应用组织芯片技术检测HIF-1α、NOS_2、VEGF在胃肠道间质瘤中的表达及临床意义

目的：检测HIF-1α、NOS2、VEGF在胃肠道间质瘤（GIST）中的表达及其与临床病理行为的关系。方法：收集124例GIST标本,用组织芯片和免疫组织化学法检测HIF-1α、NOS2、VEGF表达。结果：在124例GIST中,HIF-1α阳性表达79例（63.7%）;NOS2阳性表达80例（64.5%）;VEGF阳性表达72例（58.1%）,其表达与GIST侵袭转移、NIH分级、黏膜受侵有相关性（P〈0.05）,三者之间呈正相关（P〈0.05）。结论：HIF-1α、NOS2、VEGF在GIST组织中高表达,这为揭示GIST的发生发展提供了新的理论依据,并为GIST有效治疗提供新思路。应用组织芯片大规模高效检测临床样本是可行的,具有快速、准确、方便、经济的特点。     

PI3K、Akt以及PTEN在胃肠道间质瘤中的表达及意义

目的:探讨PI3K、Akt以及PrEN的表达与GIST临床病理特征及预后的相关性,并探讨它们间的相互关系,以揭示其在GIST发生发展过程中的作用,为进一步的肿瘤靶点治疗提供理论依据.方法:选择临床病理资料完整、随访结果确切的中国医科大学附属盛京医院1990年-2007年2月手术切除、病理证实的GIST新鲜组织标本124例.男性64例、女性60例,平均年龄54.6岁.RT-PCR检测PI3K、Akt以及PTEN在GIST及对照组的mRNA水平.结果:PI3K mRNA水平随NIH分级表达上调(P＜0.05),PI3K的阳性表达率与黏膜受侵和肿瘤侵袭转移均显著相关(P＜0.05).Akt mRNA水平随NIH分级表达上调,其中在高、中危肿瘤组之间不明显,无统计学意义,其余各组有意义;Akt的阳性表达率与肿瘤侵袭转移和黏膜受侵显著相关,提示Akt的过表达促进了GIST的肿瘤侵袭转移.同时PTENmRNA随NIH分级表达下调(P＜0.05),随着肿瘤恶性程度的增加,PTEN的缺失率增高;PTEN的阳性表达率与肿瘤侵袭转移和黏膜受侵关系密切.结论:PI3 K/Akt与PTEN在GIST的发生发展中可能互相拮抗共同作用,PI3K、Akt蛋白阳性表达之间呈显著正相关(r =0.292.P=0.031);PI3K与PTEN蛋白阳性表达之间呈显著负相关(r=-0.412,P =0.036);PTEN与Akt蛋白阳性表达之间呈显著负相关(r=-0.386,P=0.024).     

应用组织芯片技术检测HIF-1α、NOS2、VEGF在胃肠道间质瘤中的表达及临床意义

目的:检测HIF-1α、NOS2、VEGF在胃肠道间质瘤(GIST)中的表达及其与临床病理行为的关系。方法:收集124例GIST标本,用组织芯片和免疫组织化学法检测HIF-1α、NOS2、VEGF表达。结果:在124例GIST中,HIF-1α阳性表达79例(63.7%);NOS2阳性表达80例(64.5%);VEGF阳性表达72例(58.1%),其表达与GIST侵袭转移、NIH分级、黏膜受侵有相关性(P<0.05),三者之间呈正相关(P<0.05)。结论:HIF-1α、NOS2、VEGF在GIST组织中高表达,这为揭示GIST的发生发展提供了新的理论依据,并为GIST有效治疗提供新思路。应用组织芯片大规模高效检测临床样本是可行的,具有快速、准确、方便、经济的特点。     

胃肠道间质瘤PI3K-Akt信号转导通路介导的细胞凋亡相关因子的检测及其意义

目的：研究PI3K/Akt信号转导通路介导的细胞凋亡相关因子在胃肠道间质瘤（GIST）中的表达及意义。方法：RT-PCR检测PI3K、NF-κB、XIAP、bcl-2与survivin在124例GIST及癌旁正常组织中mRNA水平。结果：在GIST中,PI3K、NF-κBmRNA表达与NIH分级、肿瘤侵袭转移、黏膜受侵密切相关,而与年龄、性别、组织学类型无关。XIAPmRNA随NIH分级表达上调;XIAP表达与GIST组织分化程度呈负相关,即分化程度越低,XIAP阳性表达率愈高,伴有肿瘤侵袭转移的GIST病例XIAP表达水平较高,同时XIAP的表达与黏膜受侵密切相关,而与年龄、性别、组织学类型无关。bcl-2mRNA水平表达上调,与NIH分级、黏膜受侵有关,而与年龄、性别、组织学类型、转移复发及周围组织浸润无关。survivinmRNA在GIST中的表达与NIH分级、肿瘤侵袭转移、黏膜受侵等因素有关,而与年龄、性别以及组织学类型无关。由于NF-κB的调控作用,各指标之间mRNA的水平变化呈正相关。结论：GIST中PI3K/Akt信号转导通路的活化可以进一步激活NF-κBmRNA,从而进入细胞核内调控凋亡相关因子XIAP、bcl-2以及survivinmRNA水平的表达。     

PTEN与VEGF在人脑胶质瘤组织中的表达及意义

目的 探讨抑癌基因PTEN和VEGF在人脑胶质瘤组织中的表达意义及两者与胶质瘤侵袭性的关系.方法 采用S-P免疫组织化学法检测56例人脑胶质瘤组织中PTEN、VEGF蛋白的表达,并分析两者与胶质瘤病理级别和侵袭性的关系.结果 PTEN在胶质瘤Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级中阳性率分别为91.7%、75.0%、53.3%、15.4%,且随病理分级升高而降低(P<0.01);而VEGF表达阳性率分别为33.3%、50.0%、73.3%、76.9%,且与PTEN表达水平呈负相关(r=0.5232,P<0.01).结论 PTEN和VEGF的表达一定程度反映胶质瘤恶性度和侵袭性的强弱;PTEN缺失可引起VEGF表达增加,在胶质瘤发生、发展过程中发挥重要作用.     

EGFR、VEGF和PTEN在结直肠癌中表达及与其临床病理特征的关系

目的探讨结直肠癌中表皮生长因子受体（EGFR）、血管内皮生长因子（VEGF）和张力蛋白同源物基因（PTEN）蛋白表达及与其临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学技术,检测98例结直肠癌和20例正常结直肠黏膜组织中的EGFR、VEGF和PTEN蛋白表达,并结合临床病理特征进行分析。结果 8例结直肠癌中EGFR、VEGF和PTEN蛋白阳性表达率分别为61.2%（60/98）、66.3%（65/98）和48.0%（47/98）。结直肠癌中EGFR和VEGF表达阳性率显著高于正常结直肠黏膜组织（χ2=21.05,χ2=15.90,P〈0.05）,而PTEN表达阳性率显著低于正常结直肠黏膜组织（χ2=14.72,P〈0.05）。EGFR、VEGF和PTEN表达与结直肠癌Dukes分期、浆膜浸润和淋巴结转移相关（P〈0.05）。结直肠癌中EGFR表达与VEGF表达呈正相关（χ2=8.36,P〈0.05）,EGFR和VEGF表达与PTEN表达呈负相关（χ2=19.73,χ2=22.85,P〈0.05）。结论 EGFR、VEGF和PTEN表达与结直肠癌浸润和转移密切相关,可作为判断结直肠癌预后的客观指标。     

胃肠道间质瘤PI3K-Akt信号转导通路介导的细胞凋亡相关因子的检测及其意义

目的:研究P13K/Akt信号转导通路介导的细胞凋亡相关因子在胃肠道间质瘤(GIST)中的表达及意义.方法:RT-PCR检测P13K、NF-κB、XIAP、bcl-2与survivin在:124例GIST及癌旁正常组织中mRNA水平.结果:在GIST中,PI3K、NF-κB mRNA表达与NIH分级、肿瘤侵袭转移、黏膜受侵密切相关,而与年龄、性别、组织学类型无关.XIAP mRNA随NIH分级表达上调;XIAP表达与GIST组织分化程度呈负相关,即分化程度越低,XIAP阳性表达率愈高,伴有肿瘤侵袭转移的GIST病例XIAP表达水平较高,同时XIAP的表达与黏膜受侵密切相关,而与年龄、性别、组织学类型无关.bcl-2 mRNA水平表达上调,与NIH分级、黏膜受侵有关,而与年龄、性别、组织学类型、转移复发及周围组织浸润无关.survivin mRNA在GIST中的表达与NIH分级、肿瘤侵袭转移、黏膜受侵等因素有关,而与年龄、性别以及组织学类型无关.由于NF-κB的调控作用,各指标之间mRNA的水平变化旱正相关.结论:GIST中PI3K/Akt信号转导通路的活化可以进一步激活NF-κB mRNA,从而进入细胞核内调控凋亡相天因子XIAP、bcl-2以及survivin mRNA水平的表达.     

过表达HIF-1α和VEGF蛋白与垂体腺瘤侵袭行为的关系

目的:探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和血管内皮生长因子(VEGF)在垂体腺瘤中的表达及与垂体腺瘤侵袭性的关系。方法:收集的32例垂体腺瘤标本中侵袭性垂体腺瘤20例,非侵袭性垂体腺瘤12例,应用免疫组化染色检测HIF-1α和VEGF蛋白的表达。并对侵袭组与非侵袭组的HIF-1α和VEGF蛋白表达及不同大小肿瘤HIF-1α和VEGF蛋白表达进行分析比较。结果:非侵袭组垂体腺瘤中HIF-1α和VEGF蛋白表达阳性率与侵袭组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;垂体腺瘤直径大于30 mm者HIF-1α和VEGF蛋白表达阳性率与直径10~30 mm者比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论:HIF-1α和VEGF蛋白在侵袭性垂体腺瘤中的表达明显增加,并且与垂体腺瘤侵袭行为密切相关。     

大肠锯齿状腺瘤和腺癌组织HIF-1α表达及其与VEGF和血管密度相关性的探讨

目的:探讨大肠锯齿状腺瘤和腺癌组织HIF-1α的表达及其与VEGF和血管密度的关系。方法:采用免疫组化法检测HIF-1α和VEGF蛋白的表达。用CD34单克隆抗体标记血管内皮细胞并计数。结果:锯齿状腺瘤HIF-1α蛋白阳性率(62.5%)显著高于正常大肠黏膜组(13.3%),χ2=15.78,P<0.01;显著低于大肠癌组(85.0%),χ2=4.8,P=0.028。锯齿状腺瘤VEGF蛋白阳性率(53.1%)显著高于正常大肠黏膜组(10.0%),χ2=13.17,P<0.01;而与大肠癌组(72.5%)比较差异无统计学意义,χ2=2.89,P=0.089。HIF-1α表达与VEGF正相关(r=0.317,P=0.041);与MVD正相关,r=0.468,P=0.02。结论:HIF-1α促进肿瘤血管生成,参与大肠锯齿状腺瘤癌变。     

人肺癌组织E-cadherin和PTEN及HIF-1α蛋白表达临床意义的探讨

目的:探讨E-cadherin(E-cd)、PTEN和HIF-1α蛋白在肺癌组织中表达及其临床意义。方法:应用免疫组化方法检测99例肺癌组织E-cd、PTEN和HIF-1α蛋白的表达情况。结果:E-cd、PTEN和HIF-1α蛋白在99例肺癌组织中的阳性率分别为63.6%(63/99)、62.6%(62/99)和56.6%(56/99),在癌旁正常组织中的阳性表达率分别为100%(20/20)、100%(20/20)和0,差异均有统计学意义,P<0.05。E-cd蛋白在细支气管肺泡癌组的表达高于小细胞癌组,而HIF-1α蛋白在细支气管肺泡癌组的表达低于小细胞癌组,差异均有统计学意义,P<0.05;其余各组织学类型之间3种蛋白表达差异均无统计学意义,P>0.05。E-cd和PTEN蛋白在淋巴结无转移组的表达均高于淋巴结转移组,P<0.05;而HIF-1α蛋白在两组间的表达差异无统计学意义,P>0.05。E-cd和PTEN蛋白在Ⅰ～Ⅱ期的表达高于Ⅲ～Ⅳ期,P<0.01;而HIF-1α蛋白在Ⅰ～Ⅱ期的表达低于Ⅲ～Ⅳ期,P<0.05。E-cd蛋白表达与PTEN蛋白表达呈正相关,P<0.05;HIF-1α蛋白与E-cd、PTEN蛋白表达均呈负相关,P<0.05。结论:E-cd、PTEN和HIF-1α蛋白的异常表达可能在肺癌的恶性演进中起重要作用,3者在肺癌的侵袭转移中可能起某种协同作用。     

Ki-67、VEGF在胃肠间质瘤中表达及与MVD的相关性

目的:探讨Ki-67和VEGF在胃肠间质瘤中的表达及与临床病理因素的关系,VEGF、微血管密度(MVD)和细胞增殖之间的相关性。方法:采用免疫组化S-P法检测44例胃肠间质瘤组织中Ki-67、VEGF表达及计数MVD值和Ki-67PI。结果:VEGF、Ki-67在GIST组织中阳性表达分别为77.3%、63.6%,VEGF、Ki-67表达在不同大小的肿块之间有统计学差异(P<0.01);MVD值和Ki-67PI在VEGF阳性和阴性组的比较有统计学差异(P<0.01);VEGF、MVD和Ki-67PI之间呈显著正相关(相关系数分别为0.26、0.44和0.84,P<0.01)。结论:VEGF促进GIST组织中的新生血管形成,为肿瘤组织提供了丰富的血液和营养,并使细胞增殖活性增强,促进肿瘤细胞的增殖、肿瘤的生长、发展和转移;Ki-67PI为GIST的预后判断提供了比较客观的依据。     

PTEN’s regulation of VEGF and VEGFR1 expression and its clinical significance in myeloid leukemia

Phosphatase and tensin homolog (PTEN) acts as a novel tumor suppressor gene. PTEN protein plays an important role in regulating proliferation, apoptosis, invasion, and migration of many cancer cells. PTEN also modulates angiogenesis mediated by vascular endothelial growth factor (VEGF) via down-regulating PI3K/Akt pathway in many solid tumors. However, the effects of PTEN on VEGF and VEGFR1 (FLT1)-mediated angiogenesis, migration, invasion of leukemia cells, and its clinical significance are still unknown in myeloid leukemia. Therefore, we investigated the effect of PTEN on PI3K/Akt and VEGF/FLT1 pathways by transfecting wild-type PTEN gene to induce high expression of wild-type PTEN gene and protein in chronic myelogenous leukemia cell line K562 cells. We also observed the correlation between the expression levels of PTEN and VEGF/FLT1 and its clinical significance in myeloid leukemia patients. We found that the expression reconstitution of wild-type PTEN had significant effect on inhibiting proliferation, migration, and invasion abilities of K562 cells via down-regulation of Akt phosphorylation and inhibition of VEGF/FLT1 expression. In myeloid leukemia patients, a negative correlation was found between the expression level of PTEN mRNA and that of VEGF and FLT1 mRNA. Down-regulation of PTEN expression accompanied by up-regulation of VEGF and FLT1 mRNA indicated a higher tendency of extramedullary disease in acute myeloid leukemia patients. In conclusion, PTEN could modulate the function of VEGF/VEGFR signaling pathway down-regulation of Akt phosphorylation and that PTEN would be a candidate target to be addressed for inhibiting angiogenesis along with the treatment of myeloid leukemia.     

布洛芬通过PI3K/Akt/mTOR信号通路调控肝癌QGY-7703细胞迁移和侵袭的机制

目的 探讨布洛芬通过PI3K/Akt/mTOR信号通路对肝癌QGY-7703细胞迁移和侵袭的调控机制。方法 取对数生长期人肝癌细胞QGY-7703,采用随机法分为两组,对照组（C组）：加入等容量的RPMI l640培养液;实验组（B组）：按照不同布洛芬浓度分为三个亚组：B1组250 μmol/L,B2组500 μmol/L、B3组1 000 μmol/L。各组分别作用24、48和72 h后,利用Transwell小室检测各组细胞的侵袭和迁移能力。各组分别作用48 h后,采用Real-time PCR检测各组细胞中PI3K、PTEN和MMP-9基因表达的变化;用Western blot检测各组细胞中PTEN、Akt、磷酸化Akt（p-Akt）、mTOR、磷酸化mTOR（p-mTOR）和MMP-9蛋白表达情况。结果 与C组比较,B1、B2、B3三组细胞迁移和侵袭能力均降低,具有浓度和时间的依赖性,差异有统计学意义（P<0.01）;与C组比较,B1、B2、B3三组细胞PTEN mRNA和PTEN蛋白表达明显升高,且随着布洛芬作用浓度的增加而升高,具有浓度依赖性,差异有统计学意义（P<0.05）;与C组比较,B1、B2、B3三组细胞PI3K mRNA、Akt和mTOR蛋白的表达量差异均无统计学意义（P>0.05）;与C组比较,B1、B2、B3三组细胞MMP-9 mRNA和蛋白的表达以及p-Akt、p-mTOR蛋白的表达均显著下降,且随着布洛芬作用浓度的增加而降低,具有良好的浓度依赖性,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 布洛芬可以抑制QGY-7703细胞的迁移和侵袭能力,与布洛芬对细胞PI3K/Akt/mTOR信号通路的调控有关。     

MUC15和PI3K/Akt 表达与胃癌临床病理特征及预后的相关性研究

目的:探讨MUC15 和PI 3K/Akt的表达与胃癌临床病理特征和预后的关系。方法:采用组织芯片和免疫组织化学法检测144 例胃癌组织及对应癌旁组织中MUC15、Akt的表达。结果:MUC15在胃癌中阳性表达率为79.8% ,高于癌旁组织中的阳性表达率22.2%（P < 0.01）;Akt在胃癌中阳性表达率为80.6% ,高于癌旁组织的阳性表达率16.7%（P < 0.01）。 MUC15和Akt表达均与胃癌分化程度、浸润深度、有无淋巴结转移和TNM 分期相关（P < 0.05）;且胃癌组织中MUC15表达和Akt表达呈正相关（P = 0.001）。 单因素生存分析显示,MUC15和Akt高表达均与生存时间呈负相关（P < 0.05）。 Cox 多元回归分析提示,MUC15和Akt同时阳性的胃癌患者预后更差（HR= 3.115,P < 0.05）。 结论:MUC15可能通过PI 3K/Akt细胞信号转导通路参与胃癌的发生、发展、浸润转移,MUC15结合Akt是胃癌预后强有力的预测因子。