SRSF1在肿瘤中的研究进展

正人类基因中约有94%发生选择性剪接,使同一前体mRNA分子产生不同基因型,编码不同蛋白质,极大增加了基因表达复杂程度和蛋白质多样性~([1])。不同组织出现疾病时显示特定模式剪接变异体,这些剪接模式依赖于剪接因子在细胞核中的相对表达,包括表达量或翻译后修饰~([2])。富含丝氨酸/精氨酸剪接因子1(SRSF1),是1个典型富含丝氨酸/精氨酸SR     

RASSF1基因与肿瘤的关系

RASSF1基因位于染色体3p21.3,其转录本RASSF1A已被确认为一种候选肿瘤抑制基因,在多种实体肿瘤中表达异常,参与细胞周期和细胞凋亡的调控,并抑制细胞生长,但作用机理尚未阐明。     

卵巢癌细胞ERCC1基因VIII外显子剪接变异及功能研究

目的　确认卵巢癌细胞ERCC1基因VIII外显子剪接变异的存在 ,探讨该剪接变异对ERCC1基因表达的作用及其对卵巢癌细胞对铂类药物耐药性的影响。方法　采用Northern杂交及RNA酶保护分析确认人卵巢癌细胞内ERCC1基因调控区在RNA水平存在剪接变异。分别构建野生型及缺失VIII外显子的ERCC1表达载体 ,转染中国仓鼠卵巢 4 3 3B细胞 ,采用Westernblot检测ERCC1表达水平研究该剪接变异对ERCC1基因表达水平的影响 ,采用MTT和细胞克隆形成实验研究该剪接变异细胞对铂类药物耐药性的影响。结果　卵巢癌细胞ERCC1基因VIII外显子存在剪接变异。Westernblot结果显示该剪接变异不显著影响ERCC1表达水平 ,但CHO 4 3 3B细胞MTT及细胞克隆形成实验表明 ,该剪接变异显著影响细胞对顺铂的耐药性。结论　本研究首次证明人卵巢癌细胞、组织ERCC1基因VIII外显子存在剪接变异 ,该变异不显著影响ERCC1基因的绝对表达水平 ,但影响细胞对顺铂的耐药性     

卵巢癌细胞ERCC1基因Ⅷ外显子剪接变异及功能研究

目的 确认卵巢癌细胞ERCC1基因Ⅷ外显子剪接变异的存在,探讨该剪接变异对ERCC1基因表达的作用及其对卵巢癌细胞对铂类药物耐药性的影响。方法 采用Northern杂交及RNA酶保护分析确认人卵巢癌细胞内ERCC1基因调控区在RNA水平存在剪接变异。分别构建野生型及缺失Ⅷ外显子的ERCC1表达载体,转染中国仓鼠卵巢43-3B细胞,采用Westemblot检测ERCC1表达水平研究该剪接变异对ERCC1基因表达水平的影响,采用MTT和细胞克隆形成实验研究该剪接变异细胞对铂类药物耐药性的影响。结果 卵巢癌细胞ERCC1基因Ⅷ外显子存在剪接变异。Western blot结果显示该剪接变异不显著影响ERCC1表达水平,但CHO 43-3B细胞MTT及细胞克隆形成实验表明,该剪接变异显著影响细胞对顺铂的耐药性。结论 本研究首次证明人卵巢癌细胞、组织ERCC1基因Ⅷ外显子存在剪接变异,该变异不显著影响ERCC1基因的绝对表达水平,但影响细胞对顺铂的耐药性。     

卵巢癌细胞ERCC1基因ⅤⅢ外显子剪接变异及功能研究

目的确认卵巢癌细胞ERCC1基因Ⅷ外显子剪接变异的存在,探讨该剪接变异对ERCC1基因表达的作用及其对卵巢癌细胞对铂类药物耐药性的影响.方法采用Northem杂交及RNA酶保护分析确认人卵巢癌细胞内ERCC1基因调控区在RNA水平存在剪接变异.分别构建野生型及缺失ⅤⅢ外显子的ERCC1表达载体,转染中国仓鼠卵巢43-3B细胞,采用Western blot检测ERCC1表达水平研究该剪接变异对ERCC1基因表达水平的影响,采用MTT和细胞克隆形成实验研究该剪接变异细胞对铂类药物耐药性的影响.结果卵巢癌细胞ERCC1基因Ⅷ外显子存在剪接变异.Western blot结果显示该剪接变异不显著影响ERCC1表达水平,但CHO 43-3B细胞MTT及细胞克隆形成实验表明,该剪接变异显著影响细胞对顺铂的耐药性.结论本研究首次证明人卵巢癌细胞、组织ERCC1基因ⅤⅢ外显子存在剪接变异,该变异不显著影响ERCC1基因的绝对表达水平,但影响细胞对顺铂的耐药性.     

ERCC1检测与指导食管癌顺铂化疗的研究进展

食管癌是最常见的恶性肿瘤之一,我国的食管癌患者占全世界的1/2以上,发病率目前居世界之首嘲。在患者发现或确诊时往往已经到了癌症晚期,难以通过手术完全切除,化疗在改善食管癌患者的生存等多方面起着非常重要的作用。顺铂作为第一代铂类药物,广泛应用于食管癌的一线化疗,不同患者对顺铂的敏感性不同,     

RAP1B与肿瘤及胃癌关系的研究进展

<正>癌症是目前全世界人口死亡的主要原因之一,而胃癌是一种非常常见的消化系统恶性肿瘤,居全球癌症死因第三位[1]。胃癌是我国目前发病率第二高的恶性肿瘤,发病率远高于欧美等其他国家,仅在2013年全球新增患者95.2万例,其中47%发生在我国[2]。2008年国际癌症研究机构(IARC)数据指出,发展中国家胃癌患者较发达国家明显增多;发展中国家男性患者466 900例较发达国家的173 700例显著增多,而发展中国家和发达国家女性患者数分别为2     

Nek2剪接异构体及其与肿瘤关系的研究进展

Nek(NIMA-related kinase,Nek)激酶为哺乳动物细胞中的NIMA相关激酶。NIMA最初是在曲霉中被发现的,其对细胞周期突变体nimA进入有丝分裂起重要作用,过表达的NIMA甚至能使处于细胞周期中任意时刻的细胞进入有丝分裂[1]。     

上皮性卵巢癌ERCC1表达与顺铂化疗耐药的关系

目的探讨切除修复交叉互补基因（ERCC1）在原发性上皮性卵巢癌顺铂化疗耐药中的意义。方法用组织芯片仪制备组织芯片并结合免疫组织化学技术,检测56例上皮性卵巢癌病人癌组织中ERCC1蛋白的表达情况,并以38例正常卵巢组织作为对照,分析其与顺铂化疗耐药的关系,同时分析ERCC1在原发性上皮性卵巢癌中的表达与临床手术-病理分期（FIGO,2000）、病理学类型、分化程度、发病年龄、发生部位以及疾病发生的相关性。结果38例正常卵巢组织中ERCC1阳性表达者17例（44.74%）,56例上皮性卵巢癌组织ERCC1阳性表达者31例（55.36%）,二者比较差异无显著性（χ^2=1.022,P〉0.05）。上皮性卵巢癌中ERCC1的表达与临床手术-病理分期、病理学类型、分化程度、发病年龄、发生部位及发病率均无明显的相关性（P〉0.05）。上皮性卵巢癌顺铂化疗耐药组ERCC1的阳性表达率为76.67%,明显高于敏感组的30.77%,差异有显著性（χ^2=11.87,P〈0.05）。结论上皮性卵巢癌ERCC1表达与顺铂化疗耐药相关。     

荧光定量RT-PCR检测Rac1 mRNA基因及其与胃癌转移的关系

目的 探讨肿瘤转移相关基因Rac1水平与胃癌转移的相关性,并评价分析Rac1 mRNA基因在胃癌转移和区分胃良、恶性病变中的价值.方法 用荧光定量RT-PCR TaqMan探针技术,选择Rac1基因目的 片段,与pET-20b(+)载体连接构建重组质粒,建立Rac1 mRNA荧光定量RTPCR标准曲线,并用于检测52份胃癌、癌旁组织及12份胃良性病变组织标本中Rac1 mRNA的含量,分析评价其与胃癌转移的关系.结果 胃癌组织中Rac1 mRNA表达阳性率和含量为100.0%,7.41×103 (3.50×105 ～4.36×106)拷贝/μl,癌旁组织为46.2%,0(0～1.73×104)拷贝/μl,良性病变组织为33.3%,0(0～3.55×103)拷贝/μl,3组间阳性率和Rac1 mRNA含量水平差异均有统计学意义(x2=43.16,x2k-w=64.19,P均＜ 0.01).当ROC曲线确定荧光定量RT-PCR检测Rac1含量的最佳临界值为1.73×104 拷贝/μl时,诊断胃癌组织标本的敏感度为88.5%,特异度为100.0%;当最佳临界值为7.49×103 拷贝/μl时,诊断胃癌是否发生淋巴结转移的敏感度为57.9%,特异度为78.6%.结论 荧光定量RT-PCR检测Rac1 mRNA对鉴别胃良、恶性病变及评价胃癌转移均有参考价值.     

荧光定量RT-PCR检测Rac1 mRNA基因及其与胃癌转移的关系

Objective To investigate the relationship between tumor metastasis-related Rac1 mRNA expression levels and gastric carcinomas metastasis, and to investigate the significance of Rac1 as a tumor marker for the evaluation of gastric carcinomas metastasis and distinguish between benign and malignant lesions. Methods This experiment used fluorescence quantitative RT-PCR TaqMan probe technology, chose Rac1 target gene fragment, which was cloned into the pET-20b (+) vector, constructed recombinant plasmid, and established the Rac1 mRNA fluorescence quantitative RT-PCR standard curve. And then the Rac1 mRNA levels were detected in 52 cases of gastric carcinoma tissues,52 cases of para-carcinoma tissues and 12 cases of benign gastric disease tissues. Its association with the metastasis of gastric carcinomas was analyzed. Results The positive rates and levels (median, P25-P75) of Rac1 mRNA were 100. 0% ,7.41 ×105 (3. 50 × 105-4. 36 × 106) copies/μl in gastric carcinomas, 46. 2% ,0(0-1.73 × 104) copies/μl in parscarcinoma tissues, 33. 3%, 0(0-3.55 × 103) copies/μl in benign tissues. The positive rates and leves(x2 =43.16,x2Xk-w = 64. 19, P ＜0. 01)among the three groups were significantly different. When the critical value of Rac1 mRNA level was 1.73 × 104 copies/μl determined by ROC, the sensitivity and specificity were 88. 5% and 100% respectively. When the critical value of Rac1 level was 7.49 × 105 copies/μl, the sensitivity and specificity were 57.9% and 78. 6% respectively. ConclusionThe Rac1 mRNA level detected with fluorescence quantitative RT-PCR has reference value to distinguish between benign and malignant lesions and evaluate gastric carcinoma metastasis.     

荧光定量RT-PCR检测Rac1 mRNA基因及其与胃癌转移的关系

Objective To investigate the relationship between tumor metastasis-related Rac1 mRNA expression levels and gastric carcinomas metastasis, and to investigate the significance of Rac1 as a tumor marker for the evaluation of gastric carcinomas metastasis and distinguish between benign and malignant lesions. Methods This experiment used fluorescence quantitative RT-PCR TaqMan probe technology, chose Rac1 target gene fragment, which was cloned into the pET-20b (+) vector, constructed recombinant plasmid, and established the Rac1 mRNA fluorescence quantitative RT-PCR standard curve. And then the Rac1 mRNA levels were detected in 52 cases of gastric carcinoma tissues,52 cases of para-carcinoma tissues and 12 cases of benign gastric disease tissues. Its association with the metastasis of gastric carcinomas was analyzed. Results The positive rates and levels (median, P25-P75) of Rac1 mRNA were 100. 0% ,7.41 ×105 (3. 50 × 105-4. 36 × 106) copies/μl in gastric carcinomas, 46. 2% ,0(0-1.73 × 104) copies/μl in parscarcinoma tissues, 33. 3%, 0(0-3.55 × 103) copies/μl in benign tissues. The positive rates and leves(x2 =43.16,x2Xk-w = 64. 19, P ＜0. 01)among the three groups were significantly different. When the critical value of Rac1 mRNA level was 1.73 × 104 copies/μl determined by ROC, the sensitivity and specificity were 88. 5% and 100% respectively. When the critical value of Rac1 level was 7.49 × 105 copies/μl, the sensitivity and specificity were 57.9% and 78. 6% respectively. ConclusionThe Rac1 mRNA level detected with fluorescence quantitative RT-PCR has reference value to distinguish between benign and malignant lesions and evaluate gastric carcinoma metastasis.     

某地区HPV不同亚型感染与宫颈病变的相关研究

目的探讨该地区人群不同亚型人乳头瘤病毒(HPV)感染与宫颈病变的关系。方法采用PCR DNA反向斑点杂交技术,对1 039例门诊首诊人群的宫颈脱落细胞标本进行HPV基因诊断和分型,所得数据用SPSS 17.0统计软件进行统计分析。结果 1 039例标本中HPV整体感染率为32.1%,其中单重感染占阳性标本的75.4%,双重感染和多重感染分别占阳性标本的17.7%、6.9%。HPV感染在小于30岁年龄段感染率最高,随着年龄的增加,感染率降低。HPV感染率随着宫颈病变级别的增加逐渐上升(P<0.001),HPV16亚型随宫颈病变级别的增加感染率逐渐上升(P<0.001)。不同年龄段HPV多重感染率差异有统计学意义(P<0.05)。结论 DNA杂交技术能一次性检测23种HPV型别,敏感性高、特异性强、操作简便、结果易于判读,适合临床应用。HPV分型检测对筛选宫颈高度病变有重要意义。     

血浆内皮素1与高血压脑出血的关系

目的　探讨血浆内皮素 1(ET 1)与高血压脑出血的关系。方法　将 36 0例住院高血压病患者 ,经血浆内皮素 1测定后 ,分为高ET 1组及正常ET 1组。经 5年的观察及随访。结果　高ET 1组高血压病并发脑出血的例数明显高于正常ET 1组。结论　ET 1是高血压脑出血发病的危险因素     

不同亚型抗精子抗体与不孕不育症的关系

通过检测不孕不育患者血清的抗精子抗体 (As Ab) ,分析不同亚型的 As Ab对不孕不育的影响。报告如下。1　资料与方法1.1　对象　本院门诊或住院患者共 412例 ,均诊断为不孕或不育症。其中男 2 13例 ,女 199例。1.2　仪器和试剂　仪器使用美国Σ96 0酶标仪及 15 75型洗板机。试剂由上海第二医科大学提供试剂盒。1.3　方法　采用 EL ISA检测方法 ,统计学方法为χ2 法。2　结果2 .1　不孕不育症患者抗精子抗体阳性率与性别等关系分别见表 1、表 2。表 1　性别与抗体阳性率的比较例数阳性例数阳性率 (% )男 2 13 114 5 3.5女 1991185 9.3总…     

胃癌组织中Dnmt1与caveolin-1表达的关系

目的探讨正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜及胃癌组织中Dnmt1及caveolin-1的表达以及二者间的关系。方法应用免疫组化SP法检测20例正常胃黏膜、40例不典型增生胃黏膜及70例胃癌组织中Dnmt1、caveolin-1的表达状况。结果在正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜及胃癌组织中Dnmt1蛋白阳性表达率呈递增趋势,组间差异极显著（χ^2=34.710,P〈0.01）;而caveolin-1蛋白呈递减趋势,组间差异亦极显著（χ^2=41.806,P〈0.01）。Dnmt1蛋白阳性表达率在性别、年龄、溃疡的大小、有无脉管转移和浸润深度各组间差异不显著（P〉0.05）,而在有无淋巴结侵犯组间差异显著（P〈0.05）;caveolin-1蛋白阳性表达率在性别、年龄各组间阳性表达率差异不显著,而在有无淋巴结转移、浸润深度、有无脉管转移组间阳性表达率差异显著（P〈0.05）。Dnmt1与caveolin-1蛋白表达呈负相关（rs=-0.929,P〈0.05）。结论caveolin-1基因在胃癌组织中的沉默可能由Dnmt1高表达引起的该基因高甲基化而产生,在胃癌发生、发展中可能具有重要作用。     

Tiam 1基因在喉癌中的表达和意义

目的研究T淋巴瘤侵袭转移基因Tiam 1(T lymphoma invasion/metastasis 1)表达与喉癌浸润转移的关系.方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测30例喉癌组织、12例喉癌转移的颈部淋巴结和10例正常喉部组织Tiam 1 mRNA的表达.结果有颈淋巴结转移和无颈淋巴结转移的喉癌原发灶Tiam 1 mRNA高表达率分别为75%(6/8)和18.2%(4/22),P=0.0072;有癌转移和无癌转移的淋巴结Tiam 1 mRNA高表达率分别为100%(8/8)和25%(1/4),P=0.0182.30例喉癌有10例Tiam 1 mRNA高表达,高表达率为33.3%.结论 Tiam 1 mRNA表达与喉癌浸润转移呈相关关系.