电针对海洛因成瘾大鼠学习记忆及海马CREB表达的影响

目的：探讨电针对海洛因成瘾大鼠学习记忆的影响及作用机制。方法130只Wistar大鼠随机分为对照组、海洛因成瘾组（简称成瘾组）和海洛因成瘾后作电针治疗组（简称电针组）。进行跳台实验测试大鼠学习记忆能力,并用免疫组化方法检测鼠脑海马环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（CREB）和磷酸化CREP（P—CREB）的表达。结果：成瘾组大鼠学习记忆下降（P％0．01）,电针组大鼠学习记忆有所改善（P〈0．01）;成瘾组大鼠海马CREB、P—CREB表达较对照组增高（P〈0．05）,电针组更高（P〈0．01）。结论：电针治疗可在一定程度上对抗海洛因成瘾大鼠所致的学习记忆下降,其机制可能与海马内CREB、P—CREB表达变化有关;CREB、PCREB参与学习记忆及海洛因成瘾的形成。     

电针对海洛因成瘾大鼠PAG内细胞凋亡和caspase-3表达的影响

目的:研究电针对海洛因成瘾大鼠中脑导水管周围灰质(periaqueductal gray,PAG)的细胞凋亡及caspase-3表达的影响。方法:大鼠被随机分为四组:正常对照组、海洛因成瘾组(成瘾组)、海洛因戒断组(戒断组)和海洛因戒断针刺组(针刺组)。按给药剂量逐日递增的原则皮下注射海洛因建立成瘾模型;针刺组大鼠成瘾后用韩氏穴位神经刺激器(HNAS)针刺双侧"足三里"和"三阴交"穴位,30min,每日1次,连续5d;免疫组织化学染色法测caspase-3的表达;流式细胞仪测细胞凋亡情况。结果:(1)与正常组相比,成瘾组、戒断组和针刺组大鼠PAG内的细胞凋亡和caspase-3的表达均增多(P0.05);(2)针刺组与成瘾组和戒断组相比,针刺组PAG内的细胞凋亡和caspase-3的表达均减少(P0.05)。结论:(1)海洛因成瘾导致大鼠PAG内细胞凋亡和caspase-3的表达增多;(2)HANS针刺对海洛因成瘾引起的大鼠细胞凋亡有抑制作用,并下调大鼠PAG内caspase-3的表达。     

海洛因成瘾与学习记忆

海洛因成瘾是我国发病最高,危害最大的一种成瘾性疾病,而其中枢机制则是解决临床预防和治疗的关键,至今仍不清楚。既往工作表明,学习记忆功能在海洛因成瘾的中枢机制中居于重要的中心环节。本文在总结既往海洛因成瘾研究工作基础上联系学习记忆功能,试图从系统整合层次分析相关领域研究工作的不足和今后工作的发展方向。     

灵芝多糖对阿尔茨海默病大鼠学习记忆影响及与海马细胞凋亡的关系

目的:观察灵芝多糖(GLP)对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠学习记忆影响并探讨其与海马细胞凋亡的关系。方法:用立体定位技术对海马CA1区微量注射Aβ25~35造成AD模型;Morris水迷宫检测大鼠记忆水平;电子显微镜、流式细胞仪检测海马凋亡。结果:GLP可明显提高Aβ25~35所致痴呆大鼠学习记忆水平,显著降低海马细胞凋亡率。结论:GLP对AD大鼠的保护作用与降低海马细胞凋亡率有关。     

海洛因成瘾大鼠模型的方法建立

目的模仿人类吸毒成瘾的大量临床实例,建立海洛因成瘾大白鼠模型。方法采用递增法人为地给大白鼠皮下注射海洛因造成动物成瘾,动物设对照组和模型组。用纳洛酮促戒断,戒断症状按Maldonado评分法给予评分。结果模型组海洛因成瘾大鼠出现明显的依赖戒断症状,戒断评分值明显高于空白对照组(P<0.01)。结论用递增法皮下注射海洛因建立的海洛因成瘾大鼠模型,可在28天内形成海洛因依赖模型,该模型稳定可靠。     

粒细胞集落刺激因子对血管性痴呆大鼠海马神经细胞凋亡的影响

背景：研究发现,粒细胞集落刺激因子可激活脑内成体神经干细胞,刺激其增殖和分化,还能促进脑内各种神经营养因子分泌,减小脑缺血动物模型的缺血灶,促进慢性脑卒中模型缺失神经功能的长期恢复。 目的：观察粒细胞集落刺激因子对血管性痴呆大鼠海马神经细胞凋亡的作用。 方法：采用永久性双侧颈总动脉结扎法建立大鼠血管性痴呆模型,抽签法随机分为4组：实验组(皮下注射粒细胞集落刺激因子干预治疗)、对照组(注射生理盐水)、假手术组(仅行颈前正中切开,不结扎颈总动脉)。采用Morris水迷宫进行定向航行观察大鼠逃避潜伏期,评价大鼠空间学习记忆能力,TUNEL染色和图像分析大鼠海马神经细胞的凋亡。 结果与结论：对照组和实验组大鼠脑缺血后7 d,大鼠平均逃避潜伏期较假手术组明显延长(P < 0.01),海马组织TUNEL阳性凋亡细胞较假手术组显著增高(P < 0.01),随着时间的延长,14,28 d时大鼠学习记忆功能障碍逐渐加重,相应海马组织TUNEL阳性凋亡细胞逐渐增加。14,28 d时实验组大鼠平均逃避潜伏期比对照组明显缩短,海马组织TUNEL阳性凋亡细胞也较对照组显著减少。说明脑缺血后早期给予外源性粒细胞集落刺激因子有助于减少海马组织神经细胞的凋亡,改善大鼠学习记忆能力。     

银杏叶提取物对1型糖尿病大鼠认知功能及海马神经细胞凋亡的影响

目的： 探讨银杏叶提取物(EGB)对1型糖尿病脑病大鼠海马神经细胞的保护机制。方法: 36只SD雄性大鼠随机分为正常对照组（C组）、糖尿病模型组(DM组)、银杏叶提取物治疗组（EGB组）。用链脲佐菌素（STZ）腹腔注射建立糖尿病动物模型,EGB组腹腔注射银杏叶提取物注射液,其余2组给予同等体积的生理盐水。于12周末通过Morris水迷宫法评价各组大鼠学习记忆能力并测定血清中的血糖和胰岛素浓度;用Image-Pro Plus 6.0图像分析技术检测大鼠海马组织神经细胞密度;Western blotting和免疫组织化学法检测其Bax、Bcl-2和caspase-3蛋白的表达。结果: DM组大鼠血糖浓度(P<0.01)、海马神经细胞中Bax(P<0.01)、caspase-3(P<0.01)蛋白的表达、Bax/ Bcl-2比例 (P<0.01)及Morris水迷宫潜伏期(P<0.01)均高于C组,而胰岛素水平(P<0.01)、海马CA1和CA2区域的神经细胞密度(P<0.05) 及Morris水迷宫搜索策略能力(P<0.01)均低于C组。EGB干预治疗后大鼠胰岛素水平(P<0.05)、海马CA1和CA2区域的神经细胞密度(P<0.05) 及Morris水迷宫搜索策略能力(P<0.01)均高于DM组,而血糖浓度(P<0.01)、海马组织中Bax(P<0.05)、caspase-3(P<0.05)蛋白的表达、Bax/ Bcl-2比例 (P<0.01) 及Morris水迷宫潜伏期(P<0.05)均低于DM组。各实验组大鼠Bcl-2蛋白的表达没有明显变化。结论: 银杏叶提取物提高糖尿病大鼠的空间学习记忆能力,可能通过减少Bax、caspase-3蛋白表达、降低Bax/ Bcl-2比例,从而减少神经细胞的凋亡,提高神经细胞密度而发挥作用。提示通过有效调节神经元凋亡相关基因是EGB治疗糖尿病脑病的的重要作用机制之一。     

神经细胞凋亡调控的研究进展

细胞凋亡是机体正常发育过程中普遍存在的生命现象，神经系统的发育也不例外。细胞凋亡与细胞增殖同等重要，二者的动态平衡保证了神经系统的正常发育。近年来研究发现，细胞凋亡受到细胞内多种基因以及细胞外因素的调控。本文就细胞凋亡的生物学特征、基因调控及其与细胞周期的关系等几方面进行了综述     

D-半乳糖脑老化模型小鼠海马神经细胞凋亡的研究

D-半乳糖脑老化小鼠(D-galactose induced aging of murine brain, DGAM)模型表现有空间学习和记忆功能的障碍, 海马神经细胞神经营养因子表达下降, 细胞退行变等现象[1-3].本研究采用流式细胞技术观察了DGAM海马神经细胞是否有凋亡发生, 以便为进一步阐明脑老化的发生机制提供理论依据.     

远志对糖尿病大鼠海马神经细胞凋亡相关蛋白表达的影响

目的:探讨远志对糖尿病(DM)大鼠海马神经细胞的影响.方法:大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组、远志治疗组和远志预防组.除正常对照组外均建立链脲佐菌素致糖尿病模型.远志预防组大鼠在建模同时给予远志灌胃6周;此后给予远志治疗组大鼠远志灌胃6周.采用尼氏染色法观察大鼠海马CA1区神经细胞形态并计数神经细胞数量;采用免疫印迹检测大鼠海马组织Bcl-2和Bax的表达.结果:与正常对照组比较,糖尿病模型组大鼠海马CA1区神经细胞形态异常,数量减少,Bcl-2表达降低,Bax表达升高;与糖尿病模型组比较,远志治疗组与远志预防组大鼠海马CA1区生存神经细胞数量增多,Bcl-2表达升高,Bax表达降低.结论:远志可通过上调糖尿病大鼠海马Bcl-2的表达,并减少Bax的表达,抑制海马神经细胞凋亡,促进其存活,从而发挥对糖尿病大鼠海马损伤的预防保护作用.     

T细胞Trail受体表达及Trail诱导的T细胞凋亡

目的 :观察人T细胞Trail(TNF relatedapoptosis inducingligand)受体表达及Trail诱导T细胞凋亡的作用。方法 :通过荧光双标记 ,使用流式细胞仪检测Trail受体阳性细胞和凋亡细胞。结果 :静息Jurkat细胞表达高水平Trail受体〔(49 19±12 2 5 ) %〕 ,激活Jurkat细胞对Trail受体表达无影响。Trail诱导显著的Jurkat细胞凋亡〔(90 0 1± 2 6 71) %〕。正常人外周血淋巴细胞 (PBL)仅激活后表达Trail受体〔(2 5 2 7± 6 42 ) %〕 ,但无细胞凋亡发生。结论 :人T细胞表达Trail受体 ,Trail受体和Trail的相互作用对细胞凋亡有调控作用。     

成年SD鼠骨髓基质干细胞向神经元样细胞分化过程中分化与凋亡关系的研究

目的: 探讨体外诱导骨髓基质干细胞向神经元样细胞分化过程中分化和凋亡间的关系,为进一步延长神经元样细胞的存活提供理论和实验依据。方法: 采用全骨髓法分离培养成年SD鼠骨髓基质干细胞至第5代,以β-巯基乙醇(1mmol/L)及维甲酸(RA,10^-6mol/L)诱导分化,于诱导后1h、3h、5h分别行神经元特异性抗原MAP-2免疫组化鉴定,并计数神经元样细胞数,计算分化率。核荧光染料DAPI检测诱导后5h和24h细胞核的凋亡特异性形态学改变,流式细胞仪对细胞凋亡峰的分析检测诱导后1h、3h、5h细胞凋亡率。结果: 成年鼠骨髓基质干细胞经β-巯基乙醇(1mmol/L)及维甲酸(RA,10^-6mol/L)诱导30min后可见神经元样细胞出现,经MAP-2免疫组化鉴定,此类细胞呈阳性,诱导后1h、3h、5h神经元样细胞分化率分别为41%、44%、73%和24%、37%、61%。但诱导后5h见细胞漂浮并死亡,此时DAPI染色显示部分细胞核浓缩,出现核碎片。流式细胞仪检测经β-巯基乙醇诱导后1h、3h、5h细胞的凋亡率分别为1.5%、6.1%、21.5%,经RA诱导后的凋亡率分别为1.5%、1.7%、12.3%。结论: ①¹β-巯基乙醇及RA诱导骨髓基质干细胞分化成为神经元样细胞的能力不同。②骨髓基质干细胞在向神经元样细胞分化的过程中同时发生凋亡,分化率和凋亡率间呈正相关。     

杂色曲霉素对小鼠肾脏细胞凋亡与增殖的影响

目的：探讨杂色曲霉素（ST）对小鼠肾脏细胞凋亡与增殖的影响。方法：采用动物实验和流式细胞光度方法定量检测灌喂不同剂量的ST对小鼠肾脏细胞凋亡与增殖的影响。结果：经口灌喂不同剂量的ST（3 μg/kg、30 μg/kg、300 μg/kg、3 000 μg/kg）后12 h，ST处理组小鼠肾脏细胞的凋亡率均明显高于对照组（P<0.01）。在3-3 000 μg/kg剂量范围内，ST剂量与凋亡率之间呈明显的量效正相关（r=0.573, P<0.01）。同时,灌喂剂量为3 000 μg/kg的ST后6-48 h，随着ST处理时间的延长，,肾脏细胞的凋亡率也明显增高，ST处理时间与凋亡率之间呈明显的时效正相关（r=0.830, P<0.01）。但不同剂量的ST和ST处理后不同时间对小鼠肾脏细胞的增殖指数均无明显影响。结论：经口给予ST可诱导、促进小鼠肾脏细胞的凋亡而对其增殖指数无明显影响。     

miR-21在周围神经损伤时调控雪旺细胞凋亡

目的:探讨周围神经损伤时,微小RNA-21(microRNA-21,miR-21)与雪旺细胞(SC)凋亡的关系及相关分子机制。方法:采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测动物模型中miR-21以及人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome 10,PTEN)的表达情况;通过将miR-21类似物(miR-21-mimic)、miR-21抑制物(miR-21-inhibitor)和阴性对照miRNA(negative control miRNA,NC-miRNA)转染入RSC96细胞中,构建出过表达miR-21的雪旺细胞株(MI-SC)、抑制miR-21表达的雪旺细胞株(IN-SC)及表达对照miRNA的雪旺细胞株(NC-SC);采用流式细胞仪检测3组细胞的凋亡情况;real-time PCR检测3组细胞中miR-21以及PTEN的表达情况;Western blot检测3组细胞中PTEN及凋亡相关蛋白激活型caspase-3(cleaved caspase-3)的表达情况。结果:神经损伤组miR-21的表达量与对照组相比明显升高,神经损伤组PTEN mRNA的表达水平与对照组相比明显降低;与NC-SC相比,上调miR-21组细胞的凋亡比例减少,PTEN mRNA及蛋白的表达水平降低,cleaved caspase-3的表达水平降低,下调miR-21组细胞的凋亡比例增加,PTEN mRNA及蛋白的表达水平升高,cleaved caspase-3的表达水平升高(P0.05)。结论:miR-21可能通过下调PTEN的表达抑制雪旺细胞的凋亡,从而可能在周围神经的损伤修复中发挥作用。     

脱氢表雄酮对狼疮性BXSB小鼠脾脏淋巴细胞凋亡的影响

目的 研究脱氢表雄酮(DHEA)对BXSB狼疮性小鼠脾脏淋巴细胞凋亡的影响,并探讨其作用机理.方法 运用流式细胞术、免疫双荧光染色法检测脾脏淋巴细胞凋亡.结果 当DHEA的浓度为10-8mol/L时,淋巴细胞凋亡率降低,与对照组比较有差异有统计学意义(P＜0.05),细胞坏死率差异无统计学意义(P＞0.05);DHEA与西药组或中药组联合应用对淋巴细胞凋亡抑制作用更加显著,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 脱氢表雄酮可明显抑制BXSB小鼠脾脏淋巴细胞凋亡率.     

尼古丁对大鼠血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨尼古丁对大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖和凋亡的影响.方法用终浓度为100 μmol/L的尼古丁作用于体外培养的大鼠VSMCs 24h,不加尼古丁的细胞作为对照组,应用荧光显微镜和扫描电子显微镜观察各组细胞凋亡的形态,BrdU-ELISA和流式细胞术检测各组细胞增殖和凋亡率,进而确定尼古丁对VSM...     

自体预变性腓总神经调节大鼠受损视神经的细胞凋亡和增殖及其基因表达

目的 研究预变性自体腓总神经对受损大鼠视神经细胞凋亡和增殖的作用。 方法 115只成年雄性大鼠分为正常组、损伤组、移植组，分别用HE染色、流式细胞仪、免疫印迹、基因芯片、荧光定量PCR检测视神经细胞数量、增殖和凋亡；增殖性细胞核抗原（PCNA）表达；增殖、凋亡相关基因表达谱的变化。 结果 损伤组视神经细胞较正常组增加，移植组较损伤组增加。损伤组与正常组相比，凋亡细胞明显增加，增殖细胞明显减少；移植组与损伤组相比，凋亡细胞减少，增殖细胞增加。与正常组相比，损伤组PCNA表达下调，移植组较损伤组明显上调。损伤组与正常组相比，差异表达的细胞凋亡和增殖相关基因37条；移植组与损伤组相比，差异表达的相应基因3条。 结论 视神经损伤致远侧段细胞凋亡，增殖减弱，移植自体预变性腓总神经能减轻细胞凋亡、促进细胞增殖，并伴相应的基因表达变化。     

天花粉蛋白诱导人类白血病细胞株HL-60细胞凋亡的研究

目的:研究单链核糖体失活蛋白天花粉蛋白(TCS)诱导人类白血病细胞株HL-60细胞发生凋亡的作用及放线菌酮(CHX)对此作用的影响。方法:采用流式细胞术分析及荧光显微镜观察研究TCS诱导HL-60细胞发生凋亡的情况。结果:流式细胞术分析表明TCS能够诱导HL-60细胞发生明显的凋亡现象,TCS(20mg/L)处理48h细胞凋亡百分率为48.7%±2.3%(x±s),明显高于对照组的凋亡率(6.3%±1.0%)(P＜0.05),而CHX(5mg/L)相同条件下诱导的凋亡率为65.3%±3.9%。TCS诱导的凋亡现象进一步为荧光显微镜的观察及DNA凝胶电泳所证实,TCS处理的细胞中有许多细胞呈现典型的凋亡细胞核形态改变,如染色体凝缩、核碎裂等;DNA凝胶电泳显示TCS处理的细胞呈典型的梯级格局。进一步研究表明预先以低浓度CHX(0.2mg/L)处理可显著加强TCS的作用,而在这个浓度下单独CHX并不诱导明显的细胞凋亡。TCS诱导HL-60细胞的凋亡呈时间和剂量依赖关系。结论:TCS能够诱导HL-60细胞发生明显的凋亡,CHX可加强这种作用。这些结果提示TCS诱导的凋亡不依赖于新的蛋白质合成。     

Effects of acrylonitrile on apoptosis of rat cerebral nerve cells

The brain, especially the hippocampus, is sensitive to damage caused by anoxic chemicals. In this study, we established a rat model of acrylonitrile poisoning with administration by gavage, aiming to determine the influence of acrylonitrile on rat cerebral nerve cells. Transmission electron microscopy observation and TdT-mediated dUTP nick-end labelling (TUNEL) staining were used to explore preliminarily the apoptotic changes of cerebral nerve cells. The pathogenesis revealed by transmission electron microscopy indicated that apoptosis in the control group was more serious than that of the exposure groups. The results of TUNEL staining showed the apoptotic rate was significantly higher in the control group than that of other exposure groups. All the results indicated that acrylonitrile can inhibit the apoptosis of rat cerebral nerve cells, which is closely related to its animal carcinogenicity.