样品制备与扩增条件对寡核苷酸芯片杂交结果的影响

目的 以HLA-A小阵列检测芯片为平台，确定HLA-A寡核苷酸芯片检测中最优化实验条件。方法 观察了样品制备方法(传统酚-氯仿法、白细胞裂解液法、Fe2O3纳米磁珠)、不对称PCR制备ssDNA的参数、PCR产物纯化方法对杂交结果的影响。结果 3种不同的基因组提取方法均获得良好的特异性PCR扩增结果，纳米磁珠应用于样品提取和PCR扩增获得成功，实验条件需进一步完善；在不对称PCR最佳实验条件为反向引物与正向引物浓度比25：1，正向引物浓度为0．04μmol／L，PCR灵敏度可达ng(纳克)模板DNA，Qiagen纯化试剂盒效果略强于其它两种，但差异无显著性。结论 本研究初步探讨HLA-A生物芯片样品制备条件，并取得理想结果，为寡核苷酸生物芯片的实际操作提供一定的参考和指导。     

脂肪组织扫描电镜样品制备方法

脂肪组织由于自身脂类含量丰富,采用常规扫描电镜生物样品制备法,很难达到预期效果。经过数次摸索,作者在常规制备样品基础上,增加了锇酸后固定,以使脂肪酸和磷脂蛋白得到稳定,即而稳定细胞膜结构;为使组织细胞内有机溶剂充分置换,又延长脱水时间。通过对这些具体操作细节进行改良,取得了较为满意的结果。     

脂肪组织扫描电镜样品制备方法

摘要：脂肪组织由于自身脂类含量丰富,采用常规扫描电镜生物样品制备法,很难达到预期效果。经过数次摸索,作者在常规制
备样品基础上,增加了锇酸后固定,以使脂肪酸和磷脂蛋白得到稳定,即而稳定细胞膜结构;为使组织细胞内有机溶剂充分置
换,又延长脱水时间。通过对这些具体操作细节进行改良,取得了较为满意的结果。
     

骨髓活检电镜样品制备方法

0　引言　用电镜观察骨髓活检标本是临床上诊断造血系统恶性疾病的重要手段之一 .为了获得准确而可靠的结果 ,既要求达到良好的固定 ,保存细胞原有的微细结构 ,又要求骨组织能迅速完全脱钙 ,便于切片 .为此我们摸索出一种较好的方法介绍如下 .1　材料和方法1.1　材料　收集西京医院 1997/ 1998送检我室的骨髓环钻活检标本 5例 ,其中白血病 3例 ,再障 2例 .固定脱钙液的配制 :首先量取多聚甲醛 2 g,双蒸水 2 5 m L ,加热溶解 ,待冷却后缓慢加入 10 0 mmol· L- 1 Na OH1～ 2滴至澄清 ,然后加入2 5 0 g· L- 1戊二醛 10 m L,2 0 mmol·L- …     

扫描电镜医学生物学样品制备方法

本文介绍了扫描电子显微镜样品制备的方法。     

红细胞扫描电镜样品制备方法探讨

红细胞形态改变对各种血液病的诊断是很重要的,特别是应用扫描电镜观察红细胞形态的变化,对疾病的诊断治疗和预后的推测有一定指导意义。自扫描电镜问世以来,关于血液标本的制作方法已有报导。我室近几年来在再生障碍性贫血肾衰、先心病体外循环手术等,137例病人红细胞表面结构、     

叔丁醇干燥的扫描电镜样品制备方法

扫描电镜样品的干燥，采用临界点干燥需用专用仪器，且操作复杂。我们用超声波清洗样品[1]，叔丁醉进行干燥[2,3]，结果满意，介绍如下。1材料与方法：取大鼠气管、小肠和胃，生理盐水冲洗几次。2.5％戊二醛固定。放入盛有0．1mol／L的二甲砷酸钠缓冲液中用超声波（25～28kH2）清洗，依组织不同分别清洗3～4次，每次5min，1％饿酸后固定，0．1mol／L二甲砷酸钠缓冲浪洗2次，每次10min。用不同浓度的酒精配制成30％、50％、70％、SO％、90％叔丁醇溶液，样品经此逐级脱水置换，入纯叔丁醇3次，每次10min，于最后一次叔丁醇时置4C冰箱内约1…     

电镜样品制备节省材料的方法

目前,国内电镜样品制备过程中大多采用进口的固定剂及包埋剂,这不仅价格昂贵且难以购置。如何节省固定剂和包埋剂的用量,又不致影响样品固定、包埋的质量是一项值得研究的课题。我们在实践工作中,探索出一种即节省固定剂和包埋剂的用量,又简便、省力的方法。具体作法如下:     

硫代反义寡核苷酸质量控制方法的研究进展

综述了高效液相色谱（HPLC）、毛细管电泳（CE）、 质谱（MS）和核磁共振（NMR）在硫代反义寡核苷酸质量控制中的应用。硫代修饰的反义寡核苷酸可以抑制基因的表达,在病毒感染和癌症治疗方面有着重要用途。药物要用于临床,必须对活性成分和生产相关的杂质进行鉴别、检查。对于硫代寡核苷酸,由于其结构特殊,必须综合运用包括HPLC,CE,MS和NMR在内的多种分析手段控制其质量。HPLC和CE技术用于对杂质和活性成分进行定性、定量分析;NMR可以精确地确定硫代产物的含量;MS则能够在测定硫代寡核苷酸分子量的同时确认其序列的正确性。     

游离细胞扫描电镜样品制备方法的改良

<正>作者将常规游离细胞扫描电镜样品制作方法法作了某些改良,取得了较为满意的效果,适于电镜观察,拍摄照片清晰,介绍如下。 方法 1.盖玻片预处理:盖玻片酸泡24小时,自来水冲洗,双重蒸馏水漂洗,无水酒精浸泡,烘干备用。此种玻片适合于贴壁生长的组织培养细胞如巨噬细胞、腹水癌细胞等;如果样品为游离不易贴壁生长的细胞,则可在上述处理过的玻片上涂一层5％的卵蛋白,烘干备用。     

豚鼠内耳毛细胞的电镜样品制备方法

内耳毛细胞的电镜样品制备较为广泛，方法各不相同。我们介绍的是较为简单的方法，多年实践经验证明这种方法容易掌握，很适合研究生进行科研课题的研究，并能达到预期目的。     

大鼠皮质双向电泳样品制备方法的优化

目的 优化大鼠皮质双向电泳样品制备方法．初步建立双向电泳条件．提高电泳分辨率和重复性。方法 分别应用三氯乙酸／丙酮沉淀法、超速离心法及改良超速离心法制备电泳样品．并比较各处理方法对电泳的影响。改良超速离心法即将混合了匀浆液Ⅱ的匀浆物4C放置过夜后再进行后续处理。结果 改良超速离心法所制备的电泳样品．不仅可以减少蛋白的降解．还可以增加蛋白的溶解性．从而获得分辨率较高、重复性较好的双向电泳图谱。结论 改良超速离心法更适于制备来源于中枢神经系统双向电泳样品。     

制备肾脏扫描电镜样品的技术方法改良

肾脏组织的超微结构研究主要集中在肾小球,通常使用透射电镜经过超薄切片观察细胞器的二维平面变化[1-3].随着研究的深入,愈发需要满足不同的科研目的及特殊的临床要求.冷冻割断技术是一种可以观察组织细胞内部的扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)制样技术,它充分显示了内部结构的三维立体形象,具有不可替代的地位,但因有取材要求高、操作流程长、设备装置多、成本价格高、伤害污染重等不足[4],限制了广泛应用.     

反义寡核苷酸技术研究进展

反义寡核酸技术，是应用反义寡核苷酸类药物通过Waston-Crick碱基配对与细胞内核酸（DNA或RNA）特异结合形成杂交分子，从而在转录和翻译水平抑制特定基因表达的基因治疗技术，是一种新的药物开发方法。其机制是：①反义寡核苷酸与靶mRNA结合形成DNA-RNA杂合分子，可以激活RNase H。该酶可以切割杂合分子中的RNA链，导致靶mRNA降解。②不能激活RNase H活性的反义寡核苷酸可以通过空间位阻效应阻止核糖体结合来抑制靶mRNA的翻译：另外还可以通过封闭剪接位点有选择的促进蛋白某个可变剪接体的表达，从而纠正错误的剪接。     

超临界流体萃取中药及天然产物的样品制备和预处理方法研究进展

超临界流体萃取技术由于其能耗低、无环境污染、参数易控制等优点,在中药和天然产物有效成分的提取分离中显示出广泛的应用前景。在采用超临界流体萃取技术提取分离中药和天然产物时,样品的制备和预处理直接影响到萃取得率和萃取物的化学成分,进而影响到萃取物的药效作用。通过查阅国内外相关文献,综了超临界流体萃取中药和天然产物的样品制备和预处理方法的研究进展,以期为超临界流体萃取在中药和天然产物中的应用提供借鉴。     

一种新的双向电泳蛋白样品制备方法

目的探讨双向凝胶电泳（2-DE）样品裂解液对蛋白质分离和双向凝胶电泳结果的影响。方法以MOLT-4细胞为例，采用3种溶解性能不同的裂解液提取细胞中的蛋白质组，并分别进行双向聚丙烯酰胺凝胶电泳。结果通过对2-DPAGE图谱的比较分析，发现采用8mol／L Urea，2mol／L Thiourea，4％CHAPS，1％NP-40.4％Triton X-100，65mmol／LDTT，0．5mmol／LPMSF，0．5％pharmalyte3-10，能获得质量较高的2-DE图谱。结论采用高浓度脲、三去污裂解液有利于获得优质的蛋白质样品，从而提高蛋白质提取率和双向电泳分辨率等。