竹节参总皂苷对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜细胞增殖抑制作用的研究

目的研究竹节参总皂苷（TSPJ）对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜细胞增殖的影响。方法酶消化法进行胶原诱导性关节炎大鼠滑膜细胞的原代培养，MTT法检测TSPJ对滑膜细胞增殖的影响，流式细胞仪检测TSPJ对滑膜细胞凋亡率的影响。结果TSPJ可明显抑制体外培养的CIA大鼠滑膜细胞的增殖，TSPJ可诱导滑膜细胞凋亡。结论TSH可有效抑制体外培养的胶原诱导性关节炎大鼠滑膜细胞的增殖，这可能是其治疗类风湿关节炎的机制。     

"类风关巴布剂"穴位贴敷对CIA大鼠滑膜细胞凋亡及其分泌的TNF-α IL-1β的影响

目的：比较不同组合穴位贴敷“类风关巴布剂”对CIA大鼠滑膜细胞凋亡的影响。方法：大鼠背部5处皮内注射牛Ⅱ型胶原诱导的关节炎模型（CIA），观察以雷公藤为主的中药“类风关巴布剂”不同组合穴位贴敷对模型大鼠关节炎指数、电镜凋亡计分、免疫组化指标P53、bcl-2、NF—κβ计分，以及滑膜细胞上清液的白细胞介素-1β（IL-1β）与肿瘤坏死因子（TNF—α）的浓度变化的影响。结果：造模后大鼠关节炎指数明显升高、滑膜细胞凋亡抑制、各炎症指标升高；治疗后各穴位贴敷组大鼠的关节炎指数均有显著降低，凋亡计分、P53、bel-2计分较模型组增加，NF—κβ计分、IL-1β、TNF—α浓度降低，其中系统组（远近配穴）最接近正常组。结论：“类风关巴布剂”穴位贴敷能够有效控制CIA大鼠关节炎的病情并诱导滑膜细胞凋亡，其机制可能是上调凋亡相关基因的表达及调节相关细胞因子和炎症介质等；远近配穴可能通过标本兼治，多靶点起效，使其整体疗效优于单纯远道取穴或局部取穴。     

寒热方剂对胶原性关节炎大鼠的治疗作用及对滑膜细胞超微结构的影响

目的：从治疗作用评价、滑膜细胞超微结构观察的角度，探讨寒、热方剂清络饮、温络饮对胶原性关节炎大鼠的治疗作用、作用机理及作用异同。方法：以Ⅱ期胶原诱导的关节炎大鼠为对象，以寒、热方剂清络饮、温络饮分别进行干预，雷公藤多苷片为治疗对照。于CIA免疫1、7、21、33d分别进行疼痛试验及关节肿胀程度、关节炎指数等体征评价，CIA免疫33d时行滑膜细胞透射电镜观察。结果：寒热两方均可明显改善CAI免疫侧、继发侧疼痛（P＜0．01）和踝关节肿胀（P＜0．01）等主要结局指标，降低关节炎指数（P＜0．01），效果速于、优于或近于雷公藤多苷片对照组。清络饮改善CIA踝关节肿胀、控制继发病理改变的效果优于温络饮。寒热两方均可减轻滑膜细胞亢进的分泌功能及其代谢活性，反映出寒热两方的部分作用机理。     

温化蠲痹方诱导胶原诱导性关节炎大鼠滑膜细胞凋亡的研究

目的：研究中药温化蠲痹方诱导胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠滑膜细胞凋亡作用。方法：选用健康雄性Wistar大鼠,随机分为正常对照组（n=10,简称正常组）、造模组,造模组采用牛Ⅱ型胶原乳剂于大鼠尾根部注射,建立CIA模型。造模成功后随机分为模型组（n=10）、温化蠲痹方组（n=10,简称中药组）、MTX组（n=10）。正常组、模型组、中药组按22.9g·kg-1·d-1剂量分别灌胃生理盐水、温化蠲痹方,均每日1次,MTX组按0.78mg·kg-1·w-1剂量灌胃MTX混悬液,每周1次。给药30天后,运用透射电镜和流式细胞术检测大鼠滑膜细胞凋亡。结果：与模型组比较,治疗后中药组和MTX组大鼠关节炎指数（AI）评分明显降低（P〈0.01）;与治疗前比较,中药组和MTX组大鼠AI评分均明显降低（P〈0.01）。透射电镜显示,中药组大鼠滑膜细胞凋亡较模型组大鼠滑膜细胞凋亡明显。流式细胞术检测显示,与正常组比较,模型组大鼠滑膜细胞凋亡率明显降低（P〈0.05）;与模型组大鼠比较,中药组和MTX组大鼠滑膜细胞凋亡率明显升高（P〈0.01）。结论：CIA大鼠滑膜细胞凋亡减少,诱导滑膜细胞凋亡可能是中药温化蠲痹方治疗CIA的作用机制之一。     

滑膜细胞凋亡在佐剂性关节炎大鼠关节炎症中的作用

目的：探讨成纤维样滑膜细胞凋亡在佐剂性关节炎（AA）大鼠关节炎症中的作用。方法：采用大鼠尾部皮内注射完全福氏佐剂（CFA）建立AA模型，注射CFA后第14日起，每隔7d记录关节炎指数（AI），并每隔7d引颈处死1组大鼠，组织块培养法分离培养AA大鼠膝关节成纤维样滑膜细胞，流式细胞仪检测成纤维样滑膜细胞凋亡；分析成纤维样滑膜细胞凋亡的改变与AI的相关性。结果：AI在疾病早期逐渐增加，后期明显下降。流式细胞分析显示随AA病程延长S期滑膜细胞比例逐渐增加。在AA早期成纤维样滑膜细胞凋亡明显抑制，后期则凋亡抑制逐渐减弱，凋亡抑制与AI显著相关。结论：在AA发病机制中，成纤维样滑膜细胞凋亡抑制可能在急性滑膜炎中起有一定作用。     

兔类风湿性关节炎模型的建立及成纤维样滑膜细胞的培养

目的:建立卵蛋白诱导的兔类风湿性关节炎模型,明确兔类风湿性滑膜细胞培养的条件,储备后期用于实验研究的滑膜细胞,为后期体外细胞实验提供最佳实验条件。方法:健康大耳白兔8只,随机分为正常组4只,模型组4只,模型组建立卵蛋白诱导的类风湿性关节炎动物模型,动物模型建成后第2周取模型组兔膝关节滑膜细胞培养、传代、收集冻存细胞,1月后复苏细胞。结果:模型组兔膝关节病理切片见炎性细胞浸润,滑膜细胞增生明显,血管翳形成,并侵蚀和破坏软骨;培养的滑膜细胞具有成纤维细胞的形态和特征,呈长梭形极向生长,成功储备及复苏滑膜细胞。结论:成功建立兔类风湿性关节炎模型,成功地培养出了兔膝关节类风湿性滑膜细胞。     

艾灸对佐剂性关节炎大鼠足趾滑膜组织自噬和凋亡的影响

目的:观察艾灸对佐剂性关节炎(AA)大鼠足趾滑膜组织自噬和凋亡相关指标的影响,探讨艾灸治疗类风湿性关节炎的作用机制。方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、艾灸组、甲氨蝶呤组、雷帕霉素组,每组9只。采用弗氏完全佐剂注射法制备AA大鼠模型。艾灸组予艾灸“足三里”“关元”,每次20 min,每日1次;甲氨蝶呤组予甲氨蝶呤(0.35 mg/kg)灌胃,每周2次;雷帕霉素组予雷帕霉素腹腔注射(1 mg/kg),隔日1次;3组均干预3周。采用足趾容积测量仪检测大鼠左后肢足趾容积,ELISA法检测大鼠血清中白细胞介素(IL)-1、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量,透射电镜观察大鼠足趾关节滑膜细胞自噬体,Western blot法检测大鼠足趾滑膜组织中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)C1、磷酸化(p)-mTORC1、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3、死亡受体(Fas)、死亡受体配体(FasL)蛋白表达量。结果:与空白组比较,模型组大鼠足趾容积增大(P<0.01),血清中IL-1、TNF-α含量显著升高(P<0.001),足趾滑膜组织中p-mTORC1蛋白表达量升高(P<0...     

麝香乌龙丸对AA大鼠滑膜病变及NF—κB、Fas蛋白表达的影响

目的：观察麝香乌龙丸对佐剂型关节炎（AA）大鼠滑膜组织病变及滑膜核因子-κB（NF-κB）、凋亡因子Fas蛋白表达的影响,探讨其治疗类风湿关节炎（RA）可能的作用机制。方法：2月龄健康雄性Wistar大鼠,设正常对照组A组,其余建立大鼠AA模型,造模完成后按关节炎指数随机分成模型对照组B组、麝香乌龙丸低剂量组C组、麝香乌龙丸中剂量组D组、麝香乌龙丸高剂量组E组,每组12只,灌胃给药2周后处死动物,取跖趾关节,HE染色观察关节滑膜组织病理形态变化,免疫组化染色检测关节滑膜细胞NF-κB、Fas蛋白的表达。结果：麝香乌龙丸各组能减轻实验大鼠关节滑膜病变程度,各组与模型组比较单项病理积分减少均有统计学意义（P〈0．01）。麝香乌龙丸各组均可降低大鼠滑膜中NF-κB含量,提高Fas蛋白含量,与模型组比较均有统计学意义（P〈0．05）。结论：麝香乌龙丸能下调大鼠滑膜中NF-κB的表达,增强Fas蛋白的表达,从而促进细胞凋亡。     

姜黄素对CIA大鼠滑膜细胞增殖及细胞周期的影响

目的 观察姜黄素对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠滑膜细胞的影响,探讨其对RA的作用机制.方法 雄性Wistar 大鼠皮内注射Ⅱ型胶原,建立CIA大鼠模型,取其滑膜组织用胶原酶消化法进行原代培养,取3～5代的滑膜细胞进行后续实验.应用MTF比色法和流式细胞术(FCM)检测滑膜细胞的增殖水平和细胞周期分布.结果 5～ 80μmol/L的姜黄素作用24,48,72 h,均能明显抑制滑膜细胞的增殖(P＜0.05),且具有时间、剂量依赖性.细胞周期分析显示,20,40,80μmol/L姜黄素浓度作用24 h后,姜黄素作用组G0/G1期细胞百分比逐渐上升(P＜0.01),S期细胞百分比逐渐下降(P＜0.05),增殖指数(PI)逐渐降低(P＜0.01),并呈剂量依赖性.结论 姜黄素能明显抑制CIA大鼠滑膜细胞的增殖并呈时间、剂量依赖性改变,该作用可能与姜黄素能够使滑膜细胞的细胞周期阻滞于G0/G1期有关.     

通痹灵、雷公藤多苷及青藤碱对CIA大鼠滑膜细胞凋亡与P53表达的比较研究

目的 :研究通痹灵、雷公藤多苷及青藤碱对Ⅱ型胶原蛋白诱导性大鼠关节炎模型 (CIA)滑膜组织细胞凋亡及P53蛋白表达的影响。方法 :原位细胞凋亡检测试剂盒检测各组原代大鼠滑膜细胞凋亡的水平 ,免疫组化法检测各组原代大鼠滑膜细胞P53的表达。结果 :通痹灵高低组、雷公藤高低组、青藤碱高低组、MTX高低组滑膜细胞凋亡的数量上明显高于造模组 ;P53蛋白的表达方面 ,造模组远远高于各组 ,与细胞凋亡的结果几乎相反。结论 :通痹灵、雷公藤多苷、青藤碱和MTX对RA滑膜细胞有较强的诱导凋亡作用 ,但并非通过对介导滑膜细胞P53的表达来诱导滑膜组织细胞凋亡。     

痹痛定对大鼠滑膜病变的影响

目的：研究痹痛定胶囊对大鼠滑膜病变的影响。方法：用Freund＇s完全佐刑复制佐刑性关节炎（AA）大鼠模型，观察痹痛定胶囊对大鼠滑膜组织病理改变的影响。结果：痹痛定胶囊能减轻大鼠滑膜组织的病理学改变，减轻滑膜组织充血、水肿。且滑膜细胞增生不明显、淋巴细胞和单核细胞浸润及纤维组织渗出较少。结论：痹痛定胶囊能抑制AA大鼠继发性关节炎滑膜组织的病理改变，其作用机理与抑制滑膜组织免疫组化PCNA的表达有关。     

TUNEL法检测新风胶囊对AA大鼠滑膜胸腺及胃粘膜细胞凋亡的影响

目的：观察以终末脱氧核糖核酸转移梅介导的原位缺口末端标记（ter分钟al deoxynucleotidyl transferase mediated DUTP nick end labeling,TUNEL)技术检测新风胶囊对佐剂性关节炎（adjuvant arthritis,AA)大鼠滑膜，胸腺及胃粘膜细胞凋亡的影响，探讨新风胶囊的作用机制。方法：采用弗氏完全佐剂造成佐剂性关节炎（AA）大鼠模型，设立正常对照组，模型对照组，甲氨喋呤（MTX）对照组，雷公藤多甙（Triperygium Wilfordii Polycoride Tablet,TPT)对照组和新风胶囊（Xinfeng Cepsule,XFC)治疗组。记录各组大鼠的关节炎指数及体重变化，应用流式细胞仪（FCM）以TUNEL法测定各组大鼠没,鹕腺及胃粘膜细胞凋亡率。结果：与治疗前相比，XFC、TPT及MTX组治疗后大鼠的关节炎指数显著降低（P＜0．05－0．01），XFC组治疗后AA大鼠体重增加（P＜0．05），而TPT及MTX组体重无显著变化（P＞0．05）；模型组滑膜胸腺细胞凋亡率显著低于，胃粘膜细胞凋亡率显著高于正常对照组（P＜0．05），XFC组滑膜及胸腺细胞凋亡率显著高于，胃粘膜细胞凋亡率显著低于模型组、TPT及MTX组（P＜0．05－0．01），结论：XFC与MTX，TPT一样能降低AA大鼠关节炎指数，在增加AA大鼠体重，促进滑膜，胸腺细胞凋亡及抑制胃粘膜细胞凋亡方面优于MTX和TPT。新风胶囊的作用机理是促进滑膜细胞凋亡，抑制滑膜增生，促进胸腺细胞凋亡，抑制自身免疫反应以及抑制胃粘膜细胞凋亡，保护胃粘膜。     

木瓜苷对免疫性关节炎大鼠滑膜细胞超微结构及分泌功能的影响

目的:从滑膜细胞超微结构和分泌功能的角度探讨木瓜苷对免疫性关节炎大鼠治疗作用的机理。方法:大鼠足跖皮内注射弗氏完全佐剂造成性剂性关节炎模型;Ⅱ型胶原酶和胰蛋白酶消化法分离培养大鼠滑膜细胞,透射电镜分析滑膜细胞内具分泌功能细胞器的形态学改变;小鼠胸腺淋巴细胞增殖反应法和放射免疫测定法检测滑膜细胞分泌IL-1、TNF_a和PGE_2水平。结果:大鼠免疫后17d开始分别灌胃木瓜苷30,60,120mg·kg~(-1)和白芍总苷60mg·kg~(-1)对照药,连续给药8d。木瓜苷60,120mg·kg~(-1)、白芍总苷60mg·kg~(-1)可恢复A、B型滑膜细胞的分布和A、B型滑膜细胞中高尔基体、线粒体、粗面内质网、致密体、空泡的数量及形态异常;纠正佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞分泌IL-1、TNF_a和PGE_2过高的功能。结论;木瓜苷恢复性剂性关节炎大鼠滑膜细胞具分泌功能细胞器的形态及改善滑膜细胞过高的分泌炎性介质的功能是其治疗免疫性关节炎的途径之一。     

痹痛灵颗粒对胶原诱导类风湿性关节炎大鼠关节滑膜组织中VEGF mRNA表达的影响

目的：观察痹痛灵颗粒对胶原诱导类风湿性关节炎大鼠治疗作用及对关节滑膜组织血管内皮细胞生长因子（VEGF）mRNA表达的影响。方法：建立Ⅱ型胶原诱导大鼠类风湿性关节炎模型,通过测量其足踝体积和关节肿胀评分,并以实时荧光PCR法检测关节滑膜组织VEGFmRNA表达量,评价痹痛灵颗粒的治疗作用。结果：痹痛灵颗粒可明显降低造模大鼠关节肿胀度和关节评分,抑制关节滑膜组织VEGFmRNA过量表达。结论：痹痛灵颗粒对胶原诱导大鼠类风湿性关节炎有一定的治疗作用,其作用机理可能是抑制关节滑膜VEGFmRNA过量表达。     

热痹清片诱导AA大鼠滑膜细胞凋亡的作用及机制

目的：探讨热痹清片治疗类风湿关节炎（RA）的作用机制。方法：采用弗氏完全佐剂造成大鼠（AA）模型,设正常组、模型组、甲氨喋呤（MTX）组、雷公藤多苷（TPT）组和热痹清片组。分别采用电子显微镜、免疫组化法和流式细胞术检测各组大鼠滑膜细胞凋亡情况。结果：电镜观察显示,热痹清片组可见滑膜细胞核染色质呈凝块状,边聚呈月芽状,胞浆内及胞膜外可见凋亡小体;免疫组化法观察显示,热痹清片组Fas和FasL表达显著增加、Bcl-2表达显著减少（P〈0.05）,指标变化差异与TPT、MTX相当（P〉0.05）。流式细胞术观察表明,热痹清片组滑膜细胞凋亡率显著高于TPT组及MTX组（P〈0.05）。结论：热痹清片通过促进Fas、FasL表达,抑制Bcl-2的表达,促进了滑膜细胞凋亡,从而发挥治疗作用。     

宣发膜原方对胶原免疫性关节炎大鼠关节滑膜细胞超微结构的影响

目的：探讨宣发膜原方对胶原免疫性关节炎（CIA）的治疗机理，为研究类风湿性关节炎（RA）的发病和损伤机理提供实验依据。方法：以CIA作为RA的动物模型，以达原饮加减方作为宣发膜原法代表方，检测CIA大鼠踝关节病理改变及膝关节滑膜组织超微结构的变化。结果：宣发膜原方可以有效地减轻CIA大鼠病理损伤，提高滑膜细胞中B型滑膜细胞的比例，减少滑膜细胞中的高尔基体、粗面内质网等细胞器。结论：宣发膜原方能够减轻CIA病理损伤，改善滑膜细胞超微结构。     

针灸对佐剂性关节炎大鼠关节滑膜产生PGE2的影响

目的观察针灸对佐剂性关节炎大鼠滑膜中PGE2的影响。方法：用弗氏完全佐剂建立大鼠关节炎模型。放射免疫法(PLA)检测大鼠关节滑膜组织内RGE2的含量，观察大鼠足垫肿胀程度。结果：针灸可减轻关节炎大鼠足垫肿胀程度，抑制关节滑膜组织中PGE2。结论：针灸可减轻关节炎症反应的作用机制可能与抑制关节炎滑膜产生PGE2有关。     

通痹灵对大鼠佐剂性关节炎滑膜细胞功能的影响

目的：研究通痹灵（ＴＢＬ）对佐剂性关节炎（ＡＡ）大鼠滑膜成纤维增殖及滑膜细胞分泌白细胞介素１（ＩＬ－１），肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）和前列腺素Ｅ２（ＰＧＥ２）的影响。     

宣痹汤对AA大鼠模型滑膜组织病理改变的影响

目的：观察宣痹汤对大鼠佐剂性关节炎（adjuvant arthritis，AA）的治疗作用及对从大鼠模型关节滑膜病理的影响。方法：用弗氏完全佐剂（CFA）诱导大鼠从模型，容积法测量关节肿胀程度并进行关节评分（AI），光镜下观察滑膜组织HE染色切片，免疫组织化学法观察滑膜细胞血管内皮生长因子（VEGF）表达水平。结果：与模型组比较，宣痹汤治疗组及雷公藤组大鼠继发关节肿胀度显著降低（P〈0．01或P〈0．05），关节炎指数（AI）显著降低（P〈0．01或P〈0．05），关节病理积分显著降低（P〈0．01或P〈0．05），VEGF表达水平显著降低（P〈0．01）。结论：宣痹汤对从大鼠关节炎症有一定的抑制作用，并能降低滑膜组织中VEGF表达水平，其作用机制可能与免疫调节有关。     

针灸治疗类风湿性关节炎大鼠病理形态学观察

目的 观察针灸对实验性类风湿性关节炎大鼠病理形态学的影响。方法 以Ｗｉｓｔａｒ大鼠为实验对象,人工造成类风湿性关节炎病理模型。设立空白组、造模组、针灸组和激素组。结果与结论 针灸能缓解实验性类风湿性关节炎大鼠关节皮下软组织及滑膜充血、水肿程度,减轻淋巴细胞、单核细胞等炎细胞对关节滑膜的浸润,影响关节滑膜细胞的增生反应,并一定程度上阻止其病变的进展。