GM1对缺氧缺血新生大鼠脑损伤的保护作用

目的研究外源性单唾液酸四已糖神经节苷脂(monosialotetrahexosylgangtliosicle,GM1)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxic—ischemic brain damage，HIBD)的保护作用。方法建立HIBD模型，观察腹腔注射GM，对HIBD模型鼠体重增长、脑水肿的影响，并用免疫组化及苏木素-伊红(HE)染色方法检测缺氧缺血(hypoxic—ischemic，HI)和GM1干预后不同时间点脑海马组织HSP70阳性细胞及病理学改变。结果HI后新生大鼠海马CA1区仅能检出少量阳性HSP核蛋白(仅在核内表达的蛋白)，海马CA1区神经元呈较严重的缺血损伤性改变。而GM1组体重增加、脑水肿减轻、可见应激蛋白HSP70明显表达。结论GM1可使新生大鼠海马CA1区HSP70表达上调，减轻脑水肿、减轻脑缺氧缺血后病理损伤，对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤具有保护作用。     

新生大鼠脑缺氧缺血后海马CA1区HSP70表达及GM1作用

HI后新生大鼠海马CA1区仅能检出少量阳性HSP核蛋白(仅在核内表达的蛋白)，海马CA1区神经元呈较严重的缺血损伤性改变。而GM1组可见应激蛋白HSP70明显表达，24h达高峰。结论：GM1可使新生大鼠海马CA1区HSP70表达上调，减轻脑缺氧缺血后病理损伤，对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤具有保护作用。     

复方阿魏酸对实验性脑缺血再灌注损伤热休克蛋白70的作用

目的 研究实验性大鼠脑缺血再灌注损伤时热休克蛋白70（HSP70）的表达及复方阿魏酸对HSP70表达的作用。方法 采用大鼠双侧颈总动脉阻断和尾部放血并重复缺血再灌注的脑缺血模型。应用免疫组织化学方法检测大鼠脑组织HSP70表达，并与病理组织学改变进行对照研究。结果 （1）假手术组脑组织无HSP70表达，模型组大脑皮层可见HSP70表达，复方阿魏酸治疗组大脑皮层HSP70表达明显增强。（2）模型组大脑皮导神经细胞呈轻度缺血改变，复方阿魏酸治疗组大脑缺血损伤程度有减轻。结论 复方阿魏酸可促使缺血大脑皮层HSP70表达增强，减轻皮层神经细胞的缺血损伤，对脑缺血再灌注损伤具有保护作用。     

神经节苷脂对大鼠脑缺血损伤后海马组织的保护作用

目的探讨神经节苷脂对脑缺血损伤后大鼠海马组织的保护作用。方法取健康成年雄性SpragueDawley大鼠60只,随机分为假手术组、缺血组和神经节苷脂治疗组(治疗组),每组20只。缺血组和治疗组制备大脑中动脉狭窄模型。模型建立成功后,假手术组和缺血组注射9 g.L-1的氯化钠溶液1 mL.kg-1.d-1,治疗组注射神经节苷脂20 mg.kg-1.d-1。采用末端脱氧核苷酰基转移酶介导性dUTP切口末端标记法检测各组神经元凋亡。结果假手术组、缺血组和治疗组大鼠CA1区凋亡神经元数量分别为2.23±0.67、26.17±4.82、15.40±5.30。缺血组大鼠CA1区神经元凋亡数目高于假手术组和治疗组,差异均有统计学意义(P<0.01);治疗组大鼠海马CA1区神经元凋亡数高于假手术组(P<0.01)。结论神经节苷脂可能是通过减少海马神经元凋亡,进而改善脑损伤,起到对脑缺血损伤后大鼠的神经保护作用。     

HSP70对缺血预处理诱导大鼠海马缺血耐受的作用

目的 探讨脑缺血时的组织学变化及热休克蛋白70(HSP70)在缺血预处理诱导的脑缺血耐受中的作用.方法 取成年雄性SD大鼠48只,随机分为6组,A组:假手术对照组,手术后7 d处死取脑;B组:全脑缺血3 min,7 d后处死取脑;C组:全脑缺血6 min,2 d后处死取脑;D组:全脑缺血6 min,7 d后处死取脑;E组:3 min缺血预处理后3 d,再缺血6 min,2 d后处死取脑;F组:3 min缺血预处理后3 d,再缺血6 min,7 d后处死取脑.行苏木精-伊红染色观察各组大鼠海马CA1区存活神经元密度,免疫组化染色方法观察大鼠海马CA1区HSP70染色强度,并作相关分析.结果 光镜下A、B组大鼠海马CA1区神经元未见明显缺血性损伤,D组神经元大量坏死,C、E、F组神经元部分坏死,A组与C组、D组,D组与F组比较,差异有显著性(F=19.6,q=4.766～12.447,P＜0.01).免疫组化染色显示,未经预处理的A、C、D组大鼠海马CA1区未见HSP70表达,预处理的E、F组大鼠在整个海马区均可见HSP70表达,C组与E组、D组与F组间差异有显著性(F=210.8,q=8.277～32.133,P＜0.01).结论 在脑缺血耐受中,缺血预处理对第二次致死性缺血表现出保护作用.在这个过程中,HSP70基因的表达上调发挥了重要的保护作用.     

妥泰对脑缺血再灌注后HSP70表达的影响和脑保护作用的研究

目的　探讨高血压大鼠急性脑缺血再灌注后妥泰对HSP70 表达的影响及其脑保护作用。方法　将大鼠制成高血压模型 ,喂养 2个月。再次手术将大鼠制成大脑中动脉闭塞 (MCAO)模型 ,MCAO时间均为 2h ,并随机分为三组 :妥泰干预组、缺血再灌注组和假手术组。各组再分为测体积组和HSP70 组。再灌注时点 :测体积组为 6h ;HSP70 组为 1d。将测体积组鼠脑经TTC染色 ,用计算机病理图象分析仪测量并计算梗死体积比。测HSP70 组鼠脑经免疫组化染色后用病理图象分析仪测出HSP70阳性细胞数。结果　 (1)妥泰干预组脑梗死体积比明显小于缺血再灌注组 (P <0 0 5 ) ;(2 )妥泰干预组HSP70 的表达高于缺血再灌注组 (P <0 0 5 )。结论　妥泰能促进HSP70 的表达 ,使梗死体积减少 ,对脑缺血再灌注损伤的脑组织有保护作用。     

亚低温对大鼠脑缺血再灌注损伤后热休克蛋白70表达及细胞凋亡的影响

[目的]观察亚低温对大鼠局灶脑缺血再灌注损伤后热休克蛋白70(HSP70)表达的影响,探讨亚低温对脑神经细胞保护作用的机制。[方法]将SD大鼠随机分为正常组、假手术组、常温缺血组和亚低温缺血组。应用大脑中动脉线栓法(MCAO)建立大鼠局灶脑缺血再灌注模型,于缺血2 h再灌注,再灌注后3、6、12、24、72 h和7 d处死。其中亚低温组大鼠于缺血后30 min实施病灶侧脑亚低温并持续4 h。采用HE染色观察神经细胞形态学改变,免疫组化法检测脑组织HSP70表达,TUNEL法检测凋亡细胞。[结果]正常组及假手术组均未见明显病理改变;常温缺血组梗死灶明显,大量神经元坏死消失;亚低温缺血组未见明显梗死灶,但可见神经元固缩。正常组及假手术组未见或偶见HSP70阳性细胞;常温缺血组HSP70阳性细胞较多;与常温缺血组相比亚低温缺血组在相应时间点均明显减少(P<0.05)。常温缺血组TUNEL阳性细胞数随再灌注时间的延长而逐渐增多,至72 h达高峰;与常温缺血组相比,亚低温缺血组各时间点均明显减少(P<0.05)。[结论]亚低温对大鼠缺血再灌注损伤脑有保护作用,通过降低HSP70的表达和减少细胞凋亡可能是其保护机制之一。     

脑络通方对光化学诱导脑缺血大鼠脑内bFGF影响的实验研究

目的研究脑络通方对光化学诱导脑缺血大鼠碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响.方法用免疫组化方法,观察光化学诱导的脑缺血大鼠第5天时,各组脑内缺血灶、缺血灶周围、大脑皮层、海马、小脑等部位bFGF的表达.结果脑缺血5天后,脑内bFGF主要在缺血灶周围、海马部位表达,阳性细胞主要以神经胶质细胞、神经元细胞为主,治疗组表达比模型组明显增加.结论脑络通方可通过提高缺血灶周围和海马bFGF的表达,从而促进缺血后神经元的存活,参与脑内的损伤修复和神经再生.     

猕猴大脑中动脉缺血后海马CA1区结构改变及胰岛素样生长因子-1的表达

目的：探讨猕猴大脑中动脉阻塞／再灌（MCAO）后海马CA1区胰岛素样生长因子-1（IGF-1）的表达。方法：采用猕猴MCAO模型，缺血2h，再灌24h，用免疫组化方法检测脑缺血后IGF-1蛋白的表达。结果：MCAO后缺血侧海马CA1区形态结构改变，神经元密度降低，IGF-1蛋白阳性细胞数与假手术组比较明显减少（P〈0．05）。结论：MCAO缺血侧海马CA1区结构改变，IGF-1蛋白表达减少，提示海马内IGF-1在脑缺血损伤中可能具有一定的作用。     

雌二醇预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤脑组织HSP70表达的影响

目的：观察雌二醇对脑缺血再灌注损伤脑组织HSP70表达的影响。方法：大鼠分假手术对照组、脑缺血再灌注组和雌二醇治疗组,每组32只,采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,每组分别于再灌注3h、6h、12h、24h处死8只动物,于视交叉前后2mm脑冠状切开,取闭塞侧组织制备连续性切片．免疫组化技术检测脑组织中HSP70的表达。结果：3组脑血管内皮均有HSP70的表达。假手术组皮层和纹状体无HSP70表达：雌二醇治疗组与脑缺血再灌注组再灌注后各时间点皮层、纹状体均有HSP70的表达,且雌二醇治疗组脑缺血再灌注后12h、24h皮层HSP70表达高于脑缺血再灌注组。结论：雌二醇预处理,可以诱导大鼠脑缺血再灌注脑组织HSP70的表达,对缺血性脑损伤可能有一定的保护作用。     

宽叶缬草对大鼠局灶性脑缺血后C-Fos、C-Jun表达的影响

目的 :探讨宽叶缬草对大鼠局灶性脑缺血后大脑海马各区 C- Fos、C- Jun表达的影响。方法 :采用线栓法制作可复流大脑中动脉闭塞大鼠模型。 4 8只雄性 Wistar大鼠随机分为正常组 ,假手术组 ,大脑中动脉闭塞组 ,生理盐水组 ,宽叶缬草治疗组。大鼠大脑中动脉闭塞后 2 h,生理盐水组、宽叶缬草治疗组分别以生理盐水及宽叶缬草酊剂灌胃 ,每 8h一次 ;术后第 5天取脑组织分别行 C- Fos、C- Jun免疫组化检测。结果 :正常组大脑海马各区 C- Fos、C- Jun阳性细胞稀少 ;大脑中动脉闭塞后海马各区均可见大量 C- Fos、C- Jun阳性细胞 ;宽叶缬草治疗组 C- Fos、C- Jun阳性细胞数密度明显低于大脑中动脉闭塞组 (P <0 .0 5 )。结论 :宽叶缬草可能通过抑制 C- Fos、C- Jun的表达 ,减轻缺血后脑组织的病理学损害。     

间歇性低压低氧预处理对大鼠全脑缺血/再灌注后海马CA1区神经元DND及HSP70表达的影响

目的 探讨间歇性低压低氧预处理(Hypobaric Hypoxia Preconditionin,HHP)对大鼠全脑缺血/再灌注(Global cerebral ischemia and reperfusion,GCIR)后海马CA1区神经元迟发性死亡(Delayed Neuron Death,DND)及热休克蛋白70( HSP70)表达的影响.方法 将Wistar大鼠48只随机分为四组:假手术组(Sham组)、低压低氧对照组(HHP组)、全脑缺血/再灌注组(GCIR组)、低压低氧预处理+全脑缺血/再灌注组(HHP+ GCIR组).采用吴穹改良的复制间歇性低压低氧环境模型,选用四血管闭塞法复制大鼠GCIR模型.硫堇染色下观察海马CA1区锥体神经元组织学分级(Histological grade,HG)和神经元密度(neuronal density,ND),反映锥体细胞DND程度;免疫组织化学方法观察神经细胞HSP70阳性细胞表达变化,将四组结果进行统计学比较.结果 Wistar大鼠HHP+ GCIR组海马CA1区较GCIR组HG分级降低、ND明显增加(P＜0.05),HSP70阳性表达明显增高(P＜0.05).结论 推测间歇性HHP是通过上调神经细胞HSP70的表达,减少神经元DND,发挥对脑组织的保护作用.     

西比灵对大鼠脑缺血再灌注后HSP70表达与脑保护的研究

目的探讨西比灵对高血压大鼠急性脑缺血再灌注后HSP70表达的影响及其脑保护作用.方法将大鼠用双肾动脉狭窄术制成高血压大鼠模型,喂养2个月.随机分为两组测体积组再分为西比灵干预组、缺血再灌注组和假手术组.HSP70组也分为西比灵干预组、缺血再灌注组和假手术组.除假手术组大鼠外,其它大鼠均制成大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,MCAO时间均为2h.再灌注时点测体积组为6h;HSP70组为1d.测体积组将鼠脑经TTC染色后,用计算机病理图象分析仪测量出梗死面积,根据梯形法则计算出梗死体积及梗死体积比.测HSP70组,经免疫组化染色后用病理图象分析仪测出HSP70阳性细胞数.结果(1)西比灵组HSP70的表达高于缺血再灌注组(P＜0.05);(2)西比灵组脑梗死体积比明显小于缺血再灌注组(P＜0.05).结论西比灵能促进HSP70的表达,使梗死体积减小,对缺血再灌注引起的受损脑组织有保护作用.     

参附注射液预处理对新生大鼠缺氧缺血后脑保护作用

目的:研究参附注射液(Shenfu injection,SF)预处理对新生大鼠脑保护作用.方法:建立新生大鼠缺氧缺血性脑病(Hypoxic-ischemic encephalopathy,HIE)模型,并随机分为3组:假手术组(S),生理盐水对照组(C),参附预处理组(SF).把实验分成2部分:①检测新生大鼠缺氧缺血后...     

化瘀克塞汤预处理对局灶性脑缺血大鼠HSP70表达的影响

目的探讨不同剂量化瘀克塞汤对大鼠局灶性脑缺血的保护作用及对热休克蛋白(heat shock protein, HSP)70表达的影响。方法采用线栓法制备大脑中动脉缺血模型。Wistar大鼠60只随机分为假手术组、缺血组、化瘀克塞汤预处理高剂量组（含生药2.34g/mL，1mL/100g）、化瘀克塞汤预处理低剂量组（含生药1.17g/mL，1mL/100g），造模前7d灌胃给药, 1次/d，假手术组与缺血组则相应给予生理盐水。持续性缺血6h后处死动物, 观测各组大鼠脑梗死体积，神经元受损程度，采用RT-PCR法和免疫组化方法分别检测缺血脑组织HSP70 mRNA和蛋白的含量。结果局灶性脑缺血6h后,化瘀克塞汤预处理高、低剂量组可明显减轻神经元受损程度，降低脑梗死体积（P<0.01,P<0.05）。缺血组HSP70 mRNA及蛋白表达明显增强,化瘀克塞汤高剂量组与缺血组相比,HSP70 mRNA及蛋白表达水平明显较低(P<0.01,P<0.05),在低剂量组也较低(P<0.01,P<0.05)。结论化瘀克塞汤预处理可使局灶性脑缺血大鼠HSP70表达下降，可能与化瘀克塞汤对脑缺血的保护作用减轻了应激反应有关。     

脑梗死大鼠经血管内皮生长因子165基因治疗后热休克蛋白70的表达

OBJECTIVE: To investigate the expression of heat shock protein 70 (HSP70) in the brain of rats with cerebral infarction after the administration of vascular endothelial growth factor 165 (VEGF165) gene therapy, thereby to provide molecular basis for clinical gene therapy of cerebral infarction. METHODS: Twenty-five Wistar rats were divided equally into 5 groups, namely normal control group, sham-operated control group, middle cerebral artery occlusion group (MACO group), eukaryotic expression plasmid group (pUCCAGGS group) and gene therapy group (receiving pUCCAGGS/hVEGF165).Rat models of permanent MACO was established by ligation with nylon suture, and in the latter two groups, pUCCAGGS or pUCCAGGS/ hVEGF165 was directly injected into the infarcted area. Seven days after the infarction, the rats were killed to obtain the brain tissues for immunohistochemical detection of HSP70 expression. RESULTS: In the rat brain cortex of the normal and sham-operated control group, similar low levels of HSP70 expression were detected (P >0.05), while in the MCAO group and pUCCAGGS group, HSP70 levels were both significantly higher (P <0.01), showing no differences between the latter two groups (P >0.05). Most intense HSP70 expression was detected in the gene therapy group (P <0.01). In the penumbra of the infarct area, MCAO, pUCCAGGS, and gene therapy group all had high expression levels of HSP70, which were comparable in the former two groups (P >0.05), with the highest expression levels occurring in the latter group. Within the infarct area, similar expression pattern was observed (P <0.01). CONCLUSION: The elevated HSP70 expression in response to VEGF165 gene therapy in the rats as observed in this study suggests the potency of VEGF165 gene to induce HSP70 expression.