总皂苷并制备二醇组皂苷[4] ,再将二醇组皂苷进行降解制备人参皂苷 Rg3 。本实验采用 HPL…     

三七茎叶总皂苷促血管新生抗缺血性脑卒中的作用机制

目的 探究三七茎叶总皂苷改善缺血性脑卒中、促进缺血性脑卒中损伤后血管新生作用及机制。方法 采用网络药理学技术预测三七茎叶总皂苷促进缺血性脑卒中损伤后血管新生可能的机制,利用分子对接技术对筛选出的核心靶点与主要成分的结合进行初步验证。雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组及三七茎叶总皂苷低、中、高剂量（73、146、292mg/kg）组和3-正丁基苯酞（3-n-butylphthalide,NBP,60 mg/kg）组,每组20只。建立大鼠脑中动脉阻塞/再灌注（middlecerebral artery occlusion/reperfusion,MCAO/R）模型,给药7 d后取材。每隔1 d对大鼠进行神经功能评分;通过2,3,5-氯化三苯基四氮唑（2,3,5-triphenyltetrazolium chloride,TTC）染色、苏木素-伊红（hematoxylin-eosin,HE）染色观察大鼠脑梗死体积及脑神经细胞形态状况;通过激光多普勒血流仪观察大鼠梗死脑侧血流恢复情况;通过光学相干断层扫描血管成像观察大鼠脑微血管新生状况;通过ELISA和Western blotting测定与血管新生相关蛋白表达。结果 网络药理学分析显示,共收集到60个三七茎叶总皂苷活性成分和297个关键靶点,与血管新生和缺血性脑卒中取交集后得到64个交集靶点,并且三七茎叶总皂苷主要成分与这些核心靶点均有较好结合力。三七茎叶总皂苷促进血管新生改善缺血性脑卒中的关键通路主要富集在磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B,Akt）、缺氧诱导因子-1α（hypoxiainducible factor-1α,HIF-1α）等通路。动物实验结果显示,与模型组比较,三七茎叶总皂苷能够显著降低MCAO/R大鼠神经功能评分（P＜0.01）,改善大鼠神经功能,降低大脑梗死体积（P＜0.01、0.001）,减少脑组织损伤,恢复梗死脑侧脑血流（P＜0.05、0.01、0.001）,促进梗死脑侧皮层微血管密度（P＜0.05、0.01、0.001）,提高血管内皮生长因子（vascular endothelialgrowth factor,VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）水平和HIF-1α、PI3K、p-Akt/Akt蛋白表达（P＜0.05、0.01、0.001）。结论 三七茎叶总皂苷能够显著改善MCAO/R大鼠脑损伤,有效促进MCAO/R大鼠缺血脑区血管新生,促血管新生机制可能与提高MCAO/R大鼠大脑中VEGF、bFGF、HIF-1α表达和激活PI3K/Akt通路有关。     

Fusarium sacchari转化三七茎叶皂苷中新化合物的分离和鉴定

目的 利用甘蔗镰孢Fusarium sacchari对三七茎叶皂苷进行生物转化,以发现新的稀有抗肿瘤活性成分.方法 转化产物通过硅胶、凝胶及液相色谱进行分离,得到化合物结构经波谱鉴定.结果 分离得到了1个单体化合物,命名为三七皂苷-LZ(notoginsenoside-LZ),鉴定其化学结构为20(S)-3β-hydroxy-12β,23-epoxy-dammar-24-ene-20-O-β-D-xylopyranosyl(1→6)-β-D-glucopyranoside.结论 三七皂苷-LZ(notoginsenoside-LZ)为一新化合物.     

超声辅助酶解人参总皂苷制备人参稀有皂苷Compound K的研究

该实验采用超声辅助酶解人参总皂苷以制备人参稀有皂苷Compound K。以转化率为指标,通过单因素考察超声功率、超声时间等超声预处理因素和pH、温度、底物浓度、酶用量、反应时间等酶解因素对转化率的影响,并应用响应面法试验优化制备工艺;采用MS,¹H,¹³C-NMR鉴定酶解产物。结果表明,超声辅助酶解反应的最适条件为超声功率250 W,超声时间15 min,酶解pH 5.5,酶解温度50℃,酶解时间36 h,酶用量-底物4：5,底物质量浓度1.0 g·L^-1;反应产物相对分子质量622.4,核磁图谱证实产物为人参稀有皂苷Compound K。在此条件下,以人参总皂苷计,人参稀有皂苷Compound K转化率为6.91%。该工艺反应条件温和,转化率较高,工艺简单可靠,适合工业化生产。     

三七总皂苷生物合成的关键酶及其调控研究进展

三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)属于达玛烷型三萜皂苷,是中国传统珍贵药材三七的主要活性成分。三七总皂苷对中枢神经系统、心脑血管系统和免疫系统具有较好的保护作用,并被广泛地用于衰老、肿瘤等疾病的治疗。对三七总皂苷生物合成中的关键酶如法呢基焦磷酸合酶(FPS)、鲨烯合成酶(SS)、鲨烯氧化酶(SE)、达玛烯二醇合成酶(DS)、环阿屯醇合成酶(CAS)、P450单加氧酶(CYP450)和糖基转移酶(GT)等在催化机制、基因克隆、转录水平的表达调控及其表达模式和表达组织和器官的特异性方面的研究进展进行综述,并首次总结了多态性和环境胁迫等在三七皂苷生物合成的基因表达调控中的作用,为应用代谢工程人工合成PNS提供依据。     

人参总皂苷与三七总皂苷对高糖刺激下腹膜间皮细胞分泌转化生长因子β_1和纤维连接蛋白的影响

目的:观察人参总皂苷与三七总皂苷对高糖刺激下腹膜间皮细胞分泌转化生长因子β1(TGF-β1)和纤维连接蛋白(FN)的影响。方法:采用胰蛋白酶消化法分离大鼠腹膜间皮细胞,建立稳定的细胞培养模型,加入2.5%腹膜透析液作用3h,吸弃后加入终浓度为100μg/mL的人参总皂苷与三七总皂苷,分别于24h、48h后用ELISA法检测上清液中TGF-β1和FN的水平。结果:高糖腹透液刺激后,在24h、48h腹膜间皮细胞分泌FN及TGF-β1均明显增加,与空白组比较,差异有显著性意义或非常显著性意义(P0.05,P0.01)。对高糖刺激后的腹膜间皮细胞培养24h,与高糖组比较,三七总皂苷能抑制FN分泌(P0.01);人参总皂苷培养24h、48h均能降低FN的水平(P0.01)。人参总皂苷培养24h能减少高糖刺激后腹膜间皮细胞分泌TGF-β1(P0.01),三七总皂苷培养24h、48h均能降低TGF-β1的水平(P0.05,P0.01)。结论:三七总皂苷及人参总皂苷对高糖培养24h的腹膜间皮细胞分泌FN、TGF-β1均有明显的抑制作用,人参总皂苷对FN分泌的抑制持续时间更长,三七总皂苷对TGF-β1分泌的抑制持续时间更长。     

三七总皂苷/山茱萸总皂苷组分对犬冠状动脉结扎缺血心肌的保护作用研究

目的观察三七总皂苷/山茱萸总苷组分(PNS/TGCO)不同剂量对犬冠状动脉结扎造成心肌梗塞模型的保护作用。方法杂种犬随机分为模型对照组,PNS/TGCO大(40 mg/kg)、中(20 mg/kg)、小(10 mg/kg)剂量组、血塞通胶囊组(20mg/kg)。采用结扎麻醉犬冠状动脉左前降支造成急性心肌缺血梗塞损伤,十二指肠给药后,可显著减少冠脉结扎所致的∑-ST、N-ST抬高,用硝基四氮唑蓝染色,观察心脏梗塞范围,检测血清中肌酸磷酸激酶(CPK)和乳酸脱氢酶(LDH)活性的变化。结果 PNS/TGCO组分大、中组可显著降低犬冠脉结扎后心肌缺血的程度,缩小心肌缺血的范围;显著降低犬冠脉结扎后血清LDH、CPK活性。结论 PNS/TGCO组分对急性心肌缺血犬具有明显的保护作用。     

三七总皂苷对心血管系统的影响及作用机制

三七总皂苷是五加科人参属多年生植物三七的主要活性成分，具有抗心肌缺血再灌注损伤、抗动脉粥样硬化、抗炎、保护内皮细胞及血管平滑肌细胞等作用，现将其对心血管系统的作用机制予以综述。     

高效液相色谱-电喷雾质谱法鉴别人参、西洋参和三七的皂苷提取物

 目的采用高效液相色谱-电喷雾质谱法(HPLC/ESI-MSn)研究人参、三七和西洋参中不同皂苷提取物的组成,以期建立快速高效的鉴别方法。方法通过与人参皂苷对照品比较和对碰撞诱导解离(CID)质谱图的解析鉴定各皂苷提取物的主要成分。结果共计鉴定32种皂苷成分。通过对比,发现了各皂苷提取物中的标识性成分。结论采用高效液相色谱-电喷雾质谱法能够快速高效地鉴别人参、三七和西洋参的不同皂苷提取物,具有很高的实用价值。     

威灵仙总皂苷抗肿瘤作用及其对癌细胞增殖周期的影响

目的 研究威灵仙总皂苷(CCS)对小鼠肿瘤的抑制作用.方法 采用肉瘤(S180)、肝癌腹水型(HepA)和白血病腹水型(P388)3种小鼠移植性肿瘤模型进行实验.结果 CCS对小鼠移植性肿瘤S180、HepA、 P388均有显著的抑制作用.当剂量为0.3,0.6,1.2g·㎏-1时,对小鼠移植性肿瘤S180抑制率分别为42.78%,52.06%,58.25%(P<0.05或P<0.01),对移植性肿瘤HepA抑制率分别为37.44%,52.05%和59.36%(P<0.05或P<0.01),对移植性肿瘤P388抑制率分别为34.50%,46.78%和54.39%(P<0.05或P<0.01);CCS可以使G0～G1期细胞增多,G2～M期细胞减少,癌细胞凋亡率与用药剂量呈正相关趋势.结论 CCS对小鼠移植性肿瘤有显著的抑瘤作用,对造血系统和免疫功能无影响.     

三七总皂苷对肺癌A549细胞上皮间质转化的抑制作用

目的观察三七总皂苷(PNS)对体外经转化生长因子-β_1(TGF-β_1)诱导肺腺癌A549细胞后发生上皮细胞间质化(EMT)的作用。方法首先进行PNS MTT实验,然后再进行PNS干预EMT实验,将A549细胞随机分为5组:空白组加入F-12培养基,模型组及低、中、高浓度中药组分别加入10 ng/mL TGF-β_1和62.5、125、250μg/mL PNS,继续培养72 h。采用光学显微镜观察各组细胞的形态变化,采用实时荧光定量PCR、Western Blot及免疫荧光技术检测纤维连接蛋白(FN)、波形蛋白(Vim)、E-钙黏素(E-Cad)mRNA及蛋白表达水平。结果 31.25～500μg/mL PNS对A549细胞无明显增殖作用。与空白组比较,模型组FN mRNA及蛋白表达升高(P0.01,P0.05),Vim蛋白表达升高(P0.05),E-Cad mRNA及蛋白表达降低(P0.05)。与模型组比较,高浓度中药组FN mRNA表达降低(P0.05),E-Cad及蛋白mRNA表达升高(P0.01,P0.05);低浓度、高浓度中药组FN蛋白表达降低(P0.05),低、中浓度中药组Vim蛋白表达降低(P0.05)。结论 PNS体外干预可提高EMT过程中上皮标志物E-Cad并抑制间质标志物FN、Vim的表达,高浓度时结果更为显著,对EMT过程有一定的干预作用。     

茅莓总皂苷对黑色素瘤的抗肿瘤作用研究

目的：评价茅莓总皂苷对黑色素瘤的体内、外抗肿瘤药效作用。方法：A375人恶性黑色素瘤细胞体外常规传代培养,随机分5组,分别加入环磷酰胺,茅莓总皂苷高、中、低(0.01,0.001,0.000 1 mg·mL^-1)3个质量浓度,以不加药作阴性对照,MTT法检测茅莓总皂苷的体外抗肿瘤作用；用B16黑色素瘤细胞移植小鼠,随机分阳性药(环磷酰胺)组,茅莓总皂苷高、中、低(100,50,25 mg·kg^-1)剂量组及阴性药(生理盐水)组,观察体内抑瘤效果、荷瘤小鼠生存时间和生命延长率；同时采用TUNEL法检测茅莓总皂苷对B16黑色素瘤细胞凋亡的影响。结果：体外抑瘤试验显示,高、中质量浓度茅莓总皂苷组与阴性对照组比较,P<0.05,有统计学意义；体内抑瘤试验显示,高剂量组平均瘤体积明显低于阴性对照组(P<0.05),抑瘤率37.02%；荷B16黑色素瘤小鼠用茅莓总皂苷治疗后存活时间增加；茅莓总皂苷高、中、低剂量组黑色素瘤细胞凋亡指数分别为32.5%,20.5%和5.5%,与阴性对照组(3.5%)比较差异有统计学意义。结论：茅莓总皂苷对体内、外黑色素瘤细胞有抑制作用,并呈量效依赖关系,能通过促进黑色素瘤细胞凋亡而发挥抗肿瘤活性。