被动皮肤过敏试验影响因素初步研究

目的：探讨被动皮肤过敏试验（PCA）的影响因素,为选择敏感试验条件和提高试验预测的准确性提供试验依据。方法：采用卵白蛋白为抗原,在不同试验条件下（动物种属、致敏剂量、致敏途径）进行PCA试验。结果：①对抗原的免疫应答敏感性方面,豚鼠明显强于SD大鼠。②一定剂量范围内,豚鼠PCA反应强弱呈现出剂量依赖性,低于一定剂量时,不能得到阳性结果。③在临界致敏剂量下不同致敏途径对豚鼠PCA试验没有明显影响。④加用佐剂能够显著增强豚鼠和SD大鼠的免疫应答敏感性。⑤在抗原微量时,增加免疫次数能够增强免疫应答的敏感性。     

2种品系大鼠被动皮肤过敏反应的差异性比较

目的:比较SD,Wistar 2种品系大鼠对卵蛋白(OVA)、天花粉蛋白(TCS)诱导的被动皮肤过敏(passive cutaneous anaphylaxis,PCA)反应的差异性。方法:选用SD,Wistar 2种品系大鼠,以OVA,TCS为致敏原,PCA反应时出现蓝斑的直径及阳性反应率作为判别标准,进行大鼠同种或小鼠异种PCA试验,并考查佐剂的应用与否对试验结果产生影响。结果:大鼠同种PCA加或不加佐剂的TCS反应均为阳性,蓝斑直径大小SD大鼠＞Wistar大鼠;加入氢氧化铝凝胶佐剂可提高两品系大鼠对OVA的过敏反应阳性率,且Wistar大鼠的敏感性高于SD大鼠;小鼠异种PCA试验显示:耳廓皮内分别注射两种品系大鼠不加佐剂致敏的OVA抗血清时均呈阴性反应,注射SD大鼠天花粉蛋白抗血清后,呈阳性反应;分别注射加入佐剂致敏的OVA,TCS抗血清,则小鼠异种PCA反应均呈阳性。结论:2种品系大鼠对OVA,TCS的敏感性存在较大差异,SD大鼠对TCS较敏感,而Wistar大鼠对OVA的敏感性较强;加入佐剂可提高两种品系大鼠对OVA的过敏反应阳性率。     

卵蛋白对Ⅰ型变态反应实验影响因素的研究

目的 研究Ⅰ型变态反应实验中致敏途径、致敏剂量、是否加佐剂、不同动物、抗体含量等因素与过敏反应的相关性,为选择敏感实验条件和提高实验预测的准确性提供实验依据,完善免疫毒性的实验方法.方法 采用卵白蛋白为抗原,在不同实验条件(动物种属、致敏剂量、致敏途径、不同佐剂、免疫次数等)下进行PCA和ASA实验.结果 ①对卵蛋白的免疫应答敏感性方面,豚鼠明显强于SD大鼠和Balb/c小鼠.②卵蛋白致豚鼠PCA反应强弱呈现出剂量依赖性,低于0.3 mg/只剂量时,不能得到阳性结果.③在0.2 mg/只剂量下不同致敏途径对豚鼠PCA实验没有明显影响.④在0.2mg/只剂量下加用佐剂能够显著增强豚鼠的免疫应答敏感性.⑤在0.2 mg/只剂量下增加免疫次数能够增强免疫应答的敏感性.⑥在0.3 mg/只剂量下卵蛋白的PCA实验阳性,特异性卵蛋白IgE抗体水平明显增高,血清总IgE水平升高不明显.结论 在该次实验条件下,动物种属、致敏剂量、佐剂、免疫次数、特异性抗体含量等因素与Ⅰ型变态反应有明显的相关性.     

不同品系大鼠对天花粉蛋白诱导被动皮肤过敏差异性的比较研究

目的比较SD、Wistar和F344三种品系大鼠对天花粉蛋白诱导的被动皮肤过敏(Passive cutaneous ana-phylaxis,PCA)反应的差异性。方法选用SD、Wistar和F344三种品系大鼠,用天花粉蛋白为致敏原,以PCA反应时出现蓝斑的直径及蓝斑OD值变化率作为判别标准,进行大鼠同种或小鼠异种PCA试验。结果大鼠同种PCA试验显示,每只大鼠注射天花粉蛋白0.9 mg后,三种品系大鼠PCA反应均为阳性,蓝斑直径大小及蓝斑OD值变化率从大到小依次为:SD、F344大鼠Wistar大鼠;小鼠异种PCA试验显示,耳廓皮内分别注射三种品系大鼠天花粉蛋白抗血清后,小鼠异种PCA反应均为阳性,耳廓蓝染OD值变化率从大到小依次为:SD大鼠抗血清组F344大鼠抗血清组Wistar大鼠抗血清组。结论三种品系大鼠对天花粉蛋白的敏感性存在差异,其中以SD大鼠最为敏感。     

3种品系大鼠对灯盏花素所致 被动皮肤过敏差异性研究

目的:比较F344,SD,Wistar 3种品系大鼠对灯盏花素诱导的被动皮肤过敏(passive cutaneous anaphylaxis,PCA)反应的差异性。方法:取3种品系大鼠随机分为阴性对照组、天花粉组、灯盏花素组。采用sc给药方式,分别给予各组动物不同的药物,进行大鼠同种或大鼠-小鼠异种PCA试验,检测给予灯盏花素后动物皮肤蓝斑吸光度(A),比较药物对F344,SD,Wistar 3种品系大鼠的A变化率。结果:大鼠同种PCA试验显示:3种品系大鼠注射灯盏花素25 mg.kg-1致敏后,F344大鼠皮肤蓝斑A为0.064±0.005 7,明显升高(P<0.05),SD,Wistar大鼠PCA反应均为阴性。大鼠-小鼠异种PCA试验显示:注射F344大鼠抗血清后,小鼠异种PCA反应为阳性,A为0.10±0.01(P<0.05),注射SD,Wistar大鼠抗血清后,反应均为阴性。结论:2种试验方法结果均显示,3种品系大鼠对灯盏花素的敏感性存在差异,其中以F344大鼠最为敏感。     

大鼠主动全身过敏试验方法的探讨

目的建立大鼠主动全身过敏试验模型,评价中药注射剂过敏反应。方法选用豚鼠和BN、F344、SD、Wistar4种品系大鼠,以卵白蛋白(OVA)、天花粉蛋白(TCS)、清开灵注射液、注射用灯盏花素为受试物,分别隔日腹腔注射致敏,共3次,于末次致敏后第14天静脉注射2倍致敏剂量激发。同时设生理盐水对照组。观察各组动物的过敏反应发生率及过敏反应症状。结果阳性药卵白蛋白和天花粉蛋白可引起豚鼠和大鼠发生过敏反应,发生率均为100%,豚鼠发生的过敏反应症状程度略高于大鼠。清开灵注射液可引起豚鼠和BN大鼠发生过敏反应,发生率分别为50%和100%。注射用灯盏花素导致F344、BN和SD大鼠发生过敏反应,发生率分别为100%、100%、83.33%,且F344大鼠呈现强阳性反应,而豚鼠则呈现阴性反应。结论大鼠可推荐作为主动全身过敏试验的动物模型之一,对致敏原的敏感性在动物不同品系间可能存在差异。     

不同品系小鼠异种被动皮肤过敏试验反应耳廓蓝染与血液抗体IgE和IgG水平的研究

目的观察卵白蛋白(OVA)致大鼠过敏抗血清对不同品系小鼠被动皮肤过敏试验(PCA)及血液免疫球蛋白E(IgE)和免疫球蛋白G(IgG)抗体水平变化的影响。方法 Wistar大鼠随机分为生理盐水(NS)组、NS佐剂组、OVA组、OVA佐剂组,采用皮下注射方式给予相应药物致敏,制备大鼠OVA抗体血清,并分别将其注入不同品系小鼠耳廓内,于致敏后3 h或48 h以相应药物激发,观察各组小鼠耳廓蓝染情况,并用酶联免疫吸附剂测定(ELISA)检测小鼠体内抗体水平变化。结果各品系小鼠(KM、BALB/c、ICR、C57BL/6、B6;129S-Fcgr2btm1Ttk/J)NS组、NS佐剂组、OVA组耳廓蓝染阴性,OVA佐剂组耳廓蓝染阳性,其中各品系间存在差异,小鼠耳异种PCA敏感程度强度依次为KM、BALB/c>ICR、C57BL/6、B6;129S-Fcgr2btm1Ttk/J。结论小鼠异种PCA试验中,不同品系动物对OVA抗血清的敏感性存在差异,其中KM,BALB/c小鼠较为敏感,但PCA强度与血液IgE水平无明显的相关性。     

不同偶联率绿原酸全抗原的免疫原性研究

目的:研究不同偶联率人工抗原绿原酸-牛血清(CGA-BSA)的免疫原性,为确定绿原酸全抗原的致敏性研究提供技术和物质基础。方法:将不同数量的CGA与载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)偶联,制得不同偶联率的完全抗原后,用这些抗原免疫BALB/c小鼠和SD大鼠,制备抗血清,通过ELISA法检测其IgE抗体和组胺水平,并对不同偶联率的CGA-BSA进行被动皮肤过敏实验(PCA),测定其抗体效价。结果:CGA-BSA偶联率为20时所免疫的BALB/c小鼠产生的IgE和组胺抗体水平最高。PCA实验也证明偶联率为20的CGA-BSA致敏动物产生的IgE抗体滴度比其他偶联率的CGA-BSA致敏动物产生的IgE抗体滴度高,组胺含量也高于其他组。结论:CGA-BSA的偶联率为10~20时具有较好的免疫原性,可应用于绿原酸免疫原性的鉴定,其中以偶联率20的CGA-BSA免疫原性最好。     

改良被动皮肤过敏试验方法的建立

目的:对被动皮肤过敏试验影响因素佐剂种类、剂量、致敏次数、间隔时间等进行考察,建立灵敏、可靠的过敏反应体内试验方法,为中药注射剂过敏性检测提供可靠的方法。方法:将大鼠进行多次致敏后得到抗血清后,将抗血清背部注射于空白大鼠后激发。结果:卵白蛋白剂量为5mg/只,隔日致敏1次,共免疫3次,末次致敏后15天,制备抗血清,于被动皮肤致敏后24h用抗原与伊文思兰的混合溶液激发为最佳的PCA方法。结论:建立了可靠、灵敏的被动皮肤过敏试验方法,为中药注射剂过敏性检测及过敏原的筛选提供了可靠方法。     

不同品系大鼠对灯盏花素过敏反应差异性研究

目的:比较研究F344、BN、SD、Wistar四种品系大鼠对灯盏花素注射液被动皮肤过敏及其致敏血清中总IgE水平差异性。方法:四种品系大鼠分别随机分为正常对照组、OVA组、灯盏花素组。采用皮下注射给予不同药物致敏,观察各组大鼠被动皮肤过敏反应(PCA)皮肤蓝斑直径大小和阳性率,并检测致敏血清总IgE水平。结果:PCA结果显示,四种品系大鼠的正常组均无蓝斑出现;OVA组,F344、BN、SD、Wistar大鼠蓝斑直径(阳性率)分别为11.67±3.61(6/6)、47.33±5.72(6/6)、5.70±4.81(6/10)、17.90±3.84(10/10),与正常组相比均明显升高且具有显著统计学差异;血清总IgE水平检测结果显示,OVA组血清总IgE含量变化与PCA试验结果一致。对灯盏花素,F344、BN、SD、Wistar大鼠蓝斑直径(阳性率)分别为5.17±2.32(4/6)、2.00±1.79(0/6)、1.67±1.97(0/10)、0.00±0.00(0/10),与正常组相比仅F344大鼠显示出显著性差异;血清总IgE仅F344、BN大鼠血清明显升高,且以F344大鼠变化倍数更高。结论:四种不同品系大鼠对灯盏花素所致被动皮肤过敏反应敏感性及血清总IgE水平均存在一定差异,两者具有一定相关性,其中以F344大鼠最为敏感。     

成年大鼠适用于膜片钳技术的研究进展

膜片钳技术是目前进行离子通道研究的最好方法。但是目前膜片钳技术的研究多集中于幼鼠,随着研究的深入,人们势必涉及到成年甚至老年哺乳类动物中枢神经元上的离子通道。近年来人们利用酶急性分离技术已成功地从成年大鼠标本上分离出完整的神经元,为膜片钳技术应用于成年或老年大鼠提供了可靠的技术保证,本文将对膜片钳技术应用于成年或老年大鼠脑片的研究进行综述。并对其发展及在中医中的应用进行展望。     

云南生物资源抗辐射作用观察

目的:通过照射前给予不同配方的受试物质,观察其对60Co-r射线全身照射小鼠辐射损伤的保护作用。方法:小鼠随机分为正常对照组、辐射对照组、受试物A、B、C三个样品组,检测各组小鼠的白细胞(WBC)数,骨髓嗜多染红细胞微核数及照射后30天存活试验。结果:受试的A、B、C三个样品可显著降低5.0Gyr-射线诱发小鼠骨髓嗜多染红细胞微核发生率(P<0.01),可提高8.0Gy受照小鼠A、C样品组30天存活率,延长平均存活时间,A样品还对r-射线造成的WBC损伤具有明显保护作用。结论:云南某些生物资源具有一定的抗r-射线损伤的作用。     

脂糖舒对Ⅱ型糖尿病大鼠生化指标的影响

目的 :探讨脂糖舒抗Ⅱ型糖尿病的作用。方法 :采用链脲佐菌素制作Ⅱ型糖尿病大鼠模型 ,分别用生理盐水、二甲双胍、格列齐特和不同剂量的脂糖舒灌胃9周(每日1次) ,并取健康大鼠作正常对照 ,测定各组大鼠空腹血浆中胰岛素(Ins)、葡萄糖(Glu)、甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(NEFA)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL_C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL_C)含量 ,以及测定肝糖原含量 ,计算体重指数(BMI)、胰岛素抵抗指数(IRI)、胰岛素敏感指数(ISI)。结果 :二甲双胍、格列齐特和两实验剂量的脂糖舒均显著降低模型大鼠的BMI、IRI以及血浆中Ins,Glu ,TG ,NEFA ,TC和LDL_C含量 ,并升高ISI及HDL_C和肝糖原含量。其中 ,高剂量(2g/kg)脂糖舒降低糖尿病模型大鼠BMI,IRI及血浆Ins,Glu,TG ,NEFA和LDL_C及升高肝糖原含量的作用优于格列齐特(P<0.05～0.01) ,降低NEFA和升高肝糖原含量的作用优于二甲双胍(P<0.01) ,对其余生化指标的影响分别与格列齐特和二甲双胍作用相当(P>0.05)。脂糖舒大、小剂量组间降低IRI和升高ISI作用呈量效正相关。结论 :脂糖舒对Ⅱ型糖尿病有明显的疗效     

复方苦荞麦及其拆方治疗2型糖尿病的研究

目的 :探讨复方苦荞麦及其拆方对 2型糖尿病症状及各项指标的影响。方法 :以链脲佐菌素尾静脉注射 ,辅以高糖高脂饮食饲养 8周 ,建立 2型糖尿病大鼠模型 ,然后分组给药 ,8周后采血检测血脂、血糖、SOD ,MDA ,NO等指标。结果 :糖尿病大鼠症状明显改善 ,血糖血脂降低 ,SOD活性提高 ,MDA水平降低 ,NO代谢水平改善。结论 :复方苦荞麦组方合理 ,对治疗 2型糖尿病疗效可靠     

脂糖舒抗糖尿病作用的实验研究

目的 :观察脂糖舒抗糖尿病作用的效力。方法 :分别对健康大鼠和糖尿病模型大鼠灌胃脂糖舒 (每日 1次 ) 2 1天 ,同时以中药方剂消渴丸作对照。测定血糖、血脂和肝糖原的含量。结果 :糖尿病模型大鼠的血糖和血脂的含量显著降低而肝糖原的含量明显升高 ,但健康大鼠的上述生化指标无显著变化。与实验剂量消渴丸比较 :降糖效力相近 ,降脂和升肝糖原效力较强。结论 :脂糖舒有明显的抗糖尿病作用 ,且不使血糖和血脂降至正常水平以下。     

Evaluation of pharmacological activity of a crude hydroalcoholic extract from Jatropha elliptica

The pharmacological effect of the hydroalcoholic extract of Jatropha elliptica was analysed in in vivo and in vitro models. When given orally in mice, the extract showed a low acute toxicity (LD₅₀ 5 g/kg). In a dose of 0.5 or 1 g/kg p.o. the extract did not interfere with diuresis in the rat, but was found to be effective in blocking rat paw oedema induced by carrageenan and partially, serotonin-induced oedema. In the same dose, the extract failed to inhibit rat paw oedema induced by dextran and the increase of rat cutaneous vascular permeability caused by Bothrops Jararaca venom, dextran, histamine, PAF-acether and serotonin. Pre-incubation of the isolated rat uterus and guinea-pig ileum with the extract (0.2–0.8 mg/mL), produced a concentration-related and non-competitive inhibition of contractions induced by acetylcholine and bradykinin. However, the extract was about 2-fold more potent in inhibiting the contraction of both agonists in guinea-pig ileum than in rat uterine muscle. In rat aorta, the extract (50–100 μg/mL) caused a concentration-dependent inhibition of noradrenaline-evoked contractions, being about 5-fold more potent when compared to the IC₅₀ values obtained in rat uterus.     

Antioxidant properties of silybin glycosides

New soluble derivatives of the hepatoprotective flavonolignan silybin (1), namely silybin galactoside (2), glucoside (3), lactoside (4) and maltoside (5) were investigated for their radical scavenging and antilipoperoxidation properties. According to cyclic voltammetry the results show that glycosides are weaker electron donors than silybin, although it was of interest that they were found to be more potent scavengers of the 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl and the 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid)-derived radicals. The glycosides (2)-(5) were more efficient than silybin in preventing tert-butylhydroperoxide-induced lipoperoxidation of rat liver mitochondrial membranes. Furthermore, glycosides (2)-(5) were significantly more cytoprotective than silybin in tert-butylhydroperoxide-damaged rat erythrocytes and primary hepatocyte cultures. Glycosylation of silybin substantially reduced its toxic effects in primary cultured hepatocytes observed during prolonged incubation. These results suggest that silybin glycosides are suitable soluble derivatives of silybin for experimental studies and may have therapeutic potential.     

黄芪复方对大鼠主动型Heymann肾炎的作用

目的：研究黄芪复方对大鼠主动型Heymann肾炎的治疗作用，并探讨其作用机制。方法：大鼠腹腔注射同种肾脏免疫复合物，复制大鼠主动型Heymann肾炎模型，观察灌胃给予黄芪复方三种剂量1．5、0．75、0,375浸青／kg（折合生药4、2、1g／kg），治疗大鼠H基残留冻土层eymann肾炎4周，对Heymann肾炎模型的作用。结果：①能明显降低肾炎大鼠尿蛋白，血清肌酐与尿素氮，能升高血清总蛋白与白蛋白水平；②能明显提高血清SOD活性和降低血浆MDA含量；③能使肾炎大鼠降低的胸腺及脾脏指数以及脾淋巴细胞ConA增殖反应恢复，使IL-1水平明显降低。结论：黄芪复方对大鼠Heymann肾小球肾炎有明显的保护作用，该疗效可能与其抗炎、抗氧化和免疫调节等作用有关。     

实验性脾虚证雄性大鼠生殖系统形态与细胞化学改变的研究

目的:观察脾虚证雄性大鼠生殖系统形态与细胞化学的改变。方法:成年雄性 Wistar 大鼠,分对照组和实验性脾虚组。脾虚组用大黄浓煎荆灌服致脾虚。对两组大鼠的睾丸和附睾进行组织学与细胞化学的对比观察。结果:脾虚组雄性大鼠生殖系统出现以下变化:(1)精母细胞减少;(2)各级生精细胞均出现 ACP 和 ATPase 活性的变化;(3)睾丸间质细胞3-β HSDH 活性轻度增强;(4)附睾管头段细胞游离面纤毛呈杂乱状;(5)附睾管各段细胞 SDH活性有明显变化;(6)附睾管尾段3-β HSDH 活性减弱。结论:脾虚证不仅表现为消化系统功能低下,生殖系统也有病理改变。