慢性缺氧通过激活缺氧诱导因子1α/microRNA-96通路诱导小管上皮细胞自噬异常参与肾间质纤维化

目的：研究慢性缺氧诱导肾脏纤维化的机制。方法：缺氧诱导人近端肾小管上皮细胞(HK-2),Western Blot检测缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、微管相关蛋白轻链3Ⅰ/Ⅱ(LC3Ⅰ/Ⅱ)和p62的表达及实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测microRNA-96(miR-96)的表达。采用siRNA-HIF-1α(siHIF-1α)和pcDNA-HIF-1α处理缺氧诱导的肾小管上皮细胞,利用RT-qPCR检测miR-96的表达,探讨过表达和干扰HIF-1α对miR-96表达的影响。miR-96mimic处理常氧肾小管上皮细胞,Western Blot检测促纤维化因子α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅳ型胶原蛋白1(COL4A1)蛋白的变化,RT-qPCR检测自噬关键分子LC3Ⅰ/Ⅱ和p62的表达。小鼠腹腔注射miR-96 inhibitor的病毒载体,通过Masson染色检测各模型肾脏纤维化的程度及纤维化因子COL4A1的表达。结果：在缺氧诱导的肾小管上皮细胞中HIF-1α和miR-96表达均增加(P<0.05),与纤维化程度呈正相关性,自噬关键分子LC3Ⅰ/Ⅱ水平升高p62...     

缺氧诱导因子-1α参与肝纤维化形成机制研究进展

目的 肝纤维化是一种由于反复肝损伤而导致肝组织细胞外基质过多沉积导致的疾病.缺氧损伤为肝损伤的一部分,缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)是响应缺氧应激的关键转录因子,在肝纤维化组织和活化的肝星状细胞(HSC)表达显著增加.目前,通过对大量HIF-1α依赖性基因和信号通路的研究,确认这些基因及其通路的变化参与肝纤维化发展...     

微小RNA-425-5p对心肌梗死诱导心肌纤维化影响

目的 探究微小RNA-425-5p(miR-425-5p)在大鼠心肌梗死(MI)诱发实验性心肌纤维化中的调控作用及其潜在的作用机制.方法 在体水平选用雄性SD大鼠20只,采用随机数字表法分为假手术组、MI模型组.采用冠状动脉左前降支结扎术构建大鼠MI模型,假手术组开胸后只做冠状动脉穿线并不结扎.模型建立4周后,取心肌组...     

脂多糖对心肌细胞缺氧诱导因子-1α表达的影响

目的:观察脂多糖(LPS)对心肌细胞损伤及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响.方法:培养新生乳鼠心肌细胞,以LPS(1 μg/ml)分别作用0～4 h,建立脓毒症心肌抑制细胞模型,测定各时点细胞存活率、LDH漏出率、锥虫蓝摄取率及肌酸激酶(CK)活性.用免疫印迹法测定LPS对HIF-1α表达的影响.结果:LPS处理后,LDH漏出率、锥虫蓝摄取率及CK活性均明显上调,而细胞存活率下调,同时伴HIF-1α表达明显上调.结论:LPS能导致明显的心肌损伤;同时伴随HIF-1α表达明显上调,但HIF-1α在脓毒症心肌抑制中扮演的角色尚需进一步研究.     

微小核糖核酸靶向调控内皮细胞间质转分化触发心肌纤维化的研究进展

<正>心肌纤维化(myocardial fibrosis,MF)是指在心肌细胞外基质中胶原纤维过量积聚、胶原含量显著升高或胶原成分发生改变[1]。MF是多种心脏疾病,如风湿性心脏病、扩张型心肌病、先天性心脏病(先心病)等发展到一定阶段的共同病理表现,是心脏重构的重要组成部分,可引起心房、心室增     

缺氧诱导因子-1α在脑缺血中的作用及其机制

缺氧诱导因子-1(hy poxia-inducible factor-1,HIF-1)是一种重要的转录调节因子,主要通过其活性亚基HIF-1α参与机体对缺氧环境的应答.脑缺血缺氧时,HIF-1α表达上调,可激活涉及糖酵解、血管生长、细胞生存和细胞凋亡的多个下游靶基因表达,对脑缺血后能量代谢障碍的改善以及微循环的建立具有重要意义.HIF-1α既可促进神经元存活,也可诱导神经元迟发性死亡.各种预处理和后处理方法可能通过激活HIF-1α调节神经细胞存亡.     

缺氧诱导因子1α在肝纤维化发生发展中的作用机制

肝纤维化及终末期肝硬化常伴随肝脏缺氧现象,缺氧诱导因子1α作为调控机体缺氧反应的关键转录因子,在肝星状细胞活化和肝纤维化发生发展中扮演重要角色。此外,缺氧诱导因子1α表达下调可减轻肝纤维化,有望成为肝纤维化治疗新靶点。综述了缺氧诱导因子1α与肝纤维化相关信号通路及基因之间的关系,进一步讨论了缺氧诱导因子1α作为肝纤维化治疗新靶点的潜力。     

心肺复苏成功后血清缺氧诱导因子-1α和缺氧诱导因子-2α与患者预后的关系

目的 探讨行心肺复苏的心搏骤停患者缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和因子-2α(HIF-2α)与预后的关系.方法 2016年6月至2019年3月常山县人民医院共有151例心搏骤停患者接受接受心肺复苏治疗,其中105例复苏成功(心肺复苏成功组),46例复苏失败(心肺复苏失败组).采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)...     

缺氧诱导因子1α与胰腺癌的关系研究进展

缺氧诱导因子1α(HIF-1α)是一个在缺氧状态下发挥活性的核转录因子,在胰腺癌组织及细胞中高表达,促进胰腺癌生长和血管生成,缺氧状态下,间质细胞和胰腺癌细胞之间的相互作用增加。     

缺氧条件下心肌组织的形态学改变及缺氧诱导因子-1在心脏内的表达

目的观察缺氧条件下心肌组织的形态学改变以及缺氧诱导因子-1(HIF-1α)在心脏内的表达情况。方法将40只SD大鼠随机分为正常对照组、低氧12 h组、低氧24 h组,低氧36 h组。其中低氧12 h、低氧24 h、低氧36 h组制备体内缺氧模型。采用95%氮气+5%氧气,制备缺氧模型,缺氧时间分别为12、24、36 h,每天缺氧时间为2 h,其他时间置于空气中。所有大鼠在实验结束时均实施腹腔注射麻醉,断髓法处死,制备心肌组织石蜡切片,HE染色镜下观察心肌组织的形态学变化。SABC免疫组化法检测各组大鼠心肌细胞HIF-1α的表达情况。结果正常对照组心肌组织切片心肌细胞结构完整,核大呈圆形;低氧组大鼠的心肌细胞结构逐渐变化,心肌细胞明显肿胀,细胞间隙明显增加,核变小而不规则。免疫组化染色切片HIF-1α蛋白阳性物质定位于细胞核和细胞质,呈弥散或颗粒状。与正常对照组心肌组织HIF-1α的蛋白IOD比较,各缺氧组HIF-1α的蛋白IOD明显增加,有统计学意义(P<0.05)。结论低氧可诱导大鼠心肌组织出现破坏。HIF-1α在缺血心肌组织中高表达,可能参加了心肌缺血的代偿机制,有助于改善心肌供血。     

微小RNA-155与心血管疾病关系的研究进展

MicroRNAs是一类单链、保守的非编码小RNA,其作用是抑制靶信使的转录和翻译,其中微小RNA-155是其家族中的一员,同时亦是一种重要的多功能调节因子,与心血管系统密切相关,可通过调节各种分子和细胞机制进而影响心血管疾病的发生发展.     

缺氧对大鼠心肌细胞系H9C2中HIF-1α、CT-1表达的影响

目的 观察缺氧对大鼠心肌细胞系H9C2细胞中HIF-1、CT-1的影响.方法 采用向培养液中加氯化钴( CoCl2)模拟缺氧.实验分为缺氧组(培养液中加入100 μmol/L的CoCl2)和对照组(培养液中无CoCl2).通过CCK-8试剂盒检测各组H9C2细胞的存活率.通过Real-time PCR检测HIF-1α和CT-1的mRNA水平,通过Western blot技术检测HIF-1 α和CT-1的蛋白质水平.结果 缺氧3d和4d后,缺氧组H9C2细胞的存活率较对照组下降(P＜0.05),缺氧后H9C2细胞中HIF-1α mRNA表达无明显改变(P＞0.05),而蛋白表达增加(P＜0.05).缺氧后H9C2细胞中CT-1 mRNA和蛋白水平均增加(P均＜0.05).结论 缺氧环境下大鼠心肌细胞系H9C2中HIF-1α和CT-1的表达增加.     

缺氧诱导因子-1与心肌对缺氧的适应

缺氧诱导因子 1是在体内广泛存在的核内转录因子 ,有两个亚基。HIF 1是细胞在缺氧条件下产生的核蛋白 ,它与靶基因结合后可调节多种基因如内皮素、血管内皮生长因子、诱导型一氧化氮合酶等的表达 ,促进机体对缺氧产生一系列的适应反应。其活性的维持对心脏的发育以及对心肌在缺血缺氧性疾病中的代偿起着重要作用。对HIF 1与心脏缺氧代偿关系的研究可为治疗心脏疾病提供新的途径     

缺氧诱导因子-1α与动脉粥样硬化易损斑块

缺氧诱导因子-1是一种分布和作用都很广泛的细胞转录因子,是唯一特异性缺氧条件下发挥活性的因子。缺氧诱导因子-1α是缺氧诱导因子-1的氧调节亚单位,决定了缺氧诱导因子-1的活性。研究表明缺氧诱导因子-1α参与了动脉粥样硬化的发生发展,与易损斑块有密切的关系。     

DMOG稳定缺氧诱导因子1α改善发绀右心室重构

目的 探索二甲基乙二酰基甘氨酸（dimethyloxalylglycine,DMOG）是否通过增强缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor,HIF-1α)稳定性改善慢性缺氧导致的右心室重构（right ventricular remodeling,RVR）。方法 Sprague Dawley大鼠持续低氧4周形成发绀右心室肥厚模型。实验分为常氧组,低氧组,低氧对照组,低氧DMOG组。分别记录各组大鼠体重变化趋势,计算右心室心肥厚指数,Masson染色评估心肌纤维化程度,Western blot检测HIF-1α及促红细胞生成素受体（erythropoietin receptor,EPOR）蛋白的表达,实时聚合酶链反应检测葡萄糖转运蛋白1(glucose transporter 1,GLUT-1)、B淋巴细胞瘤2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的水平,ELISA检测血清白细胞介素6(interleukin6,IL-6)水平。结果 低氧组HIF-1α水...     

缺氧诱导因子α亚型基因在急性心肌梗死大鼠缺血心肌表达的变化

目的 通过观察急性心肌梗死(AMI)大鼠心肌缺氧诱导因子 (hypoia-inducible factor,HIF) 3个α亚型mRNA表达的动态变化,探讨其在早期缺血心肌中的作用.方法 将大鼠随机分为对照组和AMI组.用HE染色观察心肌形态学变化, RT-PCR检测术后1、2、4、6、12 h缺血心肌HIF 3个α亚型mRNA表达情况.结果 HIF-1α、2α、3α mRNA在正常心肌中均有表达.术后1 h,缺血心肌HIF-1α mRNA表达明显上调(P<0.05),2 h达高峰(P<0.01),4 h开始下降(P＜0.05),6 h降至正常水平,12 h维持在正常水平;HIF-2α、3α mRNA在急性缺血心肌表达无明显变化.结论 早期急性心肌缺血可诱导HIF-1α基因表达改变,与HIF-2α、3α基因表达无关.     

缺氧诱导因子-1α与脑缺氧缺血性损伤

缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1 alpha,HIF-lα)是近来发现的广泛存在于哺乳动物和人体内的一种缺氧应答调控因子,在调节缺氧诱导的基因表达中起关键性作用。它可调节表达多种靶基因如血管内皮生长因子、促红细胞生成素等,对改善脑缺氧缺血后能量代谢障碍、促进脑血流动力学恢复、抑制兴奋性氨基酸毒性、减少细胞凋亡等起重要作用。通过进一步对HIF-lα及其靶基因的研究,可能为临床治疗脑缺氧缺血性损伤提供了一种新的治疗策略。     

miR-155通过靶向调控TGFBR1和TGFBR2抑制AMI诱导的心肌纤维化

目的 探讨miR-155对急性心肌梗死(AMI)小鼠心肌纤维化进程及心肌成纤维细胞(CFs)细胞增殖和周期的影响,分析miR-155对转化生长因子(TGF)-β信号Ⅰ型/Ⅱ型跨膜受体(TGFBR1/TGFBR2)调控作用,阐明miR-155在AMI中的作用及其工作机制。方法 qRT-PCR检测miR-155在AMI患者和AMI小鼠血清中的表达。心脏超声,Masson染色和天狼星红染色分别检测miR-155对AMI小鼠左室射血分数及心肌纤维化程度的影响。Western印迹检测CFs细胞在缺氧条件下miR-155对TGFBR1,TGFBR2,P-smad2和P-smad3表达的影响。TargetScan和双荧光素酶报告基因试验筛选并验证TGFBR1和TGFBR2是否为miR-155的靶基因。qRT-PCR和Western印迹检测miR-155对TGFBR1和TGFBR2表达的影响。CCK8法和流式细胞法分别检测miR-155对CFs细胞增殖和周期的影响。结果 miR-155在AMI患者及AMI小鼠血清中的表达均明显降低,miR-155过表达能促使AMI小鼠左室射血分数升高,下调心肌组织中N...     

心肌转染缺氧诱导因子1α对大鼠心肌梗死的保护作用

目的 目的 评价心肌内注射缺氧诱导因子1α进行基因转染对大鼠心肌梗死的保护作用.方法 选择雄性大鼠72只进行实验,将实验分为转染腺病毒缺氧诱导因子1α组,转染空质粒对照组和假手术组.每组以术后的不同时间处死,取材分3、7、14天三个亚组,每个亚组8只.建立心肌梗死模型.当左前降支被结扎后,在室游离壁的三个不同部位分别注射50μg腺病毒缺氧诱导因子1α质粒和50μg的空质粒.假手术组不结扎左前降支.观察缺氧诱导因子1α的基因表达、心肌毛细血管密度和大鼠心肌梗死面积.结果 缺氧诱导因子1α组与对照组相比,心肌组织中缺氧诱导因子1α基因表达明显增强,梗死区毛细血管密度明显增加(P<0.01),心肌梗死面积分别为23.85%±2.25%和38.74%±3.12%,心肌梗死面积明显减少(P<0.01).结论 心肌内注射缺氧诱导因子1α进行基因转染可以增加缺氧诱导因子1α基因表达,增加心肌毛细血管生成,明显减少心肌梗死面积,对大鼠心肌梗死起保护作用.