芪丹通脉片调节TLR4信号通路抑制巨噬细胞泡沫化的研究

目的 观察益气活血中药芪丹通脉片对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的RAW264.7细胞泡沫化进程、炎症指标及Toll样受体（TLR）4信号通路的影响。 方法 培养RAW264.7细胞，随机分为对照组、ox-LDL组及ox-LDL +芪丹通脉片（QDTM）组，各组细胞干预后进行泡沫化诱导，分析各组细胞油红染色阳性面积，计算各组细胞泡沫化诱导率，收集细胞，ELISA法检测炎性因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素（IL）-6、C反应蛋白（CRP）表达水平，Real-time PCR及Western blot分析TLR4、分子核因子（NF）-κB表达水平。 结果 与对照组相比，ox-LDL组细胞泡沫化诱导率、TNF-α、IL-6、CRP水平显著升高（P < 0.05），TLR4、NF-κB表达水平明显上调，QDTM干预后，ox-LDL+QDTM组细胞泡沫化诱导率及TNF-α、IL-6、CRP水平较ox-LDL组显著下调（P < 0.05），同时TLR4、NF-κB表达水平较ox-LDL组明显下降。 结论 QDTM能抑制TLR4信号通路及炎症反应、降低RAW264.7细胞泡沫化诱导率，抑制巨噬细胞泡沫化。     

视黄酸相关孤核受体α对脓毒症小鼠心肌损伤的影响

目的 本研究旨在探索视黄酸相关孤核受体α（RORα）对脓毒症炎症反应及其所致的心脏功能损害影响。 方法 通过腹腔注射脂多糖（LPS）建立小鼠脓毒症模型，通过LPS刺激巨噬细胞，建立脓毒症细胞模型，采用细胞转染和小鼠尾静脉注射过表达质粒，以在细胞和组织中过表达RORα，进而探究RORα在脓毒症炎症反应和脓毒症所致心肌损伤中的作用。采用实时定量PCR试验、蛋白免疫印记试验检测RORα、NF-κB p65和炎症因子的变化，采用酶联免疫试验、病理切片等检测脓毒症小鼠心肌损伤的变化。 结果 RORα在LPS刺激巨噬细胞中显著降低（P<0.05）；过表达RORα能够显著抑制LPS刺激巨噬细胞中炎症因子白介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子 (TNF)-α的表达（P<0.05）、NF-κB p65的核移位水平（P<0.05）、脓毒症小鼠血清中炎症因子IL-1β和TNF-α的释放、降低脓毒症小鼠肌酸激酶同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）的含量以及改善脓毒症所致的心肌病理损害。 结论 RORα能够通过抑制NF-κB p65的核移位进而负性调控LPS刺激巨噬细胞中的炎症反应，从而缓解脓毒症小鼠的炎症反应及心肌损害。     

敲低Spectrinβ Ⅱ加重棕榈酸诱导的心肌细胞损伤

目的 研究血影蛋白β Ⅱ（Spectrin βⅡ）在棕榈酸诱导的小鼠原代心肌细胞DNA损伤和细胞凋亡中的作用。 方法 ①Western blot检测棕榈酸处理后小鼠原代心肌细胞Spectrin β Ⅱ表达量变化。②分别用Ad-sh-scramble（对照组）和Ad-sh-Spectrin β Ⅱ（Spectrin β Ⅱ干涉组）的腺病毒感染小鼠原代心肌细胞,荧光显微镜下观察病毒的感染效率。利用Western blot和qPCR检测Spectrin β Ⅱ的干涉效率。③Western blot检测棕榈酸处理后Ad-sh-scramble组和Spectrin β Ⅱ干涉组小鼠原代心肌细胞DNA损伤指标γ-H2AX及凋亡蛋白剪切型半胱天冬酶3(cleaved-caspase 3)的表达,采用流式细胞术检测各组细胞凋亡水平。 结果 ①给予棕榈酸处理的小鼠原代心肌细胞Spectrin β Ⅱ蛋白水平显著降低（P<0.05）。②与Ad-sh-scramble组相比,Ad-sh-Spectrin β Ⅱ组Spectrin β Ⅱ的蛋白和mRNA水平均显著降低（P<0.05）③给予棕榈酸处理后,与Ad-sh-scramble组相比,Ad-sh-Spectrin β Ⅱ组的γ-H2AX2和cleaved-caspase 3蛋白表达显著升高（P<0.05）,并且细胞凋亡率显著升高（P<0.05）。 结论 敲低Spectrin β Ⅱ加重棕榈酸诱导的小鼠原代心肌细胞DNA损伤和细胞凋亡。     

铁离子螯合剂去铁胺上调巨噬细胞、泡沫细胞细胞外基质金属蛋白酶诱导因子表达的机制探讨

目的: 探讨铁负荷过低上调巨噬细胞、泡沫细胞细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)表达的机制。研究促分裂原活化的蛋白激酶(MAPK)信号通路、视黄醛x受体（RXR）及过氧化物酶体增殖剂活化受体γ（PPARγ）在此过程中的作用。方法: 将巨噬细胞和泡沫细胞给予MAPK（p38,ERK1/2）信号通路抑制剂及RXR的天然配体预处理,加入或不加入去铁胺继续培养24 h,用Western blot测定细胞中EMMPRIN蛋白的表达。于巨噬细胞和泡沫细胞中加入铁离子鳌合剂去铁胺刺激,用Western blot检测MAPK（p38,ERK1/2）的磷酸化及PPARγ的水平。结果: p38 MAPK通路抑制剂及RXR和配体在本身不影响EMMPRIN表达的同时,可抑制去铁胺对EMMPRIN表达的上调。去铁胺可促进p38 MAPK磷酸化,但不影响PPARγ蛋白表达。结论: p38 MAPK 参与了铁负荷过低上调巨噬细胞和泡沫细胞中EMMPRIN表达的过程;RXR可能参与了该过程。     

褪黑素通过激活下丘脑室旁核SIRT1/炎症因子改善缺血性心力衰竭

目的 探讨室旁核输注褪黑素通过激活下丘脑室旁核SIRT1信号通道并调控炎症因子改善缺血性心衰的机制。 方法 在室旁核植入微型渗透胶囊泵并输注褪黑素,1周后建立大鼠缺血性心衰模型。4周后行超声心动图监测心功能指标,采用免疫荧光法检测室旁核SIRT1活性,采用Western blot测定促炎因子IL-1β和抗炎因子IL-10的蛋白表达水平,采用ELISA试剂盒检测外周血中去甲肾上腺素（NE）的表达。 结果 室旁核输注褪黑素显著提高SIRT1活性,降低IL-1β蛋白表达水平,提高 IL-10蛋白表达水平,降低NE的表达,显著改善大鼠心脏功能。 结论 室旁核输注褪黑素改善缺血性心衰的作用是通过激活下丘脑室旁核SIRT1信号通道,调控炎症因子,并进一步降低外周交感神经活动来实现的。     

京尼平通过SIRT3/SOD2改善小鼠缺血/再灌注后心脏功能

目的 研究栀子果实的主要药效成分京尼平对小鼠心肌缺血/再灌注（myocardial ischemia/reperfusion,MI/R）损伤后心功能的影响及其机制。 方法 将C57BL/6小鼠心脏冠状动脉左前降支结扎/放松建立小鼠心肌缺血/再灌注模型;通过Miller导管和心脏超声检测心脏功能,TUNEL染色检测细胞凋亡,western blot检测SIRT3、SOD2及凋亡相关分子的表达量。 结果 与Sham组相比,给予京尼平（50 mg/kg）显著改善了MI/R小鼠心脏功能,减轻了心肌细胞的凋亡及减少了凋亡相关分子的表达量。进一步研究表明,京尼平提高了SIRT3的表达量并降低了乙酰化SOD2水平。给予SIRT3的抑制剂3-TYP后,京尼平改善MI/R小鼠心脏功能、减轻心肌细胞凋亡及减少凋亡相关分子表达量的效果受到了显著抑制。 结论 京尼平具有改善MI/R后小鼠心脏功能和减轻心肌细胞的凋亡的作用,其机制与京尼平提高SIRT3的表达量和降低SOD2的乙酰化程度有关。     

Perilipin 5缺失导致线粒体功能异常加剧肥胖小鼠心肌的氧化应激损伤

目的 探讨Perilipin 5缺失是否会导致小鼠的线粒体功能异常,从而加剧肥胖小鼠心肌的氧化应激损伤。 方法 对各组小鼠心脏进行超声分析,对心肌组织进行HE染色观察心肌肥厚程度,检测心肌组织中丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）水平,Western blot检测心肌组织线粒体以及胞质内 Cytochrome C蛋白的表达水平。 结果 与ob/ob小鼠对比,ob/ob/Plin5-/-小鼠心脏LVEF、LVIDd进一步降低（均P<0.05）,LVIDs进一步增大（P<0.01）,心肌细胞横截面积（P<0.05）和LVPWd进一步增大（P<0.05）,MDA进一步上升（P<0.01）,SOD进一步下降（P<0.05）,心肌线粒体 Cytochrome C蛋白表达明显降低（P<0.01）,胞质中 Cytochrome C蛋白表达明显升高（P<0.01）。 结论 Plin5的缺失可能通过干扰线粒体功能,加剧肥胖小鼠心肌的氧化应激损伤,进而引起小鼠心脏功能的进一步损害。     

核干细胞因子增强间充质干细胞心肌保护作用

目的 研究核干细胞因子（nucleostemin,NS）过表达对脂肪来源间充质干细胞（ADSC）移植后的生存和心肌保护作用的影响。 方法 分离培养小鼠ADSC,分别转染NS腺病毒（ADSC-NS）和对照腺病毒（ADSC-Con）,CM-DiI标记ADSC。制作小鼠心肌梗死（MI）模型,随机分为以下4组:①Sham组（与MI相同操作但不结扎冠脉）,②MI+vehicle组（冠脉结扎后,在左心室前壁、侧壁和后壁立即心肌点注射总量20 μl PBS）,③MI + ADSC-Con组（心肌点注射20 μl含2 × 105新鲜ADSC-Con的悬液）,④MI + ADSC-NS组（心肌点注射20 μl含2 × 105的新鲜ADSC-NS的悬液）。MI 3 d后,免疫荧光和流式检测ADSC存活率,TUNEL法检测心肌细胞凋亡。MI 4周后,超声心动图检测心脏结构和功能,MASSON-三色染色测定MI面积,实时定量PCR检测心房钠尿肽（ANP）和脑钠尿肽（BNP）表达水平。在细胞水平将ADSC分为以下各组:①对照腺病毒（ADSC-Con）组,②NS腺病毒（ADSC-NS）组,③对照腺病毒 + 对照（ADSC-Con + Con）组,④NS腺病毒+对照（ADSC-NS + Con）组,⑤对照腺病毒+双氧水（ADSC-Con + H₂O₂）组,⑥ NS腺病毒+双氧水（ADSC-NS + H₂O₂）组。检测NS过表达对ADSC增殖、迁移和抗凋亡作用的影响。 结果 MI 3 d后,与ADSC-Con相比,ADSC-NS显著增加ADSC移植后在心肌组织中的存活率（P < 0.05）,显著降低心肌细胞凋亡率（P < 0.05）。MI 4周后,ADSC-NS移植显著增加左心室射血分数,降低左心室内径,降低MI面积和ANP、BNP的mRNA表达。在细胞水平,NS过表达促进ADSC增殖和抗凋亡作用,对ADSC的迁移无显著影响。 结论 NS过表达通过增加ADSC的增殖和抗凋亡能力,增强ADSC移植对心脏的保护作用。     

NF-κB在铁负荷过低上调炎症因子中的作用

目的: 探讨核转录因子(NF)-κB在铁负荷过低上调巨噬细胞、泡沫细胞炎症因子反应中的作用。方法: 将巨噬细胞和泡沫细胞给予NF-κB抑制剂预处理,加入或不加入铁离子鳌合剂去铁胺(DFO)继续培养24 h,用Western blot测定细胞中细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（EMMPRIN）蛋白的表达。于巨噬细胞和泡沫细胞中加入DFO刺激,用Western blot测定细胞核中NF-κB p65蛋白的表达。将巨噬细胞和泡沫细胞给予p38 MAPK信号通路抑制剂或视黄醛x受体（RXR）的天然配体预处理,加入DFO刺激,用Western blot测定细胞核中NF-κB p65蛋白的表达。结果: NF-κB抑制剂可抑制DFO对巨噬细胞、泡沫细胞中EMMPRIN上调的作用。DFO可促进巨噬细胞、泡沫细胞细胞核中NF-κB p65蛋白的表达。p38 MAPK通路抑制剂或RXR配体可抑制DFO对NF-κB p65蛋白水平上调的作用。结论: NF-κB 参与了铁负荷过低上调巨噬细胞和泡沫细胞中EMMPRIN表达的过程。RXR配体对铁负荷过低上调炎症反应的抑制作用,同其抑制NF-κB激活有关。     

儿茶酚胺释放对心肌BCKDK表达的影响及其机制研究

目的 探究在缺血、高血压、心衰等疾病条件下儿茶酚胺释放对心肌细胞中支链酮酸脱氢酶激酶（BCKDK）的表达影响及其作用机制。 方法 使用异丙肾上腺素（ISO）腹腔注射模拟小鼠心脏儿茶酚胺导致的心肌病变模型。小鼠分为对照（Vehicle）组和ISO注射（ISO）组。分别使用ISO、过氧化氢（H₂O₂）、鱼藤酮（rotenone）和抗霉素（antimycin ）A 模拟多种病理刺激处理心肌细胞。使用Western blot检测BCKDK、含有NHL重复序列蛋白（NHLRC）1 和热休克蛋白（Hsp）70蛋白水平表达；实时荧光定量PCR检测BCKDK mRNA水平表达；免疫荧光检测BCKDK、NHLRC1和Hsp70的细胞内定位；免疫共沉淀探究蛋白-蛋白相互作用和BCKDK泛素化水平。 结果 与Con组相比，ISO处理显著增加BCKDK蛋白水平（P<0.01），而mRNA水平无显著差异，BCKDK与NHLRC1的结合降低且泛素化水平降低。而过表达NHLRC1上调BCKDK泛素化水平并降低其蛋白表达。与ISO组相比，Hsp70敲低能完全逆转ISO诱导的BCKDK升高和泛素化降低逆转ISO诱导的支链氨基酸（BCAA）代谢紊乱（P<0.01）。 结论 ISO暴露通过诱导Hsp70与BCKDK结合竞争性抑制NHLRC1介导的BCKDK泛素化，从而导致BCKDK的上调和心肌细胞中BCAA分解代谢紊乱。     

鸢尾素对缺血再灌注心肌铁死亡的抑制作用

目的 建立小鼠心肌缺血再灌注（MI/R）损伤模型,探讨鸢尾素（irisin）能否抑制心肌铁死亡进而发挥心肌保护作用。 方法 将80只5周龄健康雄性C57小鼠随机分为正常对照组（40只）和运动训练组（40只）。运动组完成训练后进一步将两组小鼠分为假手术组和MI/R组（每组20只）。采用小鼠急性MI/R在体模型(缺血30 min,再灌注24 h) 于再灌注后取心肌组织,检测各组血清及组织中irisin水平、铁死亡相关信号表达、心肌梗死面积和整体心脏功能。在细胞学实验中,采用H9c2心肌细胞建立缺氧/复氧（H/R）模型并给予irisin处理后检测铁死亡相关信号表达情况。 结果 铁死亡抑制剂ferrostatin-1可显著减小MI/R心肌梗死面积,降低MI/R心肌中铁死亡标志物Ptgs2 mRNA和丙二醛（MDA）水平,提示心肌铁死亡是MI/R心肌损伤的重要部分。与对照组相比,有氧运动训练可有效提高骨骼肌和心肌中的irisin水平（P<0.05）。运动组MI/R心肌的铁死亡程度被显著抑制,心肌Ptgs2 mRNA、MDA和脂质过氧化程度均显著降低（P<0.05）,心功能显著改善（P<0.05）。外源性补充irisin可有效提高MI/R心肌中GPX4水平而抑制心肌铁死亡程度,减小心肌梗死面积（P<0.05）。细胞学实验发现采用siRNA抑制H9c2细胞整合素αV/β5受体可有效阻断irisin对铁死亡的抑制作用。 结论 鸢尾素通过整合素αV/β5受体-GPX4信号途径抑制MI/R心肌铁死亡。有氧运动训练可通过提高内源性irisin水平实现心肌保护作用。     

内源性sestrin2参与抑制心肌梗死后内质网应激所诱导细胞凋亡

目的 探讨sestrin2在心梗（MI）后内质网应激中的变化及作用。 方法 结扎大鼠前降支制作MI模型建立MI组,仅开胸建立Sham组;应用衣霉素刺激新生大鼠心肌细胞建立细胞内质网应激模型（衣霉素组）应用磷酸盐缓冲溶液（PBS）为对照组。原位切口末端标记法（TUNEL）评估组织水平细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞凋亡率。蛋白免疫印迹法检测葡萄糖调节蛋白（GRP）78、CCAAT-增强子结合蛋白（CHOP）、sestrin2表达水平。 结果 与Sham组相比,MI大鼠心脏组织中内质网应激激活,GRP 78及CHOP表达水平增加（均P < 0.01）,心肌细胞凋亡增加（P < 0.01）,伴随内源性sestrin2蛋白表达水平上调（P < 0.01）。与对照组相比,衣霉素刺激新生大鼠心肌细胞激活内质网应激,GRP 78及CHOP蛋白表达水平增加（P < 0.01,P < 0.05）,心肌细胞凋亡表型增加（P < 0.01）。在此基础上,转染sestrin2-siRNA抑制心肌细胞sestrin2表达后,CHOP蛋白表达上调（P < 0.05）,心肌细胞凋亡增加（P < 0.05）。 结论 内源性sestrin2参与抑制心肌缺血后内质网应激诱导心肌细胞凋亡。     

Syndecan-4 over-expression preserves cardiac function in a rat model of myocardial infarction

Syndecan-4 (synd4) is a heparan sulfate proteoglycan, involved in repair following tissue damage, through modulating neovascularization and inflammation. In acute myocardial infarction its myocardial expression is up-regulated in a time-dependent manner, and in synd4-deficient mice severe cardiac dysfunction and abnormal remodeling are observed following induction of myocardial infarction. Here we explored the therapeutic potential of sustained synd4 over-expression in the context of myocardial infarction. Adenovirus containing the synd4 gene (Ad-synd4), or corresponding control adenovirus (Ad-null), was administered intramyocardially in rats immediately after induction of myocardial infarction. Cardiac function was ascertained by echocardiography, hemodynamic assessment and brain natriuretic peptide level 28 days post-intervention. Hearts were excised for molecular and histological analyses at predetermined time points. We observed reduced mortality and improved cardiac function post-myocardial infarction in the Ad-synd4 as compared to the Ad-null group, with associated attenuation of cardiac remodeling, less myocyte loss and reduced fibrosis. Additionally, the Ad-synd4 group exhibited endothelial cell activation and increased angiogenesis and arteriogenesis in the myocardium. The Ad-synd4 group also showed evidence of reduced myocardial inflammation as compared with the Ad-null group, with reduced inflammatory cell (CD45+) and myofibroblast (α-SMA+) infiltration as well as suppressed collagen III deposition and iNOS expression. Our results suggest that sustained synd4 over-expression in the myocardium is of therapeutic benefit following experimental myocardial infarction, through inducing neovascularization, suppressing tissue inflammation and fibrosis, with resultant improvements in cardiac function and remodeling.     

Cardiomyocyte-restricted over-expression of C-type natriuretic peptide prevents cardiac hypertrophy induced by myocardial infarction in mice

OBJECTIVE: Infused C-type natriuretic peptide (CNP) was recently found to play a cardioprotective role in preventing myocardial ischaemia/reperfusion (I/R) injury and improving cardiac remodelling after myocardial infarction (MI) in rats. Our study aimed to investigate the effect of cardiomyocyte-specific CNP over-expression on I/R injury and MI in transgenic mice. METHODS AND RESULTS: We generated transgenic (TG) mice over-expressing CNP in cardiomyocytes. Elevated CNP expression on RNA and protein levels was demonstrated by RNase-protection assay and radioimmunoassay. Male TG mice and age-matched wild-type (WT) littermates were subjected to 1-hour global myocardial ischaemia and 23 h of reperfusion or permanent ligation of the coronary artery for 3 weeks. Infarct size did not differ between the WT and TG groups in mice subjected to I/R. In mice that underwent permanent ligation of coronary arteries, both left and right ventricular hypertrophy were prevented by CNP over-expression 3 weeks post-MI. Histological analysis revealed less necrosis, muscular degeneration and inflammation in infarcted TG mice. Impairment of cardiac function was less pronounced in transgenic animals than in the wild-type controls. CONCLUSIONS: Over-expression of CNP in cardiomyocytes does not affect I/R-induced infarct size but prevents cardiac hypertrophy induced by MI. Therefore, CNP may represent a potent therapeutic target for the treatment of patients with cardiac hypertrophy induced by myocardial infarction or other aetiology.     

褪黑素抗心肌缺血/再灌注损伤的室旁核机制

目的 探讨外周输注褪黑素通过下丘脑室旁核（PVN）调节交感神经活性对抗心肌I/R损伤的机制。方法 腹腔注射褪黑素或者无菌生理盐水,24 h后建立C57BL/6J小鼠心肌I/R损伤模型。超声心动图测定心功能,用Evans blue/TTC双染色法测定再灌注24 h后心肌梗死面积。免疫荧光检测下丘脑室旁核（PVN）IL-10和IL-1β及心肌酪氨酸羟化酶（TH）水平;Western blot检测下丘脑室旁核NF-κB水平;ELISA检测血浆去甲肾上腺素(NE)水平。结果 外周给予褪黑素可抑制PVN区NF-κB水平（P<0.01）,进而降低PVN区IL-1β水平（P<0.01）,升高IL-10水平（P<0.01）,降低NE及TH活性,缩小心肌梗死面积（P<0.01）,改善C57BL/6J小鼠心功能。结论 外周注射褪黑素,通过调控PVN区炎性细胞因子水平,抑制交感神经活性,改善心肌I/R损伤所致心功能降低。     

衰老标记蛋白30介导四氢姜黄素抗心肌缺血再灌注损伤的机制研究

目的 探讨衰老标记蛋白30（SMP30）在四氢姜黄素（THC）抗心肌缺血再灌注（MI/R）损伤中的作用。 方法 构建H9c2细胞缺氧/复氧模型和小鼠MI/R模型,利用腺病毒和短发夹RNA（shRNA）,在细胞和动物水平下调心肌的SMP30的表达,通过CCK8细胞活力试剂盒、ANNEXIN V- FITC/PI凋亡试剂盒、乳酸脱氢酶（LDH）活性试剂盒、肌酸激酶同功酶（CK-MB）试剂盒、心脏超声等方法,评价细胞活性和心脏功能。 结果 敲低SMP30水平后,THC对H9c2细胞的保护作用被部分逆转,THC抗H/R诱发的H9c2细胞死亡能力被削弱;SMP30通过Bax/Blc2途径介导THC对H9c2细胞的保护;THC能够显著改善小鼠MI/R后心脏功能,敲低小鼠心脏SMP30水平后,THC的心脏保护作用被部分逆转。 结论 SMP30参与介导THC抗I/R诱发的心肌细胞凋亡。     

Cellular FLICE-inhibitory protein protects against cardiac remodelling after myocardial infarction

Cellular FLICE-inhibitory protein (cFLIP) is a member of the tumour necrosis factor signalling pathway and a regulator of apoptosis, and it has a role in cardiac remodelling following myocardial infarction (MI) that remains largely uncharacterised. This study aimed to determine the function of cFLIP as a potential mediator of post-infarction cardiac remodelling. Our results show diminished cFLIP expression in failing human and murine post-infarction hearts. Genetically engineered cFLIP heterozygous (cFLIP+/-, HET) mice, cardiac-specific cFLIP-overexpressing transgenic (TG) mice and their respective wild-type (WT) and non-transgenic controls were subjected to MI by permanent ligation of their left anterior descending artery. Cardiac structure and function were assessed by echocardiography and pressure-volume loop analysis. Apoptosis, inflammation, angiogenesis, and fibrosis were evaluated in the myocardium. The HET mice showed exacerbated left ventricular (LV) contractile dysfunction, dilatation, and remodelling compared with WT mice 28 days after MI. Impaired LV function in the HET mice was associated with increases in infarct size, hypertrophy, apoptosis, inflammation, and interstitial fibrosis, and reduced capillary density. The TG mice displayed the opposite phenotype after MI. Moreover, adenovirus-mediated overexpression of cFLIP decreased LV dilatation and improved LV function and remodelling in both HET and WT mice. Further analysis of signalling events suggests that cFLIP promotes cardioprotection by interrupting JNK1/2 signalling and augmenting Akt signalling. In conclusion, our results indicate that cFLIP protects against the development of post-infarction cardiac remodelling. Thus, cFLIP gene delivery shows promise as a clinically powerful and novel therapeutic strategy for the treatment of heart failure after MI.     

动态观察胱天蛋白酶募集域蛋白9在心肌梗死后表达的基础研究

目的:探讨心肌梗死后小鼠胱天蛋白酶募集域蛋白9(caspase recruitment domain-containingprotein 9,CARD9)的表达及其与炎症的关系。方法:选择野生型小鼠和CARD9敲除小鼠各26只,分为野生型对照组、野生型心肌梗死组、CARD9敲除对照组和CARD9敲除心肌梗死组共4组,每组13只。心肌梗死模型组是通过结扎冠状动脉前降支复制心肌梗死模型,而对照组仅穿线不结扎。于模型复制后第1天,从每组随机抽取3只小鼠处死并行氯化三苯四氮唑(TTC)染色,观察模型是否复制成功;于第3天和第28天,每组分别随机各抽取3只小鼠,处死后取心肌组织行石蜡切片,苏木素伊红(HE)染色和免疫组化染色观察炎症细胞浸润,免疫组化染色和蛋白定量观察CARD9表达。结果:TTC证实心肌梗死模型复制成功;免疫组化染色和蛋白印迹证实,与野生型对照组比较,野生型心肌梗死组3d及28d时梗死区域CARD9表达均增高(P<0.05)与野生型心肌梗死组比较,3 d时CARD9敲除组心肌梗死组巨噬细胞浸润增加(P<0.05)。结论:心肌梗死后CARD9表达上调,而CARD9敲除炎症细胞浸润增加,提示CARD9参与心肌梗死并对早期炎症可能有一定抑制作用。