成肌调节因子MyoD和Myf-5在人体失神经骨骼肌中的表达及其临床意义

目的　研究人体骨骼肌失神经支配后成肌调节因子MyoD和Myf 5蛋白的表达变化 ,了解骨骼肌的再生状态。方法　 2 0例不同时间人体失神经骨骼肌与 3例正常骨骼肌标本 ,HE染色和透射电镜观察肌卫星细胞形态变化 ;抗MyoD和Myf 5多克隆抗体免疫组织化学染色 (ABC法 ) ,统计阳性染色细胞核数。 结果　抗MyoD和Myf 5抗体阳性染色细胞核数在人体骨骼肌失神经 1～ 2月时的肌卫星细胞中最多 ;3个月后急剧下降 ,并维持在一低水平 ;1年后几乎无表达。结论　人体骨骼肌失神经支配后早期肌卫星细胞通过MyoD和 (或 )Myf 5途径激活、开始增殖分化并被耗竭     

手法对家兔骨骼肌失神经支配后雪旺氏细胞S-100蛋白表达的影响

目的：通过观察推拿手法家兔骨骼肌失神经支配后肌湿重、雪旺氏细胞S-100蛋白表达水平,探讨推拿手法对受损神经及失神经支配骨骼肌的影响。方法：新西兰家兔120只,分为四大组：正常对照组30只、模型观察组30只、神经生长因子(NGF)治疗组30只、手法治疗组30只,分别于手法干预2周、3周、1月、2月、4月后,每组各取6只家兔,称量肌湿重,计算术侧与健侧的肌湿重比值;测定雪旺氏细胞S-100蛋白表达水平。结果：①腓肠肌肌湿重比：NGF治疗组在2周、3周、1月、2月及手法治疗组在2周、3周、1月、2月、4月均高于模型观察组(P＜0.05)。手法治疗组在2周、3周低于NGF治疗组(P＜0.05),4月时则高于NGF治疗组(P＜0.05)。②雪旺氏细胞S-100蛋白表达：NGF治疗组、手法治疗组在各个时期均高于模型观察组(P＜0.05)。手法治疗组在1月、2月均高于NGF治疗组(P＜0.05)。结论：推拿手法可以延缓周围神经损伤后骨骼肌萎缩、变性,促进损伤神经的修复。     

中药熏洗对大鼠失神经支配骨骼肌NGF与bFGF影响的实验研究

目的观察中药熏洗一号方熏洗对大鼠失神经支配骨骼肌神经生长因子（NGF）与碱性成纤维生长因子（bFGF）影响。方法雄性SD大鼠120只,随机取90只造模,成功后随机分为熏洗一号方组、丹参组、模型组各30只,另30只作空白对照组。分别在造模后第7天、14天和21天各处死10只,股直肌肌腹组织块取材,观察失神经支配后骨骼肌结构与NGF、bFGF免疫组织化学染色。结果（1）NGF表达：术后第7天：熏洗一号方组,NGF表达明显成于其它各组;术后第14天：熏洗一号方组,NGF表达明显成于其它各组,丹参组NGF表达显示;术后第21天：熏洗一号方组,丹参组纤维组织未见染色。（2）bFGF表达：术后第7天：熏洗一号方组和丹参组成纤维细胞染色阳性,模型组高达阳性。术后第14天：熏洗一号方组、丹参组表达明显,术后第21天：熏洗一号方组表达明显优于其它各组。结论失神经支配骨骼肌损伤的修复与NGF和bFGF的变化有关,骨骼肌失去神经生长因子（NGF）的营养发生萎缩,bFGF能促进运动神经纤维的再生。     

不同程度失神经支配的面神经和面肌超微结构观察

目的：探讨不同程度失神经支配的面神经和面肌的病理变化,为判断预后和制定治疗方案提供参考。方法：制作豚鼠面神经不同损伤程度的面神经麻痹实验模型,应用航向电镜扫描电镜观察面神经和口轮匝肌超微结构变化。结果：压榨面神经５s组只见髓鞘轻度病变,肌纤无异常改变;３０s组髓鞘和轴突及肌纤维都呈重度病理改变;１５s组神经纤维和肌纤维处于前两组改变的中间状态。结论：面神经失神经支配程度越重,面神经纤维和面肌肌纤维的     

大鼠失神经支配后胫前肌变化的实验研究

目的:研究胫前肌在失神经支配后不同时间点的变化.方法:建立SD大鼠坐骨神经离断模型,失神经支配后0、7、14、21和28天,采用透射电镜观察胫前肌肌细胞超微结构,显微镜下测量肌细胞截面积,ELISA法检测肌组织中IL-6含量,Western b1ot法测定肌组织中Bc1-2和Bax蛋白表达.结果:与失神经支配后0天比较...     

不同程度失神经支配后眼轮匝肌和口轮匝肌的形态学研究

目的:探讨不同程度失神经支配后,眼轮匝肌和口轮匝肌的形态学变化。方法:制作豚鼠面神经总干压榨15s、30s和切断的动物模型,分别于术后1周和1个月取眼轮匝肌和口轮匝肌,应用琥珀酸脱氢酶(SDH)染色,光镜和透射电镜下观察肌肉的形态和超微结构。结果:正常状态下,眼肌中I型纤维占29.51%,II型纤维占70.49%;口肌中只有II型纤维占100%。神经损伤后眼肌的I型纤维向II型纤维转化,当神经功能恢复时,I型纤维百分比又逐渐恢复。同时,SDH含量随损伤加重逐渐减少,随着神经功能恢复SDH含量又逐渐恢复。结论:面肌失神经和恢复神经支配时,肌纤维分型的转化提示肌肉功能的变化;面肌与面神经之间有一致性的变化趋势,提示面肌的病理改变可以成为判断面神经功能状态的科学标准。     

手法对家兔失神经骨骼肌收缩力的影响

目的观察手法对失神经状态下家兔骨骼肌收缩力的影响。方法 6月龄新西兰兔108只,随机分为模型观察组、手法治疗组以及正常对照组,各36只,各组再分为6个小组。模型观察组、手法治疗组建立兔失神经动物模型,手法治疗组在造模后第2天开始手法治疗,其余两组均不干预。对3组动物骨骼肌收缩力进行连续动态测试。结果正常对照组家兔腓肠肌收缩力(6.85±0.57)N,手法治疗组家兔腓肠肌收缩力分别为:1周:(4.22±0.15)N、2周:(3.53±0.11)N、3周:(3.69±0.13)N、2个月:(3.83±0.11)N、4个月:(2.58±0.21)N、6个月:(2.12±0.23)N,模型观察组家兔腓肠肌收缩力分别为:1周:(4.20±0.14)N、2周:(3.06±0.22)N、3周:(2.79±0.22)N、2个月:(3.06±0.22)N:4个月:(1.92±0.14)N、6个月:(1.52±0.21)N。手法治疗组、模型观察组大鼠腓肠肌收缩力均明显低于正常对照组(P0.01)。治疗第2周后手法治疗组大鼠腓肠肌收缩力明显优于模型观察组(P0.01)。结论推拿手法对失神经状态下家兔骨骼肌收缩力有促进作用,但只是减缓失神经骨骼肌收缩力下降的趋势。     

葡萄籽抑制肌细胞凋亡延缓失神经骨骼肌萎缩的实验研究

目的通过应用抗氧化剂葡萄籽初步探讨其能否通过抑制肌细胞凋亡来延缓失神经支配后骨骼肌的萎缩现象。方法选择8周龄Vistar大鼠40只,随机分为A组（对照组）、B组（去神经14d组）、C组（去神经28d组）、D组（去神经14d干预组）、E组（去神经28d干预组）等5组,A组做假手术,B、C、D、E组制作坐骨神经切断后失神经支配的腓肠肌模型。术后D、E组用葡萄籽200mg.kg-1.d-1空腹灌胃,A、B、C组用等量生理盐水灌胃。术后分别于14d、28d处死大鼠,用流式细胞仪检测腓肠肌细胞活性氧（ROS）的含量,激光共聚焦显微镜检测腓肠肌细胞线粒体通透性转化孔（MPTP）的开放情况,脱氧核糖核苷酸转移酶介导的缺口末端标记（Tunel）法检测腓肠肌细胞凋亡,肌湿重之比评价骨骼肌萎缩情况。结果大鼠失神经支配后,B、C、D、E组肌细胞中的ROS、MPTP及凋亡率与正常对照组比较,表达随去神经支配时间的延长（〈28d）而持续增加,且差异具有统计学意义（P〈0.05）,D、E组肌细胞ROS、MPTP及肌凋亡率分别与B、C组比较,表达有所减少,差异具有统计学意义（P〈0.05）;B、C组肌湿重之比较A组显著减小（P〈0.05）,D、E组肌湿重比分别与B、C组相比,有所升高,且差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论 ROS为调控失神经支配后骨骼肌萎缩的重要分子,葡萄籽可以通过减少ROS的含量进而抑制肌细胞凋亡并最终延缓骨骼肌萎缩。     

推拿手法对颈椎病家兔骨骼肌ATP mRNA表达的影响

目的观察推拿手法对颈椎病家兔骨骼肌肌张力变化和ATP mRNA表达的影响。方法取40只6~7月龄日本大耳白家兔随机分为正常组、模型组、药物组及推拿组各10只,并建立低头位颈椎病模型。于造模后第2 d进行干预治疗,药物组予颈复康颗粒灌胃,推拿组采用一指禅推法在大椎穴进行推拿,疗程均为10 d,对照组和模型组未进行干预。观察干预后4组表面肌电及ATP mRNA表达的变化。结果与正常组比较,模型组肌张力明显升高(P<0.01),ATP mRNA表达明显降低(P<0.01);与模型组比较,药物组和推拿组干预后的肌张力明显降低(P<0.01),以推拿组变化最为显著(P<0.01),推拿组ATP mRNA表达明显提高(P<0.05)。结论推拿手法通过改善颈椎病的高张力状态和提高ATP mRNA的表达,减轻或避免肌细胞的损伤,有效治疗颈椎病。     

双向电泳分析失神经支配大鼠腓肠肌蛋白的表达变化

目的:建立骨骼肌蛋白分离的双向电泳(2-DE)技术体系,寻找失神经支配骨骼肌与正常骨骼肌蛋白的表达差异。方法:建立失神经腓肠肌模型,提取腓肠肌总蛋白,进行第一向等电聚焦(IEF)和第二向十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术分离总蛋白,使用PDQuest软件对凝胶图像进行分析,并测量了凝胶蛋白斑点在IEF和SDS-PAGE方向上的位置偏差。结果:失神经组和正常组腓肠肌组织3块凝胶的平均蛋白质点数分别为560±16和545±13,平均匹配点数分别为471±19和447±17,匹配率达84.1%和82.1%。对比分析了两种腓肠肌组织的双向电泳图谱发现,平均匹配点数为445±8;发现在失神经支配后有80个点发生了明显而稳定的质和量(大于10倍或小于0.1倍)的改变。不同凝胶间蛋白质点在IEF方向的偏差为(1.203±0.763)mm,在SDS-PAGE方向上的偏差为(1.062±0.529)mm。结论:失神经组和正常组腓肠肌的双向电泳图谱存在明显差异,失神经后表达下调的蛋白可能与维持肌肉正常功能相关,而表达上调的蛋白则可能与肌萎缩的发生过程相关。     

推拿手法治疗骨骼肌肉疼痛影响因素的质性研究

背景骨骼肌肉疾病是较常见的慢性病之一,也是世界上疾病负担的主要原因之一,推拿自古以来在骨骼肌肉疾病的治疗中发挥重要作用,但针对推拿手法治疗骨骼肌肉疼痛的影响因素尚未开展系统研究。目的 探究推拿手法治疗骨骼肌肉疼痛的影响因素。方法 2021年10月采用目的抽样法,使用滚雪球抽样策略,以北京市推拿学系的医师为访谈对象,采用半结构化访谈的方法对其进行推拿手法治疗骨骼肌疼痛影响因素的访谈,根据研究目的与课题组讨论拟定访谈提纲,当访谈资料达到饱和时结束访谈。将访谈内容整理成文字,以扎根理论为指导并借助质性分析软件NVivo 11进行三级编码,建立理论模型。结果 共对16例受访者进行有效访谈,将访谈内容进行开放式编码得到21个初始范畴;主轴式编码将21个初始范畴归纳为“医务人员”“患者群体”“就诊环境”“地域差距”和“优势病种”5个主范畴;经选择式编码,将其归纳为“人”的内在因素（“医务人员”和“患者群体”）、“环境”的外在因素（“就诊环境”和“地域差距”）和“疾病”的致病因素（“优势病种”）,进一步抽象为推拿手法治疗骨骼肌肉疼痛影响因素树状模型。结论 影响推拿手法治疗骨骼肌肉疼痛的因素是由“人”...     

神经损伤后外源性神经生长因子对骨骼肌钙泵活性的影响

目的：应用酶细胞化学技术探讨兔坐骨神经损伤后，外源性神经生长因子（ＮＧＦ）对胫骨前肌纤维钙泵活性的影响。方法：定位、定量挫伤兔右侧坐骨神经后，局部喷布ＮＧＦ，于神经损伤后第１、２、３、４、６、８周，取胫骨前肌进行Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶细胞化学染色，透射电镜下观察钙泵活性的变化。结果：神经损伤第１～３周，肌纤维钙泵活性逐渐下降；ＮＧＦ组钙泵活性分布于６周末恢复正常；对照组于８周末恢复到正常水平。结论：周围神经损伤后，外源性ＮＦＧ对骨骼肌纤维酶活性、结构及功能的恢复具有重要作用。     

钩吻素子抗外周神经损伤导致诱发痛的效应

目的：观察钩吻素子抗外周神经损伤致神经病理性疼痛中诱发痛的效应及其时效关系,分析脊髓是否为钩吻素子抗神经病理性疼痛的可能作用部位。方法在大鼠坐骨神经慢性束缚损伤（CCI）致神经病理性疼痛模型上,以热痛觉过敏为指标,观察连续皮下注射给予钩吻素子（0．28、7．0mg/kg,CCI术后第3～9d,每天2次）对CCI大鼠诱发痛的效应;观测单次皮下注射给予7．0mg/kg钩吻素子后第0．5,1,2,4,6h对CCI大鼠诱发痛的效应及时效关系;Dixon序贯法分别测定钩吻素子皮下和鞘内注射抗CCI大鼠诱发痛作用的ED50,分析脊髓是否为钩吻素子抗神经病理性疼痛的可能作用部位。结果连续皮下注射7．0mg/kg钩吻素子组在术后第3d首次给药后,痛阈即显著高于溶剂对照组,术后第9d效应最显著（翻转率为93．8％,有效率达100％）。单次皮下注射给予7．0mg/kg钩吻素子0．5h术侧足痛阈显著高于溶剂对照组（翻转率达62．9％,有效率达55．6％）;1h痛阈最高（翻转率达70．8％,有效率达77．8％）,随后痛阈有所下降,但6h仍显著高于CCI＋saline组。单次皮下注射钩吻素子抗CCI大鼠诱发痛作用的ED50为1．074mg/kg,单次鞘内注射的ED50为每只41．4μg,远低于皮下注射的ED50。结论钩吻素子具有抗外周神经损伤致神经病理性疼痛中诱发痛的效应,单次给予0．5h内起效,持效约5．5h;脊髓可能是其发挥抗神经病理性疼痛效应的作用部位。     

枸杞多糖对小鼠坐骨神经损伤功能恢复的影响

目的观察枸杞多糖(Lycium barbarum polysaccharides,LBP)在坐骨神经损伤恢复中的作用。方法雄性ICR小鼠100只,随机分为空白对照组、假手术组、模型组、枸杞多糖组(10mg/kg)和运动训练组,每组20只,采用右侧坐骨神经卡压模型,观察灌服枸杞多糖和运动对小鼠爬网漏脚率和坐骨神经运动传导速度的影响。结果术后3周,枸杞多糖组和运动训练组爬网漏脚率均低于模型组(P<0.01),坐骨神经运动传导速度均高于模型组(P<0.05,P<0.01);术后4周,运动组坐骨神经运动传导速度高于模型组(P<0.05)。结论枸杞多糖可促进坐骨神经损伤的恢复。     

推拿防治小儿脾肺气虚型反复呼吸道感染的临床观察

目的观察推拿法防治小儿脾肺气虚型反复呼吸道感染的临床效果。方法收集肺脾气虚型反复呼吸道感染患儿80例,随机分为治疗组和对照组,每组各40例。治疗组采用推拿疗法,隔日1次,共治疗7次,对照组口服玉屏风散颗粒,每日2次,共服用2周。观察治疗前后2组患儿的总有效率、中医证候评分、血清免疫球蛋白、T细胞亚群以及治疗结束后3月随访复发率等指标,判断推拿疗法的疗效。结果治疗组在总有效率、中医证候评分、IgG、IgA、IgM、CD3~+、CD4~+、CD8~+、CD4~+/CD8~+等免疫指标、复发率等指标上优于对照组,差异具有统计学意义(P0.05~0.01)。结论小儿推拿可减少肺脾气虚型小儿反复呼吸道感染的发病次数,缓解临床症状,增强患儿体液免疫、细胞免疫功能,降低复发率。     

神经生长因子诱导背根节感觉神经元细胞iNOS和P物质的表达及干扰素调节因子-1的作用

目的:研究神经生长因子(nerve growth factor,NGF)对脊髓C7-T5背根节感觉神经元细胞内诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)和P物质表达的影响及干扰素调节因子-1(interferon regulatory factor-1,IRF-1)的...     

芪冬活血饮通过干扰素调节因子5抑制肺组织M1巨噬细胞募集治疗急性肺损伤的作用机制研究

目的 探讨芪冬活血饮通过干扰素调节因子5(IRF5)抑制肺组织M1巨噬细胞募集治疗急性肺损伤(ALI)的作用机制。方法 24只C57BL/6小鼠随机分成四组,即空白组、模型组、芪冬活血饮低剂量(1 g/mL)和高剂量(2 g/mL)组,每组6只。采用脂多糖(LPS)制备ALI模型,采用苏木素-伊红(HE)染色法观察肺组织病理学改变;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肺泡灌洗液炎症因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素(IL-6)]水平;采用原位末端转移酶标记技术(TUNEL)染色检测肺组织细胞凋亡情况;采用流式细胞术检测肺组织M1型巨噬细胞水平,采用蛋白质印迹法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3剪切体(cleaved caspase3)、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、BCL2相关X蛋白(Bax)表达;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测肺组织IRF5 mRNA表达;采用免疫荧光法检测IRF5蛋白在肺组织中的原位表达。结果 与空白组比较,模型组小鼠肺组织肺泡结构破坏,肺间质水肿增厚,炎性细胞浸润,红细胞渗出,肺组织细胞凋亡显著增...     

Association of rs10954213 polymorphisms and haplotype diversity in interferon regulatory factor 5 with systemic lupus erythematosus: A meta-analysis

The rs10954213 polymorphism and the haplotype diversity in interferon regulatory factor 5 (IRF5) play a special role in systemic lupus erythematosus (SLE) but with inconclusive results. We conducted a meta-analysis integrating case-control and haplotype variant studies in multiple ethnic populations to clearly discern the effect of these two variants on SLE. Eleven studies on the relation between rs10954213 polymorpisms in IRF5 and SLE were included and we selected a random effect model to calculate the pooled odds ratios (ORs) and the corresponding 95% confidence interval (95% CI). A total of 6982 cases and 8077 controls were involved in the meta-analysis. The pooled results indicated that A allele was significantly associated with increased risk of SLE as compared with the IRF5 rs10954213 G allele (A vs. G, P<0.00001) in all subjects. The same pattern of the results was also obtained in the European, African American, and Latin American. Asian population had a much lower prevalence of the A allele (49.1%) than any other population studied, and Europeans had the highest frequency of the IRF5 rs10954213 A allele (62.1%). The significant association of increased SLE risk and TCA haplotype was indicated in the contrast of TCA vs. TTA as the pooled OR was 2.14 (P=0.002). The same result was also found in the contrast of TCA vs. TTG as the pooled OR was 1.45 (P=0.004). This meta-analysis suggests that the A allele of rs10954213 and TCA haplotype (rs2004640-rs2070197-rs10954213) in IRF5 is associated with the increased risk of SLE in different ethnic groups, and its prevalence is ethnicity dependent.     

大鼠脊髓慢性受压后脊髓组织神经生长因子及其受体的表达

目的:观察大鼠脊髓慢性受压后脊髓组织中神经生长因子(NGF)及其受体(TrkA)表达的变化。方法:采用大鼠后路渐进性压迫的方法制作大鼠轻、中、重度脊髓压迫损伤动物模型,用免疫组化检测脊髓组织中NGF及其受体的表达的变化。结果:正常大鼠脊髓组织中的脊髓神经元和灰、白质中的胶质细胞NGF和TrkA表达较弱;脊髓受压后NGF和TrkA表达增强(P<0.05)。受压程度越重,其表达越明显,免疫反应强度与脊髓受压程度呈正相关。结论:大鼠脊髓慢性受压后,NGF及其受体表达增多,这可能对脊髓神经元的存活和保留具有重要作用。