带状疱疹患儿外周血单个核细胞Toll样受体4、9mRNA的表达及意义

目的探讨带状疱疹患儿外周血单个核细胞Toll样受体4、9mRNA的表达及意义。方法选择2010年3月～2012年1月期间,我院儿科门诊收治带状疱疹患儿19例作为研究组,另选同期在我院进行体检的健康儿童20例作为对照组。采用RT-PCR法比较分析两组外周血单个细胞中TLR4和TLR9 mRNA的阳性率及表达水平。结果健康对照组儿童PBMC中TLR4和TLR9 mRNA的表达率均为100%。而带状疱疹患儿PBMC中TLR4 mRNA的表达率为84.21%,TLR9 mRNA的表达率为89.47%。另外,与正常组健康儿童相比,研究带状疱疹患儿PBMC中TLR4和TLR9 mRNA的水平均明显升高,差异亦具有统计学意义（P〈0.05）。结论 Toll样受体有效参与了带状疱疹患儿的免疫反应,并具有重要的临床意义。Toll样受体如同天然免疫的眼睛,对于儿童带状疱疹的疾病相关分子模式发挥着监视与识别的积极作用,是自身机体抵抗疾病的第一道屏障。     

尖锐湿疣患者外周血单个核细胞TLR2、4mRNA表达的研究

目的研究尖锐湿疣患者外周血单个核细胞Toll样受体2（TLR2）mRNA、TLR4mRNA的表达情况。方法运用SYBERGreenI实时定量PCR方法检测尖锐湿疣患者29例外周血单个核细胞TLR2、TLR4的mRNA表达水平,并与30例正常人作对照。结果与正常人相比,尖锐湿疣患者外周血单个核细胞TLR2mRNA的表达水平变化不明显（P〉0．05）,TLR4mRNA的表达水平有所降低,但差别无统计学意义（P〉0．05）。结论尖锐湿疣患者外周血单个核细胞中TLR2、TLR4的表达并未升高,甚至略有所降低,可能与CA患者免疫功能受到抑制有关。     

特应性皮炎患者外周血中HSP60、TLR4、NF-κBp65的表达

目的 研究热休克蛋白60(HSP60)、Toll样受体4(TLR4)、核因子κBp65(NF-κBp65)在特应性皮炎(AD)患者外周血中的表达水平及其与疾病发病的关系.方法 分别应用逆转录PCR法、免疫细胞化学法及酶联免疫吸附试验法检测17例AD患者外周血单个核细胞中TLR4 mRNA、NF-κBp65及血清中HSP60的水平,15例正常人作对照.结果 与正常人对照组相比,TLR4 mRNA、HSP60 及NF-κBp65在AD患者外周血中过度表达,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 HSP60、TLR4、NF-κBp65 在AD患者外周血中的表达水平均升高,其表达上调可能与AD发病有关.     

带状疱疹患儿外周血单个核细胞Toll样受体2.9mRNA的表达

目的 通过检测带状疱疹患儿外周血单个核细胞(PBMCs)Toll样受体2.9(TLR2.9)mRNA的表达变化,探讨TLR2和 TLR9在儿童带状疱疹发病中的作用.方法 采用实时定量PCR方法检测带状疱疹患儿、成人各10例PBMCs上TLR2、9mRNA的表达水平,并与10例正常儿童作对照.结果 ①带状疱疹患儿PBMC上TLR2.9mRNA表达水平明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);②带状疱疹患儿PBMC上TLR2mRNA表达水平高于成人患者,差异有统计学意义(P＜0.05);带状疱疹患儿PBMC上TLR9mRNA表达水平与成人患者差异无统计学意义(P＞0.05).结论 TLR2.9mRNA可能参与了患儿机体对水痘-带状疱疹病毒的的识别及抗病毒免疫,带状疱疹患儿TLR2mRNA的表达水平高于成人,可能是儿童带状疱疹发病低于成人的原因之一.     

早期显性梅毒患者外周血单个核细胞Toll样受体2mRNA表达的研究

目的研究早期显性梅毒患者外周血单个核细胞（PBMCs）Toll样受体2（TLR2）mRNA的表达情况,探讨其在梅毒发病机制中的作用。方法采用实时定量PCR方法检测30例显性梅毒患者外周血PBMCs中TLR2mRNA的表达水平,并与20例正常人作对照。结果早期显性梅毒患者外周血PBMCs中qZR2mRNA的表达水平升高,与正常对照组比较,差异有统计学意义（P〈0．001）;早期显性梅毒患者外周血PBMCs中IZR2mRNA的表达水平与血清RPR滴度不存在相关关系（P〉0．05）。结论TLR2可能参与了免疫细胞对梅毒螺旋体的识别和信号转导,TLR2的表达水平升高提示梅毒患者可能存在细胞免疫功能失调和细胞免疫功能抑制。     

龙胆泻肝配方颗粒对生殖器疱疹患者外周血白细胞Toll样受体表达的影响

目的 探讨龙胆泻肝配方颗粒对生殖器疱疹患者外周血白细胞Toll样受体(TLRs)的作用,进一步研究其抗病毒感染免疫反应的机制.方法 采用荧光定量RT-PCR的方法 检测了50例湿热型生殖器疱疹患者龙胆泻肝配方颗粒治疗前后外周血白细胞TLR1～TLR9mRNA的表达情况,并以10例正常人作为对照.结果 治疗前患者外周血TLR1～TLR9mRNA的表达水平与健康对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).其中TLR2、TLR3、TLR5较正常值高,TLR1、TLR4、TLR6、TLR7、TLR8、TLR9较正常值低.治疗后,患者血清TLR1～TLR9mRNA的表达水平均较治疗前倾向于正常.结论 龙胆泻肝配方颗粒能调节生殖器疱疹患者外周血Toll样受体的表达水平,在启动抗病毒的固有免疫反应中起着重要作用.     

葡萄膜炎患者外周血单个核细胞TLR9、TLR7 mRNA的表达及意义

目的 观察葡萄膜炎患者外周血单个核细胞(PBMCs)Toll样受体9(TLR9)、Toll样受体7(TLR7)mRNA的表达.方法 收集42例葡萄膜炎患者(其中发病与感染相关者12例,与感染无关者30例)和正常对照组(30例)外周血,采用淋巴细胞分离液密度梯度离心法分离PBMCs,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测PBMCs TLR9、TLR7 mRNA表达的相对含量.结果 与感染相关葡萄膜炎患者PBMCs TLR9、TLR7 mRNA相对含量显著高于与感染无关葡萄膜炎患者和正常对照组(P<0.01),与感染无关葡萄膜炎患者与正常对照组比较TLR9、TLR7 mRNA相对含量差异无统计学意义(P>0.05).结论 TLR9、TLR97的表达在与感染相关葡萄膜炎患者中显著升高,提示感染因素在葡萄膜炎中的作用可能通过TLR9、TLR7介导.     

寻常性银屑病患者外周血单个核细胞TLR4mRNA表达与TNF—α相关性

目的探讨寻常性银屑病患者外周血单个核细胞（PBMC）Toll样受体4（Toll-like receptor4,TLR4）的表达变化及其与血清中TNF—Q浓度的关系。方法采用荧光定量PCR技术检测寻常性银屑病患者外周血单个核细胞TLR4mRNA的表达,并采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清TNF—α的浓度。另取30例正常人作为对照组。结果寻常性银屑病患者外周血中PBMC的TLR4mRNA的表达较正常人对照组明显增高（P〈0．01）,TLRdmRNA表达与血清TNF-α浓度变化呈正相关（P〈0．05）。结论通过单核吞噬系统TLR4介导的,TNF-α大量产生,激活炎症级联反应可能是银屑病发病的重要病理机制之一。     

溃疡性结肠炎患者外周血单个核细胞TLR4的表达及其与TNF-α和IL-6的相关性

目的 分析溃疡性结肠炎患者外周血单个核细胞Toll样受体4(TLR4)的表达及其与血清TNF-α和IL-6浓度的相关性,初步探讨TLR4在溃疡性结肠炎发病中的作用.方法 采用实时荧光定量PCR方法检测60例溃疡性结肠炎患者外周血单个核细胞内TLR4 mRNA的水平,并采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清T...     

Toll样受体在早发型重度子痫前期 患者外周血和胎盘组织中的表达及临床意义

目的 探讨子痫前期患者外周血及胎盘组织中Toll样受体4(TLR4)的表达及其临床意义.方法 选取2015年3月至2016年3月深圳市龙华人民医院产一科收治的早发型重度子痫前期患者47例为观察组,以及同期入院体检健康的正常孕妇47例为对照组.采用RT-PCR检测患者外周血单个核细胞TLR4 mRNA表达,采用免疫组织化学法检测患者胎盘组织TLR4蛋白的表达.结果 观察组和对照组外周血单个核细胞TLR4 mRNA的相对表达量分别为(0.69±0.14)和(0.27±0.05),观察组明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组胎盘组织TLR4蛋白表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 早发型重度子痫前期患者血清和胎盘组织中TLR4的水平明显升高,提示TLR4可能参与了早发型重度子痫前期的发病.     

TLR4在脓毒症中对调节性T细胞功能活性的影响

目的:探讨脓毒症中TLR4 （TLR4）对调节性T细胞功能及活性的影响,并探讨其作用机制。方法:SPF级C57/BL6雄性小鼠（wild type,WT）40只,C57BL/10ScNJNJU（TLR4-/-）小鼠40只,随机均分为4组,WTSham组,WTCLP组,TLR4-/-Sham组和TLR4-/-CLP。CLP组用盲肠结扎穿孔法制备脓毒症模型。造模后24 h,FCM检测脾脏CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞数量、凋亡率及Foxp3和TLR4表达情况, RT-PCR检测Foxp3+mRNA和TLR4mRNA的表达,Western Blot检测Treg细胞内NF-κB、p-NF-κB蛋白表达情况。结果:（1） TLR4-/-CLP组Treg细胞凋亡率较WTCLP组明显增多,而细胞数量显著降低（P<0.05）。（2）WT CLP组Treg中Foxp3mRNA及蛋白表达、TLR4mRNA及蛋白水平显著升高（P<0.05）,而在TLR4-/-CLP组中该表达较WT CLP组均显著降低（P<0.05）。（3） WT CLP组Treg细胞NF-κB、p-NF-κB的表达水平明显升高（P<0.05）,而TLR4-/-CLP组较WT CLP组明显降低（P<0.05）。结论:在脓毒症中TLR4可显著影响Treg的功能及其活性,这可能通过TLR4/NF-κB信号通路介导有关。     

高龄肺炎患者中性粒细胞TLR4表达与临床意义

目的观察高龄肺炎患者中性粒细胞TLR4（ Toll like receptors 4, TLR4 ）表达情况。方法以高龄肺炎患者（肺炎组，n=49）和健康对照者（对照组，n=21）作为研究对象。采用分离外周静脉血中性粒细胞，提取中性粒细胞的mRNA，实时定量．PCR检测TLR4 mRNA表达，比较两组TLR4mRNA相对表达量。分析肺炎PSI评分（pneumonia severity index, PSI）与TLR4mRNA相对表达量相关性。结果高龄肺炎组中性粒细胞TLR4 mRNA相对表达量较对照组中性粒细胞TLR4 mRNA相对表达量高（P〈0．05），两组间中性粒细胞TLR4mRNA相对表达量比较差异有统计学意义；肺炎PSI评分与中性粒细胞TLR4 mRNA相对表达量成正相关（r=0．495，P=0．001）。结论中性粒细胞TLR4信号传导通路可能在高龄肺炎发生发展中起一定作用，为高龄肺炎的免疫治疗奠定了基础。     

急性冠脉综合征外周血单核细胞Toll样受体4、锌指蛋白A20与组织因子的表达及意义

目的：观察急性冠脉综合征（acule coronary syndrome,ACS）患者外周血单核细胞Toll样受体4（Toll—like receptor 4,TLR4）、锌指蛋白A20（zinc finger protein A20,A20）的表达与血浆组织因子、组织因子途径抑制物（tissue factor passway inhibitor,TFPI）水平的变化。方法：选择ACS患者31例和稳定型心绞痛（stable angina pectoris,SAP）患者21例为研究对象。ACS组包括急性心肌梗死（acute myocardial infarction,AMI）15例和不稳定型心绞痛（unstable angina pectoris,UAP）16例;对照组共入选20例,均为同期住院的非心血管疾病患者。根据病变血管数目将全部冠心病患者进一步分为3组：单支病变组17例;双支病变组15例;多支病变组20例。采用荧光定量PCR检测72例入选对象外周血单核细胞TLR4mRNA、锌指蛋白A20mRNA的表达;采用ELISA法测定血浆组织因子、TFPI质量浓度。结果：①ACS组患者外周血单核细胞TLR4 mRNA及A20mRNA的表达明显高于对照组和SAP组（P〈0．001）,而后两组间的差异无统计学意义（P〉0．05）。多支病变组TLR4、A20mRNA表达均明显高于单支病变组（P=0．006,P=0．000）。②ACS组血浆组织因子、TFPI水平明显高于SAP和正常对照组（P均〈0．01）;多支病变组血清组织因子含量高于单支病变组（P=0．017）。ACS外周血单核细胞TLR4mRNA表达与A20mRNA的表达呈正相关（r=0．640,P=0．002）,与血浆组织因子浓度亦呈正相关（r=0．716,P=0．000）。结论：冠心病患者冠状动脉病变程度和粥样硬化斑块稳定性与外周血单核细胞TLR4表达水平有关;TLR4炎症信号通路激活可能参与ACS冠脉粥样斑块破裂、促进凝血异常及血栓形成。     

铜绿假单胞菌肺部感染对小鼠 Toll 样受体 2、4 的影响

目的探讨Toll样受体（TLR）2、4mRNA在铜绿假单胞菌慢性感染小鼠肺内的动态改变及其作用。方法56只雄性Balb／c小鼠随机气道接种含有铜绿假单胞菌（PA）琼脂糖珠（感染组,34只）和无菌琼脂糖珠（对照组,22只）。于第1、3、5、7、10天处死小鼠,取肺组织细菌培养,行肺组织病理观察,ELISA法检测肺泡灌洗液（BALF）中自介素（IL）-6和IL-17的含量,采用Real—timePCR检测TLR2mRNA及TLR4mRNA表达。结果感染组在接种后第3天IL-6和IL-17水平均达高峰,分别为（154．83±12．51）ng／L和（601．05±25．53）ng／L,均显著高于对照组（40．05±2．98）ng／L和（213．75±9．25）ng／L,差异有统计学意义（P〈0．05）,且两者在接种后第10天仍处于高水平。感染组中TLR4mRNA的相对表达量第7天达高峰（4．09±0．25）,与对照组第7天（0．97±0．05）比较,差异有统计学意义（P〈0．05）;而TLR2mRNA在感染组和对照组各时间相比变化均不明显（P〉0．05）。结论TLR4与小鼠肺部慢性感染PA的发生发展密切相关,其机制可能与TLR4在肺的免疫损伤中起到重要作用有关。     

TLR2在类风湿性关节炎中的表达及意义

目的探讨TLR2在类风湿性关节炎（RA）发病中的作用。方法选取活动期RA患者29例,非活动期RA患者20例及健康对照组18例。采用流式细胞术（FCM）检测RA患者外周血单核细胞表面TLR2表达率及蛋白相对含量,结合RA常规临床检测指标,对各组进行对比研究。结果①活动期RA患者CD14＋单核细胞上TLR2表达率及蛋白相对含量均显著高于非活动期和健康对照组（P〈0．05）,而非活动期RA患者CD14＋单核细胞TLR2表达率及蛋白相对含量与健康对照相比差异无统计学意义;②外周血CD14＋单核细胞上TLR2蛋白相对含量与ESR、血清CRP呈正相关（P〈0．05）,与RF无明显相关。结论活动期RA患者TLR2高表达,且其表达与疾病活动指标相关。TLRs信号通路可能参与了RA的病理过程,促进了外周血单核细胞的活化,进而引起炎症介质的释放。     

溃疡性结肠炎患者中TLR9和STAT3的表达及其与IL-10的相关性研究

  目的  检测Toll样受体9(TLR9)、信号转导与转录活化因子3(STAT3)及白介素10(IL-10)在溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)患者外周血及肠黏膜组织中的表达水平, 探讨它们在UC发病中的作用及其相互关系。  方法  选取2019年7月—2020年7月在蚌埠医学院第一附属医院诊治的32例UC患者归为实验组,30例健康体检者纳入正常对照组,其中实验组又分为轻度(10例)、中度(14例)及重度组(8例)。检测外周血单个核细胞中TLR9 mRNA和STAT3 mRNA的表达和血清IL-10水平及肠黏膜组织中TLR9、STAT3及IL-10蛋白表达水平。  结果  实验组UC患者TLR9 mRNA和STAT3 mRNA的表达水平均高于正常对照组(均P < 0.05);血清中IL-10的表达水平明显低于正常对照组(P < 0.05)。肠黏膜组织中TLR9、STAT3的蛋白表达水平均高于正常对照组(均P < 0.05),IL-10蛋白表达水平低于正常对照组(P < 0.05)。TLR9 mRNA和STAT3 mRNA、TLR9和STAT3蛋白表达水平之间均呈正相关,血清IL-10与TLR9 mRNA、STAT3 mRNA表达水平呈负相关,肠黏膜组织IL-10与TLR9、STAT3蛋白表达水平呈负相关。  结论  TLR9、STAT3、IL-10共同参与了UC的发生和发展,在UC的发病机制中TLR9和STAT3可能参与了IL-10的表达与调控。      

TLR4在肝癌患者外周血单核细胞中的表达及意义

目的 研究肝癌患者外周血单核细胞TLR4的表达情况及意义.方法 采用流式细胞术检测50例肝癌患者和30例健康正常人外周血单核细胞表面TLR4的表达,采用ELISA法检测肝癌组及对照组血浆NF-κB、IL-6的表达.结果 肝癌患者外周血TLR4、NF-κB、IL-6表达明显高于正常对照组（P＜0.01）;肝癌患者TLR4的表达与NF-κB呈正相关（r=0.352,P＜0.05）;结论 肝癌患者外周血TLR4表达较正常人明显增高,TLR4可能与原发性肝癌的发生密切相关.     

过表达TLR4基因对胃癌细胞自噬的抑制作用及其机制

目的 采用慢病毒过表达胃癌细胞中Toll样受体4（TLR4）基因,探讨其对胃癌细胞自噬的作用,并阐明其作用机制。 方法 处于对数生长期的胃癌BGC-823细胞和SGC-7901细胞分为未感染组、阴性对照病毒组和基因过表达组,分别给予无慢病毒感染、空载体慢病毒和过表达TLR4慢病毒稳定感染。采用Western blotting法检测正常胃黏膜上皮GES-1细胞及胃癌BGC-823细胞、SGC-7901细胞、HGC-27细胞和MGC-803细胞中TLR4蛋白表达水平。采用CCK-8法检测各组细胞增殖活性,实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法分别检测各组细胞中TLR4、Beclin1和微管相关蛋白轻链3（LC3）mRNA表达水平,Western blotting法检测各组细胞中磷脂酰肌醇-3激酶／蛋白激酶B（PI3K／Akt）、磷酸化PI3K／磷酸化Akt（p-PI3K／p-Akt）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）和磷酸化mTOR（p-mTOR）信号通路相关蛋白及细胞自噬相关蛋白（LC3、Beclin1和p62）蛋白表达水平。 结果 BGC-823细胞、HGC-27细胞和MGC-803细胞中TLR4蛋白表达水平高于胃黏膜上皮GES-1细胞。与未感染组和阴性对照病毒组比较,过表达TLR4组BGC-823细胞和SGC-7901细胞中TLR4蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。与未感染组和阴性对照病毒组比较,过表达TLR4组BGC-823细胞和SGC-7901细胞增殖活性明显升高（P<0.05或P<0.01）。与阴性对照病毒组比较,过表达TLR4组BGC-823细胞和SGC-7901细胞中TLR4 mRNA表达水平明显升高（P<0.01）,BGC-823细胞中Beclin1 mRNA表达水平降低（P<0.05）,SGC-7901细胞中LC3和Beclin1 mRNA表达水平降低（P<0.05）。与未感染组和阴性对照病毒组比较,过表达TLR4组BGC-823细胞和SGC-7901细胞中LC3和Beclin1蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,p62、p-PI3K、p-Akt和p-mTOR蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。 结论 过表达TLR4基因可以通过调控PI3K/Akt/mTOR信号通路明显抑制胃癌细胞的自噬活性。     

血必净对急性弥漫性腹膜炎患者Toll样受体及炎性介质表达的影响

目的观察血必净干预下急性弥漫性腹膜炎合并全身炎症反应综合征（SIRS）患者外周血单个核细胞（PBMC） Toll样受体TLR2mRNA和TLR4 mRNA及下游炎症介质TNF—d和IL-6的表达,探讨血必净对SIRS的疗效机制。方法将62例符合纳入标准的患者分为SIRS组（33例）与非SIRS组（29例）,另外设立健康平行对照组30例。RT—PCR法检测治疗前后PBMC中TLR2 mRNA和TLR4 mRNA表达变化,及ELISA检测治疗前及治疗的第1、3、5、7天血清炎症介质TNF．仪和IL-6的变化,经t检验比较各组问的差异性。结果33例SIRS患者经血必净干预后PBMC中TLR2mRNA（0．51±0．14）和TLR4mRNA（0．62±0．23）及血清TNF-α（36．89±12．23）、IL-6（40．27±30．31）表达均显著下降,且SIRS组降低较非SIRS组差异有统计学意义（P〈0．05）。结论急性弥漫性腹膜炎SIRS组TLR2mRNA和TLR4mRNA及血清TNF-α、IL-6表达均显著下降且症状减轻,提示血必净在阻断炎症发生发展过程中可能发挥一定的作用。