Klotho蛋白减轻低氧/复氧诱导的心肌细胞系H9C2损伤

目的研究Klotho蛋白对低氧-复氧诱导的心肌H9C2细胞系损伤的保护作用及其机制。方法将H9C2心肌细胞分为对照组、低氧/复氧组(1%O_2低氧6 h, 5%CO_2以及95%空气培养箱中复氧2 h)和Klotho蛋白(10μg/mL)干预组。通过酶标仪间接测定细胞内钙离子([Ca~(2+)]_i)水平;CCK8法和TUNEL法分别检测细胞活性及细胞凋亡;分光光度法检测细胞中钠ATP酶(Na~+/K~+-ATPase,NKA)和反向模式钠/钙交换体(Na~+/Ca~(2+)-exchange,NCX)的活性。结果体外培养的H9C2细胞低氧/复氧(6 h/2 h)处理后可明显降低H9C2细胞活性(P0.05);增加细胞内Ca~(2+)水平和凋亡率(P0.05);降低细胞中Na~+/K~+-ATPase的活性(P0.05);增加反向模式Na~+/Ca~(2+)交换体的活性(P0.05);10μg/mL Klotho蛋白处理可明显减轻上述损伤。结论 Klotho蛋白可减轻低氧/复氧诱导下的H9C2细胞内钙超载,最终减少该细胞系细胞的凋亡。     

大鼠正中视前核注射血管紧张素Ⅱ对近球小管Na~+,K~+-ATPase活性的影响

目的:探讨大鼠正中视前核(MnPO)的血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对肾近球小管Na~+, K~+-ATPase活性的作用及其途径.方法:SD大鼠MnPO注射AngⅡ,注射后15、 45、 60、 75、 105、 145min取肾,分离单根近球小管,测定Na~+, K~+-ATPase活性;注射后取血测定血清的内源性洋地黄样物质(EDLS).结果:与MnPO注射人工脑脊液(aCSF)相比,注射AngⅡ后60min,血清EDLS水平达峰值,近球小管Na~+, K~+-ATPase活性降到最低值,注射后105min,近球小管Na~+, K~+-ATPase的活性和血清EDLS水平分别恢复到对照水平.MnPO注射AngⅡ后145min内的EDLS浓度与其近球小管Na~+, K~+-ATPase活性呈显著负相关.结论:AngⅡ作用于MnPO可抑制近球小管的Na~+, K~+-ATPase活性;AngⅡ在MnPO是通过AT1受体介导的;AngⅡ在MnPO通过AT1受体介导,远距离抑制近球小管Na~+, K~+-ATPase活性的途径,可能与EDLS释放增多有关.     

食盐及钙对大鼠血压和红细胞膜ATP酶活性的影响

细胞膜各种离子在血压调节中的作用早被人们重视。有关红细胞膜Na~+、K~+、Ca~(2+)和Mg~(2+)等许多重要离子转运与高血压的关系,已成为80年代高血压研究的最新进展之一。     

棉酚所致低钾血症机制的研究

棉酚是我国首创的男性避孕药,效果肯定。但部分棉酚受试者出现低钾血症,这成为临床上应用棉酚的主要障碍。本文研究了醋酸棉酚对人类红细胞Na~+、K~+跨膜流动的作用,观察了其对新鲜红细胞内Na~+、K~+浓度的影响,并测定了棉酚受试者红细胞内Na~+、K~+浓度及红细胞(Na~+,K~+)联合转运的活性,就棉酚引起低钾血症的机制提出了一种新的见解。     

心肌α肾上腺素受体耦联的多种亚细胞过程

心肌α受体所介导的正性肌力作用至少与胞内Ca~(2+)及肌原纤维对Ca~(2+)敏感性的增加均有关。此并非通过直接耦联L型钙通道,而可能经短暂K~+外向电流Ito的抑制实现。此外,磷酸肌醇代谢、Na~(a+)-H~+交换等也有涉及。     

地高辛单克隆抗体的研究——Ⅱ.特异性单克隆抗体对地高辛抑制家兔红细胞膜Na~+,K~+-ATP酶活性的拮抗作用

为探讨特异性抗体解除洋地黄毒性作用的机制,应用由淋巴细胞杂交瘤技术制备的高亲和力抗地高辛特异性MAb,研究了特异性抗体对地高辛抑制家兔红细胞(RRBC)膜Na~+,K~+-ATP酶活性的拮抗作用。实验结果表明,特异性MAb FD8可高效拮抗地高辛引起的Na~+,K~+-ATP酶活性抑制。10~(4·26)稀释的FD8 MAb腹水在试管内可使4ng/ml地高辛引起的酶活性抑制恢复达50％。给地高辛中毒动物静脉注射FD8 MAb腹水后,RBC膜Na~+,K~+-ATP酶活性抑制迅速恢复,RBC内Na~+、K~+离子浓度异常也得到恢复。本研究从受体水平证实了特异性MAb解除地高辛毒性的作用机制。     

神经生物学家的一个新信息:葡萄糖调节的钾通道

几乎在每一种细胞上都有K~+通道,各种不同类型的K~+通道(如不同大小的、电压依赖性的和非电压依赖性的、磷酸化的和非磷酸化的、由不同细胞内第二信使介导等),调节着细胞各方面的功能。然而,从药理学的观点看,K~+通道长期被认为同Ca~(2+)和Na~+通道的关系不大。尽管我们已经拥有一些通过调节Ca~(2+)或Na~+通道发挥作用的药物,但还     

精氨酸加压素对慢性肾衰大鼠心功能及其心肌细胞钠-钾-ATP酶活力的影响

用SD大鼠制作慢性肾衰(CRF)动物模型,观察其血浆与心肌精氨酸加压素(AVP)含量的变化;CRF大鼠静脉分别注射AVP及其抗血清,观察其对平均动脉压、左心室压峰值和心肌细胞钠-钾-ATP酶(Na~+,K~+-ATP酶)活力的影响。结果表明,CRF~+大鼠血浆及心肌AVP含量与血肌酐水平同步增高;静脉注射AVP标准品,可使心肌Na~+,K~+-ATP酶活力明显降低,并加重心功能指标的异常变化;而给予AVP抗血清,则可改善心功能,对心肌有明显的保护作用。提示ATP含量异常增高所引起的Na~+,K~+-ATP酶泵转运动力学损害,可能参与CRF时心功能不全的病理过程。     

红细胞抗高血压因子对大鼠红细胞膜Ca~(2+)·Mg~(2+)-ATP酶活性的影响

近年来本实验室从大鼠和人的红细胞中提取并基本上纯化了一种降压物质—抗高血压因子(Antihypertensive factor,AHF),对其理化特性、生理功能和作用机制进行了较深入和系统的研究。结果表明AHF的降压机制与抑制血管平滑肌(VSM)Ca~(2+)内流、降低胞内Ca~(2+)浓度和呈内皮依赖性的舒张VSM有密切关系。本文观察AHF对自发性高血压     

山莨菪碱、异搏定、内毒素对重组脂质体上心肌肌膜Na~+-Ca~(2+)交换活性的影响

山莨菪碱对心肌肌膜Na~+-Ca~(2+)交换蛋白活性呈剂量依赖性的抑制作用,而异搏定不抑制Na~+-Ca~(2+)交换,高浓度反而呈轻度促进作用,内毒素则与山莨菪碱的作用相反。提示抑制Na~+-Ca~(2+)交换可能是山莨菪碱发挥其细胞保护作用的机制之一,     

异莲心碱对小鼠离体气管平滑肌的舒张作用

目的:研究异莲心碱对高K~+预收缩小鼠离体气管平滑肌(ASM)的舒张作用及其机制。方法:利用张力换能器检测异莲心碱对高K~+诱导的ASM预收缩和Ca~(2+)内流的影响;利用膜片钳技术和钙成像系统分别检测异莲心碱对ASM细胞膜L型电压依赖性Ca~(2+)通道(LVDCC)电流以及细胞内Ca~(2+)浓度([Ca~(2+)]_i)的影响。结果:异莲心碱可显著舒张高K~+预收缩的ASM,且其舒张作用呈现浓度依赖性,当浓度为100μmol/L时最大舒张比达到(95.3±3.9)%。此外,利用膜片钳全细胞记录技术测量LVDCC电流,电流可被异莲心碱完全阻断;在高K~+诱导下气管平滑肌细胞中Fura-2的340/380 nm荧光比值稳定在0.63±0.10,而异莲心碱加入后比值显著下降至0.36±0.05(P0.01);在[Ca~(2+)]_i峰点加入异莲心碱,340/380 nm荧光比值从0.74±0.02迅速降至0.42±0.05(P0.01);异莲心碱抑制高K~+诱导的Ca~(2+)内流引起的ASM收缩。结论:异莲心碱可阻断小鼠离体气管平滑肌细胞LVDCC电流,LVDCC介导的Ca~(2+)内流停止,[Ca~(2+)]_i降低,导致ASM舒张,提示异莲心碱可能是潜在的气管舒张剂。     

钙通道生理

细胞的兴奋决定于膜内外的离子交换,细胞膜上离子通道活动的正常乃是膜内外离子交流的保证。离子通道是细胞膜上的大分子蛋白质,镶嵌在脂质双层膜上构成亲水性孔道(Pores)。神经系统的兴奋与电信号的产生与传播都包含着经过离子通道的离子移动,Na~+,K~+,Ca~(2+)与Cl~-离子几乎参予全部的过程。可把每一通道看作一个对特殊刺激发生反应的可兴奋     

内毒素对兔骨骼肌细胞外液容积、钠钾离子及其Na~(+)-K~(+)-ATP酶活性的影响

本实验以氚水和Na_2~(35)SO_4为标记物,观察了内毒素对兔骨骼肌细胞外液容积(ECV)、Na~+、K~+含量以及(Na~+-K~+)-ATP酶活性的影响。实验结果显示,动物静注内毒素(0.5mg/kg)后10小时骨骼肌ECV、Na~+、K~+含量和(Na~+-K~+)-ATP酶活性均无显著变化;但血K~+浓度自内毒素注射后3小时即有显著下降。     

肌质网囊泡中钙的转运与一价阳离子和质子的释放

作者通过膜电位和离子释放实验研究了在ATP调节下兔骨骼肌肌质网囊泡对Ca~(2+)的摄取。当pH由小变大。或K~+由高变低时,肌质网囊泡的H~+和K,Na通过就产生H~+和K~+扩散电势,用di O-C_5-(3)萤光染料就可测定出膜电位。存在pH梯度和     

细胞膜上钙转运分子机制的研究进展

Ca~(2+)浓度与细胞的代谢和细胞的功能具有密切的关系。在通常情况下,细胞外游离的Ca~(2+)浓度为10~(-3)M,细胞内游离的Ca~(2+)则为10~(-8)～10~(-7)M。为了维持细胞内如此之低的Ca~(2+)浓度,质膜上Ca~(2+)转运以及细胞内Ca~(2+)转运系统具有重要的作用。在10~3～10~4化学梯度(Ca_0~(2+)/Ca_i~(2+))范围和     

神经酰胺中介的细胞因子效应

神经酰胺(ceramide)系某些激素和细胞因子刺激细胞、水解细胞膜神经鞘磷脂产生的一种脂质分子。它介导多种类型细胞的生物学反应,涉及细胞分化、生长抑制、衰老和细胞凋亡等。神经酰胺参与调控蛋白质磷酸化、蛋白激酶活性、原癌基因c-myc水平、核因子κB等。神经酰胺及下游物质鞘氨醇(sphingosine)对K~+、Na~+、Ca~(2+)通道电流均有明显影响。全新的以“神经鞘磷脂循环”为生化基础的信号转导途径的阐明将为有关疾病的防治开辟新的思路。     

氯离子转运体KCC2/NKCC1参与病理性疼痛的研究进展

正阳离子氯离子联合转运蛋白(cation-Cl-cotransporter,CCC)是一组转运Na~+、K~+、Cl~-进出细胞的膜蛋白。其中,钾氯联合转运蛋白2(K~+-Cl~- cotransporter 2,KCC2)和钠钾氯联合转运蛋白1(Na~+-K~+-Cl~- cotransporter 1,NKCC1)是调节神经系统氯离子稳态的主要CCC,NKCC1将Cl~-转运入胞内,KCC2将Cl~-转运至胞外,两者共同调节氯离子平衡及     

羟基氨酮强心作用机制的进一步研究

前巳报道羟苯氨酮(BAK_3)及其衍生物具有较强的强心和扩血管作用,且有不增加心率的优点, BAK_3在有效浓度范围内不抑制Na~+K~+-ATP和磷酸二酯酶(PDE),显著提高心肌收缩蛋白对Ca~(2+)的敏感性,提示增强收缩蛋白对Ca~(2+)的敏感性,可能是其强心作用的主要机制,可能为一种非甙和非PDE抑制剂的新型强心药物——钙增敏剂(Calcium Sensitiger).     

烧伤血浆毒性物质对豚鼠心肌线粒体功能的影响

本文采用豚鼠背部皮肤烧伤(35％TBSAⅢ度)模型,观察了豚鼠烧伤后8小时血浆毒性物质(BPS)对正常心肌线粒体的呼吸控制率、Ca~(2+)—ATP酶、Na~+/K~+—ATP酶活性及Mg~(2+)—ATP酶活性,脂质过氧化物(LPO)含量,超氧化物歧化酶(SOD)活性及维生素E(Vit.E)含量的影响,并与豚鼠烧伤后8小时心肌线粒体上述功能指标的变化相比较。结果发现,烧伤血浆毒性物质使心肌线粒体(1)呼吸控制率下降。且与BPS的作用浓度有明显依赖性;(2)Na~+/K~+—ATP酶及Ca~(2+)—ATP酶活性降低;(3)LPO含量升高、SOD活性降低及Vit,E含量降低,上述变化与烧伤后8小时心肌线粒体的变化一致。 上述结果提示:烧伤血浆毒性物质的作用可能是严重烧伤早期心脏功能抑制的重要原因之一,其作用可能与其抑制线粒体的呼吸功能有关,ATP酶活性降低又进一步影响线粒体的物质转运、膜内外的离子平衡、能量代谢及心肌细胞的电活动。同时,烧伤血浆毒性物质对心功能的抑制过程中有氧自由基反应参与。     

巴豆醛抑制小鼠心肌收缩功能

目的研究香烟烟雾中α,β-不饱和醛-巴豆醛对小鼠心肌细胞收缩功能和心肌细胞内Ca~(2+)功能的影响。方法经Langendorff装置灌注消化分离出C57BL/6小鼠心肌细胞,与不同浓度(1、10、25和50μmol/L)巴豆醛孵育6 h,对照组不经巴豆醛处理,然后分别检测心肌细胞收缩峰值(PS)、最大收缩和舒张速率(±dL/dt)、心肌细胞收缩峰值时间(TPS)、心肌细胞舒张90%时间(TR_(90))、fura-2荧光强度(FFI)、细胞内Ca~(2+)衰退和SERCA~(45)Ca~(2+)摄取,Western blot分析Na~+-Ca~(2+)交换体的表达。结果与对照组相比,较高浓度(25和50μmol/L)的巴豆醛组能明显降低心肌细胞PS、±dL/dt、ΔFFI、SERCA活性及Ca~(2+)衰退速度(P0.05),并能延长TR_(90)(P0.05);而不同浓度巴豆醛对小鼠心肌细胞Na~+-Ca~(2+)交换体的表达无明显影响。结论巴豆醛可能是通过抑制小鼠心肌细胞内SERCA活性来影响心肌细胞内Ca~(2+)功能,从而抑制心肌细胞的收缩功能。