从黑线姬鼠肺细胞中分离一株病毒的鉴定

<正> 黑线姬鼠是肾型流行性出血热(简称出血热,EHF)的传染源和储存宿主。Lee氏利用间接免疫萤光抗体(FA)方法,从黑线姬鼠肺细胞中检测到朝鲜出血热(KHF)病毒抗原,随后病原分离成功。我们曾利用黑线姬鼠的肝、肾组织分离EHF病毒,未获阳性结果。1979年在试图建立黑线姬鼠肺细胞株过程中,我们从连续传代的黑线姬鼠肺细胞中获得大小     

关于中国湖北省流行性出血热与朝鲜流行性出血热的病毒病因关系

<正> 在 Lee 等的报告中,证实了中国浙江省流行性出血热患者恢复期血清中,含有高效价的同朝鲜出血热病毒抗原起特异性免疫萤光反应的抗体。实验是应用间接免疫萤光法对三种来源的朝鲜出血热病毒抗原进行的:(1)黑线姬鼠肺(2)Wistar 大白鼠肺(3)A-549细胞系。最近又从中国湖北省的流行性出血热患者得到了10份恢复期血清,3份急性期血清。     

中国野鼠(Apodemus agrarius)肺抗原同朝鲜出血热特异抗体之间对流免疫沉淀反应特异性的检定

<正> 流行性出血热是一种自然疫源性疾病,国外的病原学研究已达40年之久。曾使用多种动物和细胞分离病毒均未成功。直到1976年,朝鲜李镐汪和李平佑首次报告用免疫萤光技术在黑线姬鼠肺和肾组织检出了一种抗原,能与朝鲜出血热病人恢复期血清发生特异性反应。1977年,他们在黑线姬鼠和出血热病人急性期血清中分离出朝鲜出血热病毒(KHF 病毒)。并作了鼠肺切片电镜观察的报导。其后又将 KHF 病毒适应到A-549细胞系,Wistar 大白鼠肺和黑线姬鼠肺。同时,通过免疫萤光技术确定了朝鲜     

自然感染肾综合征出血热病毒大鼠组织中病毒抗原及抗体的定…

作应用小鼠抗肾综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）单克隆抗体（ＭＡｂｓ）对经检测清抗体阳性率为２８％的５０只大鼠组织中病毒抗原及抗体（内源性免疫球蛋白，ＥＩｇ）进行了研究。结果：５０只大鼠，１５只仅检测到病毒抗原阳性，１０只仅检测到ＥＩｇ阳性，１８只抗原、ＥＩｇ均阳性，７只抗原、ＥＩｇ均阴性，其中的血清抗体阳性鼠分别有２，６，３，３只。总抗原阳性率为６６％，ＥＩｇ阳性率为５６％。病毒抗原分布于心肌细胞     

应用疫区鼠肺抗原检测流行性出血热特异性抗体的初步报告

<正> 目前,诊断流行性出血热(EHF)的方法仍然仪凭临床资料。如能同时检测特异性抗体,无疑对EHE的确诊更为有利。国内外均报告可用感染出血热病毒的A_(549)细胞涂片检测特异性抗体。宋氏报告过用非疫区黑线姬鼠感染EHF病毒的传代鼠肺抗原检测特异性抗体的方法。但是将疫区野生鼠肺进行组织切片,用作血清学诊断尚未见报道。本文报道用此法检测30例经临床确诊的EHF病人血清结果,初步证明该方法有一定的实用价值。     

湖北省疫区黑线姬鼠肺组织流行性出血热特异性抗原的免疫荧光检查

<正> 1976年李镐旺等关于朝鲜出血热(KHF)抗原-抗体系统的发现,使得历时40余年。一直未获成功的流行性出血热(EHF)病原学研究发生了一个新的转折。他们首先用间接免疫荧光技术在朝鲜出血热(KHF)疫区黑线姬鼠肺、肾等组织中找到了一种抗原,能与KHF病人恢复期血清发生特异性反应。其后又报导从黑线姬鼠肺和EHF病人急性期血清中分离出朝鲜出血热病毒。除将病毒适应于非疫区黑线姬鼠以外,KHF病毒还被适应于Wistar大白鼠和A-549细胞。朝鲜出血热与苏联、     

肾综合征出血热病毒单克隆抗体的研究与应用

作者概要地报道我室近年来对肾综合征出血热病毒单克隆抗体(McAb)的研究与应用,包括:①肾综合征出血热病毒及其血凝素抗原McAb杂交瘤细胞系的建之与鉴定,②选择其中高效优质的McAb进行病毒的抗原性分析;③以McAb亲和层析纯化病毒结构蛋白及其分析鉴定,④纯化HFRS-McAb及其应用;⑤以Mcab-IFAT检验HFRS患者外周血白细胞中的病毒抗原;⑥建立了McAb-ELISA间接夹心法检测HFRS病毒抗原、检测不同疫区人和动物血清中特异性抗体(IgM和IgG)、患者血清中血凝抑制抗体等。并已应用于研究HFRS病毒结构及其特征、纯化病毒抗原组份及保护性抗原,对本病的早期快速检验诊断、流行病学调查、研究疫苗及免疫治疗等都有重要意义。     

非标记抗体技术在流行性出血热病毒抗原研究中的应用

将非标记抗体技术应用于流行性出血热病毒抗原研究,对感染细胞内病毒抗原及经免疫转印到硝酸纤维膜上的病毒多肽抗原进行了检测,并分别与间接免疫荧光和间接酶标抗体方法进行了比较。结果表明,非标记抗体技术敏感性高,背景浅,可用于流行性出血热病毒抗原检测与分析。用非标记抗体技术及间接免疫荧光法对流行性出血热单克隆抗体培养上清液进行筛选,两种方法阳性检出率相同(7.29％,7/96),但前者滴度(1:16～256)高于后者(1:4～32)。     

自然感染肾综合征出血热病毒大鼠组织中病毒抗原及抗体的定位研究

作者应用小鼠抗肾综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）单克隆抗体（ＭＡｂｓ）对经检测血清抗体阳性率为２８％的５０只大鼠组织中病毒抗原及抗体（内源性免疫球蛋白，ＥＩｇ）进行了研究。结果：５０只大鼠中，１５只仅检测到病毒抗原阳性，１０只仅检测到ＥＩｇ阳性，１８只抗原、ＥＩｇ均阳性，７只抗原、ＥＩｇ均阴性，其中的血清抗体阳性鼠分别有２，６，３，３只。总抗原阳性率为６６％，ＥＩｇ阳性率为５６％。病毒抗原分布于心肌细胞、肝细胞、脾淋巴细胞、肺支气管粘膜上皮及肺泡壁、肾小管上皮细胞、唾液腺闰管及腺上皮，以及肾上腺腺细胞，Ｇ２抗原多为弥漫性，ＮＰ抗原呈颗粒状包涵体或弥漫性阳性，其中１８只组织中可同时有抗体阳性。ＥＩｇ阳性见于各组织的血管内皮，特别是肾小球毛细血管，以及单核吞噬细胞系统；在心肌和肝脏有呈散在分布的心肌及肝细胞ＥＩｇ阳性。以上结果提示：血清抗体，组织中抗原和抗体三者间无明确一致关系，抗原的检测可能更好地反映动物的带毒状况；另外，大鼠组织中有抗原和免疫复合物存在，作者在本文对大鼠感染ＨＦＲＳＶ病变不严重，亦不引起发病进行了讨论。     

宁夏某非疫区肾综合征出血热的流行病学调查分析

目的基于宁夏某非疫区发生1例肾综合征出血热病例,故对该地部分人群及宿主动物肾综合征出血热感染情况进行调查。方法采集患者急性期和恢复期血液标本;在患者现居住地及周边地区随机调查16～60周岁人群,采集血液标本;居民区及野外进行鼠种构成、密度调查,并采集鼠血、鼠肺标本。对人、鼠标本分别进行出血热抗体或抗原检测。结果患者急性期血清肾综合征出血热病毒IgM抗体阳性,恢复期血清特异性IgG抗体阳性,为实验室确诊病例。患者居住地96份人群血清肾综合征出血热IgG抗体均为阴性。居民区鼠密度为2.10%,优势鼠种为小家鼠;野外鼠密度为2.40%,优势鼠种为小家鼠。81份鼠肺、鼠血标本中,鼠肺出血热抗原、鼠血出血热IgG抗体均为阴性。结论此次调查工作虽未找到流行性出血热传染源,但病例为确诊病例,需加强宿主动物监测工作和宣传教育工作,探索病例发生的原因,有效防控疫情。     

双单克隆抗体ELISA间接夹心法检测HFRS病毒抗原的实验研究

间接荧光抗体技术(IFAT)已广泛用于肾综合征出血热(HFRS)病毒抗原的检测,其不足之处是需用荧光显微镜,有一定主观性及不能检测可溶性抗原。本文建立了以同样的抗HFRS病毒单克隆抗体(McAb)作为包被和第二抗体,以酶标葡萄球菌A蛋白(SpA)作指示抗体的双McAb ELISA间接夹心法,初步用于感染细胞培养上清及组织标本中HFRS病毒抗原的检测,获得较满意结果。     

广州市2001～2002年肾综合征出血热监测结果分析

目的 了解广州市2001～2002年肾综合出血热在人间和鼠间的流行情况，为修订控制措施提供依据。方法 根据疫情报告对患和疑似患进行免疫荧光抗体IgG检测；从居民、野外监测用笼捕捉鼠类，用乙醚麻醉鼠后鉴别鼠种和性别，无菌剖肺、取血，检测特异性抗原、抗体(Ag、Ab)，计算其鼠密度，鼠带病毒密度、鼠带病毒率及带病毒率指数。结果 2001—2002年全市肾综合征出血热(HFRS)发病率分别为0．44／10万和0．40/10万，无死亡病例，外来人员两年中在广州市感染发病60例，病死1例；在市区的2个鼠间疫情监测点和五个区居民及野外监测全年采集各种鼠肺、血清各为1872份。其中褐家鼠1711份，HV抗原阳性146份(8．5％)，抗体IgG阳性137份(8．0％)，总感染率为8．7％(149／1711)，黄胸鼠81份，HV抗原阳性2份(2．5％)，抗体IgG阴性；臭鼩鼱30份，HV抗原阳性1份(3．3％)，抗体IgG I份阳性(3．3％)，其分鼠种抗原、抗体全部阴性；2001年首次在白云区监测中，检出褐家鼠肺中1份为姬鼠型病毒。结论 通过监测证实家鼠型疫区可能演变成混合型疫区。     

膜性肾病患者肾组织M型磷脂酶A2受体1抗原及其抗体的表达差异

目的 探讨肾组织M型磷脂酶A2受体1(PLA2R1)抗原及其抗体在膜性肾病(MN)患者中的表达水平.方法 选取经肾活检证实的特发性MN(IMN)58例、乙型肝炎病毒相关性MN(HBV-MN) 15例、V型狼疮性肾炎(V-LN) 17例.采用间接免疫荧光法检测肾组织PLA2R1抗原,并与IgG4共定位.同时检测上述MN患者血清抗PLA2R1抗体.分析肾组织PLA2R1抗原及其抗体在MN中的表达差异,以及PLA2R1阳性与阴性患者临床资料的差异.结果 VLN及HBV-MN患者肾组织及血清中均未发现PLA2R1抗体;在81.03％ IMN患者肾组织检测到PLA2R1抗原,70.69％ IMN患者血清中检测到PLA2R1抗体,PLA2R1抗原与IgG4共定位,均沿肾小球毛细血管袢呈细颗粒状沉积.PLA2R1抗原阳性患者24 h尿蛋白定量高于阴性患者(P＜0.05),并且血清清蛋白低于阴性患者(P＜0.05).结论 肾组织PLA2R1抗原在IMN的诊断中敏感性及特异性均较高,且表达与临床病情严重性明显相关.     

西安市流行性出血热隐性感染追踪调查

<正> 笔者1982年在出血热重疫区,用间接免疫荧光技术检测288例正常人出血热抗体水平,了解本病是否存在隐性感染问题,结果发现15例阳性。为了进一步了解其血清中抗体存留的期限,1982年—1984年又进行了3年的追踪调查,现报告如下。一、材料、方法1.抗原片:鼠肺抗原片:我市出血热疫区捕获的黑线姬鼠,取其肺冷冻切片,用间接免疫荧光技术检测的出血热病毒鼠肺抗原片。经中国医学科学院流研所鉴定。鼠脑抗原片:     

山东省家猪感染肾综合征出血热病毒流行病学调查和实验研究

目的了解家猪在肾综合征出血热(HFRS)疫区的流行病学意义,探讨家猪与HFRS发病的关系。方法以HFRS病毒(HFRSV)抗原和抗体为指标,采用反向间接血凝法(RPHA),血凝抑制法(RPHI),酶标葡萄球菌A蛋白(HPR-SPA),间接免疫荧光法(IFA)和PCR反应对山东部分地区家猪自然感染HFRSV的情况进行检测。结果家猪心、肝、脾、肺、肾等脏器及血、尿、粪和猪圈内污物检出HFRSV抗原与抗体,脏器抗原阳性率为3.33%~5.00%。而血、尿、粪和圈内的污染物抗原阳性率分别为3.67%、7.04%、2.51%和5.56%,血清抗体阳性率为1.96%,并从HFRSV抗原阳性的多种标本分离出病毒。人工感染后病毒可随血液波及多个脏器,二次感染乳鼠脑可检出HFRSV抗原。二次组织病理学检查发现肺、肝、肾等脏器有一过性病理改变;HFRSV可在猪体内增殖,并经多途经排出体外。结论家猪可能是HFRSV的扩散宿主动物。     

广州市某高校动物实验室生物安全事件的调查与分析

目的分析广州市某高校肾综合症出血热实验室感染事件的原因,探讨维护动物实验室生物安全的预防控制措施。方法开展现场流行病学调查,采集人血、鼠血标本进行出血热抗体检测,采集鼠肺标本进行出血热抗原检测。结果患者被诊断为实验室确诊病例。实验动物鼠肺标本抗原阳性率为9.30%(4/43),鼠血标本抗体阳性率为1.82%(1/55),阳性标本均来自开放饲养区的实验用大白鼠;21份野鼠鼠肺标本抗原检测均为阴性,鼠血标本抗体阳性率为25.00%(2/8);实验动物提供单位采集的40份血清标本均为阴性;实验室相关工作人员血清标本抗体阳性率为1.67%(1/60)。结论动物实验室基础设施不完善是造成该事件的主要原因,感染肾综合征出血热的野鼠将病毒传播给开放饲养区的大白鼠,最终导致了实验工作人员感染发病,提示我们动物实验室的监管以及动物实验室工作人员的生物安全意识亟待加强。     

分泌肾综合征出血热病毒单克隆抗独特型抗体的杂交瘤细胞系的建立

目前,关于病原性微生物、激素、生物受体及细胞表面标记抗原的抗独特型抗体研究已广泛展开,但迄今尚未见有关肾综合征出血热病毒(HFRSV)的单克隆抗独特型抗体(McAb_2)的研究     

流行性出血热病毒抗原抗体同步检测85例报告

本文报道一种新的流行性出血热诊断方法。运用免疫学和免疫组织化学原理,采用免疫金银染色法作流行性出血热病毒抗原、抗体同步检测。用胶体金标记的L—133流行性出血热单克隆抗体,在患者淋巴细胞膜上直接显示出流行性出血热病毒抗原决定簇与膜受体的反应位置。又以患者血清为一抗,按滴度滴加于流行性出血热细胞抗原片上;用间接法显示患者受感染后机体产生的抗出血热病毒抗体滴度。前者用以确定患者是否已受感染或机体内是否尚存有病毒;后者为测定患者对病毒的反应能力,即所产生的抗病毒抗体滴度。     

黑龙江省2019—2021年肾综合征出血热患者血清标本抗体检测

目的 检测黑龙江省2019—2021年肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome, HFRS)疑似患者血清标本中的汉坦病毒急性期和恢复期抗体水平,为该疾病防控提供科学依据。方法 应用酶联免疫吸附法对采集到的肾综合征出血热疑似患者急性期血清样本进行汉坦病毒IgM抗体检测,对恢复期血清标本进行IgM单抗体、IgG单抗体检测,使用SPSS 19.0软件对各年份间患者急性期血样IgM抗体阳性率进行χ²检验分析,使用EpiData 3.1和Excel2003软件对患者性别、职业、年龄、发病日期及初诊间隔时间数据进行整理分析。结果 共检测肾综合征出血热疑似患者急性期血清351份,恢复期血清208份。急性期血清标本IgM抗体阳性317份,阳性率为90.31%,各年份之间患者急性期IgM抗体阳性率差异无统计学意义(χ²=0.895,P=0.639)。患者恢复期血清IgM单抗体阳性32份(15.39%);血清IgG单抗体阳性28份(13.46%);IgM、IgG抗体双阳性148份(71.15%)。男女患者性别比4...     

山东省家猪感染肾综合征出血热病毒流行病学调查和实验研究

目的 了解家猪在肾综合征出血热(HFRS)疫区的流行病学意义，探讨家猪与HFRS发病的关系。方法 以HFRS病毒(HFRSV)抗原和抗体为指标，采用反向间接血凝法(RPHA)，血凝抑制法(RPHI)，酶标葡萄球菌A蛋白(HPR-SPA)，间接免疫荧光法(IFA)和PCR反应对山东部分地区家猪自然感染HFRSV的情况进行检测。结果 家猪心、肝、脾、肺、肾等脏器及血、尿、粪和猪圈内污物检出HFRSV抗原与抗体，脏器抗原阳性率为3.33％～5．00％。而血、尿、粪和圈内的污染物抗原阳性率分别为3.67％、7.04％、2．51％和5.56％，血清抗体阳性率为1．96％，并从HFRSV抗原阳性的多种标本分离出病毒。人工感染后病毒可随血液波及多个脏器，二次感染乳鼠脑可检出HFRSV抗原。二次组织病理学检查发现肺、肝、肾等脏器有一过性病理改变;HFRSV可在猪体内增殖．并经多途经排出体外。结论 家猪可能是HFRSV的扩散宿主动物。