白藜芦醇对髓系白血病干细胞增殖和凋亡的影响及其与allo-NK细胞的联合杀伤作用

目的探讨白藜芦醇(RES)对髓系白血病干细胞(CD34+CD38-KG1a细胞,以下简写为KG1a细胞)增殖和凋亡的影响,并初步探讨RES增强allo-NK细胞对KG1a细胞杀伤作用的机制。方法免疫磁珠分选法分选人外周血单个核细胞(PBMCs)中的CD16+CD56+CD3-NK细胞(以下简写为NK细胞)。流式细胞术检测细胞表面分子CD34、CD38、CD3、CD15和CD56。MTT法、甲基纤维素克隆形成实验检测RES对KG1a细胞增殖抑制作用。DAPI染色法和流式细胞术检测RES对KG1a细胞凋亡的影响。使用IC50的RES作用KG1a细胞24 h后清洗离心获得RES/KG1a细胞。LDH释放法检测NK细胞对KG1a细胞和RES/KG1a 2种细胞的杀伤能力。流式细胞术检测KG1a细胞和RES/KG1a细胞的表面配体ULBP1、ULBP2、ULBP3、MICA和MICB。结果免疫磁珠分选后,外周血单个核细胞中的NK细胞比例为(90.5±3.2)%;KG1a细胞纯度为(91.2±3.9)%。RES对KG1a细胞的增殖抑制作用具有时间和剂量依赖性,24 h的IC50=24.0μmol·L-1;48 h的IC50=13.7μmol·L-1。RES抑制KG1a细胞的克隆形成能力并诱导细胞凋亡,具有剂量依赖性(P<0.05)。NK细胞对RES/KG1a细胞的杀伤能力比其对KG1a细胞的杀伤能力强(P<0.05)。与KG1a细胞比较,RES/KG1a细胞表面配体ULBP1、ULBP2、ULBP3表达明显上调(P<0.05),MICA和MICB变化不明显。结论 RES能够抑制KG1a细胞增值抑制并诱导细胞凋亡,联合NK细胞对KG1a细胞具有协同杀伤作用,这可能与KG1a细胞表面的ULBP1、ULBP2、ULBP3表达上调相关。     

昆明地区单采血小板献血者HPA1-17系统基因多态性的分析

目的研究昆明地区单采血小板献血者HPA1-17基因多态性,建立已知型血小板献血者基因数据资料库。方法分别PCR-SSP方法对1000名昆明地区无血缘关系的单采血小板献血者做HPA-1-17系统基因分型,计算基因型频率、基因频率,并与其他人群进行比较。结果在昆明地区人群中均检测到HPA-1a,2a,4a-14a,16a,17a基因;HPA-4a,7a-14a,16a,17a呈现单态性,未检测出相应的等位基因HPA-b;对于HPA-1、-2、-5、-6主要以a/a纯合子为多,a/a基因型频率分别是0.989、0.96、0.99、0.98,没有b/b纯合子出现。在HPA1-17中,具有最高杂合度的是HPA-15,基因型HPA15a/15a,HPA15a/15b,HPA15b/15b频率分别是0.392、0.36、0.248;HPA-3在其次,基因型HPA3a/3a,HPA3a/3b,HPA3b/3b频率分别是0.339、0.467、0.194。经χ2检验,结果符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律。结论昆明地区单采血小板献血者HPA1-17基因频率与中国南方汉族接近,也呈现其自身的特点,应建立本地区的单采血小板献血者基因分型数据库。     

低氧诱导因子1α在急性肺损伤发病机制中的研究进展

低氧诱导因子1a（HIF-1a)能与β亚基结合形成二聚体复合物，调节下游基因的表达参与低氧适应、机体炎症反应、免疫调节等，在急性肺损伤中发挥重要作用。本文就NF-kB/HIF-1a、ROS/HIF-1a、腺苷A2/HIF-1a途径与急性肺损伤发病机制的研究进展进行综述。     

ASIC1a对大鼠关节软骨细胞基质代谢及MAPK信号通路表达的影响

目的研究ASIC1a(acid-sensing ion channel 1a)对大鼠关节软骨细胞基质代谢及MAPK信号通路表达的影响。方法 SD大鼠关节软骨细胞分离、培养与鉴定,建立软骨细胞ASIC1a表达沉默模型。将软骨细胞分为正常组(pH7.4)、pH 6.0酸化组、以及ASIC1a特异性阻滞剂PcTx-1、表达沉默组和非特异性阻滞剂Amiloride处理的酸化组,对二甲基亚甲蓝分光法检测大鼠关节软骨细胞培养上清中GAG的含量,氯胺T法检测Hyp的含量,ELISA法检测MMP-2、TIMP-2的含量,Western blot法检测酸化及阻断ASIC1a后ERK1/2、p38 MAPK磷酸化蛋白的表达。结果激活ASIC1a明显抑制大鼠关节软骨细胞GAG、Hyp和TIMP-2代谢水平(P<0.01),对MMP-2的代谢水平降低抑制作用较弱(P<0.01),且ASIC1a能引起ERK1/2、p38 MAPK磷酸化水平升高,阻断ASIC1a后,磷酸化水平升高受到明显抑制(P<0.01)。结论 ASIC1a参与了酸诱导的大鼠关节软骨细胞基质代谢的失衡,其机制可能与激活ERK1/2和p38MAPK磷酸化有关。     

有机阴离子转运多肽1B1（OATP1B1）遗传多态性对瑞格列奈药动学的影响

目的：研究有机阴离子转运多肽1B1（OATP1B1）遗传多态性对瑞格列奈药动学的影响。方法：16名健康男性受试者单剂量po 4 mg瑞格列奈片,并考察其SLCO1B1（OATP1B1的编码基因）常见单体型（SLCO1B1＊1a、＊1b、＊5和＊15）,按基因型将其分成＊1b/＊1b、＊1a/＊1a或＊1a/＊1b、＊1a/＊15或＊1b/＊15三组,采用HPLC-MS-MS法测定给药后不同时间瑞格列奈的血药浓度。利用DAS 2.0计算药动学参数和SPSS 12.0评价统计学差异。结果：SLCO1B1＊1b/＊1b、SLCO1B1＊1a/＊1a或＊1a/＊1b和SLCO1B1＊1a/＊15或＊1b/＊15三组受试者的AUC0-8 h分别为（63±20）、（70±26）和（82±24）μg.L-1.h,Cmax分别为（56±16）、（52±17）和（58±34）μg/L,三者之间差异没有统计学意义。结论：OATP1B1遗传多态性对瑞格列奈药动学有影响,但从本试验结果看,三组之间的差异较小,还不足以影响临床用药的安全性和有效性。     

结核感染病人血清中多种蛋白测定的意义

为探讨结核感染病人血清中多种急性蛋白变化规律 ,对结核感染病人 45例及 40例正常人血清中的巨球蛋白 ( a2 -MG)、a1 -抗胰蛋白酶 ( a1 -AT)、a1 -酸性糖蛋白 ( a1 -AG)、转铁蛋白 ( Tf)、Clq、补纤 C9、B因子含量进行了测定与评价。结果显示 ,结核感染病人血清中 a2 -MG、a1 -AT与正常人血清组比较呈高度显著性正相关 ( P<0 .0 1) ,Tf与正常人血清比较呈显著性正相关 ( P<0 .0 5 ) ;而结核感染病人血清中 a1 -AG、B因子与正常人血清组比较呈高度显著性负相关 ( P<0 .0 1) ,Clq、C9对正常人血清比较呈显著性负相关 ( P<0 .0 5 )     

miR-199a在妊娠糖尿病中的表达及参与胰岛素抵抗的作用机制研究

目的　探究微小RNA（miR）-199a在妊娠糖尿病（GDM）中的表达及调控沉默信息调节因子1（SIRT1）/叉头盒转录因子O1（FOXO1）通路参与胰岛素抵抗（IR）的机制。方法　GDM孕妇56例为GDM组,正常孕妇60例为正常孕妇组,实时荧光定量PCR（qPCR）检测2组胎盘中miR-199a水平;计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）;Pearson相关分析miR-199a与HOMA-IR的相关性。体外培养人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo并建立IR模型。miR-199a功能验证：细胞依处理方式不同分为模型组、miRNA inhibitor NC组、miR-199a inhibitor组、miRNA mimic NC组、miR-199a mimic组;qPCR检测各组细胞中miR-199a表达情况,蒽酮法检测细胞内葡萄糖吸收量,试剂盒检测超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平,Western blot检测SIRT1、FOXO1、乙酰化（Ac）-FOXO1蛋白水平,双荧光素酶报告基因实验鉴定miR-199a与SIRT1的靶向关系。结果　与正常孕妇组比较,GDM组胎盘中miR-199a、HOMA-IR水平升高（P＜0.05）;GDM组miR-199a水平与HOMA-IR呈正相关（P＜0.05）。棕榈酸、胰岛素共同作用细胞24 h成功建立IR模型。与模型组和miRNA inhibitor NC组比较,miR-199a inhibitor组miR-199a、MDA水平降低,葡萄糖吸收量、SOD水平、SIRT1蛋白水平升高（P＜0.05）。与模型组和miRNA mimic NC组比较,miR-199a mimic组miR-199a和Ac-FOXO1蛋白表达升高、MDA水平升高,葡萄糖吸收量、SIRT1蛋白水平降低（P＜0.05）。Tarbase数据库分析显示,miR-199a与SIRT1存在互补的结合位点,并经双荧光素酶实验证实。结论　GDM患者胎盘中miR-199a高表达,升高的miR-199a可通过靶向下调SIRT1而促进FOXO1乙酰化,导致IR。     

慢性肺源性心脏病患者血清脂蛋白(a)的临床意义

目的观察慢性肺源性心脏病患者血清脂蛋白(a)[Lp(a)]的临床意义。方法采用联合火箭电泳法分别检测40例慢性阻塞性肺病(COPD)、32例慢性肺心病及40例健康志愿者血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TCH)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、载脂蛋白A1(ApoA1)、载脂蛋白B(ApoB)及脂蛋白(a)[Lp(a)]水平。结果COPD及肺心病TG、TCH、HDL、Lp(a)、ApoB升高,LDL、ApoA1、ApoA1/ApoB降低,肺心病组Lp(a)水平较COPD组升高更为明显,各组间比较提示Lp(a)有统计学差异。结论脂蛋白(a)的异常更能反映慢性肺心病的脂质代谢异常,Lp(a)高低与慢性肺心病发病有相关性。     

红景天提取液对大鼠心肌缺血预处理的实验研究

目的探讨红景天提取液对大鼠心肌缺血预处理后的心肌保护作用机制。方法将20只健康大鼠随机分为模型组、红景天组,两组均经尾静脉注射垂体后叶素,建立急性心肌缺血模型,红景天组尾静脉注射红景天提取液2 mL/(kg·d),模型组给予等体积生理盐水。于缺血前及缺血预处理1周后,尾静脉取血测定血清超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性,断头取心,以ELISA法测定大鼠缺血心肌组织受体胎肝激酶1(FLK-1)蛋白及FLK-1a mRNA,缺氧诱导因子-1a(HIF-1a)蛋白及HIF-1a mRNA,缺血心肌组织中丙二醛(MDA)。结果与模型组及缺血预处理前比较,红景天组在缺血预处理1周后FLK-1蛋白及FLK-1 mRNA、HIF-1a蛋白及HIF-1a mRNA表达明显增强,CAT、SOD活性提高,MDA含量明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论红景天提取液可提高预处理后FLK-1蛋白、HIF-1a蛋白、FLK-1 mRNA、HIF-1a mRNA表达及自由基清除酶活性,减轻急性心肌缺血大鼠血管内皮炎症反应,抑制脂质过氧化反应,对心肌缺血有一定的保护作用。     

聚乙二醇修饰胰高血糖素样肽1类似物反应条件的响应面法优化#br#

目的 用响应面法对马来酰亚胺活化相对分子质量40 000的聚乙二醇（polyethylene glycol,PEG）（MAL-PEG_40K）修饰胰高血糖素样肽1类似物（glucagon-like peptide-1 analog,GLP-1a）的反应条件进行优化。方法 对GLP-1a浓度、GLP-1a/MAL-PEG40K摩尔比、反应液pH值、反应温度、反应时长进行单因素试验。以前3个条件为自变量, PEG修饰率为响应值,根据中心组合试验设计原理,研究各自变量及其交互作用对PEG修饰率的影响。通过高效液相色谱法分析PEG修饰率,依据回归分析确定各反应条件的最优值。 结果 GLP-1a与MAL-PEG_40K的最佳反应条件为：GLP-1a浓度2.5 mg/ml,GLP-1a/MAL-PEG_40K摩尔比1∶1.25,反应液pH 8,反应温度4 ℃,反应时长60 min。该优化条件下,GLP-1a的PEG修饰率可达91.0%。结论 响应面法获得了GLP-1a与MAL-PEG_40K的最佳反应条件。     

含噻唑烷-4-酮类核苷的免疫调节功能研究

目的 利用小鼠脾细胞实验建立的免疫活性研究平台,进一步阐明含噻唑烷-4-酮环类核苷的免疫增强活性,并评价其作为药物的潜在开发价值.方法通过体外细胞学实验观察含噻唑烷-4-酮环糖类衍生物CH1a、CH2a、CH1b和CH2b对丝裂原[刀豆蛋白A(Con A)、脂多糖(LPS)]处理的脾淋巴细胞增殖能力的影响,用酶联免疫吸附测定(ELISA) 法检测CH1a、CH2a、 CH1b、CH2b对淋巴细胞产生的细胞因子白细胞介素(IL) 2、IL-4和γ干扰素(IFN-γ)的影响.所有实验指标均与免疫调节药匹多莫德比较.结果化合物CH1a、CH2a、CH1b和CH2b均可增强ConA处理脾细胞的增殖能力,与匹多莫德比较差异有统计学意义(P＜0.01);CH1b和CH2b可促进LPS处理的脾细胞增殖,作用明显强于匹多莫德(P＜0.01),化合物CH1a、CH2a无明显促进LPS处理脾细胞的增殖(P＞0.05).CH1a、CH2a、CH1b和CH2b均可明显促进细胞因子IL-2和IL-4的增殖,与匹多莫德比较差异有统计学意义(P＜0.01).对于IFN-γ,CH1a、CH2a、匹多莫德可明显促其增殖(P＜0.01),而CH1b和CH2b对IFN-γ的增殖影响不大.结论含噻唑烷-4-酮类核苷CH1a、CH2a、 CH1b、CH2b对小鼠的免疫活性具有较好的增强作用,有可能成为潜在的免疫调节佐剂.     

重症肺炎 64例外周血微 RNA-34a、沉默信息调节因子 1的表达

目的研究重症肺炎病人外周血微 RNA-34a(miR-34a)、沉默信息调节因子 1(Sirt1)的表达变化及临床意义。方法选取 2017年 10月至 2020年 4月武警重庆总队医院收治的 64例重症肺炎病人为重症肺炎组,同期收治的 80例普通肺炎病人为普通肺炎组,进行健康体检的 70例健康志愿者为对照组。采用实时荧光定量 PCR法( qRT-PCR)检测外周血 miR-34a表达水平,采用酶联免疫吸附法检测血清 Sirt1、炎症细胞因子表达水平; Kaplan-Meier生存分析研究 miR-34a与 Sirt1表达水平与重症肺炎组病人预后的关系; Cox回归分析影响重症肺炎病人预后的因素。结果重症肺炎组 miR-34a的表达水平高于普通肺炎组和对照组( 1.65±0.28比 1.32±0.33、1.00±0.25)Sirt1表达水平低于普通肺炎组和对照组［( 6.83±1.59)μg/L比( 8.94±1.62)μg/L、(12.11±1.77)μg/L］(P<0.05); miR-34a表达与 Sirt1表达水平存在明显负相关( P<0.05)。高危、中危病人 miR-34a表达水平高于低危病人, Sirt1表达水平低于低危病人( P<0.05),高危病人 miR-34a表达水平高于中危病人, Sirt1表达水平低于中危病人(P<0.05)。 miR-34a高表达病人血清肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)、细胞间黏附分子 -1(ICAM-1)、白细胞介素( IL)-6和高迁移率族蛋白 B-1(HMGB1)水平高于 miR-34a低表达病人, 30 d累积生存率低于 miR-34a低表达病人( P<0.05); Sirt1高表达病人血清 TNF-α、ICAM-1、IL-6、HMGB1水平低于 Sirt1低表达病人, 30 d累积生存率高于 Sirt1低表达病人( P<0.05)。ICAM-1、miR-34a及 Sirt1均是影响重症肺炎病人预后的独立危险因素( P<0.05)。结论重症肺炎病人外周血中 miR-34a表达增加与血清 Sirt1表达降低具有相关性,且 miR-34a、Sirt1的变化与病情加重、炎症反应激活、预后不良有关。     

灰色系统理论GM(1,1)模型预测的校正公式

设有原始数列 y1 ,y2 … ,yn累加生成 X(i) =y1 +y2 +… +yi(i=1,… ,n) ,X(t)≠ const,且满足 GM(1,1)模型 X (t) +ax(t) =b。定理　对上述模型参数 a与 b的灰色预测值 a与 b,有a= ln2 +a2 - a,b=ba/ a　 (a≠ 0 )b (a=0 )推论 1　估计量 a与 b的相对误差完全相同 ,且该相对误差 1- a/ a=1- b/ b是 |a|的严格增加函数。推论 2　a与误差 a- a都是 a的奇函数且都与 a同号 ,b与误差 b- b都是 b的奇函数且都与 b同号 ;a≠ 0时 |a|<|a|,ab≠ 0时 |b|<+|b|。推论 3　恒有 |a|<2 ;当 a…     

HIF-1a表达与膀胱癌生物学行为关系的研究

目的探讨膀胱肿瘤组织表达缺氧诱导因子 (HIF 1a)与肿瘤组织中微血管计数(MVC)、肿瘤分级、复发的关系。方法用免疫组化染色显示膀胱肿瘤组织中HIF 1a表达 ,并用计数定量血管形成 ,回顾性分析HIF 1a表达和MVC、肿瘤分级、复发的关系。结果正常膀胱粘膜 1 9例 ,膀胱肿瘤Ⅰ级 2 1例、Ⅱ级 2 7例、Ⅲ级 2 2例。HIF 1a表达 1 9例正常膀胱粘膜均为阴性 ,在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级膀胱肿瘤中HIF 1a阳性率分别为 2 9%、41 %和 64 % ,Ⅰ、Ⅲ级阳性率差别显著 (P <0 0 5)。 1 9例正常膀胱粘膜MVC为 0 ,在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级膀胱肿瘤中MVC分别为 39 71± 1 1 62、44 70± 1 1 52和 52 36± 1 6 83。其中Ⅰ、Ⅲ级相差显著 (P <0 0 5)。根据肿瘤属于初发或复发分组 ,初发组 51例 ,复发组 1 9例 ,HIF 1a阳性率分别为 35 %和 74% ,相差显著 (P <0 0 5)。MVC初发组和复发组分别为 42 68± 1 3 73和 53 47± 1 2 50 ,相差显著 (P <0 0 5)。结论HIF 1a阳性率和膀胱肿瘤MVC、肿瘤分级以及肿瘤复发率呈正相关关系 ,提示HIF 1a表达与膀胱肿瘤的生物学行为有关 ,可作为膀胱肿瘤生物学行为的标志     

2型糖尿病患者糖化血红蛋白与脂蛋白a关系探讨

目的探讨2型糖尿病患者血糖控制不佳时糖化血红蛋白(HbA1C)与脂蛋白(a)[lipoprotein(a),Lp(a)]水平之间的关系。方法对已挑选的HbA1C7%的92例糖尿病患者同时检测HbA1C及Lp(a),另测定60例正常体检者HbA1C及Lp(a)作为对照组,进行相关分析作统计学检查;根据HbA1C水平将升高组分成3组,对Lp(a)进行组间分析,并对Lp(a)与HbA1C进行相关性分析。结果 HbA1C升高组的Lp(a)水平高于正常对照组(P0.05);组间分析,三组之间Lp(a)水平差异无统计学意义(P0.05),相关分析发现Lp(a)与HbA1C无相关性。结论 2型糖尿病血糖控制不佳时HbA1C与Lp(a)无相关性,Lp(a)的升高不受HbA1c的影响,是独立于HbA1C之外的一项指标。     

CD1a在鞍区病变表达的临床病理学分析

目的 探讨CD1a在鞍区病变的表达情况及在病理诊断中的应用意义。方法 回顾性分析194例鞍区肿瘤及非肿瘤性病变的CD1a免疫组织化学染色情况。结果 CD1a在15例Rathke′s 囊肿内的正常垂体细胞、3例增生的腺垂体组织和28例朗格汉斯细胞组织细胞增生症均100%的弥漫性强阳性表达,但在76例垂体腺瘤仅7例灶性阳性。CD1a在6例垂体生殖细胞肿瘤、62例颅咽管瘤、1例颗粒细胞瘤和3例垂体细胞瘤均不表达。结论 CD1a可用于鉴别正常垂体细胞、腺垂体增生和垂体腺瘤,前两者呈弥漫性阳性,后者不表达或呈灶性阳性;由于正常垂体细胞表达CD1a,当有垂体炎时不要误诊为朗格汉斯细胞组织细胞增生症。     

艮他霉素C_(2a)的活力

艮他霉素有三个主要组份,即C_1、C_(1a)、C_2和小组份C_(2a)和C_(2b).其中C_(2a)是C_26'-C异构体,C_(2b)是C_(1a)6'-N-甲基物,即通称的相模湾霉素.     

酸敏感离子通道1a在酸诱导的大鼠肝星状细胞活化中的作用

目的：探讨酸敏感离子通道1a（ASIC1a）在酸诱导的大鼠肝星状细胞活化中的作用。方法：体外培养肝星状细胞株（HSC-T6）经处理后,乳酸脱氢酶（LDH）检测细胞毒性变化,RT—PCR检测ASIC1a mRNA表达,Western Blot和RT—PCR分别检测Calpain、Calcineurin蛋白和mRNA表达变化,免疫细胞化学法检测α-平滑肌肌动蛋白（α—SMA）的变化。结果：细胞酸化处理后ASIC1a含量明显上升;随着胞外pH值的下降,LDH释放量逐渐升高,ASIC1a阻滞剂可抑制酸化诱导的肝星状细胞LDH的释放量;酸化组肝星状细胞Calpain、Calcineurin mRNA和蛋白表达水平均明显增高,ASIC1a阻断剂组Calpain、Calcineurin mRNA和蛋白表达水平较酸化组明显降低;与酸化组相比,阻断ASIC1a可以降低HSC—T6中α—SMA的表达。结论：胞外酸化环境下可诱导肝星状细胞活化,阻断ASIC1a能明显降低酸化诱导的细胞活化。     

60岁以下男性心肌梗死患者脂蛋白(a)水平与载脂蛋白(a)表型的关系

目的比较60岁以下男性心肌梗死患者和健康对照的脂蛋白[Lp(a)]含量与载脂蛋白(a)[Apo(a)]表型频数分布的关系。方法采用酶法和免疫比浊法测定实验组和对照组的血清脂质,十二烷基硫酸钠-多丙烯酰胺冻胶电泳(SDS-PAGE)法和免疫印迹技术分析Apo(a)表型频数分布。结果两组的Lp(a)含量和Apo(a)表型频数分布差异有统计学意义;心肌梗死组中Apo(a)F、B、S1、S2、S1S2区带出现频率多于对照组,S3、S4和测不到表型者少于对照组;对照组的B、S1、S2表型较其他高相对分子质量Apo(a)表型者具有更高的Lp(a)含量。结论60岁以下男性心肌梗死患者具有更高的Lp(a)含量和更高比例的相对小分子质量Apo(a)表型;可以根据Lp(a)含量和Apo(a)表型预测心血管疾病的发生。     

注射用磷酸肌酸钠致过敏性休克1例

1病例 患者,女性,69岁,因发作性心前区疼痛10 a、加重伴心悸1周,于2012年2月6日入院。既往有冠心病史10 a,原发性高血压病史6 a,脑梗死、颈椎病病史3 a,长期口服马来酸依那普利、阿司匹林、辛伐他汀及复方丹参滴丸治疗,有青霉素过敏史。入院症状为胸闷、心悸,反复心前区、后背部疼痛,